頭孢噻呋鈉在豬體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究

1、頭孢噻呋鈉在豬體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究胡振英, 張新國, 羅永江, 尚若峰, 史彥斌, 羅超應(yīng), 梁紀(jì)蘭, 鄭繼方(中國農(nóng)科院蘭州畜牧與獸藥研究所農(nóng)業(yè)部新獸藥工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室, 甘肅蘭州730050摘要:用微生物杯蝶法測定血清藥物濃度, 6頭實(shí)驗(yàn)豬按5m g kg 單劑量靜注、肌注頭孢噻呋鈉(Cefti o 2fu r Sodium , 對其藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度進(jìn)行了研究。試驗(yàn)菌為蠟樣芽孢桿菌111687, 結(jié)果平均回收率為96152%, 血清最低檢測濃度為0115g m l , 日內(nèi)日間變異系數(shù)為215%419%, 血清濃度在013018g m l 范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系(r =0

2、19884 。藥時(shí)數(shù)據(jù)經(jīng)M cpkp 藥代動(dòng)力學(xué)計(jì)算機(jī)程序處理, 豬靜注、肌注頭孢噻呋鈉體內(nèi)藥物運(yùn)轉(zhuǎn)都符合二室開放模型, 其中靜注的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為:T 1 2=2122h , T 1 2=14164h , K 12=0109h , K 21=01078 h , Kel =0120 h , V 1=0134l kg , V B =1138l kg , CLB =0107l kg h , AU C =76156m g l h ; 肌注藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為T m ax =0169h , C m ax =12109g m l , T 1 2ka =0119h , T 1 2=15118h , Kel =

3、0123h , K 12=0114 h , K 21=0108 h ; 生物利用度為AU C i . m AU C i. v =87197%。關(guān)鍵詞:頭孢噻呋鈉; 藥代動(dòng)力學(xué); 生物利用度; 微生物法測定中圖分類號:S 85917文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1000-6354(2003 05-00014-04頭孢噻呋鈉(Cefti ofu r Sodium 是我國自行研制的一種-內(nèi)酰胺類抗生素, 經(jīng)對其結(jié)構(gòu)測定及藥效試驗(yàn), 結(jié)果顯示其與國外的頭孢噻呋鈉為同一種物質(zhì)。該藥作用于轉(zhuǎn)肽酶阻斷細(xì)菌細(xì)胞壁的合成而呈現(xiàn)殺菌作用。體外試驗(yàn)證實(shí):國產(chǎn)頭孢噻呋鈉具有廣譜抗菌活性, 對革蘭氏陽性菌、陰性菌及一些厭氧

4、菌有很強(qiáng)的抗菌活性, 臨床上對放線桿菌胸膜肺炎、多殺性巴氏桿菌性肺炎等常見的畜禽病原體的抗菌效果更優(yōu)。1本試驗(yàn)采用微生物杯碟法測定血清藥物濃度, 對6頭試驗(yàn)豬靜注、肌注頭孢噻呋鈉的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究, 現(xiàn)報(bào)道如下, 供臨床應(yīng)用參考。1材料和方法1. 1材料1. 1. 1藥品及檢測菌頭孢噻呋鈉粉針劑, 批號020301,由浙江海正集團(tuán)有限公司提供。蠟樣芽孢桿菌111687, 由北京微生物所提供, 78號培養(yǎng)基, 恒溫培養(yǎng)箱和游標(biāo)卡尺等。1. 1. 2試驗(yàn)動(dòng)物健康長白×約克夏雜交種豬6頭, 雌雄各半, 體重(35±5 kg , 購自蘭州種豬場。于本所動(dòng)物房飼喂, 常規(guī)飼養(yǎng),

5、自由飲水和采食, 自配全價(jià)飼料, 不含任何抗菌藥物。臨床觀察兩周表現(xiàn)健康, 試驗(yàn)前12h 禁食不禁水, 給藥6h 后統(tǒng)一進(jìn)食。1. 2方法1. 2. 1給藥途徑及劑量6頭實(shí)驗(yàn)豬先以5m g kg 的劑量單次i . v 給藥, 采血之后再間隔2周以同樣的劑量i . m 給藥。1. 2. 2血液采集及處理將頭孢噻呋鈉用滅菌蒸餾水配成30m g m l , 耳靜脈注射或肌肉注射給藥, 并于給藥前及給藥后不同時(shí)間前腔靜脈無菌采血5m l , 置無菌試管中, 分離血清(3000r m in , 15m in , -20冰箱保存待測。1. 2. 3血清中頭孢噻呋鈉含量微生物法測定收稿日期:2003-04-

6、09作者簡介:胡振英(1956- , 女, 副研究員, 從事微生物制藥研究。1. 2. 3. 1標(biāo)準(zhǔn)液的制備精密稱取頭孢噻呋鈉51. 9750m g , 溶于50m l 容量瓶中, 用滅菌蒸餾水定容(濃度1000g m l , 臨用時(shí)用空白血清稀釋至相應(yīng)濃度, 即藥物濃度分別為0. 8、0. 7、0. 6、0. 5、0. 4、0. 3g m l 。1. 2. 3. 2檢測菌液的制備將蠟狀芽孢桿菌接種于斜面瓊脂培養(yǎng)基上, 于37培養(yǎng)24h , 用生理鹽水洗下, 備用。1. 2. 3. 3含菌平板制備將78號培養(yǎng)基加熱熔化后, 冷卻至約60, 每100m l 培養(yǎng)基中加檢測菌液0. 3m l 混勻

7、; 在直徑為9c m 平皿中傾注12m l 含菌培養(yǎng)基, 待凝固后, 放入滅菌不銹鋼管6枚; 于每只平皿的鋼管內(nèi)間隔滴加015g m l 的標(biāo)準(zhǔn)液, 余下鋼管內(nèi)滴加稀釋的同一血清樣, 每份樣本重復(fù)2次; 加樣完畢, 置37恒溫箱中培養(yǎng)24h , 取出用游標(biāo)卡尺測量抑菌圈直徑; 各點(diǎn)經(jīng)校正后, 利用抑菌圈直徑與濃度呈線性關(guān)系求標(biāo)準(zhǔn)曲線方程, 再將血清抑菌圈直徑代入方程, 求出相應(yīng)的濃度, 再乘以稀釋倍數(shù), 即得血清中藥物含量。1. 2. 3. 4血清中頭孢噻呋鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線制作及最低檢測濃度測定精取頭孢噻呋鈉儲備液, 用空白血清稀釋至濃度分別為0. 8、0. 7、0. 6、0. 5、0. 4、0.

8、3g m l , 同“1. 2. 3. 3”項(xiàng)操作, 測定抑菌圈直徑, 各點(diǎn)經(jīng)校正后, 用抑菌圈直徑為橫坐標(biāo), 在半對數(shù)紙上作圖, 并進(jìn)行線性回歸, 得回歸方程:y =0. 0359x -0. 1613相關(guān)系數(shù)r =0. 9884, 最低檢測濃度為0. 15g m l 。1. 2. 4方法精密度試驗(yàn)日內(nèi)、日間變異分析在0. 75、0. 5、0. 3g m l 范圍內(nèi)進(jìn)行, 重復(fù)4次。1. 2. 5回收率測定精密稱取頭孢噻呋鈉51. 98m g , 溶于50m l 容量瓶中用滅菌蒸餾水定容(濃度1000g m l , 用時(shí)用空白血清稀釋至相應(yīng)濃度, 即藥物濃度為0. 75、0. 5、0. 3g

9、m l , 按上述血清樣測定法進(jìn)行測定。2結(jié)果2. 1精密度試驗(yàn)結(jié)果見表1。表1精密度試驗(yàn)(X ±S 加入濃度 -1實(shí)測濃度 -1R SD %日內(nèi)0. 750. 7254±0. 0152. 70. 500. 4819±0. 0102. 70. 300. 2886±0. 0124. 4日內(nèi)0. 750. 7242±0. 0162. 60. 500. 4807±0. 0112. 50. 300. 2880±0. 0104. 92. 2回收率 結(jié)果見表2。表2回收率試驗(yàn)加樣量-1測得量-1R SD %回收率 %平均 %0. 300

10、. 2874±0. 0102. 397. 360. 500. 4819±0. 0122. 596. 3896. 520. 750. 7302±0. 0173. 695.81圖1頭孢噻呋鈉靜注藥時(shí)曲線圖2頭孢噻呋鈉肌注藥時(shí)曲線2. 3血藥濃度6頭試驗(yàn)豬只單劑量i . v 、i . m 5m g kg 頭孢噻呋鈉后血藥濃度-時(shí)間曲線見圖1、圖2, 血藥濃度見表3、表4。2. 4藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)豬單劑量i . v 、i . m 頭孢噻呋鈉后, 血藥濃度用M cpkp 程序2擬合, 藥物運(yùn)轉(zhuǎn)均符合二室模型特征, 求得曲線方程及有關(guān)參數(shù)如下:i. v :A =13. 34、B

11、 =1. 62、=0. 32、=0. 05將參數(shù)A 、B 、代入靜脈單次給藥血藥濃度時(shí)間曲線方程得:C =13. 34e -0. 32t+1. 62e -0. 05ti. m :A =16. 00B =1. 55C =15. 67=0. 41=0. 05K A =3. 81將參數(shù)A 、B 、K A 代入血管外單次給藥血藥濃度時(shí)間曲線方程得:C =16. 00e -0. 41t+1. 55e -0. 05t-15. 67e -3. 81t藥代主要參數(shù)見表5、表6; 藥時(shí)曲線見圖2、圖3。表3豬單劑量靜注頭孢噻呋鈉(5m g kg 血藥濃度(g m l 取樣時(shí)間 h0. 170. 500. 751

12、. 002. 003. 004. 006. 008. 0010. 0014. 0023. 0034. 0048. 00114. 4413. 8310. 859. 886. 646. 556. 46-3. 231. 260. 75-0. 530. 32212. 86-12. 2112. 106. 396. 286. 223. 413. 301. 200. 660. 510. 40-314. 1913. 6513. 1112. 936. 296. 116. 373. 283. 371. 530. 730. 510. 360. 18415. 2613. 8312. 5712. 216. 485. 9

13、65. 783. 163. 171. 410. 670. 520. 360. 28515. 0714. 0112. 6012. 306. 816. 325. 783. 263. 191. 560. 730. 540. 400. 28均值14. 3713. 7512. 3812. 056. 516. 276. 143. 293. 261. 410. 730. 510. 400. 25標(biāo)準(zhǔn)差0. 850. 220. 811. 120. 190. 210. 290. 090. 070. 150. 060. 020. 070. 07表4豬單劑量肌注頭孢噻呋鈉(5m g kg 血藥濃度(g m l 取樣

14、時(shí)間 h0. 170. 500. 751. 002. 003. 004. 006. 008. 0010. 0014. 0023. 0034. 0048. 0016. 6113. 9310. 459. 776. 555. 48-3. 111. 501. 380. 690. 520. 310. 2226. 0513. 07-10. 346. 395. 485. 233. 241. 491. 270. 660. 560. 350. 2236. 5711. 8614. 1512. 796. 235. 935. 753. 251. 521. 380. 680. 550. 300. 2146. 3712.

15、 15-12. 50-6. 185. 043. 141. 521. 310. 700. 540. 300. 1656. 4314. 2413. 2010. 347. 885. 994. 643. 291. 731. 410. 760. 520. 320. 16表5豬單劑量靜注頭孢噻呋鈉(5m g kg 的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)ParamC 。ABT 1 2T 1 2K 12K 21KelV 1VBC I B AU C fc 3TCP (ther -1-1-1-1-1( -1-1114. 310612. 56621. 74440. 30830. 04592. 247615. 11110. 09470.

16、07790. 18160. 34941. 38370.063578. 79400. 262547. 2270213. 757812. 74651. 01130. 25530. 04262. 714416. 26780. 05290. 05820. 18680. 36341. 59330. 067973. 66500. 228138. 0440315. 105013. 52931. 57570. 31260. 04752. 217314. 59350. 08740. 07510. 19750. 33101. 37690. 065476. 46800. 240443. 4670415. 82371

17、3. 97491. 84880. 36500. 04911. 898514. 12150. 11980. 08600. 20830. 31601. 34160. 065875. 97200. 235545. 3350515. 672013. 78151. 89050. 34350. 04942. 017314. 01630. 10800. 08900. 20000. 31901. 29070. 063878. 35300. 247245. 4320表6豬單劑量肌注頭孢噻呋鈉(5m g kg 的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)ParamC 。A BKa K 12K 21Kel T 1 2Ka T 1 2T 1 2

18、AU C T m ax C m ax F-1-1-1-1-1113. 705813. 14411. 67360. 40180. 04974. 82530. 14280. 09230. 21650. 14361. 724613. 937163. 29800.584711. 135580. 3335214. 641914. 13322. 15210. 47710. 05344. 17300. 19390. 11490. 22170. 16611. 452512. 984266. 04200. 619211. 371189. 6518315. 375915. 56341. 32960. 37760.

19、 04133. 91030. 12620. 07010. 22260. 17721. 835116. 766469. 00200. 681612. 148790. 2364416. 712217. 64411. 25080. 38320. 04183. 12140. 11880. 06710. 23910. 22201. 808616. 561469. 88600. 787412. 641191. 9892515. 369815. 20811. 63050. 38480. 04934. 03910. 12500. 08450. 22470. 17161. 801014. 050768. 412

20、00. 666612. 204887. 3125均值15. 674616. 00461. 54590. 41280. 04613. 80730. 14330. 08290. 22770. 18841. 692415. 182067. 30880. 690412. 086587. 9679標(biāo)準(zhǔn)差1. 35182. 20240. 29740. 03530.00450.62910.02360.01570.00860. 03340. 13611. 44742. 01520. 07470. 6106-3小結(jié)微生物法是測定抗生素含量的經(jīng)典方法, 根據(jù)抗生素在含菌瓊脂平板中抑菌圈直徑大小與濃度對數(shù)成線性關(guān)系

21、原理, 直接顯示抗生素的實(shí)際效價(jià), 反映藥物的抑殺菌效果, 因而使測定更具臨床意義。本試驗(yàn)所用檢測菌蠟狀芽孢桿菌(111687 為頭孢菌素超敏感菌株, 試驗(yàn)中血清藥物濃度在013018g m l 范圍呈良好線性關(guān)系(r =019884 ; 最低檢測濃度為0115g m l ; 平均回收率為96152%; 日內(nèi)、日間變異系數(shù)均小于10%, 符合生物樣品分析要求。并且該法靈敏、穩(wěn)定、重現(xiàn)性好, 可用于頭孢噻呋鈉血藥濃度測定和藥代動(dòng)力學(xué)研究。頭孢噻呋鈉經(jīng)不同途徑給藥后, 藥-時(shí)數(shù)據(jù)經(jīng)M cpkp 程序處理, 體內(nèi)藥物運(yùn)轉(zhuǎn)均符合二室開放模型, 表明頭孢噻呋鈉靜注后, 藥物在體內(nèi)分布廣泛, 消除較為緩慢

22、。肌注后藥物吸收快, 能迅速達(dá)到峰濃度, 血中藥物濃度高, 消除較為緩慢, 有效血藥濃度維持時(shí)間長。生物利用度F =87197%, 表明該藥肌肉生物利用度高, 易于被機(jī)體吸收利用。上述結(jié)論與B row n S . A .36等報(bào)道的頭孢噻呋鈉在健康豬、牛、羊藥代動(dòng)力學(xué)過程相似。根據(jù)國外報(bào)道及我們所測定的頭孢噻呋鈉的體外抗菌活性, 頭孢噻呋鈉對巴氏桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、放線桿菌的M I C 值分別為0106、0125、0125、0124g m l , 說明頭孢噻呋鈉對這些菌具有較強(qiáng)的抑殺作用。本研究結(jié)果顯示, 頭孢噻呋鈉經(jīng)兩種途徑5m g kg 單劑量給藥, 48h 內(nèi)血藥濃度(0124&#

23、177;0101 g m l , 提示頭孢噻呋鈉按上述方式給藥, 48h 內(nèi)體內(nèi)濃度足以抑制上述各種臨床致病菌。參考文獻(xiàn):1Steven L . H alstead , Robert D . W alker , John C . Baker ,etc . Pharm acok inetics evaluati on of cefti ofu r in serum , tissue cham ber flu id and b ronch ial secreti on s from healthy beef -b red calves J . Can J vet res , 1992, 56:26

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29、In stitu te of A n i m al &V eterinary Pharm aceu tics Science , CAA S , Key L abo rato ry of N ew A n i m alM edicine , M in istry of A gricu ltrue , P . R . C , L anzhou , Gan su 730050, Ch ina Abstract :A m icrob i o logical m ethod w as app lied fo r the study of cefti ofu r sodium on its ph

30、arm acok inetics and b i oavail 2ab ility in p igs fo llow ing i . v and i . m adm in istrati on at a single do se rate of 5m g kg . B acilluscereus 1. 1687w as served as theindicato r o rgan is m . T he validati on of the m ethod show ed that serum drug concen trati on of cefti ofu r sodium w ith i

31、n 0. 30. 8g m l has a good relati on sh i p (r =0. 9884 . T he average recovery of the m ethod is 96. 52%, the low est detected serum drugconcen trati on is 0. 15, the R SD %of in tra -day and in ter -day is 2. 5%and 4. 9%, respectively . Serum drug concen trati on -ti m e cou rses of bo th adm in i

32、strati on rou tes w ere founded to be fitted to a tw o -compartm en t open model after p rocessed by M cpkp compu ter softw are . T he m ain pharm acok inetic param eters (average of i . v adm in istrati on are T 1 2=2122h , T 1 2=14164h , K 12=0109 h , K 21=01078 h , Kel =0120 h , V 1=0134l kg , V

33、B =1138l kg , CLB =0107l kg h , AU C =76156m g l h , and that of i . m adm in istrati on are T m ax =0169h , C m ax =12109g m l , T 1 2ka =0119h , T 1 2=15118h , Kel =0123 h , K 12=0114 h , K 21=0108 h . T he b i oavailab ility (AU C i . m AU C i. v is 87197%.Key W ords :cefti ofu r sodium , pharm acok inetics , b i oavailab ility , m icrob i o logic