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文檔簡介
1、(時間:90分鐘;滿分:100分)一、選擇題(本題共20小題,每小題2.5分,滿分50分)1 .破譯生物基因組 DNA的遺傳信息進行基因操作時,首先要提取細胞核DNA。下列不適宜作為提取 DNA的實驗材料的是()A.雞血細胞B.蛙的紅細胞C.人的成熟紅細胞D.菜花解析:選Co DNA主要分布于真核細胞的細胞核中,而人的成熟紅細胞中無細胞核,故無DNA ,因而不能用人的成熟紅細胞作為提取DNA的實驗材料。2 .在下列圖示中,可以正確反映 DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關系的是()1JN&溶解度0J4NaC啾度0.14N.CI 減度(mU/L)&14NaCI 粒度OLMNd堪t
2、度(iuiI/L)I)C解析:選Co在NaCl溶液的濃度為0.14 mol/L時,DNA的溶解度最小,而蛋白質(zhì)的溶解度較大;NaCl溶液的濃度高于或低于 0.14 mol/L時,隨著其濃度的升高或降低,DNA的溶解度都會逐漸增大。3 .蛋白酶能將蛋白質(zhì)水解而使染色質(zhì)中的DNA分離出來,下列藥品可達到上述同一目的的是()A .蒸儲水B . NaCl溶液C. NaOH溶液D.鹽酸答案:B4 .在“ DNA的粗提取與鑒定”實驗中,有兩次 DNA沉淀析出:DNA在NaCl溶液中的物質(zhì)白量濃度為 0.14 mol/L溶解度最低;DNA在冷卻的體積分數(shù)為95%的酒精中能夠沉淀析出。該實驗依據(jù)的原理是()A
3、 .兩次都是B .兩次都是C.第一次是,第二次是D.第一次是,第二次是解析:選Co DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低, 而高于或低于這一濃度,DNA在NaCl溶液中的溶解度都會增大;DNA不溶于酒精溶液,但是,細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,這樣 DNA就可以沉淀析出。5 .在研究DNA的基因樣本前,采集來的血樣需要蛋白水解酶處理,然后用有機溶劑除去蛋白質(zhì)。用蛋白水解酶處理血樣的目的是()A.除去血漿中的蛋白質(zhì)B.除去染色體上的蛋白質(zhì)C.除去血細胞表面的蛋白質(zhì)D.除去血細胞中的所有的蛋白質(zhì),使 DNA釋放,便于進一步提純解析:選D。蛋白水解酶簡稱蛋白酶,能夠催化多肽或蛋白
4、質(zhì)水解,所以這種酶可以分解血細胞中的所有蛋白質(zhì),有利于DNA的釋放。6 .將含有DNA的濾液放在6070 C的恒溫水浴箱中保溫 1015 min,可以得到含雜 質(zhì)較少的DNA ,這一做法所依據(jù)的原理是 ()A.高溫使蛋白質(zhì)變性B.高溫使DNA變性C.高溫使蛋白質(zhì)分解D.高溫使DNA分解解析:選A。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受 6080 C的高溫,而DNA在80 C以上才會發(fā)生 變性。在6070 C的恒溫水浴箱中保溫,目的是使蛋白質(zhì)發(fā)生變性,從而分離得到DNA。7 .在DNA的粗提取實驗過程中,對 DNA提取量影響較小的是()A.使雞血細胞在蒸儲水中充分破裂,放出 DNA等核物質(zhì)8 .攪拌時要用玻璃棒沿
5、一個方向輕緩攪動C.在析出DNA黏稠物時,要緩緩加入蒸儲水,直到黏稠物不再增多D.要用冷酒精沉淀 DNA ,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻解析:選B。本題考查DNA的粗提取與鑒定的有關知識,同時考查學生對DNA提取原理的理解。攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動的目的是防止DNA的細絲被打碎,但是打碎的DNA分子并不影響提取的 DNA的含量;如果雞血細胞破裂不充分,DNA等核物質(zhì)釋放不充分,DNA的提取量會減少;在析出 DNA黏稠物時,加入蒸儲水的量不足,會 使DNA不能充分析出,而如若加入蒸儲水的量過多,析出的 DNA又會溶解,DNA的提取 量也會減少;用冷酒精沉淀DNA甚至將混合液放入冰箱冷卻
6、的目的是抑制DNA水解酶活性,防止DNA降解,如果酒精冷卻不充分,DNA析出量減少,DNA的提取量也會減少。此類題目的解題方法是理解實驗各個環(huán)節(jié)或操作的目的,突破的方法是將各個環(huán)節(jié)進行比較分析,找出其中的相互關系。8 .如圖表示PCR擴增的產(chǎn)物,請分析它是哪次循環(huán)的產(chǎn)物()1皿 I Hili 11】11111in 】n II 】h n 】imT引物I引物nunmnninninnininnnininiiiLA.第一次循環(huán)B.第二次循環(huán)C.第三次循環(huán)D.第四次循環(huán)解析:選A。在PCR反應中以引物為標記,第一次循環(huán)時,以加入的DNA為模板,兩條DNA鏈可分別由引物I和引物n與其結合,并在 DNA聚合
7、酶的作用下延伸,所以,形 成的每個子代 DNA中只有一種引物。從第二次循環(huán)開始,第一次產(chǎn)物的DNA分子又可作為模板參與反應,形成的DNA分子兩端都含有引物。9 . PCR儀實質(zhì)上是一臺自動調(diào)控溫度的儀器,下列關于它調(diào)控不同溫度的目的敘述錯 誤的是()A. 95 C,使DNA分子變性,解開螺旋B. 55 C,使DNA分子兩條單鏈與兩種引物結合C. 72 C,使DNA分子開始復制,延伸D. 72 C,使DNA分子恢復雙螺旋結構,恢復活性解析:選D。PCR禾I用DNA熱變性的原理,當溫度上升到90 C以上時,雙鏈 DNA解旋為單鏈,A項正確;當溫度下降到 50 C左右時,兩種引物通過堿基互補配對原則
8、與兩條 單鏈DNA結合,恢復活性,B項正確;當溫度上升到 72 C左右時,在DNA聚合酶的作用 下,根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈,從而實現(xiàn) DNA延伸,故C正確,D錯誤。10.下列關于DNA復制的敘述,不.正確的是(多選)()A. DNA聚合酶不能從頭開始合成 DNA ,只能從5'端延伸DNA鏈B. DNA復制不需要引物C.引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進行結合D. DNA的合成方向總是從子鏈的 3'端向5'端延伸解析:選ABD。只認為B錯誤的原因是沒有理解 DNA復制過程以及 DNA聚合酶的作 用特點。DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA ,只能從引物的3
9、39;端延伸DNA鏈。由于模板鏈首先復制的是 3'端,即復制方向3' - 5',而DNA分子是反向平行的,子鏈是依據(jù) 堿基互補配對原則,在 DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向從子鏈的5' - 3'。11.在pH = 5.12時進行電泳,哪種蛋白質(zhì)既不向正極移動也不向負極移動()A.血紅蛋白:pI(等電點)=7.07B.魚精蛋白:pI = 12.20C. ai 球蛋白:pI = 5.06D. 3 球蛋白:pI = 5.12解析:選D。3球蛋白在pH=5.12時不帶電,在電泳時既不向正極移動也不向負極移 動。12.洗滌紅細胞時,離心所采用的方法是()A.低
10、速長時間離心B.低速短時間離心C.高速長時間離心D.高速短時間離心解析:選Bo高速或長時間離心,會導致白細胞和淋巴細胞一同沉淀,得不到純凈的紅 細胞,進而影響后面血紅蛋白的提取純度。13 .將豬的紅細胞分別放在 9%的NaCl溶液和蒸儲水中,表現(xiàn)出的現(xiàn)象分別是 ()A.都發(fā)生質(zhì)壁分離B.無變化、漲破C.無變化、無變化D.皺縮、漲破解析:選D。動物細胞由于沒有細胞壁,不會發(fā)生質(zhì)壁分離。9%的NaCl溶液濃度已很高,紅細胞會失水皺縮,在蒸儲水中則會吸水漲破。14 .將處理破裂后的紅細胞混合液以2000 r/min的速度離心10 min后,離心管中的溶液分為四層,從上到下的順序依次是()A.血紅蛋白
11、、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、細胞破碎物沉淀層B.甲苯層、細胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層C.脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、細胞破碎物沉淀層D.甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細胞破碎物沉淀層解析:選D?;旌弦航?jīng)離心后按密度大小排列,在離心管中從上到下的順序依次是:第 1層為無色透明的甲苯層,第 2層白色薄層固體是脂溶,f物質(zhì)沉淀層,第3層紅色透明液體是血紅蛋白水溶液,第 4層暗紅色沉淀物主要是紅細胞破碎物沉淀。15 .人們用雞的紅細胞提取 DNA不用人的紅細胞提取血紅蛋白的原因是()A.雞的紅細胞無血紅蛋白,人的紅細胞有血紅蛋白B.雞的紅細胞有線粒體,人的紅細胞無線粒體C.雞的紅細胞有細胞核,人
12、的紅細胞無細胞核D.雞的紅細胞有氧呼吸,人的紅細胞無氧呼吸解析:選C。雞(鳥類)的紅細胞具有完整的細胞核,含有核DNA,便于進行 DNA的提??;人的成熟紅細胞無細胞核,結構簡單,血紅蛋白含量豐富,便于提取血紅蛋白。16 .在提取血紅蛋白的樣品處理階段,洗滌紅細胞十分重要,其目的是 ()A.讓紅細胞破裂,釋放血紅蛋白B.洗去血漿蛋白C.防止血液凝固D 保證紅細胞的正常形態(tài)解析:選Bo本題考查血紅蛋白的分離中樣品處理的原理。血液中含有多種蛋白質(zhì),除紅細胞內(nèi)的血紅蛋白,血漿中還含有多種蛋白質(zhì),這些蛋白質(zhì)在血紅蛋白釋放出后會與其混合,需要在紅細胞破裂前將其除去。17 凝膠色譜法操作正確的是()A.將橡
13、皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴B 將橡皮塞下部切出凹穴C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D 將尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞下部一樣大小的圓片解析:選A。凝膠色譜柱制作時,首先選擇合適封堵玻璃管口的橡皮塞,將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴;插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面;把尼龍網(wǎng)剪成與橡皮塞上部一樣大小的圓片。18 在實驗室中,做PCR 通常使用的微量離心管是一種薄壁塑料管,此過程可以使用玻璃離心管嗎?為什么()A.可以,玻璃離心管、塑料微量離心管都可以使用B 不可以,玻璃離心管易碎,使用不安全C.不可以,玻璃離心管一般較大,不適合作為微量離心管D 不可以,玻璃離心管容易吸附DNA解析
14、:選Do本題考查多聚酶鏈式反應擴增DNA片段的有關知識。DNA親和玻璃,在進行 DNA 操作時應用塑料器皿。19 某考古學家在西伯利亞泰加林地區(qū)的冰中,發(fā)現(xiàn)了一種冰凍的已滅絕的巨型動物的肌肉,他想了解該巨型動物的DNA 與現(xiàn)今印度大象的DNA 的相似性,于是做了如下檢測工作,其中正確的操作步驟及順序是()降低溫度,檢測處理后的雜合DNA雙鏈通過PCR技術擴增巨型動物和大象的DNA 把巨型動物的DNA 導入大象的細胞中在一定溫度條件下,將巨型動物和大象的 DNA 水浴共熱A.B.C.D.答案: D20下面說法不 正確的是()A.在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH
15、基本不變B.緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成C.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程D 透析袋能使大分子自由進出,而將小分子保留在袋內(nèi)解析: 選 D 。透析袋一般是用硝酸纖維素制成的。透析袋能使小分子自由進出,而將大分子保留在袋內(nèi)。透析可以除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì),或用于更換樣品的緩沖液。二、非選擇題(本題共4 小題,滿分50 分 )21. (12 分 )回答下列有關“DNA 的粗提取和鑒定”實驗的問題。(1)下列有關“DNA 的粗提取和鑒定”實驗原理的敘述,正確的是 ()A DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度隨NaCl 溶液濃度的降低而減小B 利用DNA 不溶于
16、酒精的性質(zhì),可除去細胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純凈的DNAC DNA 是大分子有機物,不溶于水而溶于某些有機溶劑D 在沸水中,DNA 遇二苯胺會出現(xiàn)紫色反應(2)如下圖為該實驗過程中的一些重要操作示意圖。折出粒地中的找我翻一張枳分收為二售酒精富也溶解的正確的操作順序是 O上圖C、E步驟都加入蒸儲水,但其目的不同,分別是和 O圖A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過 才能使用,該步驟的目的是(3)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA ,可滴加 試劑,沸水浴,如果出現(xiàn),則該絲狀物的主要成分為DNA。答案:(1)B (2)C- B-E-D - A 加速血細胞的破裂降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出 充分
17、預冷 提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA(3)二苯胺藍色22. (12分)近20年來,PCR技術(多聚酶鏈式反應)成為分子生物學實驗室的一種常規(guī) 實驗手段,其原理是利用DNA半保留復制,在試管中進行DNA的人工復制(如圖),在短時 間內(nèi),將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,從而使實驗室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。隹 IAA ? <-(1)加熱使DNA雙鏈間的 鍵完全打開,稱為 ;而在細胞中是在 酶的作用下進行的。(2)如果只需要大量克隆模板 DNA中間的某個特定區(qū)段, 應該加入 種特定的引物。當溫度降低至 55 c時,引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結合,在 DNA聚合酶 的作
18、用下,只能在引物的 端連接脫氧核甘酸,兩條子鏈的延伸方向都是(3)PCR技術的必需條件,除了模板、原料、酶之外,至少還有三個條件,即液體環(huán)境、 適宜的 和,前者由 自動調(diào)控,后者則靠 來維持。(4)通過PCR技術使DNA分子大量復制,如果將一個用15N標記的DNA分子放入試管 中,以14N標記的脫氧核甘酸為原料,連續(xù)復制四次之后,則15N標記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是 。解析:(1)PCR技術利用熱變性原理使 DNA雙鏈之間的氫鍵斷裂, 稱為解旋,而在細胞 內(nèi)是在解旋酶的作用下使氫鍵斷裂。(2)PCR分為三個基本反應步驟:變性 (95 C)、復性(55 C)、延伸(72 C),其
19、特異性依賴于與靶序列互補的引物,引物是兩段與待擴增DNA序列互補的片段,兩引物之間的距離決定擴增片段的長度。由于 DNA聚合酶不能從頭開始合 成DNA ,只能從引物的3'端延伸DNA鏈,則DNA的合成方向總是從子鏈的 5'端向3' 端延伸。(3)PCR技術與細胞內(nèi)的 DNA復制不完全相同,除了需要模板、原料、酶以外,至 少還需要液體環(huán)境(穩(wěn)定的緩沖溶液),每一個步驟需要適宜的溫度和酸堿度等。(4)一個DNA分子連續(xù)復制四次之后,形成16個DNA分子,15N標記的DNA分子有2個,則15N標記的DNA分子占全部 DNA分子總數(shù)的比例為 1/8。答案:氫解旋解旋(2)兩 3
20、' 從子鏈的5'端向3'端延伸(3)溫度酸堿度 PCR儀緩沖液(4)1/823. (12分)商品化植酸酶主要來自微生物,首先篩選出產(chǎn)酶的菌株,然后制備植酸酶, 請根據(jù)下面的流程圖回答問題:國狀土睚透機液(1庚除百漉T船廠發(fā)麻液F透,攤峰T 化IT常曜嬴口)(1) I中的主要成分有哪些?;(2)請寫出一種純化得到植酸酶的方法: ;解析:本題考查蛋白質(zhì)粗提取和分離的方法。植酸酶是蛋白質(zhì),屬于大分子有機物,含酶的發(fā)酵液經(jīng)過透析后,能夠除去小分子雜質(zhì),這樣就能夠得到植酸酶。對于粗提取的植酸 酶可以用凝膠色譜法進行提純,由于蛋白質(zhì)帶有電荷,亦可用電泳法進行純化。答案:(1)小分子
21、雜質(zhì) 含植酸酶等多種蛋白質(zhì)(2)凝膠色譜法 根據(jù)蛋白質(zhì)之間分子大小、吸附性質(zhì)等差異進行純化(或電泳法根據(jù)蛋白質(zhì)之間電荷、分子大小等差異進行純化)24. (14分)某生物興趣小組開展 DNA粗提取的相關探究活動。具體步驟如下:材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10 go剪碎后分成兩組,一組置于20 C,另一組置于20 C條件下保存24 hoDNA粗提取:第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入 15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布 過濾,取濾液備用。第二步:先向6只小燒杯中分別注入 10 mL濾液,再加入20 mL體積分數(shù)為95%的冷 酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步:取6支試管,分別加入等量的 2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測:在上述試管中各加入 4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5 min , 待試管
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