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1、作物生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)/教學資源庫土壤速效磷含量的測定土壤速效磷也稱為土壤有效磷,包括水溶性磷和弱酸溶性磷,其含量是判斷土壤供磷能力的一項重要指標。測定土壤速效磷的含量,可為合理分配和施用磷肥提供理論依據(jù)。一、方法原理用PH8.5的0.5mol/L的NaHCO3作為浸提劑處理土壤,由于碳酸根的存在掏了土壤中碳酸鈣的溶解,降低了溶液中Ca2濃度,相應地提高了磷酸鈣的溶解度。由于浸提劑的PH較高,掏了Fe3和Al3的活性,有利于磷酸鐵和磷酸鋁的提取。此外,溶液中存在著OH、HCO3、CO32等陰離子,也有利于吸附態(tài)磷的置換,及NaHCO3作浸提劑撮的有效磷與作物吸收磷有良好的相關(guān)性,其適應范圍也較廣。浸
2、出液中的磷,在一定的酸度下,用硫酸鉬銻抗還原顯色成磷鉬藍,藍色的深淺在一定濃度范圍與磷的含量成正比,因此,可用比色法測定其含量。二、主要儀器振蕩機、分光光度計或光電比色計、天平(001g)、三角瓶(250m1)、容量瓶(50m1)、漏斗、無磷濾紙、移液管(10m1)。三、試劑配制1.0 .5mol/L的NaHCO3 (pH85)浸提液 稱取化學純的NaHC0342.0g溶于800m1 蒸餾水中,以4molLNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8.5(用pH計測定),然后稀釋至1 000ml,保存于試劑瓶中。如果貯存超過1個月,使用時應重新調(diào)整pH。2.無磷活性碳 將活性碳先用1:1(VV)的鹽酸浸泡過夜,然
3、后在布氏漏斗上抽氣過濾,用蒸餾水沖洗多次至無Cl為止,再用0.5mol/L的NaHCO3溶液浸泡過夜,在布氏漏斗上抽濾,用蒸餾水沖洗多次盡NaHCO3,檢查至無磷為,烘干備用。3. 7.5mol/L硫酸鉬銻抗貯存液 在1 000ml燒杯中加入400ml蒸餾水,將燒杯浸在 冷水中,然后緩慢注入208.3m1濃H2SO4(分析純),并不斷攪拌,冷卻至室溫。另稱取分析純鉬酸銨20g 溶于約60的150ml蒸餾水中,冷卻。再將硫酸溶液慢慢全入鉬酸銨溶液中,不斷攪拌,最后加入100 m1酒石酸銻鉀溶液,用蒸餾水稀至1000 m1,搖勻,貯于棕色試劑瓶中避光保存。4.鉬銻抗混合顯色劑 稱取1.5g抗壞血酸
4、(左旋,旋光度12º22º,分析純)溶于100ml鉬銻抗貯存液中,混勻。此試劑有效期為24h,宜用前配制,隨配隨用。5磷標準液 準確稱取在105烘箱中烘干2h的分析純KH2PO40.2195g,溶于400ml蒸餾水中。加濃H2SO45ml,轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中,加蒸餾水定容至刻度,搖勻,此溶液為50mg/L磷標準溶液。吸取上述磷標準液25m1,稀釋至250ml,即為5mg/L磷標準液,此溶液不宜久貯。磷標準曲線的繪制:分別吸取5mg/L磷標準液0、1、2、3、4、5(m1)于50ml容量瓶中,各加入0 .5mol/L的NaHCO3浸提劑1ml和鉬銻抗顯色劑5ml,除盡氣
5、泡后定容,充分搖勻,即為0、0.1、0.3、0.4、0.5mg/L的磷的系列標準液。30 min后與待測液同時進行比色,讀取吸光度值。在方格坐標紙上以吸光度值為縱坐標,磷mg/L為橫坐標,繪制磷標準曲線。四、測定步驟1待測液的制備 稱取通過1mm篩孔的風干土樣5.00g置于250ml三角瓶中,加入一小勺無磷活性碳和0.5mgL NaHCO3浸提劑100ml,塞緊瓶塞,在振蕩機上振蕩30min,取出后即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾,濾液用另一只三角瓶承接。同時作空白實驗。2測定 吸取濾液10ml(對含P2051以下的樣品吸取10ml,含磷高時可改為5ml 或2ml,但必用0.5mg/LNaHCO3補
6、足至10m1),于50ml容量瓶中,加鉬銻抗混合顯色劑5 m1,小心搖動。30min后,在分光光度計上用波長660mm比色,以空白液的吸收值為0,讀出待測的吸光度值。五、計算結(jié)果待測液(mg/kg)×待測液體積 × 分取倍數(shù)烘干土重(g)土壤速效磷(mg/kg)式中:(1)待測液mg/kg-從標準曲線上查得的待測液的濃度(mg/kg); (2)加入混合顯色劑后,即產(chǎn)生大量的氣體CO2,由于容量瓶口小CO2氣體不易逸出,在混勻過程中易造成試液外溢,造成測定誤差,因此必須小心慢慢加入,同時充分搖動排出CO2,以避免CO2的存在影響比色結(jié)果。 (3)活性碳一定要洗至無磷無Cl反應,否則不能使用。 (4)此法溫度影響很大,一般測定應在2025的溫度下進行,如室溫低于20,可將容量瓶放入3040熱水中
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