全國艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(2015年修訂版)檢測(cè)策略

1、第六章第六章 艾滋病病毒感染艾滋病病毒感染實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略疫情監(jiān)測(cè)相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告疫情監(jiān)測(cè)相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告；臨床臨床診斷相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告診斷相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告；血液血液篩查相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告。篩查相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告。一、規(guī)范修改背景一、規(guī)范修改背景1. 1. 艾滋病疫情的不斷發(fā)展，艾滋病疫情的不斷發(fā)展，感染人群的變化，對(duì)艾滋病感染人群的變化，對(duì)艾滋病監(jiān)測(cè)和檢測(cè)的需求也不斷增加。監(jiān)測(cè)和檢測(cè)的需求也不斷增加。原有規(guī)范不能原有規(guī)范不能滿足目前艾滿足目前艾滋病檢測(cè)工作的實(shí)際滋病檢測(cè)工作的實(shí)際需求需求。2.2.國家相關(guān)政策的出臺(tái)國家相關(guān)政策的出臺(tái)，擴(kuò)

2、大檢測(cè)，診斷即治療等，要求，擴(kuò)大檢測(cè)，診斷即治療等，要求檢測(cè)提供更多更好的方法。檢測(cè)提供更多更好的方法。3. 3. 艾滋病檢測(cè)新技術(shù)不斷進(jìn)展。出現(xiàn)了抗原抗體聯(lián)合診艾滋病檢測(cè)新技術(shù)不斷進(jìn)展。出現(xiàn)了抗原抗體聯(lián)合診斷試劑和核酸檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用等等。斷試劑和核酸檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用等等。4. 4. 國際上發(fā)達(dá)國家的艾滋病指南也不斷更新，國際上發(fā)達(dá)國家的艾滋病指南也不斷更新，WHOWHO也出臺(tái)也出臺(tái)了很多技術(shù)性文件。了很多技術(shù)性文件。二、主要二、主要修改修改、增補(bǔ)和、增補(bǔ)和完善完善內(nèi)容內(nèi)容 增加了疫情監(jiān)測(cè)的HIV匿名無關(guān)聯(lián)試驗(yàn)流程； 修改HIV抗體篩查流程，增加了可以用原有試劑雙孔雙份復(fù)檢程序，對(duì)復(fù)檢結(jié)果有反應(yīng)

3、的情況，既可以選擇抗體確證，也可選擇核酸診斷； 新增加抗原檢測(cè)流程圖；新增核酸檢測(cè)流程圖； 新增高危人群快速試劑檢測(cè)策略和快速+酶聯(lián)試劑的檢測(cè)策略； 新增血液HIV血清學(xué)篩查試驗(yàn)流程和血液核酸HIV試驗(yàn)流程； 修改了艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童HIV感染早期感染檢測(cè)流程，制備干血斑，而不用EDTA抗凝的全血。1.HIV1.HIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程先先用試劑用試劑1 1進(jìn)行初篩試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告進(jìn)行初篩試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告“HIVHIV抗體陰性抗體陰性”，不再進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)；結(jié)果有反，不再進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)；結(jié)果有反應(yīng)，進(jìn)入復(fù)檢試驗(yàn)。應(yīng)，進(jìn)入復(fù)檢試驗(yàn)。所有初篩有反應(yīng)的樣品，使用試劑所有

4、初篩有反應(yīng)的樣品，使用試劑2 2進(jìn)行復(fù)檢，結(jié)進(jìn)行復(fù)檢，結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告果無反應(yīng)，報(bào)告“HIVHIV抗體陰性抗體陰性”；結(jié)果有反應(yīng)，；結(jié)果有反應(yīng)，報(bào)告報(bào)告“HIVHIV抗體陽性抗體陽性”。HIVHIV感染疫情報(bào)告檢測(cè)流感染疫情報(bào)告檢測(cè)流程見程見圖圖1 1 HIVHIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程。實(shí)名關(guān)聯(lián)疫情監(jiān)測(cè)，需采取臨床診斷相關(guān)檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告。試劑試劑-1-1有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)試劑試劑-2-2有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)報(bào)告報(bào)告HIVHIV抗體陽性抗體陽性報(bào)告報(bào)告HIVHIV抗體陽性抗體陽性圖圖1 HIV1 HIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程 2.2.使用抗體使用抗體檢

5、測(cè)試劑的檢測(cè)流程檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程用試劑1進(jìn)行初篩，結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性”；結(jié)果有反應(yīng)，不能出具陽性報(bào)告，必須進(jìn)入復(fù)檢試驗(yàn)。對(duì)初篩有反應(yīng)的樣品，用原有試劑雙份或雙孔進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)（或者兩種試劑復(fù)檢），如均無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性”；如均有反應(yīng)或一個(gè)有反應(yīng)一個(gè)無反應(yīng)，進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)（見第二章4.2.4）， 報(bào)告“HIV感染待確定”。試劑-1有反應(yīng) 無反應(yīng) 試劑1雙份或雙孔檢測(cè)或兩種試劑均有反應(yīng)或 一有反應(yīng)一無反應(yīng) 均無反應(yīng)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)報(bào)告HIV抗體陰性 圖圖2 2 使用抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程使用抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程 3.3.使用使用抗原抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程抗原抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程抗

6、原抗體檢測(cè)試劑分為兩類抗原抗體檢測(cè)試劑分為兩類，一類一類是抗原和抗體在一個(gè)反應(yīng)體系內(nèi)，是抗原和抗體在一個(gè)反應(yīng)體系內(nèi)，不能區(qū)分抗原和抗體檢測(cè)不能區(qū)分抗原和抗體檢測(cè)結(jié)果結(jié)果；另另一類是抗原和抗體分別在不同的反應(yīng)一類是抗原和抗體分別在不同的反應(yīng)體系內(nèi)，可區(qū)分抗原和抗體檢測(cè)結(jié)果。體系內(nèi)，可區(qū)分抗原和抗體檢測(cè)結(jié)果。用不能區(qū)分抗原抗體的試劑進(jìn)行初篩，結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性、HIV-1p24抗原陰性”；結(jié)果有反應(yīng)，不能出具陽性報(bào)告，必須進(jìn)入復(fù)檢試驗(yàn)。對(duì)初篩有反應(yīng)的樣品，用抗體檢測(cè)試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)，結(jié)果有反應(yīng)，進(jìn)行抗體補(bǔ)充試驗(yàn)；結(jié)果無反應(yīng)，進(jìn)行HIV-1核酸試驗(yàn)、HIV-1 P24抗原試驗(yàn)或2-4周

7、后隨訪。用可區(qū)分抗原抗體的試劑進(jìn)行初篩，抗原抗體結(jié)果均無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性、HIVp24抗原陰性”；抗原抗體結(jié)果均有反應(yīng)，進(jìn)行抗體復(fù)檢檢測(cè)，結(jié)果有反應(yīng)，做補(bǔ)充試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)，進(jìn)行HIV核酸試驗(yàn)或2-4周后隨訪；抗體有反應(yīng)抗原無反應(yīng)，進(jìn)行抗體復(fù)檢檢測(cè)，結(jié)果有反應(yīng)做抗體確證試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)判為抗體陰性、P24抗原陰性；抗體無反應(yīng)抗原有反應(yīng)，進(jìn)行HIV核酸或抗原試驗(yàn)或2-4周后隨訪。不區(qū)分抗原抗體的檢測(cè)試劑不區(qū)分抗原抗體的檢測(cè)試劑有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)抗體檢測(cè)抗體檢測(cè)有反應(yīng)有反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)補(bǔ)充補(bǔ)充試驗(yàn)試驗(yàn)HIV-1HIV-1核酸核酸試驗(yàn)試驗(yàn)或或P24P24抗原試驗(yàn)抗原試驗(yàn)或或2-42-

8、4周后隨訪周后隨訪報(bào)告報(bào)告HIVHIV抗體陰性抗體陰性P24P24抗原陰性抗原陰性圖圖3 3 使用不區(qū)分抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑的檢測(cè)使用不區(qū)分抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑的檢測(cè)區(qū)分抗原抗體檢測(cè)試劑抗體有反應(yīng)抗原有反應(yīng)抗體有反應(yīng)抗原無反應(yīng)抗體無反應(yīng)抗原有反應(yīng)抗體無反應(yīng)抗原無反應(yīng)抗體檢測(cè)*有反應(yīng)無反應(yīng)抗體確證試驗(yàn)HIV-1核酸試驗(yàn)或24周后隨訪報(bào)告HIV抗體陰性， HIV P24抗原陰性圖4 區(qū)分抗原抗體檢測(cè)試劑檢測(cè)流程4.4.補(bǔ)充補(bǔ)充試驗(yàn)檢測(cè)策略試驗(yàn)檢測(cè)策略補(bǔ)充試驗(yàn)分為抗體確證試驗(yàn)和補(bǔ)充試驗(yàn)分為抗體確證試驗(yàn)和HIV-1HIV-1核酸試驗(yàn)核酸試驗(yàn)?？贵w抗體確證試驗(yàn)包括免疫印跡試劑（確證試驗(yàn)包括免疫印跡試劑（

9、WBWB）和條）和條帶帶/ /線性免疫試驗(yàn)（線性免疫試驗(yàn)（RIBA/LIARIBA/LIA），）， 特定條件特定條件下的替代檢測(cè)（三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種快下的替代檢測(cè)（三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種快速試驗(yàn)或者酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)），免疫層速試驗(yàn)或者酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)），免疫層析或免疫滲濾試驗(yàn)析或免疫滲濾試驗(yàn)。HIV-1HIV-1核酸試驗(yàn)包括定性和定量試驗(yàn)。核酸試驗(yàn)包括定性和定量試驗(yàn)?？贵w確證試驗(yàn)流程抗體確證試驗(yàn)流程復(fù)檢試驗(yàn)有反應(yīng)的樣品（圖復(fù)檢試驗(yàn)有反應(yīng)的樣品（圖2 2，圖，圖3 3和圖和圖4 4），），進(jìn)行抗體進(jìn)行抗體確證試驗(yàn)。結(jié)果陰性確證試驗(yàn)。結(jié)果陰性者報(bào)告者報(bào)告“HIVHIV抗體陰性抗體陰性”，如

10、果有，如果有流行病學(xué)史，需要流行病學(xué)史，需要2-42-4周后隨訪，或進(jìn)行核酸試驗(yàn)；結(jié)周后隨訪，或進(jìn)行核酸試驗(yàn)；結(jié)果陽性果陽性者報(bào)告者報(bào)告“HIV-1HIV-1抗體陽性抗體陽性”，按規(guī)定做好檢測(cè)后，按規(guī)定做好檢測(cè)后咨詢和疫情報(bào)告。結(jié)果不確定咨詢和疫情報(bào)告。結(jié)果不確定者報(bào)告者報(bào)告“HIVHIV抗體不確抗體不確定定”。建議進(jìn)行建議進(jìn)行HIV-1HIV-1核酸試驗(yàn)或核酸試驗(yàn)或2-42-4周后隨訪周后隨訪。使用以檢測(cè)使用以檢測(cè)HIV-1HIV-1抗體并抗體并含含HIV-2HIV-2指示帶的抗體確證試指示帶的抗體確證試劑，當(dāng)出現(xiàn)劑，當(dāng)出現(xiàn)HIV-2HIV-2指示帶指示帶，（1 1）HIV-1HIV-1抗體

11、陽性，報(bào)告抗體陽性，報(bào)告HIV-1HIV-1抗體陽性，不推薦再檢測(cè)抗體陽性，不推薦再檢測(cè)HIV-2HIV-2；（；（2 2）HIV-1HIV-1抗抗體不確定或陰性，需再用單純的體不確定或陰性，需再用單純的HIV-2HIV-2抗體確證試劑或抗體確證試劑或能區(qū)分能區(qū)分HIV-1HIV-1與與HIV-2HIV-2感染的確證試劑檢測(cè)感染的確證試劑檢測(cè)。免 疫 印 跡 試 驗(yàn)(WB/RIBA)不確定陰性陽性出現(xiàn)HIV-2指示帶核酸試驗(yàn)或24周后隨訪報(bào)告HIV-1抗體陰性報(bào)告HIV-1抗體陽性根據(jù)情況進(jìn)一步檢測(cè)HIV-2圖5 免疫印跡試驗(yàn)流程抗體確證在特定條件下的替代檢測(cè)抗體確證在特定條件下的替代檢測(cè)三種

12、酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種快速試驗(yàn)三種快速試驗(yàn)酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)流程酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)流程 特定條件：特定條件： 高流行地區(qū)（大于高流行地區(qū)（大于5%5%），），高危人群（男男同性戀人群，吸毒人群），高危人群（男男同性戀人群，吸毒人群），三種試劑經(jīng)過使用地區(qū)中心實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)。三種試劑經(jīng)過使用地區(qū)中心實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)。 三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（S/CO比值）方法僅限于檢測(cè)方法方法僅限于檢測(cè)方法/ /試劑給出了特試劑給出了特定閾值（與抗體確證試驗(yàn)比較，其陽性定閾值（與抗體確證試驗(yàn)比較，其陽性的預(yù)測(cè)值的預(yù)測(cè)值9595）時(shí)使用，或經(jīng)臨床評(píng)）時(shí)使用，或經(jīng)臨床評(píng)估確定適合人群的特定閾值。高估確定適合人群的特定

13、閾值。高S/COS/CO比比值是指當(dāng)值是指當(dāng)S/COS/CO比值比值特定的閾值時(shí)；低特定的閾值時(shí)；低S/COS/CO比值是指其比值是指其S/COS/CO比值比值 5000CPs/ml5000CPs/ml，報(bào)告檢測(cè)值；，報(bào)告檢測(cè)值；檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)結(jié)果5000CPs/ml5000CPs/ml，建議重新采樣檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果建議重新采樣檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果報(bào)報(bào)告檢測(cè)值。臨床醫(yī)生可結(jié)合臨床及流行病史、告檢測(cè)值。臨床醫(yī)生可結(jié)合臨床及流行病史、CD4+TCD4+T淋巴淋巴細(xì)胞檢測(cè)值或細(xì)胞檢測(cè)值或HIV-1HIV-1抗體隨訪檢測(cè)結(jié)果等進(jìn)行診斷或排除抗體隨訪檢測(cè)結(jié)果等進(jìn)行診斷或排除診斷診斷。4.4.對(duì)于核酸檢測(cè)無反應(yīng)的建

14、議進(jìn)行抗體確證試驗(yàn)。對(duì)于核酸檢測(cè)無反應(yīng)的建議進(jìn)行抗體確證試驗(yàn)。HIV-1核酸檢測(cè)核酸檢測(cè)HIV-1核酸定性檢測(cè)核酸定性檢測(cè)HIV-1核酸定量試驗(yàn)核酸定量試驗(yàn)有反應(yīng)報(bào)有反應(yīng)報(bào)告告HIV-1核酸陽性核酸陽性無反應(yīng)報(bào)無反應(yīng)報(bào)告告HIV-1核酸陰性核酸陰性報(bào)告報(bào)告低于低于檢測(cè)限檢測(cè)限5000cp/ml,報(bào)告報(bào)告檢測(cè)值檢測(cè)值;5000cp/ml重新采重新采樣檢測(cè)樣檢測(cè)高于檢測(cè)限高于檢測(cè)限低于檢測(cè)限低于檢測(cè)限圖圖-1-1核酸試驗(yàn)流程核酸試驗(yàn)流程7.7.血液血液篩查相關(guān)的檢測(cè)策略篩查相關(guān)的檢測(cè)策略1.1.血液血液抗原抗體篩查試驗(yàn)抗原抗體篩查試驗(yàn)流程流程2.2.血液血液HIVHIV核酸試驗(yàn)流程核酸試驗(yàn)流程HI

15、V 1/2抗體或抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試驗(yàn)無反應(yīng)有反應(yīng)方案1：相同樣本相同試驗(yàn)雙孔復(fù)試方案2復(fù)試結(jié)果無反應(yīng)-，-復(fù)試結(jié)果有反應(yīng)-，+；+，-反應(yīng)性報(bào)告血液檢測(cè)不合格。如需進(jìn)一步檢測(cè)，參照臨床診斷檢測(cè)策略陰性報(bào)告血液檢測(cè)合格圖圖9 9 血液抗原抗體篩查試驗(yàn)流程血液抗原抗體篩查試驗(yàn)流程N(yùn)ATNAT試驗(yàn)試驗(yàn)NATNAT單人份檢測(cè)單人份檢測(cè)有反應(yīng)有反應(yīng)NATNAT混樣檢測(cè)混樣檢測(cè)無反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)無反應(yīng)有反應(yīng)有反應(yīng)按說明書按說明書拆分檢測(cè)拆分檢測(cè)報(bào)告血液檢測(cè)不合格。如需進(jìn)報(bào)告血液檢測(cè)不合格。如需進(jìn)一步檢測(cè)，參照臨床診斷檢測(cè)一步檢測(cè)，參照臨床診斷檢測(cè)策略策略陰性陰性報(bào)告血液檢測(cè)合格報(bào)告血液檢測(cè)合格圖圖10 10 血液血液HIVHIV核酸試驗(yàn)流程核酸試驗(yàn)流程8.HIV8.HIV感染母親兒童抗體檢測(cè)流程感染母親兒童抗體檢測(cè)流程 兒童第一次采血時(shí)已滿12個(gè)月，則應(yīng)首先按照“艾滋病.感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體檢測(cè)流程”（ 圖12）進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)。 若兩種不同原理或廠家生產(chǎn)的HIV抗體檢測(cè)試劑檢測(cè)結(jié)果均為陰性，則排除兒童感染； 若HIV抗體檢測(cè)試劑檢測(cè)結(jié)果呈陽性反應(yīng)，不能通過抗體檢測(cè)確定兒童感染狀態(tài)，則可在不同時(shí)間采集兩份血樣本，按照前述流程進(jìn)行“嬰兒HIV感染早期診斷”檢測(cè)。 如果兒童第一次采血時(shí)已滿18個(gè)月，則應(yīng)按照HIV抗體檢測(cè)流程（圖2）進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)，無需進(jìn)行“嬰兒HIV感染早期診斷