潔凈室沉降菌檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、GMP質(zhì)量管理（9）文件編號(hào)：ZL/SOP/ZK/02200潔凈室沉降菌檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件名：潔凈室沉降菌檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編號(hào)：ZL/SOP/ZK/02200制定人：日期：年 月日文件類型：工作標(biāo)準(zhǔn)審核人：日期：年 月日版次：第一版批準(zhǔn)人：日期：年 月日印數(shù)：共5份生效日期：年 月日頒發(fā)部門：綜合辦公室分發(fā)至：質(zhì)量副總經(jīng)理、質(zhì)量管理部、QC僉驗(yàn)室、綜合辦公室變 更 記 載修訂號(hào)修訂人批準(zhǔn)日期生效日期原因及目的1. 目的：建立沉降檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，用以規(guī)范員工的檢測操作。2. 范圍：適用于公司內(nèi)部生產(chǎn)潔凈區(qū)內(nèi)的沉降菌檢測工作3. 責(zé)任：生產(chǎn)部、生產(chǎn)車間、質(zhì)量管理部、QC僉驗(yàn)室主任、檢驗(yàn)員

2、對(duì)本規(guī)程的執(zhí)行 負(fù)責(zé)。4檢測依據(jù)：YY/T0188.6 1995藥品檢驗(yàn)操作規(guī)程，第6部分，藥品生物測定法。5.內(nèi)容：5.1 設(shè)備：高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱；5.2 培養(yǎng)基及平皿制備：5.2.1 培養(yǎng)皿：一般采用C90mmi5mm勺硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。5.2.2 培 養(yǎng)基一 -般采用普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其它藥典認(rèn)可的培 養(yǎng)基。5.2.3 將培養(yǎng)皿置于12TC濕熱滅菌20分鐘或于18OC干熱滅菌2小時(shí)。5.2.4將培養(yǎng)基加熱溶化，冷至45C時(shí)，在無菌操作要求下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿 約 15m。5.2.5待瓊脂凝固后，將培養(yǎng)基平面倒置于3035C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，若培養(yǎng)基平面上確無菌落生長

3、，即可供采樣用。526制備好的培養(yǎng)基平面宜在28C的環(huán)境中存放。5.3采樣點(diǎn)：5.3.1采樣點(diǎn)的布置力求均勻，避免采樣點(diǎn)在某局部區(qū)域過于集中，按照潔凈區(qū)的面積 大小，而制定最少采樣點(diǎn)數(shù)目 在滿足最少測點(diǎn)數(shù)的同時(shí)，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)。最少采樣點(diǎn)數(shù)目面積m潔凈度級(jí)別100100001000002322422<10822164210< <204010380206>2016040134001003280020063注：表中的面積，對(duì)于單向流潔凈室，是指送風(fēng)面積，對(duì)于非單向流潔凈室，是指房間面積。潔凈度級(jí)別所需C 90m培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降-以卄/ m0.5小時(shí)計(jì)）沉降菌/皿100

4、141100002310000025300000155.3.2 工作區(qū)采樣點(diǎn)的位置離地0.8米1.5米左右（略高于工作面）。并在關(guān)鍵設(shè)備或 關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加采樣點(diǎn)。5.3.3 測試標(biāo)準(zhǔn)潔凈區(qū)微生物監(jiān)控的靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)如下：級(jí)別沉降菌（90mm）頻次cfu /0.5 小時(shí)(b)100級(jí)< 11次/月10000 級(jí)< 31次/月100000 級(jí)< 101次/月潔凈區(qū)微生物監(jiān)控的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)如下:級(jí)別沉降菌（90mm）頻次表面微生物頻次cfu /0.5 小時(shí)（b）接觸碟(55mm)cfu /碟5指手套cfu /手套100級(jí)<11次/天VI<11次/班10000級(jí)<31

5、次/天100000級(jí)< 101次/周5.4測試規(guī)則541測試狀態(tài)5.4.1.1 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）的溫濕度必須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換 氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。5.4.1.2 沉降菌測試前被測試潔凈室（區(qū)）已經(jīng)過消毒。5.4.1.3 測試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)二種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報(bào)告 中注明測試狀態(tài)。靜態(tài)測試時(shí)潔凈室凈化空調(diào)系統(tǒng)已處于正常運(yùn)行狀態(tài)。動(dòng)態(tài)測試時(shí)潔凈室已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)。5.4.2測試人員5.4.2.1 測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級(jí)別的工作服.5.4.2.2 靜態(tài)測試時(shí)，所有生產(chǎn)設(shè)備均已安裝就緒，但未運(yùn)行，室內(nèi)測試人員不得多

6、于二人。測試時(shí)間：對(duì)單向流，如100級(jí)凈化房間及層流工作臺(tái)，測應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不 少于10分鐘后開始；對(duì)非單向流，如10000級(jí)、10000（級(jí)以上的凈化房間，測試應(yīng)在凈化空 調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30分鐘后開始。5.4.2.3 動(dòng)態(tài)測試時(shí)，所有生產(chǎn)設(shè)備按預(yù)定的工藝模式運(yùn)行并有規(guī)定數(shù)量的操作人員在現(xiàn) 場操作。5.4.3 測試步驟5.4.3.1 采樣方法:將已制備好的培養(yǎng)皿按采樣點(diǎn)的布置要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培 養(yǎng)皿表面暴露0.5小時(shí)，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。5.4.3.2 培養(yǎng)：全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中，在3035C培養(yǎng)，時(shí) 間不少于48小時(shí)。543.3 菌落計(jì)數(shù)：

7、用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)記，然后用510倍放 大鏡檢查，有無遺漏。若培養(yǎng)皿上有二個(gè)以上菌落重疊，可分辨時(shí)以二個(gè)以上菌落數(shù)計(jì)數(shù)。5.5注意事項(xiàng)：5.5.1測試用具要做無菌處理，以確保測試的可靠性，正確性。5.5.2采取一切措施，防止人為對(duì)樣本的污染。5.5.3 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其它參數(shù)做祥細(xì)的記錄。5.5.4計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光對(duì)培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏記培養(yǎng)皿邊緣生長的 菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別。必要時(shí)，用顯微鏡鑒別。5.5.5采樣前應(yīng)仔細(xì)檢驗(yàn)每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量,如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。5.6結(jié)果計(jì)算：用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)，按下式計(jì)算：M1+M2+Mn平均菌落M=n式中：M-平均菌落數(shù)M1-1號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)M2-2號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)Mn-n號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)n-培養(yǎng)皿總數(shù)5.7結(jié)果評(píng)定：用平均菌落數(shù)判斷潔凈室（區(qū)）空氣中微生物。5.7.1潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。5.7.2若某潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，貝U必須對(duì)此區(qū)域先進(jìn)行消毒， 然后重新采樣兩次