細(xì)胞與分子免疫學(xué)問答

1、第二章 免疫球蛋白1.  Ig的基本結(jié)構(gòu)，功能和水解片段（1） 基本結(jié)構(gòu)組 成 由一對較長的和一對較短的多肽鏈組成 四條多肽鏈 長鏈：重鏈（Heavy Chain， H鏈）， 450-550 aa， 55-57 KD 短鏈：輕鏈（Light Chain， L鏈）， 214 aa， 24 KD 二硫鍵：H鏈和L鏈之間，兩條H鏈之間 由二硫鍵連接，呈Y型 分 區(qū) N端：aa序列變化（110個殘基） C端 ：則相對穩(wěn)定（1）可變區(qū)（Variable region， V區(qū)） 近N端：V區(qū)= 1/2 L鏈+ 1/4（1/5）H鏈 （2）恒定區(qū)（Constant region， C區(qū)） 近C端：

2、C區(qū)= 1/2 L鏈+ 3/4（4/5）H鏈 （3） 鉸鏈區(qū)  高變區(qū)（hypervariable regio，HVR） 可變區(qū)中某些區(qū)域的aa組成和排列特別易變化或具更高的變易性。 CDR（互補決定區(qū)）：Ig的抗原結(jié)合部位和抗原表位互補結(jié)合部位，決定抗體的特異性。 鉸鏈區(qū) 位于CH1和CH2之間，富含脯aa，富有彈性，可自由折疊 意義：能使V區(qū)與不同距離的抗原結(jié)合 補體結(jié)合位點易于暴露 IgM和IgE無鉸鏈區(qū)（2）功能區(qū)的作用 VL、VH： 抗原結(jié)合部位 HVR（CDR）與抗原表位結(jié)合 CH1、CL：遺傳標(biāo)志所在 IgG- CH2：補體結(jié)合位點，通過胎盤部位 CH3：與各種組織表面

3、IgG Fc受體 （FcR）結(jié)合部位IgM： CH3 ：補體結(jié)合位點IgE： CH2、CH3 ：與肥大細(xì)胞、嗜堿性 粒細(xì)胞的 （ IgEFc受體FcR）結(jié)合部位 Ig的其他片段 J鏈 （Joining Chain）：連接兩個或兩個以上Ig單體作用 SIgA：二聚體 IgM： 五聚體 分泌片SP（Secretory Piece）：是SIgA上 的一個輔助成分上皮細(xì)胞合成，分泌到黏膜細(xì)胞表面 作用：具抵抗外分比液中蛋白水解酶的降解作用，穩(wěn)定SIgA的作用。（3）水解片段 木瓜蛋白酶 IgG 2Fab段 + Fc段 （ 抗原結(jié)合片段）（可結(jié)晶片段） 胃蛋白酶 IgG F（ab）2段 + p

4、Fc段 （ 抗原結(jié)合片段） 碎片 意義：F（ab）2段保持了與抗原結(jié)合的生物學(xué)活性， 又減少了 Fc段的生物學(xué)活性?？蓱?yīng)用于生物 制品研究，如精致抗毒素等。2. Ig多樣性形成的機制（1）Ig的基因多樣性形成機制組合造成的多樣性眾多的V區(qū)基因片段的組合和輕重鏈的組合， 眾多的V、D、J基因中，重排時每個片段只能取一個， 就存在多種組合。VH： 51個基因片段，編碼CDR1、CDR2部分的aa DH： 30個基因片段，編碼CDR3中的大部分aaJH： 6個基因片段，編碼其余的CDR3部分的 aa 和第 四個骨架區(qū)（2）連接造成的多樣性CDR3區(qū)位于V、J和V、D、J片段連接處

5、，兩片段之間可插入或丟失數(shù)個核苷酸，增加了互補決定區(qū)（CDR3）的多樣性。（3）體細(xì)胞高頻突變造成的多樣性成熟的B 細(xì)胞重排的V區(qū)基因，往往在抗原的刺激下發(fā)生點突變，突變的頻率非常高（每次細(xì)胞分裂，大約每1000個bp中就有一對發(fā)生突變，而其他體細(xì)胞的突變頻率為10-10bp。）。 稱為體細(xì)胞高頻突變。 有人計算多樣性可達(dá)4.8 X 107 ，故針對外界眾多的抗原分子，體內(nèi)可產(chǎn)生數(shù)以億計的不同抗體分子。3. 小分子抗體的特點  僅含V區(qū)結(jié)構(gòu) ，免疫原性較弱。 分子量小，易通過血管壁，可有效克服腫瘤灶組織對抗體的生理阻抗。 無Fc段，不與非靶細(xì)胞的FcR結(jié)合，易達(dá)腫瘤病灶，適合臨床診斷

6、，腫瘤的導(dǎo)向治療。 與靶細(xì)胞抗原結(jié)合力較弱。 半衰期短，影響到達(dá)腫瘤局部抗體的濃度。第三章 補體系統(tǒng)1、 補體三條激活途徑的比較  經(jīng)典途徑 MBL途徑 旁路途徑激活物質(zhì) 抗原-抗體復(fù)合物 MBL 細(xì)菌脂多糖 IgM，2IgG C反應(yīng)蛋白等 酵母多糖 凝集的IgA，IgG4 參與成分 C1-C9 C2-C9 C3，C5C9 B，D，P，I，H C3轉(zhuǎn)化酶 C4b2b C4b2b C3bBb C5轉(zhuǎn)化酶 C4b2b3b C4b2b3b C3bnBb 作用 參與特異性體液 參與非特異性免疫 免疫的效應(yīng)階段 感染早期發(fā)揮作用2、補體的生物學(xué)功能(1)溶解靶細(xì)胞： C5-C9參與，形成MAC

7、。(2)調(diào)理作用： 促進吞噬細(xì)胞的吞噬作用。 C3b，C4b，i C3b 細(xì)菌（Ag）+ Ab +C3b- C3b R：巨嗜細(xì)胞-吞噬 單核細(xì)胞 中性粒細(xì)胞(3)炎癥介質(zhì)作用 1)激肽樣作用： C2a-增加毛細(xì)血管通透性， 引起炎癥充血2) 過敏毒素樣作用： C3a，C5a，C4a-肥大細(xì)胞，嗜鹼性粒細(xì)胞受體-釋放組胺等-毛細(xì)血管 通透性 內(nèi)臟平滑肌收縮3) 趨化作用： C3a，C5a - 吸附具C3a，C5a受體的吞噬細(xì)胞-游走- 補體激活部位。(4)免疫黏附和清除免疫復(fù)合物作用 免疫黏附： Ag + Ab+C- C3b或C4b -RBC，血小板 - 較大聚合物-運輸至肝臟清除， 易被吞噬細(xì)

8、胞吞噬。 （CR1） 第四章 細(xì)胞因子一、CK作用的共性和生物學(xué)作用1 細(xì)胞因子的共性：（1）理化特性：1）多為低分子量的蛋白或糖蛋白（15-30 KD）2） CK與靶細(xì)胞的結(jié)合：無抗原特異性，也不受MHC限制 3）微量水平（PM）發(fā)揮作用：與靶細(xì)胞受體親合力極高（2）分泌特點 多源性：一種細(xì)胞因子可由多種細(xì)胞產(chǎn)生，一種細(xì)胞也可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子。瞬時性 短暫而自限過程（CK的mRNA易降解）2、生物學(xué)作用特點 （1）作用方式自分泌： CK的靶細(xì)胞就是產(chǎn)生CK的自身細(xì)胞，表現(xiàn)的生物學(xué)作用旁分泌： CK的靶細(xì)胞是產(chǎn)生CK的鄰近細(xì)胞，表現(xiàn)的生物學(xué)作用內(nèi)分泌： CK的靶細(xì)胞就是產(chǎn)生CK的遠(yuǎn)距離的細(xì)胞，

9、表現(xiàn)的生物學(xué)作用            （2）作用多樣性細(xì)胞因子參與多種機體的病理與生理作用介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，參與炎癥反應(yīng)，促進細(xì)胞的增殖與分化，刺激造血， 促進組織修復(fù) （3）作用復(fù)雜性 多效性： 一種細(xì)胞因子可對多種靶細(xì)胞發(fā)揮作用，產(chǎn)生多種不同的生物學(xué)效應(yīng)。 重疊性： 幾種不同的細(xì)胞因子也可對同一種靶細(xì)胞發(fā)揮作用，產(chǎn)生相同或相似的生物學(xué)效應(yīng)。 拮抗性： 一種細(xì)胞因子可以抑制另一種細(xì)胞因子的某種生物學(xué)作用。 協(xié)同性： 一種細(xì)胞因子可以增強另一種細(xì)胞因子的某種生物學(xué)作用。

10、雙向性： 生理調(diào)節(jié)作用適量 損傷機體過量3、網(wǎng)絡(luò)性調(diào)節(jié) 眾多的CKs相互誘生、相互促進、相互抑制 、 相互調(diào)節(jié)， 形成十分復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)。二、sCKR的產(chǎn)生，生物學(xué)作用與臨床的關(guān)系1、可溶性CKR產(chǎn)生機制（1）膜結(jié)合CKR，在蛋白水解酶的作用下， 胞外區(qū)脫落，結(jié)合能力不變。 sIL-1R sTNFR sIFN-rR（2）CKR的mRNA不同剪接后，新編碼的SCKR轉(zhuǎn)錄子,表達(dá)SCKR, 由細(xì)胞分泌至胞外。（主要） sIL-4R sIL-7R sIFN-Ar（3）膜受體酶解脫落和分泌型mRNA翻譯同時存在 sIL-5R（a） sIL-1R（a） sSCFR2、可溶性CKR生物學(xué)作用（1）負(fù)調(diào)作用-與

11、膜結(jié)合型CKR競爭CK-阻斷CK作用-膜受體的正常代謝途徑，有利于處于活化狀態(tài)的細(xì)胞恢復(fù)正常水平 （2）載體作用-與CK結(jié)合，防止CK被降解或清除，并將其運送到靶細(xì)胞的膜CKR處（3）輔助作用- 使原本對CK信號不敏感的靶細(xì)胞產(chǎn)生作用3、sCKR與臨床（1）檢測sCKR水平在臨床中的應(yīng)用 輔助早期診斷 病情轉(zhuǎn)歸 評估 治療1） IL-2R 血清sIL-2R水平升高與某些疾病的關(guān)系惡性腫瘤： 白血病 霍奇金淋巴瘤 骨髓瘤 肝癌 胃癌 結(jié)腸癌 肺癌 鼻咽癌自身免疫或炎性疾?。?RA SLE 重癥肌無力 哮喘病毒感染或其他傳染病： HAV HBV HCV HIV HPV 結(jié)核病 麻風(fēng) 痢疾 梅毒骨髓

12、及器官移植排斥反應(yīng)其他：燒傷 消化性潰瘍 妊高癥 肝硬化 腎功能衰竭2） IL-6R 血清sIL-6R水平升高與某些疾病的關(guān)系炎癥及自身免疫性疾病 RA 克隆病 潰瘍性結(jié)腸炎 感染性疾病 HIV感染 細(xì)菌感染及膿毒血癥腫瘤和白血病 多發(fā)性骨髓瘤 慢性淋巴細(xì)胞白血病 漿細(xì)胞白血病 非霍奇金淋巴瘤 3） sTNFRsTNFR水平 升高與某些疾病的關(guān)系炎癥及自身免疫性疾病 RA （血清及關(guān)節(jié)滑液） SLE 感染性疾病 HIV感染 細(xì)菌性痢疾 膿毒血癥腫瘤和白血病 肺癌 直腸癌 胃癌 卵巢癌 宮頸癌 慢性淋巴細(xì)胞白血病骨髓移植其他 孕婦（隨胎齡增加而升高，可能是保護胎兒的一種機制） 慢性腎衰 外傷 酒

13、精性肝硬化（2）SCKR的臨床應(yīng)用前景 為減輕或防止促炎細(xì)胞因子造成的病理損傷提供了新的治療途徑三、CK有何臨床意義1. 細(xì)胞因子參與了疾病的發(fā)生和發(fā)展： （1）細(xì)胞因子及其受體缺陷（先天性、后天性）先天性：IL-2受體鏈缺陷= IL-2，4，7功能障礙=淋巴干細(xì)胞不能分化=T，B細(xì)胞不能成熟=免疫功能嚴(yán)重缺陷（體液，細(xì)胞）=先天性重癥聯(lián)合免疫缺陷綜合癥。后天性：HIV = CD4T細(xì)胞破壞 = 由Th細(xì)胞產(chǎn)生的各種細(xì)胞因子缺陷（IL-2、4、5、6）=T、B細(xì)胞不能活化 免疫功能全面下降 =AIDSIL-1表達(dá)過高：細(xì)菌感染 =釋放內(nèi)毒素=M = IL-1，TNF-a = 感染性休克 治療：

14、IL-1受體拮抗劑，TNF-a單抗（2）細(xì)胞因子表達(dá)過高（炎癥，自身免疫病，過敏反應(yīng)，休克等）IL-1、IL-2R、IL-6和IL-6R ；可溶性CKR升高IL-1在疾病中的作用 疾病 IL-1作用慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 發(fā)熱、滑膜細(xì)胞增生、破壞軟骨川崎病 損傷血管內(nèi)皮痛風(fēng) 尿素結(jié)晶引起局部產(chǎn)生IL-1-炎癥腎小球腎炎 促進腎小球系膜細(xì)胞增生， 誘導(dǎo)產(chǎn)生PGE2 急性髓性白血病 自分泌IL-1， 促進白血病細(xì)胞惡性發(fā)生IL-2R1974年，日本人發(fā)現(xiàn)成人T細(xì)胞白血病是一種IL-2R病。IL-6和IL-6RIL-6基因變異=表達(dá)失控 =IL-6過度分泌=IL-6R=造血細(xì)胞過度增殖（B細(xì)胞）= 骨髓瘤

15、 3、sCKR與臨床（1）檢測sCKR水平在臨床中的應(yīng)用 輔助早期診斷 病情轉(zhuǎn)歸 評估 治療4） IL-2R 血清sIL-2R水平升高與某些疾病的關(guān)系惡性腫瘤： 白血病 霍奇金淋巴瘤 骨髓瘤 肝癌 胃癌 結(jié)腸癌 肺癌 鼻咽癌自身免疫或炎性疾?。?RA SLE 重癥肌無力 哮喘病毒感染或其他傳染病： HAV HBV HCV HIV HPV 結(jié)核病 麻風(fēng) 痢疾 梅毒骨髓及器官移植排斥反應(yīng)其他：燒傷 消化性潰瘍 妊高癥 肝硬化 腎功能衰竭5） IL-6R 血清sIL-6R水平升高與某些疾病的關(guān)系炎癥及自身免疫性疾病 RA 克隆病 潰瘍性結(jié)腸炎 感染性疾病 HIV感染 細(xì)菌感染及膿毒血癥腫瘤和白血病

16、多發(fā)性骨髓瘤 慢性淋巴細(xì)胞白血病 漿細(xì)胞白血病 非霍奇金淋巴瘤 6） sTNFRsTNFR水平 升高與某些疾病的關(guān)系炎癥及自身免疫性疾病 RA （血清及關(guān)節(jié)滑液） SLE 感染性疾病 HIV感染 細(xì)菌性痢疾 膿毒血癥腫瘤和白血病 肺癌 直腸癌 胃癌 卵巢癌 宮頸癌 慢性淋巴細(xì)胞白血病骨髓移植其他 孕婦（隨胎齡增加而升高，可能是保護胎兒的一種機制） 慢性腎衰 外傷 酒精性肝硬化（2）SCKR的臨床應(yīng)用前景 為減輕或防止促炎細(xì)胞因子造成的病理損傷提供了新的治療途徑2. 應(yīng)用細(xì)胞因子治療某些疾?。?（1）添加遼法腎性貧血：EPO病毒感染： IFNa-干擾病毒的復(fù)制 腫瘤： TNF：瘤灶直接注射（直腸

17、癌）（2）阻斷和拮抗療法原理：抑制CK的產(chǎn)生，阻斷CK與相應(yīng)受體的結(jié)合，阻斷結(jié)合后的信號傳導(dǎo)過程應(yīng)用：自身免疫性疾病、移植排斥反應(yīng)、感染性休克抗TNF單克隆抗體：減輕、阻斷感染性休克IL-1受體拮抗劑：炎癥、自身免疫性疾病rs IL-1R：抑制移植排斥反應(yīng) （3） CK基因治療四、CK基因治療有哪些方法1、 CK臨床應(yīng)用存在問題半衰期短，需要短期內(nèi)重復(fù)給藥（靜注IL-2的半衰期只有710min）；CK的多效性會產(chǎn)生較為嚴(yán)重的副作用。其它如前期投入大、制備困難、產(chǎn)量低等。2、免疫效應(yīng)細(xì)胞介導(dǎo)的CK基因治療 逆轉(zhuǎn)錄病毒 注射CK基因 免疫效應(yīng)細(xì)胞（攜帶CK基因） 機體 電融合 3、CK基因修飾的疫

18、苗 CK基因 導(dǎo)入 放射線照射回輸 腫瘤細(xì)胞免疫原性增強 腫瘤細(xì)胞分泌CKS 激活機體的抗腫瘤免疫（IL-2、4、6、7、IFN）4、成纖維細(xì)胞等載體介導(dǎo)的CK基因治療導(dǎo)入 返輸 表達(dá)CK基因 成纖維細(xì)胞、骨髓細(xì)胞 機體、 成纖維細(xì)胞、骨髓細(xì)胞 CKs （生命周期長，易于培養(yǎng)， 可在體內(nèi)持續(xù)存在）5、直接體內(nèi)途徑的CK基因療法 注射直接將體外CK表達(dá)載體 機體 載體表達(dá)CKS CKS發(fā)揮效應(yīng)（質(zhì)粒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、瘤苗病毒等）6、CKR基因療法 CKR基因 靶細(xì)胞 表達(dá)CKR 調(diào)亡 （TNFR） （腫瘤細(xì)胞） （TNFR）第五、六章 白細(xì)胞分化抗原和黏附分子1、參與T、B細(xì)胞識別和活化的常見CD分

19、子（1）與T細(xì)胞識別與活化的有關(guān)CD分子    CD 別名 主要分布 配體 功能 CD3 成熟T細(xì)胞 TCR-CD3復(fù)合體 參與信號傳導(dǎo) CD4 部分T細(xì)胞 胸腺細(xì)胞 MHC-II 參與信號傳導(dǎo) （Th ） HIV gP120受體 CD8 部分T細(xì)胞 胸腺細(xì)胞（CTL） MHC-I 參與信號傳導(dǎo) CD2 LFA2 T、NK、 CD58 參與協(xié)同刺 胸腺細(xì)胞 （LFA3） 激信號傳導(dǎo) CD58 LFA3 廣泛 CD2 參與協(xié)同刺 激信號傳導(dǎo) CD28 CD4+ T、 50% CD8+ T B7分子 參與協(xié)同刺 激信號傳導(dǎo) CD152 CTLA-4

20、 （cytotoxic T lymphocyte antigen-4） 活化T細(xì)胞 B7分子 抑制T細(xì)胞活化 起負(fù)調(diào)節(jié)作 CD154 活化T CD40 參與協(xié)同刺 （CD40L） T細(xì)胞 激信號傳導(dǎo)（2）與B細(xì)胞識別有關(guān)的CD分子 CD 別名 主要分布 配體 功能CD79a/CD79b B細(xì)胞 與BCR構(gòu)成： Ig/Ig 漿細(xì)胞 BCR-Ig/Ig 參與信號傳導(dǎo) CD21 CR2 EBV受體 B、DC iC3b、C3d 與信號傳導(dǎo) 上皮細(xì)胞 EBVCD80/CD86 B、DC、APC B7 內(nèi)皮細(xì)胞 CD28 -正調(diào)節(jié)（T活化） CTLA4 -負(fù)調(diào)節(jié)（抑制T） CD19 B 細(xì)胞 各種激酶 加

21、強信號傳導(dǎo)CD40 B、DC、 APC、內(nèi)皮 CD40L 參與信號傳導(dǎo)（B細(xì)胞活化的必須條件） 2、選擇素家族成員的組成、分布、配體和功能3、AM有何生物學(xué)作用（1）參與炎癥反應(yīng)細(xì)菌感染細(xì)胞或被M吞噬 M 釋放淋巴因子CKs：TNF- IFN-，趨化性CKs等  白細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞  LFA1 ICAM-1 VLA-4 VCAM-1 CD15S P，E 選擇素 促使白細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞黏附向炎癥部位游走。 （2）參與免疫細(xì)胞的識別與活化共同組成協(xié)同刺激分子，提供刺激信號，參與抗原提呈，識別及免疫細(xì)胞的活化。 APC Th/CTL MHC-II/I-

22、CD4/CD8 第一信號 + 抗原肽-TCR-CD3 LFA3 - LFA2 第二信號ICAM-1 - VLA4 B7 - CD28（3）參與淋巴細(xì)胞歸巢L-選擇素- PNAD（外周淋巴結(jié)地址素）CD44 - Mad CAM-1 （黏膜地址素細(xì)胞黏附分子）LFA1 - ICAM-1、2、3 VLA4 - VCAM-1 淋巴細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞促使淋巴細(xì)胞歸巢到外周淋巴結(jié)，黏膜淋巴組織，炎癥部位。（4）參與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的調(diào)亡（5）其他作用 1）參與凝血、創(chuàng)傷愈合 2）參與細(xì)胞的伸展與移動3）參與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移等。4、AM有何臨床意義（1）AM分子缺陷與疾病 白細(xì)胞黏附缺陷病 (leukocyte adh

23、esion deficiency , LAD-1) LAD-2LAD-180年代報道：一種由于白細(xì)胞LFA-1缺乏的先天性疾病。LFA-1 ： 2亞單位不能與亞單位組裝-完整的LFA1分子-白細(xì)胞不表達(dá)LFA1-白細(xì)胞不能進入炎癥區(qū)-不能形成膿液。 表現(xiàn)：反復(fù)嚴(yán)重感染，致死性。通常采用骨髓移植治療。LAD-2近來發(fā)現(xiàn)的另一類LAD病人。白細(xì)胞CD15s表達(dá)缺陷-不能與內(nèi)皮細(xì)胞P-、E-選擇素結(jié)合-影響白細(xì)胞游走及向炎癥部位移動-形成膿液。（2）AM分子參與疾病的病理過程 局部組織中的抗原、炎癥因子 刺激 血管內(nèi)皮受損、活化 ICAM 表達(dá)淋巴細(xì)胞，白細(xì)胞上的AM受體表達(dá) 血液中的白細(xì)胞向炎癥部

24、位浸潤，加重病變損傷（CD2、LFA1、VLA4）治療設(shè)想：阻斷AM分子與AM配體結(jié)合 采用抗LFA-1、抗ICAM-1、抗LM抗體治療結(jié)果： 類風(fēng)濕、支氣管哮喘獲滿意效果。 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)機體 抗自身IgG抗體（IgM為主） 自身IgG抗體 中等大小 IC 沉積小關(guān)節(jié)滑膜 激活補體等（III型超敏反應(yīng)） 對稱性、進行性、破壞性關(guān)節(jié)病變 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎鼻病毒：引起普通感冒，由于型別眾多（100多型），難以預(yù)防。發(fā)現(xiàn)：90%以上型別的鼻病毒均能與宿主細(xì)胞膜上的ICAM-1結(jié)合，感染致病。治療設(shè)想：采用可溶性ICAM-1或抗ICAM-1抗體，阻斷鼻病毒與ICAM-1的結(jié)合，預(yù)防感冒。（3）

25、AM檢測 主要通過細(xì)胞膜上及循環(huán)種的可溶性AM分子，以了解疾病的進展，估計預(yù)后。 VCAM （內(nèi)皮、上皮、DC、M）： 腫瘤：卵巢、胃腸道、腎、膀胱 敗血癥休克、腎功能損傷、SLE、類風(fēng)關(guān) ICAM-1 ： 敗血癥休克、腎移植后排斥反應(yīng)、轉(zhuǎn)移性腫瘤、LAD、潰瘍性結(jié)腸炎 E-選擇素 ： 腫瘤：乳腺、胃腸道、敗血癥休克。第七章   MHC 分子1、比較HLA-I類和II類分子在結(jié)構(gòu)、組織分布和功能特點 HLA I II 基因座位 B 、C 、A DR、DQ、DP 分子結(jié)構(gòu) 鏈，2-m 1、1 抗原肽結(jié)構(gòu)域 1、2 鏈、鏈，表達(dá)特點 共顯性 共顯性 分布 所有有核細(xì)胞

26、 APC、活化T細(xì)胞、精子 血清、尿、初乳功能 識別、遞呈內(nèi)源性抗 識別、遞呈原外源性抗原 受體：CD8分子 受體：CD4分子 識別、調(diào)節(jié)CTL殺傷作用 識別、調(diào)節(jié)Th細(xì)胞功能2、HLA的生物學(xué)功能有哪些參與抗原的加工和提呈 內(nèi)源性抗原-APC-抗原肽+MHC-I -CD8+細(xì)胞識別 外源性抗原-APC-抗原肽+MHC-II -CD4+細(xì)胞識別參與對免疫應(yīng)答的遺傳調(diào)控 機體對抗原的免疫應(yīng)答受遺傳控制，人類的免疫應(yīng)答基因可能位 于HLA-II區(qū)內(nèi)。免疫細(xì)胞相互作用的限制性 M-Th B-Th Th-Tc Tc-靶細(xì)胞 細(xì)胞間的作用受MHC的限制參與免疫調(diào)節(jié)已證明：MHC 表達(dá)水平的高低可直接決定

27、機體抗原產(chǎn)生應(yīng)答的強弱。通過調(diào)控MHC分子的表達(dá)水平，可有效地發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用參與T細(xì)胞分化過程引起移植排斥反應(yīng) 3、HLA與臨床有什么關(guān)系 HLA與器官移植： 匹配座位的重要性依次為： HLA-DR、HLA-B、HLA-A HLA分子的異常表達(dá)和臨床疾病 HLA與疾病的關(guān)聯(lián) HLA與親子鑒定和法醫(yī)學(xué)第11-13章1、T細(xì)胞在胸腺內(nèi)的發(fā)育過程 “三步曲”：1）早期階段 早期T細(xì)胞的主要表型為CD4-和CD8-,稱雙陰性細(xì)胞（Double Negative cell ,DN）2）.第二階段 前T細(xì)胞由雙陰性分化為雙陽性CD4+CD8+（ Double Positive cell,DP）3）.第三

28、階段 DP細(xì)胞經(jīng)歷陽性和陰性選擇，發(fā)育為CD4+或CD8+的單陽性細(xì)胞(Single Positive cell,SP),即成熟T細(xì)胞。2、TH1和TH2的分化和相互轉(zhuǎn)換主要因素：1）抗原類型和濃度：低劑量使TH0TH1；高劑量使TH0 TH2細(xì)胞。2）APC類型：M提呈抗原誘導(dǎo)TH1細(xì)胞分化和激活；B細(xì)胞提呈抗原誘導(dǎo)TH2細(xì)胞分化和激活。3）局部微環(huán)境細(xì)胞因子作用： IL-12促使 TH0TH1； IL-4促使TH0TH24）其他因素： 黏附分子的作用：朗罕細(xì)胞向TH1細(xì)胞提呈抗原需要黏附分子，向TH2細(xì)胞提呈抗原無需黏附分子參與。 激素作用：糖皮質(zhì)激素增強TH2細(xì)胞活性，脫氫表雄甾酮可增強

29、TH1細(xì)胞活性3.CTL功能-殺傷功能 參與抗腫瘤、抗病毒作用 CTL殺傷靶細(xì)胞的機制：分泌穿孔素；釋放多種絲氨酸酯酶，通過活化穿孔素而促進殺傷作用；分泌淋巴毒素，直接殺傷靶細(xì)胞；活化的CTL高表達(dá)FasL，通過與靶細(xì)胞表面Fas抗原結(jié)合，可誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡。CTL殺傷靶細(xì)胞特點：受MHC-I類分子限制4.抑制性T細(xì)胞（Ts細(xì)胞）功能- 抑制作用 作用靶細(xì)胞：主要是抗原特異性的TH細(xì)胞和B細(xì)胞作用機制：直接對抗原提呈細(xì)胞產(chǎn)生胞毒效應(yīng)；分泌抑制因子發(fā)揮作用；通過獨特型網(wǎng)絡(luò)而發(fā)揮抑制效應(yīng)作用意義：參與免疫調(diào)節(jié)，抑制自身免疫病產(chǎn)生 能抑制在胸腺內(nèi)不能形成自身耐受的自身反應(yīng)性T細(xì)胞克??；對“非已抗原”誘

30、發(fā)的免疫應(yīng)答也有抑制作用，。5、B細(xì)胞的分化發(fā)育B細(xì)胞的分化過程可分為兩個階段，即抗原非依賴期和抗原依賴期第一階段發(fā)生在骨髓 骨髓中的pro-B細(xì)胞丟失CD43，即轉(zhuǎn)化為pre-B細(xì)胞，進而發(fā)育為+的不成熟B細(xì)胞；進一步發(fā)育為+ +的成熟B細(xì)胞。 發(fā)育基本過程：骨髓多能造血干細(xì)胞淋巴干細(xì)胞前B細(xì)胞 未成熟B細(xì)胞成熟B細(xì)胞。w 第二階段發(fā)生在外周免疫器官 接受抗原刺激后，B細(xì)胞可發(fā)生類型轉(zhuǎn)換，最終分化為漿細(xì)胞w 6、B細(xì)胞的表面標(biāo)志A表面受體 1、抗原受體（BCR）-SmIg IgM 、 IgD 單體形式存在于細(xì)胞膜2、細(xì)胞因子受體（CKR）使B細(xì)胞活化、增殖3、補體受體（CR）：CR1（CD3

31、5）是C3b受體，CR2（CD21）也是EB病毒受體。4、IgGFc段受體（FcR）5、絲裂原受體B表面抗原1、MHC 包括MHC-I 和 MHC-II 2、CD抗原 有幾十種，CD19為所有B細(xì)胞共有2、超抗原激活T細(xì)胞的特點v 強大的刺激能力v 無須抗原處理v 與T細(xì)胞相互作用無MHC限制性v 選擇性結(jié)合TCR鏈V區(qū)v 超抗原不僅可激活T細(xì)胞，而且可能誘導(dǎo)T細(xì)胞的耐受v 超抗原的免疫識別位點分為兩類：MHC結(jié)合位和TCRV區(qū)結(jié)合的T細(xì)胞表位7、超抗原的生物學(xué)意義v 參與某些病理過程 SAg刺激大量T細(xì)胞激活，產(chǎn)生多種細(xì)胞因子引起某些疾病。如金葡菌外毒素引起毒素休克綜合征。v SAg與自身免

32、疫應(yīng)答 SAg的強大刺激可能激活體內(nèi)自身反應(yīng)性T細(xì)胞，從而誘發(fā)自身免疫性疾病v SAg與免疫抑制 T細(xì)胞因過度激活而被耗竭v 與抗腫瘤效應(yīng) CTL被大量激活而對腫瘤發(fā)揮殺傷作用8.DC的生物學(xué)功能a、抗原提呈 利用受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用攝取可溶性抗原；具有強大的液相吞飲功能；通過吞噬作用攝取大顆?；蛭⑸铩、參與T、B細(xì)胞的發(fā)育、分化和激活 提供T細(xì)胞激活的協(xié)同刺激信號，釋放可溶性因子等途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長與分化c、免疫調(diào)節(jié)作用 DC可分泌多種細(xì)胞因子參與免疫功能的調(diào)節(jié)；分泌多種趨化因子，介導(dǎo)其他免疫細(xì)胞的趨化作用。d、免疫監(jiān)視功能 某些前體DC對局部各種化學(xué)信號十分敏感，在體內(nèi)發(fā)揮免疫監(jiān)視作用。

33、9、抗原提呈的途徑（一）溶酶體提呈途徑（外源性抗原），該過程受MHC-II分子限制，又稱MHC-II類分子途徑。1、APC對外源性抗原的吸取與加工 抗原物質(zhì)APC吞噬（胞飲） 形成吞噬體+溶酶體吞噬溶酶體（內(nèi)體，含40余種酶） 蛋白抗原被水解肽段 2、抗原肽-MHC-II類分子形成與轉(zhuǎn)運 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)MHC-II類分子（與恒定鏈結(jié)合） MHC-II離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)恒定鏈被蛋白酶水解形成MHC-II+CLIP（II類相關(guān)的恒定鏈肽段） 在HLA-DM作用下CLIP解離空載MHC-II+抗原肽 MHC-II-抗原肽復(fù)合物轉(zhuǎn)運到細(xì)胞表面提呈給CD4+TCR識別（二）胞質(zhì)溶膠提呈途徑（內(nèi)源性抗原）v 該過程受MH

34、C-I類分子限制，又稱MHC-I類分子途徑，內(nèi)源性抗原是在胞內(nèi)合成的抗原蛋白質(zhì)分子。1、內(nèi)源性抗原在胞質(zhì)溶膠中加工處理 2、抗原肽-MHC-I類分子形成與轉(zhuǎn)運.T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答 分三個階段：抗原識別階段；T細(xì)胞活化、增殖、分化階段；效應(yīng)階段 T細(xì)胞活化、增殖、 分化階段 1、T細(xì)胞活化的信號要求 T細(xì)胞的第一激活信號：TCR-CD3MHC-抗原多肽 特點：CD4/CD8作為共受體與MHC-II/MHC-I分子結(jié)合，顯 著增強TCR與抗原肽的結(jié)合力 達(dá)，從而保護T細(xì)胞免于凋亡。 抑制性信號: CTLA-4+B7,防止T過度增殖 T細(xì)胞的第二激活信號： 又稱協(xié)同刺激信號 CD28 +B7; C

35、D45R+CD22 LFA-1+ICAM-1; LFA-2+LFA-3; CTLA-4+B7 主要是B7/CD28，其機制在于增強基因轉(zhuǎn)錄并穩(wěn)定 IL-2mRNA，促進T細(xì)胞產(chǎn)生生長因子。此外，CD28分子啟動的胞內(nèi)信號可促進細(xì)胞存活蛋白bcl-xL的表達(dá)，從而保護T細(xì)胞免于凋亡。 抑制性信號: CTLA-4+B7,防止T過度增殖B細(xì)胞活化后表現(xiàn)1）膜分子表達(dá)，如細(xì)胞因子IL-1，IL-2，IL-4受體2）增殖 分化漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞（Tm）3）合成分泌抗體4）產(chǎn)生體液免疫效應(yīng)第14章 細(xì)胞凋亡與免疫PCD, programmed cell death第一節(jié) 細(xì)胞凋亡概述誘導(dǎo)凋亡制劑：1、Ca/

36、Mg+：為內(nèi)源性DNA內(nèi)切酶所依賴，Zn2能拮抗之.2、糖皮質(zhì)激素：常見的凋亡誘導(dǎo)劑,機制為促進凋亡相關(guān)蛋白質(zhì)合成，可被蛋白合成抑制劑抑制。3、細(xì)胞因子：v IL-2:可增強Fas途徑介導(dǎo)的AICD,增加FasL的轉(zhuǎn)錄和表達(dá),并抑制(Fas信號抑制劑)的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)v IL-10:可通過Fas/ FasL，使活動型SLE病人PBMC凋亡v IL-12:促進TNF /TNFR途徑引起的凋亡;v IFN-:使高表達(dá)IFN-R的T細(xì)胞凋亡；v TNF、TGF- ：促進凋亡。4、抗原：Ag結(jié)合sIgM， sIgM交聯(lián)，PKC激活，胞內(nèi)鈣庫釋放，誘發(fā)細(xì)胞凋亡。5、抗體：抗sIgM、Fas、CD3/TCR、

37、CD4、CD8 CD23等抗體誘導(dǎo)表達(dá)相應(yīng)膜抗原的細(xì)胞發(fā)生凋亡。6、超抗原及絲裂原：SAg金葡菌腸毒素誘導(dǎo)胸腺內(nèi)DP細(xì)胞凋亡，PWM誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡抑制凋亡制劑n 細(xì)胞因子：v IL-2：可抑制糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的1細(xì)胞的凋亡,其抑制凋亡的機制可能是通過蛋白激酶(PKC)活化途徑實現(xiàn)的；v IL-4:可抑制糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的Th2細(xì)胞凋亡。這可能是通過bcl-2的高表達(dá)或通過活化PKC途徑實現(xiàn)的；v IL-10:可抑制感染細(xì)胞的凋亡；v IL-12:可抵抗60o,射線引起的小鼠骨髓細(xì)胞凋亡；v IFN -:抑制低表達(dá)IFN R T細(xì)胞凋亡。免疫相關(guān)的凋亡信號轉(zhuǎn)倒(一)DR介導(dǎo)的信號途徑n caspas

38、e：含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶n caspase家族: Ø 酶作用點為天冬氨酸殘基Ø caspase 以酶原形式存在于胞內(nèi)-激活-剪切Ø caspase-2,8,10,9為起始（上游） caspaseØ caspase-3,6,7是凋亡效應(yīng)（下游）caspase. caspase -3可以激活降解酶,降解導(dǎo)致細(xì)胞凋亡FasL+Fas Fa多聚體化 Fas-DD+DD-FADD(Fas associated protein with death domain) （N端）FADD-DED+DED-proCaspase8(10)-DISC Cas8(10)活化

39、 tBid剪切和激活下游Cas pase 釋放細(xì)胞色素C,pro-Cas2,3,9激活Cas3、6、7 激活Cas9 apoptosis(二)線粒體途徑Ø 線粒體是各種死亡刺激的感受器。促凋亡信號如損傷、生長因子去除以及大部分化療藥物通常可誘導(dǎo)線粒體釋放細(xì)胞色素(cytochrome-c，Cyt C)和其他促凋亡多肽,釋放的Cyt C與凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf1)相結(jié)合，促使Apaf1形成寡聚體。在ATP/dATP存在下, Apaf1招募procaspase- 9聚集形成稱為凋亡體(apoptosome)的復(fù)合體, procaspase 9通過自我活化產(chǎn)生具有活性的caspas

40、e- 9.最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。調(diào)控機制1、Bcl-2家族：。抑制凋亡/促進增殖：Ø bcl-2、bcl-xl等阻止線粒體外膜通透化，從而阻止cyto-c釋放。Ø bcl-2為原癌基因，凋亡抑制基因 通過抑制細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性氧族的產(chǎn)生而抑制凋亡 抑制P53,c-myc的凋亡作用，抗激素、輻射等誘 導(dǎo)的凋亡. bcl-2/bax抑制凋亡； bcl-xl與bcl-2有協(xié)同作用Ø 促進凋亡:分為二個亞類: bax、bak和bcl-xs等, bad、bim、bid等， bax,bcl-xs促進凋亡；bax/bax促進凋亡激活線粒體，膜通透性改變，釋放cyto-c 激活caspas

41、e-9途徑凋亡。2、 IAP（inhibitor of apoptosis protein） 抑制線粒體活性；IPA結(jié)合、抑制cas-3,6,7；抑制cas-9的作用。 3、AIF（apoptosis inducing factor）Endo G(endonulcease G)由線粒體釋放，介導(dǎo)非caspase依賴的染色體濃集和DNA片斷化，促進凋亡。（三）顆粒酶B徑顆粒酶B（絲氨酸蛋白酶）剪切激活caspase-3apoptosis 剪切Bid線粒體釋放cyto-capoptosis第2節(jié) 細(xì)胞凋亡與免疫生理n 免疫細(xì)胞的凋亡主要涉及兩條途徑; 即DR途徑和忽視所致死亡（death by neglect）忽視死亡:免疫細(xì)胞缺少或丟失賴以生存的外來刺激信號，繼而通過線粒體途徑所致的凋亡。 如淋巴細(xì)胞缺乏細(xì)胞因子、抗原的刺激而發(fā)生的凋亡。n 陽性選擇，DP不能與MHC分子結(jié)合，經(jīng)bcl-2途徑凋亡；n 陰性選擇，經(jīng)Fas及Bim凋亡；n CK(IL-10,TGF)、糖皮質(zhì)激素等參與調(diào)節(jié)胸腺細(xì)胞的凋亡。細(xì)胞凋亡與外周免疫自穩(wěn)a.活化誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡(AICD)生物學(xué)意義:清除過量的活化T細(xì)胞 清除激活的自身反應(yīng)性T細(xì)胞 b. 死亡忽略途徑:由細(xì)胞因子撤離引起，發(fā)生于免疫應(yīng)答末期?？乖碳p弱，IL-2,IL-2R水平降低，活化信號缺乏，致凋亡。 生理學(xué)