生化需氧量(BOD5)的測定

1、實(shí)驗(yàn)三 生化需氧量( BOD 5)的測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1掌握五日培養(yǎng)法測定生化需氧量的基本原理和方法。 2學(xué)會使用自動(dòng)調(diào)溫培養(yǎng)箱。二、原理 生化需氧量是指在規(guī)定條件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物質(zhì)， 主要是有機(jī)物質(zhì)所進(jìn)行的生物化學(xué)過程中消耗溶解氧的量。 分別測定水樣培養(yǎng)前 的溶解氧含量和在20C±C培養(yǎng)五天后的溶解氧含量，二者之差即為五日生化 過程所消耗的氧量( BOD5)。水體發(fā)生生物化學(xué)過程必須具備：(1) 水體中存在能降解的好氣微生物。(2) 有足夠的溶解氧。(3) 有微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)。因此在測定水樣時(shí)須加入一定量的無機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)。 根據(jù)水樣的情況進(jìn)行一定 比例的

2、稀釋，稀釋水充分暴氣等等。三、儀器1 自動(dòng)調(diào)溫培養(yǎng)箱(20C±C)，不透光，以防光合作用產(chǎn)生溶解氧。2. 520 L細(xì)口玻璃瓶。3. 10002000mL 量筒。4. 特制攪拌棒：棒長應(yīng)比所用量筒高度長20cm。在粗鐵絲下端裝一個(gè)2mm 厚，直徑比量筒直徑略小，并帶有幾個(gè)小孔的硬橡膠板。5. 培養(yǎng)瓶： 250 300mL 特制的 BOD 瓶(帶有磨口玻璃塞并具有供水封用 的鐘形口)或試劑瓶。所用培養(yǎng)瓶的容積均需校準(zhǔn)，編號紀(jì)錄。6. 碘量瓶： 250mL四、試劑1.磷酸鹽緩沖溶液：將 8.5g 磷酸二氫鉀( KH 2PO4) ， 21.75g 磷酸氫二鉀(K2HPO4), 33.4g磷

3、酸氫二鈉(Na2HPO4 7H2O)和 1.7g 氯化銨(NH4CI)溶于 水中，稀釋至1000mL。此溶液的pH應(yīng)為7.2。2 .硫酸鎂溶液：將22.5g硫酸鎂(MgSO4 7H2O)溶于水中，稀釋至1000mL。3氯化鈣溶液：將27.5g無水氯化鈣溶于水，稀釋至1000mL。4.三氯化鐵溶液：將0.25g三氯化鐵(FeCb 6H2O)溶于水，稀釋至1000mL。5 .鹽酸溶液(0.5mol/L): 將 40mL( p =1.18g/mL鹽酸溶于水，稀釋至100mL。6. 堿性碘化鉀溶液：稱取250g氫氧化鈉(NaOH)，在攪拌下溶解于250mL 水中，冷卻后，加75g碘化鉀(KI)，用水稀

4、釋至500mL。貯于棕色瓶中，用橡 皮塞塞緊，避光保存。7. 硫代硫酸鈉溶液c ( Na2S2O3=0.01mol/L ):硫代硫酸鈉溶液 c(Na2S2O3 5H2O)=0.01mol/L :稱取 25g 硫代硫酸鈉(Na2S2O3 5H2O)溶于煮沸放 冷的水中，加2g碳酸鈉，用水稀釋至10 L，貯于棕色瓶中，使用前標(biāo)定。標(biāo)定 方法同實(shí)驗(yàn)五。8. 5g/L淀粉指示劑：稱取1g可溶性淀粉，用少量水?dāng)嚦珊隣?，加?00mL 煮沸的水，混勻，繼續(xù)煮至透明，冷卻后加入 1mL冰醋酸，稀釋至200mL，盛 于試劑瓶中。五、分析步驟溶解氧的測定：將經(jīng)20°C±°C五天培養(yǎng)

5、后的水樣的250mL培養(yǎng)瓶蓋外的水 倒去，小心打開蓋子，加入1mL氯化亞錳溶液和2mL堿性碘化鉀溶液(注意先 加氯化亞錳，移液管尖接近液面)。立即謹(jǐn)慎地將瓶蓋好，不能有氣泡，溢出的 水倒掉，用手指按住瓶蓋，用力反復(fù)顛倒培養(yǎng)瓶20次，直到沉淀與液體完全混合為止。將培養(yǎng)瓶靜置約1小時(shí)，當(dāng)沉淀只占培養(yǎng)瓶體積1/2時(shí)，小心打開蓋子， 吸出清液略大于5mL，用移液管加入5mL硫酸溶液，蓋上蓋子，反復(fù)顛倒培養(yǎng) 瓶，使沉淀完全溶解。靜置5分鐘，小心打開瓶塞，然后用已標(biāo)定的0.01mol/L的硫代硫酸鈉標(biāo) 準(zhǔn)溶液滴定。當(dāng)溶液呈淡黃色時(shí)，加1mL淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛剛腿去。 記下滴定管讀數(shù)。單位：ML12初始體積V10.000.00終點(diǎn)體積V23.123.32溶液體積V3.123.32六、計(jì)算1 樣品水樣中溶解氧的計(jì)算:c（溶解氧，O2mg/I）M V 8 1000 V樣3(1)式中：M硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L);V滴定消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積(mL )。M=0.009126 mol/L V 瓶 1 =200 mL V 瓶 2 =200mL瓶 1 CO2=( 0.009126*3.12*8*1000)/(200-3)