穿心蓮內(nèi)酯的提取分離及鑒定

1、穿心蓮內(nèi)酯的提取分離及鑒定 2011級(jí)16班摘要：穿心蓮為解毒消炎類臨床常用藥，穿心蓮內(nèi)酯是中藥穿心蓮的主要有效成分，分子式C20H30O5，白色方形或長方形結(jié)晶，味極苦，難溶于水易溶于乙醇、甲醇等。利用乙醇提取方法、超聲、回流、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮方法對(duì)穿心蓮內(nèi)酯進(jìn)行提取分離以及純化，使用TLC法對(duì)其鑒別，可得到純度較高的穿心蓮內(nèi)酯。 關(guān)鍵詞：穿心蓮、穿心蓮內(nèi)酯、超聲提取法、乙醇提取法、TLC鑒別Isolation & Identification of AndrographolideABSTRACT: Clinical commonly used medicines, creat for

2、detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula C20H30O5, white square or rectangle crystal, taste bitter, soluble in water, soluble in ethanol，methanol, etc. Using the ethanol extract method, ultrasound, reflux, rotary

3、evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide.KEY WORDS: Andrographis paniculata；Ultrasonic extraction；Andrographolide；alcohol extraction；Thin layer chromatography (TLC)穿心蓮為常用中藥

4、，來源于爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata（Burm. f.）Nees.的干燥地上部分。收載于中國藥典2000 年版一部。具有清熱解毒，涼血，消腫的功能，臨床用于感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、口舌生瘡、頓咳勞嗽、泄瀉痢疾、熱淋澀痛、癰腫瘡瘍、毒蛇咬傷等。其主要活性成分為穿心蓮內(nèi)酯（andrographoiide）、新穿心蓮內(nèi)酯（neoandrographoiide）脫水穿心蓮內(nèi)酯（dehydroandrographoiide）4。穿心蓮內(nèi)酯為天然植物穿心蓮的主要有效成份，具有祛熱解毒，消炎止痛之功效，對(duì)細(xì)菌性與病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊療效，被譽(yù)為天然抗生素藥物。本品為二

5、萜類內(nèi)酯化合物，均難溶于水，通常僅能口服給藥。主要藥理作用：抗菌作用、抗病毒作用、利膽保肝作用、抗心腦血管疾病作用、抗腫瘤作用。穿心蓮內(nèi)酯(andrographolide)又稱穿心蓮乙素。分子式C20H30O5，分子量350.44。無色方形或長方形結(jié)晶，味極苦。mp.230231，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、吡啶中，微溶于氯仿、乙醚、難溶于水、石油醚、苯。1、材料 11實(shí)驗(yàn)儀器和試劑 儀器：燒杯，玻璃棒，鐵架臺(tái)，球形冷凝管，研缽，藥勺，恒溫水浴鍋，超聲儀，減壓抽濾器，濾紙，薄層板，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，布氏漏斗，冰箱，毛細(xì)管，吹風(fēng)機(jī)，烘箱，試劑：95%乙醇，活性炭，乙酸乙酯，單質(zhì)碘，CMC-Na溶液,硅膠粉

6、，12實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)室提供的穿心蓮粉末2、方法和結(jié)果21提取和分離穿心蓮內(nèi)酯粗品的提?。喝?0g穿心蓮粉末于燒杯中，加入適量的95%乙醇溶液，攪拌，靜置10min,于50恒溫水浴鍋中超聲提取40min,提取時(shí)應(yīng)注意防止乙醇的揮發(fā)用保鮮膜封住燒杯口，然后過濾，濾渣再加入10倍量95%乙醇再超聲提取40min過濾，提取兩次后合并提取液（深綠色液體，含有葉綠素及其他雜質(zhì)），在提取液中加入6g活性炭，于75（溫度不能高于80，否則易發(fā)生水解）恒溫水浴鍋中水浴加熱30min脫色，趁熱抽濾，濾液再加入5g活性炭于75恒溫水浴鍋中水浴加熱30min脫色，趁熱抽濾，加熱濃縮，濾液濃縮至15ml（呈微黃色液體，

7、稍微渾濁），自然冷卻，靜置48小時(shí)析晶，若無晶體析出或是析出晶體較少，可繼續(xù)靜置析晶，過濾取晶體（淡黃色，有較多雜質(zhì)），得到穿心蓮內(nèi)酯粗品（淡黃色晶體）5、7。 抽濾液點(diǎn)板結(jié)果 濃縮液點(diǎn)板結(jié)果 濃縮液中粗品的析出 抽濾得到的粗品（淡黃色）取少量晶體溶于乙醇中，取少量溶液點(diǎn)板，以乙酸乙酯-95%乙醇（7.5:2）為展開劑，鑒別檢查粗品。穿心蓮內(nèi)酯粗品的精制：取粗品晶體，稱量得1.38g,加入約40mL乙酸乙酯溶解，于75恒溫水浴鍋中回流30min,過濾取濾液，再于75恒溫水浴鍋中回流30min，過濾取濾液，自然冷卻，于冰箱中靜置48小時(shí)析晶（析出白色晶體），過濾得到白色晶體，稱量得到精制穿心蓮內(nèi)

8、酯0.34g。2.2穿心蓮內(nèi)酯的鑒定取少量晶體溶于適量乙醇中，使用硅膠：G-CMC-Na（1:3）的薄層板（事先鋪好，經(jīng)過活化好的薄層板）用毛細(xì)管取吸對(duì)照溶液和樣品液點(diǎn)板，以乙酸乙酯-95%乙醇（7.5:2）為展開劑，在展開槽中展開完畢立即吹干，用碘單質(zhì)熏板使顯示兩個(gè)黃色的點(diǎn)，以大致鑒別檢查最后得到的穿心蓮內(nèi)酯的純度。點(diǎn)板顯示得到的穿心蓮內(nèi)酯純度較高。 穿心蓮內(nèi)酯粗品點(diǎn)板結(jié)果 精制穿心蓮內(nèi)酯TLC鑒別（左：對(duì)照點(diǎn)，右：樣品點(diǎn)） 穿心蓮內(nèi)酯精品（0.34g） 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)率（%）：0.34/50×100%=0.68%3、討論 據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，穿心蓮主要有效成分為二萜內(nèi)酯類成分，具有解熱、抗炎、鎮(zhèn)

9、靜等作用。其中以穿心蓮內(nèi)酯含量較高，以醇提工藝穿心蓮內(nèi)酯含量較高。因?yàn)榇┬纳弮?nèi)酯易水解提取時(shí)應(yīng)注意溫度（實(shí)驗(yàn)中控制溫度不得大于80）與溶液pH（穿心蓮內(nèi)酯在堿性壞境中容易水解），以防止穿心蓮內(nèi)酯在提取過程中水解而對(duì)產(chǎn)率影響較大。經(jīng)過與同實(shí)驗(yàn)室其他小組提取方法比較，超聲波的介入顯著縮短了浸提時(shí)間，明顯加快了溶出效率，同時(shí)也保證了其穩(wěn)定性。超聲波提取具有高效、節(jié)能、降低工藝成本，且安全性大的特點(diǎn)。 本次實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品純度較好但產(chǎn)率較低，可能原因是穿心蓮內(nèi)酯類化合物為二萜類內(nèi)酯，性質(zhì)極不穩(wěn)定，易氧化、聚合?？梢材苁窃谔崛r(shí)，如用熱乙醇加熱回流提取穿心蓮總內(nèi)酯，能同時(shí)提出大量穿心蓮中的葉綠素、樹脂以及無機(jī)鹽

10、等雜質(zhì)，使析晶和精制較為困難，產(chǎn)率較低。 穿心蓮內(nèi)酯類化合物為二萜類內(nèi)酯，性質(zhì)極不穩(wěn)定，易氧化、聚合而樹脂化。因此所提取的穿心蓮應(yīng)是當(dāng)年產(chǎn)的新藥材，并且要未受潮變質(zhì)的莖葉部分，否則內(nèi)酯含量明顯下降至極低，難以提取得到。 水提取一般可將多糖等多種水溶性雜質(zhì)提取出來，水提取出膏率較高，但穿心蓮內(nèi)酯水溶性較低，不適合穿心蓮的提取。 穿心蓮內(nèi)酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情況下進(jìn)行，此時(shí)晶形與結(jié)晶的純度都較好。當(dāng)溶液的含水量較高，或粘稠度太大時(shí)，往往不易析出結(jié)晶，實(shí)驗(yàn)時(shí)使用的是95%乙醇。 在活性炭脫色的過程中，要注意控制活性炭的量，加入過多在吸附雜質(zhì)的同時(shí)也是產(chǎn)品損失較大，降低產(chǎn)品產(chǎn)率。 本實(shí)驗(yàn)由于考慮到穿心蓮內(nèi)酯熱不穩(wěn)定性，活性炭脫色時(shí)采用75水浴加熱30min脫色（兩次），精制回流是也是75水浴加熱30min（兩次），控制溫度小于80，使穿心蓮內(nèi)酯不被破壞水解。4、參考文獻(xiàn)1徐靚，穿心蓮內(nèi)酯的提取及純化工藝研究，成都理工大學(xué)碩士學(xué)位論文J200705012趙玉江，李勇，吳修紅，孟祥才，不同提取方法對(duì)穿心蓮內(nèi)酯含量的影響J黑龍江醫(yī)藥2006，3（19）3聶凌云，羅興平，穿心蓮提取工藝的研究及熱穩(wěn)定性考察J解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，第 2l 卷 第 l 期4李曙光，葉再元，穿心蓮內(nèi)酯的藥理活性作用J2 0 08年5月，第26卷