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1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上第6章第2節(jié) 形態(tài)學(xué)方法及其在中醫(yī)研究中的應(yīng)用一、名詞解釋(每題2分)1形態(tài)學(xué)答案:形態(tài)學(xué)作為生物學(xué)的主要分支學(xué)科,其目的是描述生物的形態(tài)和研究其規(guī)律性,且往往是與以機能為研究對象的生理學(xué)相對應(yīng)。廣義地來說,它包括研究細胞階段形態(tài)的細胞學(xué)的大部分,以及探討個體發(fā)生過程的發(fā)生學(xué)。狹義的形態(tài)學(xué)主要是研究生物的成年個體的外形和器官構(gòu)造(解剖學(xué)、組織學(xué)和器官學(xué))。2組織學(xué)答案:組織學(xué)是研究機體微細結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué)。組織學(xué)是隨著顯微鏡的出現(xiàn)、在解剖學(xué)的基礎(chǔ)上從宏觀向微觀發(fā)展形成的。組織學(xué)的研究,就是闡明在正常情況下,細胞、組織、器官和系統(tǒng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和其生理活動,以及它們在
2、人體內(nèi)的相互關(guān)聯(lián)和意義。因此,組織學(xué)的發(fā)展極大促進了生理學(xué)的進步。組織學(xué)也是病理學(xué)的基礎(chǔ)。3胚胎學(xué)答案:胚胎學(xué)是研究動物個體發(fā)育過程中形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,敘述怎樣從一個受精卵發(fā)育成胚胎,從而了解各種動物發(fā)育的特點和規(guī)律的生物學(xué)分支學(xué)科。也可廣義地理解為研究精子、卵子的發(fā)生、成熟和受精,以及受精卵發(fā)育到成體的過程的學(xué)科。4病理學(xué)答案:病理學(xué)是用自然科學(xué)的方法,研究疾病的病因、發(fā)病機制、形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能和代謝等方面的改變,揭示疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律,從而闡明疾病本質(zhì)的醫(yī)學(xué)科學(xué)。病理學(xué)既是醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科,同時又是一門實踐性很強的具有臨床性質(zhì)的學(xué)科,稱之為診斷病理學(xué)或外科病理學(xué)。按照研究對象的不同,還可分為人體病
3、理學(xué)和實驗病理學(xué)。5病理解剖學(xué)答案:病理解剖學(xué)是研究疾病時機體內(nèi)所發(fā)生的形態(tài)結(jié)構(gòu)改變,揭示疾病的病因、發(fā)病機制和轉(zhuǎn)歸,從而認識和掌握疾病的本質(zhì)、發(fā)生和發(fā)展規(guī)律,為診治和預(yù)防疾病提供科學(xué)的理論基礎(chǔ)的一門基礎(chǔ)學(xué)科。6尸體剖驗答案:尸體剖驗簡稱尸檢,是病理學(xué)的基本研究方法之一。主要運用肉眼或借助放大鏡、量尺及各種衡器等,對所檢標本的大小、形狀、色澤、重量、表面及切面、病灶特性及堅硬度等進行細微的觀察及檢測。7活體組織檢查答案:在患者身上用局部切除、鉗取、穿刺、針吸及摘除等手術(shù)方法采取病變組織進行病理檢查,以確定診斷,稱為活體組織檢查,簡稱活檢。8數(shù)字化可視人答案:數(shù)字化可視人是指把人體形態(tài)學(xué)、物理學(xué)
4、和生物學(xué)等信息,通過大型計算機處理而實現(xiàn)的數(shù)字化虛擬人體,可代替真實人體進行實驗研究的技術(shù)平臺。數(shù)字化“可視人”包括3個研究階段虛擬可視人、虛擬物理人和虛擬生物人。9組織化學(xué) 答案:組織化學(xué)是應(yīng)用物理、化學(xué)和免疫學(xué)方法,對組織、細胞內(nèi)某些化學(xué)成分的定性、定位和定量進行研究,從而探討與其相關(guān)的機能活動。10免疫組織化學(xué) 答案:免疫組織化學(xué)是運用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理建立起來的一種組織化學(xué)技術(shù)。其優(yōu)點是,可以在原位觀察目的抗原物質(zhì)是否存在及存在部位、含量等,把形態(tài)變化與分子水平的機能代謝結(jié)合起來,在顯微鏡下直接觀察。11抗原答案:抗原是指能夠刺激機體產(chǎn)生(特異性)免疫應(yīng)答,并能與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗
5、體和致敏淋巴細胞結(jié)合,發(fā)生免疫效應(yīng)的物質(zhì)。12抗體答案:抗體指機體在抗原刺激下,由B細胞分化成的漿細胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的免疫球蛋白。13單克隆抗體答案:抗體是由B淋巴細胞分化形成的漿細胞合成、分泌的。每一個B淋巴細胞在成熟的過程中通過隨機重排只產(chǎn)生識別一個抗原的抗原受體基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當(dāng)機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成效應(yīng)B細胞(漿細胞)和記憶B細胞,大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。如果能選出一個制
6、造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng),就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。14細胞化學(xué)答案:細胞化學(xué)是研究細胞的化學(xué)成分,及其在細胞活動中的變化和定位的學(xué)科。即在不破壞細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的狀況下,用生化的和物理的技術(shù)對各種組分做定量的分析,研究其動態(tài)變化,了解細胞代謝過程中各種細胞組分的作用。15熒光細胞化學(xué)答案:熒光細胞化學(xué)即免疫熒光細胞化學(xué),是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有熒
7、光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量。免疫熒光細胞化學(xué)分直接法、夾心法、間接法和補體法。16原位標記法(TUNEL法)答案:是檢測細胞凋亡的組織學(xué)技術(shù)。該技術(shù)的原理是,凋亡細胞的DNA在出現(xiàn)許多不對稱斷裂點的缺口上,會產(chǎn)生了一系列游離的DNA 3-OH末端,利用末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)將標記的dUTP結(jié)合在DNA 3-OH末端上。其標記物可以是地高辛、生物素或熒光素。方法采用常規(guī)石蠟切片,在蘇木精染色前進行以上的染色。這種組織細胞原位顯示凋亡細胞的方法,稱為末端轉(zhuǎn)
8、移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標記,簡稱TUNEL法。17原位雜交答案:原位雜交技術(shù)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù)。該技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。18冰凍切片答案:冰凍切片指采用冷凍技術(shù),硬化組織,在冰凍切片機上切片。該技術(shù)的優(yōu)點是可以最大程度保護被檢組織新鮮度和酶的活性,實驗周期短。因此被廣泛用于臨床活體組織檢查及手術(shù)中快速病理診斷,以便迅速作出下一步治療上的決策。1
9、9HE染色法答案:HE染色法是組織學(xué)中最常用的染色法,采用蘇木精(hematoxylin)和伊紅(eosin)染色,簡稱HE染色法。20顯微鏡答案:顯微鏡是由一個透鏡或幾個透鏡的組合構(gòu)成的一種光學(xué)儀器,主要用于放大微小物體便于人肉眼可見。顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡。光學(xué)顯微鏡可把物體放大1600倍,分辨的最小極限達0.1微米,而電子顯微鏡的放大倍數(shù)可達80萬倍。21暗視野顯微鏡答案:暗視野顯微鏡是一種具有暗視野聚光鏡,從而使照明的光束不從中央部分射入,而從四周射向標本的顯微鏡。22熒光顯微鏡答案:用以觀察有自發(fā)熒光或經(jīng)熒光素染色或標記的細胞和組織的顯微鏡。這種顯微鏡一般是以高壓汞燈產(chǎn)生的短
10、波紫外線為光源,熒光物質(zhì)在紫外線照射下激發(fā)出各種顏色的熒光,借此研究該熒光物質(zhì)的分布和特征。 23激光掃描共聚焦顯微術(shù)(CLSM)答案:用以觀察細胞的形態(tài)學(xué)以及多種動力學(xué)功能的參數(shù),了解細胞的解剖定位,闡明在完成細胞特殊功能時的各種細胞成分的作用,多種組分的相互作用以及其功能原理。其工作原理是利用共焦光路和激光掃描獲得生物樣品的顯微斷層形態(tài)。24顯微切割術(shù)答案:顯微切割技術(shù)是在顯微狀態(tài)或顯微鏡直視下通過顯微操作系統(tǒng)對欲選取的材料(組織,細胞群,細胞,細胞內(nèi)組分或染色體區(qū)帶等)進行切割分離并收集用于后續(xù)研究的技術(shù)。顯微切割技術(shù)實際上屬于在微觀領(lǐng)域?qū)ρ芯坎牧系姆蛛x收集技術(shù),因此應(yīng)用此技術(shù)往往是許多
11、要深入的研究工作中起始的重要一步。25電子顯微鏡答案:電子顯微鏡,簡稱電鏡,是使用電子來展示物件的內(nèi)部或表面的顯微鏡。高速的電子的波長比可見光的波長短,因此電子顯微鏡的分辨率可達0.1納米,遠高于光學(xué)顯微鏡的分辨率(約200納米)。電子顯微鏡主要有透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡和掃描透射電子顯微鏡等。26透射電鏡(TEM)答案:透射電鏡即透射電子顯微鏡,通常稱作電子顯微鏡或電鏡(EM),是使用最為廣泛的一類電鏡。它的主要特點是利用電子射線(或稱電子束也稱電子波)穿透樣品,而后經(jīng)多級電子放大后成像在熒光屏上。它的主要優(yōu)點是分辨率高,可用來觀察組織和細胞內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)以及微生物和生物大分子的全貌。
12、27掃描電鏡(SEM)答案:掃描電鏡即掃描電子顯微鏡,主要利用電子射線轟擊樣品表面,引起二次電子等信號的發(fā)射,經(jīng)檢測裝置接收后成像的一類電鏡。其特點是景深長,圖像立體感強,可用來觀察生物樣品的各種形貌特征。28掃描透射電鏡答案:掃描電鏡中電子射線作用于樣品后,其中一部分電子可透過樣品成為透射電子,另一部分則在樣品表面形成散射電子,將透過樣品的透射電子和散射電子用檢測器接收成像,就成為掃描透射電鏡。29電子顯微術(shù) 答案:電鏡不能直接觀察天然狀態(tài)下的生物標本,必須通過各種技術(shù)將生物標本制成特殊的電鏡生物樣品,才可放入電鏡進行觀察,這些電鏡樣品制備技術(shù)稱為電子顯微術(shù)。30超薄切片技術(shù)答案:超薄切片技
13、術(shù)是所有透射電鏡生物樣品制備技術(shù)中最常用、最基本的一種技術(shù),就是通過固定、脫水、包埋、切片和染色等步驟,將生物標本切成薄于0.1m的超薄切片的樣品制備技術(shù),用于生物組織的內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)研究。31負染色技術(shù)答案:負染色技術(shù)利用電子密度比標本高的重金屬鹽(如磷鎢酸鈉、醋酸鈾等)將生物標本包圍起來,增強背景散射電子的能力以提高反差,在黑暗的背景下顯示標本的形態(tài)結(jié)構(gòu),稱負染色技術(shù)。32冷凍蝕刻技術(shù)答案:在快速冷凍下對生物樣品進行斷裂、蝕刻和復(fù)型,制備生物樣品復(fù)型膜的技術(shù)稱冷凍蝕刻技術(shù)。在電鏡下觀察復(fù)型膜可獲得立體感強的超微結(jié)構(gòu)圖像,主要用于生物膜結(jié)構(gòu)的研究。33生物標本割裂技術(shù)答案:將生物標本放在特殊包
14、埋劑中經(jīng)冷凍或其他方法固化,然后把固化的標本割裂,暴露組織和細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu),再經(jīng)干燥和導(dǎo)電后在 SEM下觀察。這一技術(shù)使 SEM能觀察生物標本的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。 34鑄型技術(shù)答案:用鑄型技術(shù)(如甲基丙烯酸酯和ABS等)注入生物體的腔性器官,制成鑄型標本,可在 SEM下觀察管腔內(nèi)表面的結(jié)構(gòu)。35電子探針答案:電鏡技術(shù)之一,其原義僅是一個物理學(xué)名詞,指聚焦了的電子束。電子探針,主要用于探測微小區(qū)域的元素成分。36分析電鏡答案:分析電鏡是利用電子射線轟擊樣品所產(chǎn)生的X射線或俄歇電子對樣品元素進行分析的一類電鏡。其特點是能在觀察超微結(jié)構(gòu)的同時,對樣品中一個極微小的區(qū)域進行化學(xué)分析,從而在超微結(jié)構(gòu)水平上測定各
15、種細胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分及其變化規(guī)律。37分析電鏡答案:分析電子顯微鏡是由透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡和電子探針組合而成的多功能的新型儀器。其功能有:可獲得透射電子圖像、掃描透射電子圖像、二次電子圖像、背散射電子圖像和X射線圖像,可用X射線能譜和電子能譜進行微-微區(qū)成分分析,用多種衍射技術(shù)進行晶體結(jié)構(gòu)分析、粒度分析和陰極發(fā)光觀察等。38CT答案:CT(computed tomography)是電子計算機X射線斷層掃描技術(shù)簡稱。其工作原理是,根據(jù)人體不同組織對X線的吸收與透過率的不同,用X線束對人體某部一定厚度的層面進行掃描,由探測器接收透過該層面的X線,轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢姽夂?,由光電轉(zhuǎn)換變?yōu)殡娦盘枺俳?jīng)
16、模擬/數(shù)字轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)為數(shù)字,輸入計算機處理。處理后,就可攝下人體被檢查部位的斷面或立體的圖像,發(fā)現(xiàn)體內(nèi)任何部位的細小病變。39MRI答案:MRI即核磁共振成像(nuclear magnetic resonance imaging),又稱為核磁共振成像術(shù)(MR)。MR是一種生物磁自旋成像技術(shù),它是利用原子核自旋運動的特點,在外加磁場內(nèi),經(jīng)射頻脈沖激后產(chǎn)生信號,用探測器檢測并輸入計算機,經(jīng)過處理轉(zhuǎn)換在屏幕上顯示圖像。該技術(shù)不需注射造影劑、無電離輻射、對機體沒有不良影響。對檢測腦內(nèi)血腫、腦外血腫、腦腫瘤、顱內(nèi)動脈瘤、動靜脈血管畸形、腦缺血、椎管內(nèi)腫瘤、脊髓空洞癥和脊髓積水等顱腦常見疾病非常有效,同時對
17、腰椎椎間盤后突、原發(fā)性肝癌等疾病的診斷也很有效。40PET答案:正電子發(fā)射型計算機斷層顯像(Positron Emission Computed Tomography,PET)的成像原理:將人體代謝所必需的物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、核酸、脂肪酸等標記上短壽命的放射性核素(如18F)制成顯像劑(如氟代脫氧葡萄糖,簡稱FDG)注入人體后進行掃描成像。因為人體不同組織的代謝狀態(tài)不同,所以這些被核素標記了的物質(zhì)在人體各種組織中的分布也不同,如:在高代謝的惡性腫瘤組織中分布較多,這些特點能通過圖像反映出來,從而可對病變進行診斷和分析。二、填空題(每題2分)1解剖學(xué)的主要方法包括:標本防腐固定、_、血管灌注
18、技術(shù)、_、數(shù)字化可視人等。答案:斷面解剖、淋巴管灌注2解剖學(xué)是一門研究機體形態(tài)結(jié)構(gòu)的重要醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科,屬于生物學(xué)中的_范疇。根據(jù)其研究對象及研究方法的不同,可分為大體解剖學(xué)、_和胚胎學(xué)三部分。答案:形態(tài)學(xué)、組織學(xué)3標本防腐固定劑常用_的甲醛(福爾馬林)。常用的防腐固定方法是先灌注,后_。答案:10、浸泡4病理解剖學(xué)的主要方法包括:_、_。答案:尸體剖驗、活體組織檢查5在患者身上用局部切除、鉗取、穿刺、針吸及摘除等手術(shù)方法采取病變組織進行病理檢查,以確定診斷,稱為_。其優(yōu)勢在于可以得到足夠的組織用于診斷,而且新鮮組織保留了完整的結(jié)構(gòu),能確保正確診斷。答案:活體組織檢查/活檢6組織化學(xué)和細胞化學(xué)是
19、應(yīng)用_、_和免疫學(xué)方法,對組織、細胞內(nèi)某些化學(xué)成分的_、_和定量進行研究,從而探討與其相關(guān)的機能活動。答案:物理、化學(xué)、定性、定位7免疫組織化學(xué)是運用_原理建立起來的一種組織化學(xué)技術(shù)。其優(yōu)點是,可以在原位觀察_及存在部位、含量等,把形態(tài)變化與分子水平的機能代謝結(jié)合起來,在顯微鏡下直接觀察。答案:抗原-抗體特異性結(jié)合、抗原物質(zhì)是否存在8電子顯微鏡主要包括_、_。答案:透射電鏡、掃描電鏡9透射電鏡(TEM)可分為:_、高壓TEM和_。答案:一般TEM、超高壓TEM10掃描電鏡(SEM)可分為:_、場發(fā)射電子槍SEM和_。答案:一般SEM、生物用SEM11石蠟切片常用染色法采用_和_染色,簡稱HE染
20、色。答案:蘇木素、伊紅12石蠟切片的制備程序大致分為_、_、_和_四個程序。答案:取材與固定、脫水與包埋、切片與染色、封固13放射自顯影術(shù),是利用_,追蹤某些物質(zhì)在體內(nèi)、組織或細胞中的代謝徑路與結(jié)構(gòu)的關(guān)系。答案:同位素分析的靈敏性14激光掃描共聚焦術(shù)(CLSM)由于其高靈敏和_的獨特優(yōu)勢,克服了過去對樣品觀察只停留在_、單層、靜態(tài)的局限性。答案:能觀察空間結(jié)構(gòu)、表面15組織化學(xué)和細胞化學(xué)是應(yīng)用物理、化學(xué)和免疫學(xué)方法,對組織、細胞內(nèi)某些化學(xué)成分的_、_和_進行研究,從而探討與其相關(guān)的機能活動。答案:定性、定位、定量(順序可變動)三、單選題(每題2分)1 “解剖”一詞最早出現(xiàn)于哪一部專著中( D
21、)?A 五十二病方 B 難經(jīng) C 類經(jīng)圖翼 D 黃帝內(nèi)經(jīng) E傷寒雜病論2下面哪一部專著是世界上最早的系統(tǒng)的法醫(yī)學(xué)專著( A )?A 宋慈洗冤錄 B 無名氏內(nèi)恕錄C 趙逸齋平冤錄D Forturiatus Flaelis論醫(yī)學(xué)關(guān)系 E王與無冤錄3普通光鏡觀察的組織切片一般厚度為( D )。 A 510mm B 0.50.7mm C 0.10.5mm D 510m E 510nm 4透射電鏡生物標本的超薄切片不應(yīng)超過( B )。 A 0.01m B 0.1m C 1m D 10 m E 100m5標本防腐固定劑常用( B )的甲醛(福爾馬林)。A 4 B 10 C 15D 37 E 40%6標本防
22、腐常采用10%的甲醛,采?。?D )防腐固定方式。A 先浸泡,后沖洗 B 先灌注,后沖洗C 先浸泡,后灌注D 先灌注,后浸泡 E 先沖洗,后浸泡7病理解剖學(xué)的主要方法包括尸體剖驗與( B )。A 斷面解剖方法 B 活體組織解剖 C 血管灌注 D 淋巴管灌注 E 數(shù)字化可視人技術(shù)8對于一些特殊的組織,如血液、腸系膜、骨組織等標本,適合采取下列哪種方法進行組織學(xué)觀察( C )。A 普通光鏡標本制備B 組織化學(xué) C涂片、鋪片、磨片D 冰凍切片 E 免疫組化9臨床手術(shù)中快速病理診斷,可以采用( E )。A 掃描電鏡 B 透射電鏡 C 肉眼觀察 D 石蠟切片 E 冰凍切片10采用電鏡技術(shù)觀察生物樣品的表
23、面特征,宜采用哪種電鏡( B )?A 透射電鏡 B 掃描電鏡 C 電子探針 D 分析電鏡 E 掃描透射電鏡11采用電鏡技術(shù)觀察組織和細胞內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)特征,宜采用哪種電鏡( D )?A 分析電鏡 B 掃描電鏡C 電子探針 D 透射電鏡 E 掃描透射電鏡12原位標記法(TUNEL法)是檢測( A )的組織學(xué)技術(shù)。A 細胞凋亡 B 細胞壞死 C 細胞形態(tài) D 細胞分裂 E 細胞生長13觀察組織和細胞培養(yǎng)中的活細胞,一般用( C )。A普通光學(xué)顯微鏡 B暗視野顯微鏡 C相差顯微鏡D熒光顯微鏡 E 偏光顯微鏡14不染色的新鮮細胞涂片比較適合采用( B )觀察。A普通光學(xué)顯微鏡 B暗視野顯微鏡C相差顯微鏡
24、D熒光顯微鏡 E 偏光顯微鏡15有自發(fā)熒光的細胞或組織適合采用( E )觀察。A普通光學(xué)顯微鏡 B暗視野顯微鏡 C相差顯微鏡D 偏光顯微鏡 E熒光顯微鏡16放射自顯影術(shù),是利用( A ),追蹤某些物質(zhì)在體內(nèi)、組織或細胞中的代謝徑路與結(jié)構(gòu)的關(guān)系。A 同位素分析的靈敏性B 抗原-抗體特異性結(jié)合 C 堿基互補原理 D 激光掃描獲得生物樣品的顯微斷層特征 E 酸堿結(jié)合原理17石蠟切片HE染色是指用( E )染色。A蘇木素和麗春紅 B考馬斯亮藍和品紅C 考馬斯亮藍和伊紅D蘇木素和品紅 E蘇木素和伊紅18石蠟切片的制備程序為( D )。A 取材與固定、切片與染色、脫水與包埋、封固B 脫水與包埋、封固、取材
25、與固定、切片與染色C 取材與固定、脫水與包埋、封固、切片與染色D 取材與固定、脫水與包埋、切片與染色、封固E 封固、切片與染色、取材與固定、脫水與包埋四、多選題(每題2分)1以下哪些為組織學(xué)常用的方法( ABCDE )? A 普通光鏡標本制備技術(shù) B 組織與細胞培養(yǎng)技術(shù)C 流式細胞術(shù) D 涂片、鋪片、磨片標本的制備E 激光掃描共聚焦顯微術(shù)2以下哪些為組織學(xué)常用的方法( ABCDE )? A 顯微切割技術(shù) B 組織與細胞培養(yǎng)技術(shù) C 顯微分光光度技術(shù)D原位標記法 E放射自顯影3以下哪些為解剖學(xué)常用的方法( ABCDE )?A標本防腐固定方法 B淋巴管灌注方法 C血管灌注技術(shù)D數(shù)字化“可視人”方法
26、E 斷面解剖方法4流式細胞術(shù)可測量細胞哪些參數(shù)( ABCDE )?A 細胞的大小、形態(tài) B 細胞的類型 C 細胞總蛋白量D 細胞RNA含量 E 細胞DNA含量5( BD )是與掃描電鏡有關(guān)的電子顯微術(shù)A 超薄切片技術(shù) B 鑄型技術(shù) C 電鏡細胞化學(xué)技術(shù)D 生物標本割裂技術(shù) E 免疫電鏡技術(shù)6( ABE )是與透射電鏡有關(guān)的電子顯微術(shù)A 超薄切片技術(shù) B負染色技術(shù)C 鑄型技術(shù)D生物標本割裂技術(shù) E電鏡放射自顯影技術(shù)7電鏡包括( ABCDE )。A 透射電鏡 B掃描電鏡 C分析電鏡D電子探針 E掃描透射電鏡8以下哪些為電鏡( BCD )?A 熒光顯微鏡 B掃描電鏡 C分析電鏡D電子探針 E相差顯微
27、鏡9以下哪些技術(shù)可以應(yīng)用于解剖學(xué)研究之中( ABCDE )?A 正電子發(fā)射計算機斷層(PET) B計算機X線斷層掃描圖(CT)C 核磁共振(NMR) D 放射自顯影術(shù)(autoradiograph)E 超聲斷層圖(ultrasonic tomograph)五、問答題(每題5分)1試述石蠟切片制備步驟。答案:石蠟切片的制備程序大致分為取材與固定、脫水與包埋、切片與染色、封固4個步驟:(1)取材與固定。將欲觀察的人體或動物的新鮮材料切成適當(dāng)?shù)男K,立即浸入固定液,如10甲醛液等,其目的是使其盡可能保持活體時的結(jié)構(gòu)狀態(tài)。(2)脫水與包埋。這一步驟實際包含脫水、透明、浸蠟與包埋等多個環(huán)節(jié)。為了使石蠟?zāi)?/p>
28、浸入組織內(nèi),把固定好的材料用乙醇等脫水,經(jīng)二甲苯透明后,再浸入加溫溶化的石蠟中浸透包埋使組織塊變硬。(3)切片與染色。利用切片機將包埋的組織蠟塊切成510m的薄片,然后貼片、脫蠟、染色。常用的是蘇木精和伊紅染色法,即HE染色法。(4)封固。在切片上滴加中性樹膠,用蓋玻片進行封固,保存?zhèn)溆谩?解剖學(xué)主要有哪些方法?答案:解剖學(xué)的主要方法有:(1)標本防腐固定方法。標本防腐固定劑常用10的甲醛(福爾馬林)。常用的防腐固定方法是先灌注,后浸泡。灌注時多采用吊桶灌注法,灌注量一般為體重的20%左右。經(jīng)過灌注處理的尸體,要達到比較完全的固定,適于解剖操作的程度,一般需要經(jīng)4-6個月。(2)斷面解剖方法。
29、采用鋸切方法制作斷面標本是研究器官的位置、器官與器官之間或局部與整體之間位置關(guān)系的有效方法之一。(3)血管灌注技術(shù)。血管灌注是將一些帶有色料的填充劑灌注到血管內(nèi),通過解剖法顯示血管位置、行徑和分支特點。一般用新鮮尸體,根據(jù)制作標本的要求,進行整體灌注或局部灌注。(4)淋巴管灌注方法。淋巴管較為細小,淋巴液無色透明,用一般解剖方法不易觀察,所以通常多先注入有色的注射劑,然后再進行解剖觀察。注射一般采用間接注射法。(5)數(shù)字化“可視人”方法。數(shù)字化“可視人”是指把人體形態(tài)學(xué)、物理學(xué)和生物學(xué)等信息,通過大型計算機處理而實現(xiàn)的數(shù)字化虛擬人體,可代替真實人體進行實驗研究的技術(shù)平臺。數(shù)字化“可視人”包括3
30、個研究階段虛擬可視人、虛擬物理人和虛擬生物人。3組織學(xué)、病理學(xué)主要有哪些研究方法? 答案:組織學(xué)、病理學(xué)的主要方法有:(1)普通光鏡標本制備技術(shù)。應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察機體各部的微細結(jié)構(gòu)時,首先應(yīng)把所有要觀察的材料制成薄片,最基本的就是切片方法,其中石蠟切片更為常用。其制備程序大致如下:取材與固定、脫水與包埋、切片與染色、封固。(2)涂片、鋪片、磨片標本的制備。對于一些特殊材料,如血液、疏松結(jié)締組織、腸系膜等薄層組織、骨和牙等堅硬組織可采用該法。(3)組織化學(xué)。組織化學(xué)和細胞化學(xué)是應(yīng)用物理、化學(xué)和免疫學(xué)方法,對組織、細胞內(nèi)某些化學(xué)成分的定性、定位和定量進行研究,從而探討與其相關(guān)的機能活動。如運用蘇
31、丹染色法可將細胞內(nèi)的脂肪成分反映出來。(4)免疫組織化學(xué)。是運用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理建立起來的一種組織化學(xué)技術(shù)。其優(yōu)點是,可以在原位觀察抗原物質(zhì)是否存在及存在部位、含量等,把形態(tài)變化與分子水平的機能代謝結(jié)合起來,在顯微鏡下直接觀察。(5)放射自顯影。利用同位素分析的靈敏性,放射自顯影是研究追蹤某些物質(zhì)在體內(nèi)或細胞內(nèi)的代謝徑路與結(jié)構(gòu)的關(guān)系。在生物醫(yī)學(xué)研究中,常用放射同位素主要是能量低、射程短、電離作用強的射線,有14C、125I等及其化合物。(6)流式細胞術(shù)(FCM)。是近幾十年來發(fā)展起來的新技術(shù),建立在計算機、激光科學(xué)、流體力學(xué)、單克隆抗體制劑,定量細胞化學(xué)和定量熒光細胞化學(xué)等知識及技術(shù)
32、的應(yīng)用上。該技術(shù)可以對單一的細胞逐個地進行高速的定量分析和分類,測量細胞的多種參數(shù),如細胞大小、形狀、胞漿顆粒、類型,細胞的面積、周長、核質(zhì)比,或用熒光染色后測量細胞DNA、RNA含量,細胞總蛋白量等和免疫標記的其他參數(shù)。新近發(fā)展的熒光激活細胞分類儀(FACS),則是建立在流式細胞術(shù)上的一種先進的自動分析儀器。(7)激光掃描共聚焦顯微術(shù)(CLSM)?;竟ぷ髟硎抢霉步构饴泛图す鈷呙璜@得生物樣品的顯微斷層形態(tài)。由于它的高靈敏和能觀察空間結(jié)構(gòu)的獨特優(yōu)勢,克服了過去對樣品觀察只停留在表面、單層、靜態(tài)的局限性。用以觀察細胞的形態(tài)學(xué)以及多種動力學(xué)功能的參數(shù),了解細胞的解剖定位,闡明在完成細胞特殊功能
33、時的各種細胞成分的作用,多種組分的相互作用以及其功能原理。(8)細胞凋亡檢測技術(shù)(TUNEL法)。是檢測細胞凋亡的組織學(xué)技術(shù)。該技術(shù)的原理是,凋亡細胞的DNA在出現(xiàn)許多不對稱斷裂點的缺口上,會產(chǎn)生了一系列游離的DNA3-OH末端,利用末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)將標記的dUTP結(jié)合在DNA3-OH末端上。其標記物可以是地高辛、生物素或熒光素。方法采用常規(guī)石蠟切片,在蘇木精染色前進行以上的染色。這種組織細胞原位顯示凋亡細胞的方法,稱為末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標記(TdT-mediated X-dUTP nick end labeling)。除上述常用方法外,還有組織與細胞培養(yǎng)技術(shù)、顯微分光光度技
34、術(shù)、原位多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)、原位雜交技術(shù)、顯微切割等一系列技術(shù)。4組織學(xué)常用光學(xué)顯微鏡包括哪些?答案:包括如下4種:(1)普通光學(xué)顯微鏡。 (2)暗視野顯微鏡:用于觀察在亮視野下因反差太小或分辨率不足而難以觀察的微細結(jié)構(gòu)或顆粒。用來觀察不染色的新鮮細胞涂片或放射自顯影標本中的銀顆粒分布等。(3)相差顯微鏡:主要用于觀察組織和細胞培養(yǎng)中的活細胞。相差顯微鏡將細胞中的各種結(jié)構(gòu)對光線所產(chǎn)生的不同折射作用,轉(zhuǎn)換成光密度差異,使鏡下結(jié)構(gòu)反差明顯,影像清楚。另有一種將顯微鏡改裝成目鏡在下,光源在上,稱為倒置相差顯微鏡。(4)熒光顯微鏡:用以觀察有自發(fā)熒光或經(jīng)熒光素染色或標記的細胞和組織。這種顯微鏡
35、一般是以高壓汞燈產(chǎn)生的短波紫外線為光源,熒光物質(zhì)在紫外線照射下激發(fā)出各種顏色的熒光,借此研究該熒光物質(zhì)的分布和特征。 5電子顯微鏡主要有哪些類型?答案:主要包括如下5類:(1)透射電鏡(TEM):即透射電子顯微鏡,通常稱作電子顯微鏡或電鏡(EM),是使用最為廣泛的一類電鏡。它的主要特點是利用電子射線(或稱電子束也稱電子波)穿透樣品,而后經(jīng)多級電子放大后成像在熒光屏上。它的主要優(yōu)點是分辨率高,可用來觀察組織和細胞內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)以及微生物和生物大分子的全貌。 (2)掃描電鏡(SEM):即掃描電子顯微鏡(SEM),主要利用電子射線轟擊樣品表面,引起二次電子等信號的發(fā)射,經(jīng)檢測裝置接收后成像的一類電鏡
36、。其特點是景深長,圖像立體感強,可用來觀察生物樣品的各種形貌特征。(3)電子探針:電子探針主要用于探測微小區(qū)域的元素成分。其原義僅是一個物理學(xué)名詞,指聚焦了的電子束。(4)分析電鏡:是利用電子射線轟擊樣品所產(chǎn)生的X射線或俄歇電子對樣品元素進行分析的一類電鏡。其特點是能在觀察超微結(jié)構(gòu)的同時,對樣品中一個極微小的區(qū)域進行化學(xué)分析,從而在超微結(jié)構(gòu)水平上測定各種細胞結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分及其變化規(guī)律。(5)掃描透射電鏡:SEM中電子射線作用于樣品后,其中一部分電子可透過樣品成為透射電子,另一部分則在樣品表面形成散射電子,將透過樣品的透射電子和散射電子用檢測器接收成像,就成為掃描透射電鏡。6透射電鏡和掃描電鏡的
37、電子顯微術(shù)各包括哪些?答案:主要包括:(1)與TEM有關(guān)的電子顯微術(shù)1)超薄切片技術(shù):這是所有電鏡生物樣品制備技術(shù)中最常用、最基本的一種技術(shù)。超薄切片技術(shù)就是通過固定、脫水、包埋、切片和染色等步驟,將生物標本切成薄于0.1m的超薄切片的樣品制備技術(shù),用于生物組織的內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)研究。2)負染色技術(shù):利用電子密度比標本高的重金屬鹽(如磷鎢酸鈉、醋酸鈾等)將生物標本包圍起來,增強背景散射電子的能力以提高反差,在黑暗的背景下顯示標本的形態(tài)結(jié)構(gòu),稱負染色技術(shù)。這種技術(shù)操作簡便,主要用于顆粒狀標本(如細菌、病毒、分離細胞器等)的研究。3)冷凍蝕刻技術(shù):在快速冷凍下對生物樣品進行斷裂、蝕刻和復(fù)型,制備生物樣
38、品復(fù)型膜的技術(shù)稱冷凍蝕刻技術(shù)。在電鏡下觀察復(fù)型膜可獲得立體感強的超微結(jié)構(gòu)圖像,主要用于生物膜結(jié)構(gòu)的研究。4)電鏡細胞化學(xué)技術(shù):在超微結(jié)構(gòu)水平上,通過電鏡細胞化學(xué)反應(yīng)來研究細胞成分的分布和變化的方法稱電鏡細胞化學(xué)技術(shù)。這一技術(shù)目前主要用于研究細胞內(nèi)各種大分子物質(zhì)和酶的定位等。5)免疫電鏡技術(shù):這是一種使抗原在超微結(jié)構(gòu)水平上定位的技術(shù),應(yīng)用與抗原相應(yīng)的標記抗體,在電鏡下觀察標記物的位置,從而定位相應(yīng)抗原。這一技術(shù)具有靈敏度高、特異性強的特點。6)電鏡放射自顯影技術(shù):這是電鏡技術(shù)與放射自顯影技術(shù)相結(jié)合,觀察放射性物質(zhì)在超微結(jié)構(gòu)水平上的定位和變化,從而了解細胞的各種代謝活動。這一技術(shù)使結(jié)構(gòu)與功能的研究
39、結(jié)合起來,是一種動態(tài)的研究方法。(2)與SEM有關(guān)的電子顯微術(shù)1)SEM常規(guī)制樣技術(shù):樣品制備包括樣品觀察面的暴露、固定、干燥和導(dǎo)電等步驟,使表面特征充分暴露而不變形。這一技術(shù)是 SEM樣品制備的常規(guī)技術(shù),主要用于組織、細胞、寄生蟲等表面形貌的研究。2)生物標本割裂技術(shù):將生物標本放在特殊包埋劑中經(jīng)冷凍或其他方法固化,然后把固化的標本割裂,暴露組織和細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu),再經(jīng)干燥和導(dǎo)電后在 SEM下觀察。這一技術(shù)使 SEM能觀察生物標本的內(nèi)部結(jié)構(gòu),目前最常用的是冷凍割裂技術(shù)。3)鑄型技術(shù):用鑄型技術(shù)(如甲基丙烯酸酯和ABS等)注入生物體的腔性器官,制成鑄型標本,可在 SEM下觀察管腔內(nèi)表面的結(jié)構(gòu)。7
40、藏象理論的形態(tài)學(xué)研究取得了哪些成就?答案:主要有:(1)腎的研究。腎本質(zhì)的研究腎主生殖的研究、腎主水液的研究、腎主骨生髓的研究、腎開竅于耳的研究、腎與二十四節(jié)氣相關(guān)性研究。(2)脾的研究。脾主運化的研究、脾氣散精的研究、內(nèi)傷脾胃百病由生的研究、脾虛衰老的研究。(3)肝的研究。肝主疏泄的研究、肝藏血的研究。(4)心的研究。心主血的研究、心主脈的研究。(5)肺的研究。肺主氣司呼吸的研究、肺與大腸相表里的研究。8試簡述經(jīng)絡(luò)理論形態(tài)學(xué)研究所取得的成就主要體現(xiàn)在哪些方面?答案:經(jīng)絡(luò)理論形態(tài)學(xué)研究在經(jīng)脈研究、絡(luò)脈研究、穴位研究等方面均有所發(fā)現(xiàn),取得了豐碩的成就。9形態(tài)學(xué)主要有哪些方法? 請舉例簡要說明。答
41、案:形態(tài)學(xué)主要有如下3類方法:(1)解剖學(xué)、病理解剖學(xué)方法。前者包括如標本防腐固定方法、斷面解剖方法等;后者包括如尸體剖驗、活體組織檢查等方法。(2)組織學(xué)、病理學(xué)方法。如普通光鏡標本制備技術(shù)、激光掃描共聚焦顯微術(shù)等。(3)電子顯微鏡方法。如透射電鏡(SEM)和掃描電鏡(TEM)。10何謂解剖學(xué)?何謂病理解剖學(xué)?答案:解剖學(xué)是一門研究機體形態(tài)結(jié)構(gòu)的重要醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科,屬于生物學(xué)中的形態(tài)學(xué)范疇。病理解剖學(xué)是研究疾病時機體內(nèi)所發(fā)生的形態(tài)結(jié)構(gòu)改變,揭示疾病的病因、發(fā)病機制和轉(zhuǎn)歸,從而認識和掌握疾病的本質(zhì)、發(fā)生和發(fā)展規(guī)律,為診治和預(yù)防疾病提供科學(xué)的理論基礎(chǔ)的一門基礎(chǔ)學(xué)科。11普通光鏡標本制備技術(shù)包括哪些?答案:應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察機體各部的微細結(jié)構(gòu)時,首先應(yīng)把所有要觀察的材料制成薄片,最基本的就是石蠟切片法。其他在制作較硬組織(如骨組織等)或較大組織器官(如眼球)等切片,可用火棉膠切片的方法。為保存細胞內(nèi)酶的活性,可選用冰凍切片的方法。12什么叫組織化學(xué)和細胞化學(xué)技術(shù)? 原理如何?答案:組織化學(xué)和細胞化學(xué)是應(yīng)用物理、化學(xué)和免疫學(xué)方法,對組織、細胞內(nèi)某些化學(xué)成分的定性、定位和定量進行研究,從而探討與其相關(guān)的機能活動。其原理是在組織切片上或被取材料上,加某種試劑,使之與組織或細胞內(nèi)某些物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),形成最終反應(yīng)產(chǎn)物,用以辨別
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