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1、第五章第五章 免疫放射分析免疫放射分析2第五章第五章 免疫放射分析免疫放射分析 目的與要求:掌握免疫放射分析(IRMA)原理以及與RIA的區(qū)別及方法學(xué)。 內(nèi)容:免疫放射分析(IRMA)是利用125I標(biāo)記抗體與相應(yīng)待測(cè)抗原進(jìn)行非競(jìng)爭(zhēng)性名 結(jié)合反應(yīng),以達(dá)到定量分析的目的。3第一節(jié) 免疫放射分析的基本原理一、重點(diǎn)掌握基本原理IRMA是一種非競(jìng)爭(zhēng)性的放射免疫分析法,其原理屬于非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。(一)單位點(diǎn)IRMA原理及其反應(yīng)式。(二)雙位點(diǎn)IRMA原理及其反應(yīng)式。(三)掌握RIA與IRMA的區(qū)別。4三、掌握劑量效應(yīng)曲線 劑量效應(yīng)曲線形態(tài)直接受標(biāo)記抗體濃度和親和力的影響。(一)抗體濃度對(duì)劑量效應(yīng)曲線

2、的影響。(二)抗體親和力對(duì)劑量效應(yīng)曲線的影響。5第二節(jié)第二節(jié) 免疫放射分析的方法學(xué)免疫放射分析的方法學(xué)一、掌握雙位點(diǎn)免疫放射分析方法及特點(diǎn)。其中重點(diǎn)掌握雙抗體夾心法,了解標(biāo)記第三抗體法。二、雙標(biāo)記抗體法三、雙位點(diǎn)免疫放射分析操作流程可分為正向兩步法和反向兩步法。6四、掌握影響免疫放射分析方法的主要因素(一)被測(cè)抗原性質(zhì) (二)結(jié)合在固相抗體上的抗原穩(wěn)定性。 (三)反應(yīng)時(shí)間和溫度 (四)標(biāo)記抗體溫度 (五)固相物的洗滌 (六)血清、電解質(zhì)和其它質(zhì)的非特異性效應(yīng)7第三節(jié)第三節(jié) 免疫放射分析的特點(diǎn)及其數(shù)據(jù)處理免疫放射分析的特點(diǎn)及其數(shù)據(jù)處理一、掌握免疫放射分析特點(diǎn)(一)IRMA是用標(biāo)記抗體作為示蹤劑。(二)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)(三)靈敏度(四)特異性(五)標(biāo)記曲線的工作范圍(六)方法的穩(wěn)健性8二、了解免疫放射分析的數(shù)據(jù)處理的三種

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