曲克蘆丁對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

1、曲克蘆丁對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用         08-05-31 17:01:00     編輯：studa20          作者：齊貴勝， 裴素霞， 任家勝【關(guān)鍵詞】  曲克蘆?。?肝臟；,缺血再灌注摘要：目的探討曲克蘆丁對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響及其機(jī)理。方法將Wistar大鼠40只隨機(jī)分為假手術(shù)對照組、缺血再灌注組(I/R 組)和I/R 加曲克蘆丁預(yù)

2、處理組。I/R 加曲克蘆丁預(yù)處理組動(dòng)物術(shù)前腹腔內(nèi)注射曲克蘆丁20 mg/kg, 1次/d, 連續(xù)3  d。 然后制作大鼠肝缺血再灌注損傷模型，檢測大鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量及肝組織中脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量, 并通過光鏡觀察肝組織結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果用曲克蘆丁處理組大鼠血清中ALT 和AST及肝組織中MDA含量明顯低于缺血再灌注組(P < 0.01) , 而肝組織中SOD含量則高于缺血再灌注組(P  < 0.01) , 與假手術(shù)組差異較小(P  <0.05), 肝細(xì)胞形態(tài)

3、學(xué)異常改變較I/R 組也明顯減輕。結(jié)論曲克蘆丁對肝臟I/R損傷具有保護(hù)作用，其機(jī)理與抑制氧自由基的生成,增強(qiáng)氧自由基的清除, 減輕肝細(xì)胞脂質(zhì)過氧化作用有關(guān)。關(guān)鍵詞：曲克蘆?。?#160; 肝臟；  缺血再灌注Preventive Effect of Troxerutin Injection on the Damage of IschemiaReperfusion in Rat LiverAbstract：ObjectiveTo study the preventive effect on damage of ischemia-reperfusion in rat liver by a

4、pplying Troxerutin Injection.Methods30 rats were put randomly into sham operated control(SOC)group ,ischemia reperfusion ( I/ R) group and ischemia reperfusion + Troxerutin ( I/ R + Troxerutin)group.The animal model of hepatic ischemia-reperfusion was made by temporarily blocking the hepatic portal

5、blood vessels and releasing 30 minutes later. The malondialdehyde (MDA) ,superoxide dismutase (SOD) in liver tissue and ALT, AST levels in the blood were determined after the liver had been reperfused for 120 minutes ,the hepatic tissue was examined under light microscope. ResultsMDA, ALT, AST decre

6、ased and SOD increased significantly in I/ R + Troxerutin group when compared those in the I/ R group （P< 0.01) . The histologic changes of the liver tissue under light microscope in the I/ R + Troxerutin group was more easer than in the I/ R group.ConclusionTroxerutin has the ability to scavenge

7、 oxygen free radical (OFR) and to protect from the damage of ischemia-reperfusion in rat liver.Key words：Troxerutin;  Liver;  Ischemia-reperfusion;  Oxygen free radical      在復(fù)雜的肝膽手術(shù)、嚴(yán)重肝創(chuàng)傷的處理及肝移植時(shí)均不可避免地會(huì)導(dǎo)致肝缺血再灌注損傷(Ischemia/Reperfusion，I/R) ,甚至引發(fā)肝功能衰竭,而藥物預(yù)適應(yīng)是減輕I/ R

8、損傷的有效方法之一。蘆丁( rutin) 又名蕓香苷, 為一來源很廣的黃酮類化合物。蘆丁及其衍生物具有廣泛的藥理活性, 具有降低毛細(xì)血管通透性、抗炎、抗病毒、鎮(zhèn)痛、抗氧化及抑制醛糖還原酶等多方面作用1，2。 臨床上主要用于防治腦出血、高血壓、視網(wǎng)膜出血、紫癜和急性出血性腎炎等。文獻(xiàn)上對蘆丁在心腦血管疾病方面的作用機(jī)制研究和探討較多,但其是否對肝臟的缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)復(fù)制大鼠肝缺血再灌注損傷模型，并應(yīng)用蘆丁的可溶性羥乙基衍生物曲克蘆丁(Troxerutin)對動(dòng)物進(jìn)行術(shù)前預(yù)處理。測定各組大鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量及肝組織中脂質(zhì)過氧

9、化反應(yīng)產(chǎn)物丙二醛(MDA) 和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,光鏡檢查肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)改變，觀察曲克蘆丁對大鼠肝臟I/R 損傷的保護(hù)作用并探討其作用機(jī)理。1  材料與方法1.1  材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組：成年健康Wistar大鼠30 只, 由山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供, 體重（250±30）g, 雌雄不限, 隨機(jī)分為3 組, 每組10 只大鼠。假手術(shù)對照組:（sham operated control , SOC） 常規(guī)手術(shù)和術(shù)后處理; 肝缺血再灌注組:（ischemia- reperfusion , I/ R，模型組）, 夾閉肝固有動(dòng)脈和門靜脈30 min 后,

10、再灌注120 min; 曲克蘆丁預(yù)處理組:（I/R +Troxerutin）術(shù)前腹腔內(nèi)注射曲克蘆丁20 mg/kg, 1次/d, 連續(xù)3  d, 然后制作肝缺血再灌注損傷模型。1.2  藥品與試劑曲克蘆丁注射液由山東華魯制藥有限公司生產(chǎn)（批號：A0507121；規(guī)格：60 mg/支）。試劑：血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、丙二醛(MDA )、超氧化物歧化酶(SOD) 測定試劑盒, 均購于南京建成生物工程研究所。1.3  方法1.3.1  模型制作各組動(dòng)物均手術(shù)前12 h禁食,不禁飲水。用1% 戊巴比妥鈉麻醉后固定于手術(shù)臺(tái)上, 常規(guī)脫毛、消

11、毒、鋪巾后, 上腹正中切口,打開腹腔，分離出肝蒂, 游離開肝固有動(dòng)脈、門靜脈和肝總管， 用小血管夾同時(shí)夾閉肝固有動(dòng)脈和門靜脈,造成肝臟缺血。30 min后取下血管夾恢復(fù)肝臟血供, 再灌注120 min后采集標(biāo)本進(jìn)行指標(biāo)測定。1.3.2  血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 的活性測定分別以標(biāo)準(zhǔn)試劑盒（按照試劑盒說明書）測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 的活性。1.3.3  肝組織丙二醛(MDA )、超氧化物歧化酶(SOD)含量測定頸椎脫臼法處死大鼠后, 置于冰環(huán)境中, 迅速切取肝組織, 分析天平稱取組織濕重, 用蒸餾水混后制成勻漿, 按MDA 和SOD 試劑盒操作程序進(jìn)行測定MDA、SOD 的含量。1.3.4  肝組織病理形態(tài)學(xué)檢查將大鼠以頸椎脫臼法處死后, 快速取其肝組織，置于4%甲醛溶液中。將肝