人民教育出版生物選修一課題目1《微生物的實驗室培養(yǎng)》學案

1、專題2課題1微生物的實驗室培養(yǎng)學案【學習目標】知識目標：1.舉例說明有關(guān)培養(yǎng)基的基礎知識 2.概述無菌操作技術(shù)包括的主要內(nèi)容能力目標：掌握純化大腸桿菌的基本操作【學習過程】第一部分：自主預習一、基礎知識（一）培養(yǎng)基1概念：人們按照微生物對 的不同需求，配制出供其 的營養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)基。m 培養(yǎng)基的種類包括 培養(yǎng)基和 培養(yǎng)基等。 2.培養(yǎng)基的化學成分一般都含有 、 、 、 四類營養(yǎng)成分。3.在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對 、 _ 以及 等的要求。例如：培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加 ；培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至 ；培養(yǎng)細菌時需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至 ；培養(yǎng)厭

2、氧微生物時需要提供無氧的條件?！狙a充】碳源：如CO2、糖類、脂肪酸等有機物，構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物，并提供能量。 氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等，主要用來合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。 蔗糖是提供碳源的，也就是提供能源的，瓊脂是凝固劑（二）無菌技術(shù)1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 。避免雜菌污染的方法主要包括以下四個內(nèi)容：對實驗操作的 、操作者的衣著和手進行清潔和 。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行 。 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在_附近進行。 實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材

3、料用具與_相接觸。 2.消毒和滅菌（1）消毒是指使用_僅殺死物體表面或_的部分微生物（不包括_和_）。常用的消毒方法有 、 。此外，人們也常使用化學藥劑進行消毒，如用 、 等。此外，實驗室里還用 或 進行消毒。（2）滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體_的微生物，包括芽孢和孢子。常用的滅菌方法有 、 、 ，二、實驗操作本實驗用_培養(yǎng)基進行大腸桿菌的純化培養(yǎng)，可分成_和_兩個階段進行。1.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 倒平板2.純化大腸桿菌微生物接種的方法中最常用的是 和 。（1） 平板劃線法是指接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面_的操作，將聚集的菌種_到培養(yǎng)基的表面。平板劃線的操作步驟如下： (2)稀釋涂

4、布平板法是指將菌液進行一系列的_，然后將不同_的菌液分別涂布在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。在稀釋度 的菌液時，聚集在一起的微生物將被分散成_，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的_。三、結(jié)果分析與評價1.如果接種大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，說明接種符合要求。2.若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中_未達到要求。3._的作為對照的培養(yǎng)基，在培養(yǎng)過程中出現(xiàn)了菌落，則說明培養(yǎng)基_ 不徹底，實驗失敗。四、菌種的保存1.對于頻繁使用的菌種，我們可以采用 法；2.對于需要長期保存的菌種，可以采用 法。第二部分：課中探究探究一：消毒與滅菌的比較探究二：有關(guān)“倒平板”操作1.培養(yǎng)基

5、滅菌后，需要冷卻到500C左右，才能用來倒平板。你用什么方法來估計培養(yǎng)基的溫度？2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？探究三：有關(guān)“平板劃線法”操作1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？3.在作第二次以及其后的劃線操作是為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？探究四：有關(guān)“稀釋涂布平板法”操作1.系列稀釋操作中應注意的事項有哪些？2. 涂布

6、平板的所有操作都應在火焰附近進行，結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，涂布平板操作的第2步應如何進行無菌操作？第三部分：課后練習1.下列措施中不屬于消毒的是（ ）A.酒精擦拭雙手 B.向水中通入少量Cl2 C.皮膚受傷處涂紫藥水 D.灼燒接種環(huán)2.有關(guān)平板劃線操作的敘述，正確的是（ ）A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過程中不再滅菌B.打開含菌種的試管需通過火焰滅菌，取出菌種后需馬上塞上棉塞C.把皿蓋打開，將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可D.最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3.下列有關(guān)平板劃線接種法的操作錯誤的是（ ）A.將接種環(huán)放在火焰上燃燒 B.將已冷卻的

7、接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液C.蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行 D. 接種環(huán)劃線要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)的劃線相連4.關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述錯誤的是（ ）A.操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.等培養(yǎng)基冷卻至500C左右時進行倒平板 D.將平板冷卻凝固5-10分鐘后將平板倒過來放置5.細菌培養(yǎng)過程分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌（ ）A. 接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種環(huán) C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D.接種環(huán)、手、高壓鍋6.有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述錯誤的是()A.首先將

8、菌液進行一系列的梯度稀釋 B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C.適宜條件下培養(yǎng) D.結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落7. 如右圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為12345。下列操作方法正確的是()A操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌 B劃線操作須在火焰上進行C在5區(qū)域中才可以得到所需菌落 D在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌8.為了保持菌種的純凈需要進行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是()A.對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法 B.臨時保藏的菌種一般接種到試管的斜面培養(yǎng)基上 C.臨時保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異 D.對于需要長期保存的菌種

9、，可以采用低溫-40C保藏的方法9.（2009·寧夏理綜，40）（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮、和滲透壓等條件。（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行 處理（消毒、滅菌），其中對培養(yǎng)皿進行滅菌常用的方法是；操作者的雙手需要進行清洗。（3）若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應嚴格操作、多次重復外，還應保證待測樣品稀釋的。（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的。（5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是 。（6）若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。10. （2010年重慶理綜）炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實驗確診。（1）細菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。（2）細菌鑒定：實驗流程如下圖所示。對配制的液體培養(yǎng)基等需采取 方法滅菌；實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為 （填“無機碳”或“有機碳”）。挑選可疑菌落制片后，用 觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。接種可疑菌后，3