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1、學(xué) 士 學(xué) 位 論 文系 別: 生 命 科 學(xué) 系 學(xué)科專業(yè): 園 林 姓 名: 梁 彬 鋒 運(yùn) 城 學(xué) 院2014 年 6月 水楊酸對(duì)月季切花保鮮作用的研究系 別: 生 命 科 學(xué) 系 學(xué)科專業(yè): 園 林 姓 名: 梁 彬 鋒 指導(dǎo)教師: 楊 青 珍 運(yùn) 城 學(xué) 院 2014 年6月水楊酸對(duì)月季切花保鮮作用的研究梁彬鋒 (運(yùn)城學(xué)院生命科學(xué)系,山西運(yùn)城,044000)摘 要 :為了探索月季切花瓶插期間的保鮮機(jī)理,本研究以月季花為材料,通過(guò)10mg/L、30mg/L、50mg/L不同濃度水楊酸溶液對(duì)瓶插月季花進(jìn)行噴灑處理,研究月季切花瓶插過(guò)程中的衰老機(jī)理。結(jié)果表明:水楊酸能顯著延長(zhǎng)切花瓶插觀賞時(shí)
2、間;減緩月季切花的水分虧缺,維持其水分平衡;減輕瓶插期間細(xì)胞膜損傷,平衡細(xì)胞膜透性;保護(hù)切花組織內(nèi)的SOD酶和CAT酶活性,減緩膜脂過(guò)氧化程度。其中30mg/L水楊酸溶液處理后的月季切花,壽命最長(zhǎng),保鮮效果最好。關(guān)鍵詞:水楊酸;月季切花;保鮮Salicylic acid Preservation of Cut Rose researchLiang Binfeng(Department of Life Science, Yuncheng University, Yuncheng, Shanxi, 044000)Abstract:In order to explore the mechanism
3、of preservation of chinese rose during the vase planting, this study chinese rose as material, through 10 mg/L, 30 mg/L, 50 mg/L of different concentrations of salicylic acid in solution spray bottle inserts chinese rose, and study the aging mechanism in the process of vase planting chinese rose.The
4、 results showed that salicylic acid could significantly prolong vase planting ornamental;Reduce the water deficit of chinese rose cut flowers, maintain moisture balance;Lighten the vase during cell membrane damage, balance the cell membrane permeability;Protect the SOD and CAT enzyme activity in the
5、 organization of cut, slow down the level of membrane lipid peroxidation.30 mg/L salicylic acid solution after processing of chinese rose cut flowers, life expectancy, preservation effect is best.Key words:Salicylic acid; Cut Rose; Preservation目 錄1 前 言11.1 月季的概述11.1.1 月季的形態(tài)特征11.1.2 月季的主要價(jià)值11.2 國(guó)內(nèi)外研究
6、進(jìn)展及趨勢(shì)11.2.1 切花體內(nèi)的水平衡與鮮切花衰老的關(guān)系21.2.2 膜脂過(guò)氧化與鮮切花衰老的關(guān)系21.2.3 酶活性與鮮切花衰老的關(guān)系21.2.4 脯氨酸與鮮切花衰老的關(guān)系21.3 研究的目的和意義21.4 本課題的創(chuàng)新之處32 材料與方法42.1 試驗(yàn)材料42.2 主要儀器和試劑42.3 試驗(yàn)方法與內(nèi)容42.3.1 試驗(yàn)前期處理42.3.2 試驗(yàn)方法42.3.3 切花瓶插壽命及外觀品質(zhì)的觀察52.3.4 細(xì)胞膜相對(duì)透性測(cè)定52.3.5 游離脯氨酸的測(cè)定52.3.6 丙二醛的測(cè)定52.3.7 葉綠素的測(cè)定52.3.8 SOD活性的測(cè)定62.3.9 CAT活性的測(cè)定63 結(jié)果與分析73.1不
7、同濃度的水楊酸對(duì)月季切花瓶插壽命及品質(zhì)的影響73.2不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花朵大小變化的影響73.3 不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花枝鮮重的影響83.4不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花丙二醛含量的影響83.5不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花瓶插期間膜透性的影響93.6不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花游離脯氨酸含量的影響93.7不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花葉片內(nèi)葉綠素含量的影響103.8不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花瓣內(nèi)SOD活性的影響103.9不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花瓣內(nèi)CAT活性的影響114 討 論125 結(jié) 論13參考文獻(xiàn)14致 謝151 前 言1.1 月季的概述1.1.1 月季的形態(tài)特征 月季(Rosa
8、 Chinensis)又稱斗雪紅、長(zhǎng)春花。月季姿態(tài)優(yōu)美、芳香馥郁、四季常開(kāi),深受人們的喜愛(ài),是中國(guó)十大名花之一。月季,又被稱為花中皇后,屬于薔薇科,薔薇屬,常綠小灌木,1-2 米。莖直立;小枝綠色,無(wú)毛,常彎曲的刺或無(wú)刺。羽狀復(fù)葉,葉片先端急尖或漸尖,基部圓形或?qū)捫ㄐ危吘壘呒怃J細(xì)鋸齒,表面鮮綠色,兩面均無(wú)毛。月季花常數(shù)朵簇生或單生,四季開(kāi)花花朵多紅色偶爾出現(xiàn)白色花托近球形,萼裂片三角狀卵形,先端尾尖,全緣或羽狀分裂 ;花瓣重瓣,以深紅色、粉紅色為主,少有白色。月季果實(shí)球形,黃紅色,直徑 1.5-2 厘米??勺鳛橛^賞植物,也可作為藥用植物。 目前廣泛種植的月季和它的祖先月季(Rose Chin
9、ensis)的區(qū)別是非常大的,所以我們稱之為現(xiàn)代月季,也直接叫月季。它可以用來(lái)作為鮮切花生產(chǎn)、花園種植和盆栽,在花卉園藝中占有重要的地位。1.1.2 月季的主要價(jià)值月季常應(yīng)用于園林中布置花壇、花境,同時(shí)也可制作月季盆景,作花籃、切花、花束也是很好的選擇。月季是鮮切花的一種重要花卉。景觀作用:在園林里,月季花具有不可替代的景觀價(jià)值。月季是春夏季重要的觀賞花,它的花期比較長(zhǎng),具有較高的觀賞價(jià)值,受全國(guó)各地園林工作者的喜愛(ài)。環(huán)境保護(hù):可作連續(xù)的鮮花花環(huán)、花坪、花墻,主要用于學(xué)校、住宅區(qū)、城市廣場(chǎng),等。1.2 國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展及趨勢(shì) 鮮花的需求大量增加意味著社會(huì)的發(fā)展和人類的進(jìn)步,是人們生活水平和情調(diào)進(jìn)
10、步的重要標(biāo)志,鮮切花就是其中之一1。然而,美中不足的是花不能長(zhǎng)時(shí)間保持其風(fēng)景,花剪幾天自然會(huì)枯萎,這給花卉產(chǎn)品儲(chǔ)存,運(yùn)輸,銷售等環(huán)節(jié)帶來(lái)了許多不便。據(jù)統(tǒng)計(jì),國(guó)內(nèi)外的鮮切花損失率約占總產(chǎn)量的 20% ,比一般的蔬菜水果的損失率要高的多2。所以,很多研究者紛紛對(duì)此展開(kāi)了研究,但國(guó)內(nèi)鮮切花生產(chǎn)起步較晚,對(duì)現(xiàn)有的研究結(jié)果的分析、探討,對(duì)鮮切花卉市場(chǎng)具有深遠(yuǎn)的意義3。 1949,比利時(shí)化學(xué)家鮑斯將一些化學(xué)物質(zhì)加入水中,發(fā)現(xiàn)能明顯延長(zhǎng)鮮切花壽命。許多國(guó)家是鮮花的種植、交易和消費(fèi)大國(guó)4;這些國(guó)家對(duì)于花卉保鮮方面研究時(shí)間久56,每年都會(huì)有新的保鮮劑配方涌現(xiàn)7。查閱國(guó)內(nèi)外的研究資料,總結(jié)了出了切花衰老的機(jī)理主要
11、有以下幾方面: 1.2.1 切花體內(nèi)的水平衡與鮮切花衰老的關(guān)系失水是切花衰老的主要原因,鮮切花脫離母體后,切花體內(nèi)水平衡被破壞,出現(xiàn)萎蔫現(xiàn)象,到最后花瓣干枯和皺縮。因此,防止失水是切花保鮮的重要措施。此外,細(xì)菌、真菌、酵母菌等的繁殖會(huì)造成木質(zhì)部阻塞,使傳導(dǎo)能力逐漸降低進(jìn)一步激化切花的衰老。1.2.2 膜脂過(guò)氧化與鮮切花衰老的關(guān)系切花在衰老過(guò)程中,細(xì)胞膜的透性增加。用來(lái)衡量膜脂過(guò)氧化及細(xì)胞膜透性的指標(biāo)分別是丙二醛(MDA)含量和相對(duì)電導(dǎo)率。細(xì)胞膜透性增加造成細(xì)胞內(nèi)含物流出和細(xì)胞間隙中滲出物增加,加劇了水分的喪失,從而加劇了切花的衰老。 1.2.3 酶活性與鮮切花衰老的關(guān)系 酶的活性變化與切花衰老
12、密切相關(guān)。SOD是與活性氧代謝密切相關(guān)的酶類,SOD活性與植物抗氧化脅迫能力呈正相關(guān),在切花衰老過(guò)程中SOD的活性均呈先升后降的趨勢(shì)。CAT活性的變化和SOD有著相似先升后降的趨勢(shì)。1.2.4 脯氨酸與鮮切花衰老的關(guān)系 脯氨酸是植物體內(nèi)的一種重要滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),滲透調(diào)節(jié)是植物適應(yīng)水分虧缺的主要生理機(jī)制之一。脯氨酸在植物體內(nèi)的含量在很大程度上能反映出植物抗逆性的強(qiáng)弱。1.3 研究的目的和意義 在國(guó)內(nèi)外花卉產(chǎn)業(yè)中,鮮切花所占比例越來(lái)越大。隨著社會(huì)文明的進(jìn)步,生活水平、文化的提高,越來(lái)越多的人開(kāi)始用鮮花表達(dá)自己的情感,促使鮮切花消費(fèi)量逐年增加。鮮切花行業(yè)又被稱為朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)。隨著我國(guó)切花生產(chǎn)的迅速發(fā)展,切
13、花栽培與保鮮技術(shù)的研究對(duì)國(guó)內(nèi)的花卉產(chǎn)業(yè)越來(lái)越顯得重要。而目前國(guó)內(nèi)鮮切花行業(yè)使用的一些保鮮劑,價(jià)格比較高,對(duì)環(huán)境有一定的污染,效果不理想。大多還是以進(jìn)口國(guó)外的保鮮劑為主,這樣無(wú)疑就加大了鮮切花的成本。鮮切花的損耗大,保鮮劑價(jià)格高,都在抑制著鮮切花行業(yè)的發(fā)展。因此能研究制造出一種高效低價(jià)的鮮切花保鮮劑對(duì)國(guó)內(nèi)鮮切花行業(yè)尤為重要。據(jù)相關(guān)資料報(bào)道,水楊酸具有提高植物組織內(nèi)的抗氧化酶活性,減緩膜脂過(guò)氧化,維持組織內(nèi)的水分平衡的作用。目前水楊酸在菊花8、香石竹9等花卉上具有很好的保鮮效果。但在月季上尚無(wú)報(bào)道。因此我們用水楊酸溶液對(duì)月季切花進(jìn)行噴灑處理,對(duì)水楊酸對(duì)月季切花的保鮮機(jī)理展開(kāi)了研究。通過(guò)研究水楊酸對(duì)
14、月季切花瓶插期間的保鮮機(jī)理,可以給國(guó)內(nèi)的月季切花保鮮領(lǐng)域提供一定的理論依據(jù)和技術(shù)支持。有助于提高國(guó)內(nèi)的鮮切花保鮮技術(shù),促進(jìn)鮮切花行業(yè)的發(fā)展。1.4 本課題的創(chuàng)新之處 這幾年,水楊酸對(duì)于植物和水果的應(yīng)用的研究以耐熱性、抗病性和抑制乙烯等方面,然而對(duì)水楊酸在月季切花的保鮮方面的研究甚少。本試驗(yàn)通過(guò)水楊酸對(duì)月季切花保鮮機(jī)理進(jìn)行研究。一方面為月季花卉保鮮提供了一定的理論依據(jù);其次為如何延長(zhǎng)月季切花的瓶插保鮮時(shí)間提供了技術(shù)支持;最后也可以為花卉的生產(chǎn)者、經(jīng)營(yíng)者提高一定的效益。 2 材料與方法 2.1 試驗(yàn)材料 月季切花購(gòu)于運(yùn)城市西花園花鳥(niǎo)市場(chǎng),選取蕾期切花,挑選大小相近,無(wú)病蟲(chóng)害和機(jī)械損傷的鮮切花作為試
15、驗(yàn)對(duì)象。2.2 主要儀器和試劑 儀器:722型可見(jiàn)分光光度計(jì) ,DDS-11A型電導(dǎo)率儀,125×0.02mm游標(biāo)卡尺,電子天平,電熱恒溫水浴鍋,離心機(jī),紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),高速冷凍離心機(jī),移液槍 試劑:鹽酸、乙醇、丙酮、NaH2PO·2H2O、Na2HPO·12H2O 、核黃素、甲硫氨酸、8-羥基喹啉、檸檬酸、蔗糖2.3 試驗(yàn)方法與內(nèi)容2.3.1 試驗(yàn)前期處理將月季切花在蒸餾水中用枝剪進(jìn)行修剪,將花枝剪成35cm左右,保留頂端兩片葉子待用。配置營(yíng)養(yǎng)液:3%的蔗糖+150mg/L的8-羥基喹啉+300mg/L的檸檬酸配置三個(gè)水楊酸溶液濃度梯度:10mg/L、30m
16、g/L、50mg/L 配制儲(chǔ)備液A:稱取15.6 g NaH2PO4·2H2O 加入燒杯中用蒸餾水溶解,用500 mL容量瓶定容。配制儲(chǔ)備液 B:稱取35.85 g Na2HPO4·12H2 O加入燒杯中用蒸餾水溶解,用500 mL容量瓶定容。分別取 A液8.5 mL和B液 91.5 mL,用 300 mL蒸餾水充分混勻后即為0.05 mol·L 磷酸緩沖液(pH值7.8,含0.1 mmol·L EDTA)。配制NBT (氯化硝基四氮唑藍(lán))反應(yīng)液。稱取0.01204 g核黃素溶于100 mL蒸餾水中,取4 mL,稱取0.387 g甲硫氨酸,0.0103
17、g NBT,加入磷酸鹽緩沖液(PH值7.8) 196 mL溶解。2.3.2 試驗(yàn)方法 設(shè)4個(gè)試驗(yàn): CK: 蒸餾水噴灑花朵 SA 1 10mg/L 水楊酸溶液噴灑花朵 SA 2 30mg/L 水楊酸溶液噴灑花朵 SA 3 50mg/L 水楊酸溶液噴灑花朵 每個(gè)試驗(yàn)插10朵花,在瓶?jī)?nèi)倒入200mL提前配置好的營(yíng)養(yǎng)液,用棉花將瓶口塞住,其中2 朵切花用作外觀形態(tài)指標(biāo)的觀察,另外8 朵用作生理指標(biāo)的測(cè)定,將4個(gè)實(shí)驗(yàn)組放置于室內(nèi),避免太陽(yáng)光照射,室溫維持在20左右,每天早上8點(diǎn)對(duì)各個(gè)試驗(yàn)組噴灑相對(duì)應(yīng)的溶液,每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。 2.3.3 切花瓶插壽命及外觀品質(zhì)的觀察 月季切花瓶插壽命的計(jì)算是從瓶插第一
18、天至花朵出現(xiàn)萎焉、莖出現(xiàn)彎曲、花瓣變藍(lán)從而失去觀賞價(jià)值為止?;ǘ渲睆阶兓糜螛?biāo)卡尺測(cè)量,計(jì)算平均單枝花的直徑大小。花鮮重用電子天平稱重法稱取花重, 計(jì)算單枝平均鮮重。2.3.4 細(xì)胞膜相對(duì)透性測(cè)定 參照張昭其10的方法測(cè)定,每組取1g花瓣置于試管中,加入20mL蒸餾水搖勻后浸泡4h,用DDS-11A型電導(dǎo)率儀測(cè)定電導(dǎo)率(A),然后放在沸水浴中15min,冷卻至室溫后測(cè)定的電導(dǎo)率(B),相對(duì)透性=(A/B)*100%計(jì)算。2.3.5 游離脯氨酸的測(cè)定 采用磺基水楊酸法11測(cè)定。稱取各實(shí)驗(yàn)組花瓣0.5g,剪碎倒入試管中,加入5mL 3的磺基水楊酸溶液,沸水浴10min(加熱過(guò)程中不斷搖晃),冷卻后
19、過(guò)濾,濾液就是花瓣內(nèi)的脯氨酸的提取液。取2 mL提取液于試管中,加入冰醋酸2 mL及2.5酸性茚三酮試劑2 mL ,沸水浴加熱30min。冷卻,加入4 mL甲苯,放入 10 ml規(guī)格的離心管中,在3000r/min下離心5min。吸取上層溶液于比色皿中,甲苯為對(duì)照,在波長(zhǎng) 520mm處測(cè)定吸光度(A)值,并記錄。2.3.6 丙二醛的測(cè)定 用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛12。取0.500 g樣品,與5 mL 5% 三氯乙酸研磨,勻漿離心10 min,速度3000 r/min。取2 mL上清液,加入0.67% 硫代巴比妥酸2 mL,混合后在沸水浴30 min,冷卻后3000 r/min離心10 min
20、。取上清液測(cè)定在450 nm、532 nm和600 nm處吸光度值并記錄。2.3.7 葉綠素的測(cè)定丙酮與95%濃度的乙醇等體積混合,待測(cè)葉片用蒸餾水洗凈,用打孔器在主脈兩側(cè)各取5個(gè)小圓片放入20ml提取液,置于暗處浸泡8-12h,期間搖晃2-3次,直至葉片變白為止。將上層綠色溶液注入比色皿,蒸餾水為參比溶液,在652nm測(cè)量的D值,來(lái)表示葉綠素含量13。2.3.8 SOD活性的測(cè)定 紫外分光光度法:利用NBT法測(cè)定。取小試管4支并編號(hào),依次加入各酶液上清液50L和3 mL NBT反應(yīng)液。在25下燈光照25 min (觀察顏色變化,不能太深)。在波長(zhǎng)560 nm下測(cè)定吸光值(D)。 數(shù)據(jù)處理:1
21、5L酶液+3 mL考馬斯亮藍(lán),在595 nm 下測(cè)月季可溶性蛋白D值。將牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線作為蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線:Y= 0.2908X+0.0046 (X為吸光值,Y為蛋白質(zhì)含量),利用NBT光照還原紫外分光光度法將實(shí)驗(yàn)測(cè)得的月季D值代入Y,求得X。月季可溶性蛋白質(zhì)含量:M(mg·g-1 鮮重 ) =X·VT·FW-1·V1-1。式中,VT是樣品溶液的總體積(mL),V1為測(cè)定時(shí)樣品用量(mL),F(xiàn)W為鮮重(g)。SOD活性= (DCK一DT) VT(0.5DCK·0.6M·V1)-1 式中,DCK 為對(duì)照的光吸收值,DT為樣品的光吸收值,
22、VT為樣液總體積(mL),V1 為測(cè)定時(shí)樣品用量(mL),M 為1 g樣品中可溶性蛋白的含量14 。2.3.9 CAT活性的測(cè)定CAT活性測(cè)定采用化學(xué)滴定法:稱取花瓣1g剪碎,加人50 mmol/L pH值7.0磷酸緩沖液5 mL于冰浴中研磨成勻漿,勻漿倒入離心管中,在轉(zhuǎn)速為15000 r/min下離心 30 min,上清液即為含酶溶液。5 mL反應(yīng)液中含50 mmol/L pH值7.0磷酸緩沖液,8 mmol/L H2O2-和100 L酶提取液,30下反應(yīng)1 min,然后加入2 ml 10% H2S02終止反應(yīng),用2 mmol/L KMnO4 滴定剩余H202,根據(jù)H2O2消失量計(jì)算CAT活
23、性.3 結(jié)果與分析3.1不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花瓶插壽命及品質(zhì)的影響表3.1.1 不同濃度水楊酸對(duì)月季切花的瓶插壽命影響 處理 瓶插至盛開(kāi)天數(shù)(d)盛開(kāi)持續(xù)期(d) 瓶插時(shí)間(d)CK21214SA 131316SA 241418SA 331316觀察結(jié)果如上表(表3.1.1 ),與對(duì)照相比, 水楊酸處理的月季切花完全開(kāi)放比對(duì)照組晚了 1 d, 而花盛開(kāi)持續(xù)期與對(duì)照組相比則延長(zhǎng)了 1-2 d, 瓶插壽命比對(duì)照組增加了 1-2 d。在第8 d對(duì)照組一些花出現(xiàn)脫水萎蔫,到了第 10 d 大部分的花出現(xiàn)藍(lán)變、收縮,莖桿彎曲的現(xiàn)象,失去了花卉的觀賞價(jià)值,到了第14 d,對(duì)照組花朵死亡。而水楊酸處理能
24、抑制月季藍(lán)變、收縮,莖桿彎曲的發(fā)生,顯著延長(zhǎng)月季切花瓶插觀賞時(shí)間,到了第14 d有部分花依然飽滿,由表1可看出由 SA 2 噴灑處理的月季切花瓶插壽命最長(zhǎng)。 3.2不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花朵大小變化的影響圖 3.2.1 月季切花瓶插期間花朵大小變化 試驗(yàn)結(jié)果如上圖所示 (圖 3.2.1 ), 對(duì)照組月季切花在瓶插第 2 d完全盛開(kāi)直徑達(dá)到最大。 而經(jīng)水楊酸處理后的月季切花第 4 d 花的平均直徑增加到最大值, CK組然后開(kāi)始出現(xiàn)枯萎,花朵萎焉程度高于有水楊酸處理的另外3組實(shí)驗(yàn)。說(shuō)明SA處理能顯著延長(zhǎng)瓶插時(shí)間,延緩花朵的枯萎速率,其中SA 2的效果最好3.3 不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花枝鮮
25、重的影響圖3.3.1 月季切花瓶插期間鮮重變化試驗(yàn)結(jié)果如上圖所示 (圖 3.2.1 ), 對(duì)照組和水楊酸處理的月季切花鮮重都出現(xiàn)上升趨勢(shì),而用不同濃度的水楊酸處理的月季切花在瓶插后花枝鮮重增加較快, 插后第 4 d 切花鮮重達(dá)到最大值, 其中又以SA 2噴灑的月季切花鮮重增加最多。到了第8 d花枝鮮重逐漸降低, 不過(guò)試驗(yàn)組的切花鮮重下降比對(duì)照組緩慢。說(shuō)明水楊酸保鮮液能維持切花較快的水分吸收。3.4不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花丙二醛含量的影響圖 3.4.1 月季切花瓶插期間丙二醛含量變化 試驗(yàn)結(jié)果如上圖所示(圖3.4.1 ),月季切花隨瓶插時(shí)間的延長(zhǎng),不同濃度水楊酸處理和對(duì)照的丙二醛含量變化趨勢(shì)基
26、本一致,但水楊酸處理一直低于對(duì)照組。丙二醛含量的增加,說(shuō)明膜脂過(guò)氧化在加重。隨時(shí)間的延長(zhǎng),對(duì)照組 MDA含量增加,膜脂過(guò)氧化作用破壞細(xì)胞膜,而水楊酸噴灑后的月季切花,適當(dāng)?shù)木徑饬诉@個(gè)過(guò)程,其中又以SA 2噴灑產(chǎn)生的緩解效果最好。3.5不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花瓶插期間膜透性的影響圖 3.5.1 月季切花瓶插期間膜透性的變化 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如上圖所示(圖 3.5.1 ),對(duì)照組和3 個(gè)實(shí)驗(yàn)組的相對(duì)電導(dǎo)率基本呈上升的趨勢(shì)。從瓶插第2 d 開(kāi)始,CK組切花的相對(duì)導(dǎo)電率相比于水經(jīng)過(guò)楊酸保鮮液噴灑處理的月季切花高。一般認(rèn)為膜脂分解15是老化的主要因素,實(shí)驗(yàn)組的整體上升趨勢(shì)較為遲緩,其中又以SA 2處理表現(xiàn)效果
27、最好,相對(duì)導(dǎo)電率上升最慢。說(shuō)明水楊酸能維持月季切花細(xì)胞膜的穩(wěn)定性,減少花瓣細(xì)胞膜損傷,抑制膜脂的分解。3.6不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花游離脯氨酸含量的影響圖3.6.1 月季切花瓶插期間游離脯氨酸含量的變化 試驗(yàn)結(jié)果如上圖所示(圖 3.6.1 ),游離脯氨酸含量在瓶插前基本相同, 第4d開(kāi)始,對(duì)照組脯氨酸含量快速增加;而經(jīng)水楊酸處理的月季切花, 到了第 8d 才開(kāi)始逐步上升。與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組的脯氨酸增加量要小的多。說(shuō)明SA能有效的改善月季切花的水分平衡,減輕月季切花受水分脅迫,緩解切花體內(nèi)游離脯氨酸的增加。其中SA 2 降低游離脯氨酸的效果最明顯。3.7不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花葉片內(nèi)葉綠素
28、含量的影響圖 3.7.1 月季切花瓶插期間葉綠素含量變化試驗(yàn)結(jié)果如上圖所示(圖 3.7.1 ), 隨著瓶插時(shí)間的增加,對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的月季切花葉綠素含量在瓶插開(kāi)始前4 d都有小幅度的增加,之后隨著瓶插時(shí)間的變長(zhǎng),CK組葉綠素含量開(kāi)始下降;而SA處理顯著的緩解了葉綠素減少的速率,其中SA 2 的保護(hù)葉綠素效果最明顯。3.8不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花瓣內(nèi)SOD活性的影響 圖 3.8.1 不同水楊酸對(duì)月季鮮切花SOD活性的影響 試驗(yàn)結(jié)果如上圖(圖 3.8.1 )所示,瓶插開(kāi)始時(shí),月季切花的SOD活性基本一致;第4天測(cè)定時(shí) ,SOD活性和剛開(kāi)始相比,數(shù)值上升很多,表明在瓶插前4 d,SOD 活性值呈
29、逐漸上升趨勢(shì);第 8 d測(cè)定,SOD活性值有所下降,第12 d測(cè)定時(shí),SOD活性值又有所下降,而且對(duì)照組SOD活性下降程度遠(yuǎn)高于實(shí)驗(yàn)組。結(jié)合表 1 得出,月季切花處于開(kāi)花最佳時(shí)期時(shí),SOD活性達(dá)到最大,對(duì)照組在第 8天逐漸出現(xiàn)衰敗,SOD 活性減弱明顯,膜脂過(guò)氧化程度加劇;在整個(gè)過(guò)程中,不論是對(duì)照組還是實(shí)驗(yàn)組的SOD 活性表現(xiàn)均為先升高后降低的狀態(tài)。同時(shí)根據(jù)數(shù)據(jù)顯示,經(jīng)水楊酸處理的月季切花花瓣的SOD活性值明顯大于對(duì)照組,說(shuō)明水楊酸能提高SOD活性,減緩切花的膜脂過(guò)氧化程度。 3.9不同濃度的水楊酸對(duì)月季切花花瓣內(nèi)CAT活性的影響圖 3.9.1 不同水楊酸對(duì)月季鮮切花CAT活性的影響CAT是細(xì)
30、胞內(nèi)清除活性氧的主要酶。試驗(yàn)結(jié)果如上圖(圖 3.9.1)所示,隨著月季切花瓶插天數(shù)的延長(zhǎng),花瓣內(nèi)的CAT活性都呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),但經(jīng)過(guò)水楊酸處理明顯地延緩這一進(jìn)程。對(duì)照組花瓣CAT活性在第 2 d活性達(dá)到最高,然后開(kāi)始下降。而經(jīng)過(guò)水楊酸處理的實(shí)驗(yàn)組花瓣CAT活性在第 4 d 達(dá)到最大,然后CAT活性呈緩慢減弱的趨勢(shì)。說(shuō)明水楊酸對(duì)月季切花瓶插期間花瓣內(nèi)CAT活性的降低具有延緩作用。4 討 論 國(guó)內(nèi)外不少研究表明細(xì)胞和組織中活性氧產(chǎn)生而不能被及時(shí)清除是造成衰老的主要原因,而清除活性氧能力大小的主要標(biāo)志是抗活性氧毒害的內(nèi)源保護(hù)酶SOD、CAT活性的高或低22。一旦SOD和CAT等保護(hù)酶活性被削
31、弱,就會(huì)造成活性氧的積累,從而加劇膜脂質(zhì)過(guò)氧化程度,使膜結(jié)構(gòu)遭到破壞,膜透性增大23。本研究表明,經(jīng)水楊酸處理后的實(shí)驗(yàn)組,月季花瓣內(nèi)的SOD和CAT活性下降的速度均慢于對(duì)照,這與李柏林、梅慧生24的研究結(jié)果一致。因此可以認(rèn)為水楊酸能增強(qiáng)月季切花瓶插期間的SOD、CAT活性,減少切花組織內(nèi)的活性氧的積累,延緩月季切花的衰老速率,延長(zhǎng)瓶插觀賞時(shí)間。丙二醛和相對(duì)電導(dǎo)率是用來(lái)衡量膜脂過(guò)氧化及細(xì)胞膜透性的兩個(gè)生理指標(biāo),反映了細(xì)胞膜的受損情況。從試驗(yàn)的結(jié)果看,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),對(duì)照組切花MDA和相對(duì)電導(dǎo)率迅速增加,膜脂過(guò)氧化程度增加從,細(xì)胞膜的相對(duì)透性增加,使細(xì)胞內(nèi)水分流失加快,從而加快了切花的衰老。而由水
32、楊酸處理后的月季切花的這兩個(gè)生理指標(biāo)上升速度明顯比較慢。同時(shí)我們猜想水楊酸能夠誘導(dǎo)月季本身的抗病性, 降低切口處微生物滋生、降低莖導(dǎo)管的堵塞, 提高了切花的水分供應(yīng)17,在一定程度上減緩了丙二醛含量的增加, 從而減弱了膜損傷, 減緩了月季切花的衰老,起到了一定的保鮮作用,這一結(jié)果與薛秋花,林如等的研究結(jié)果一致18。有關(guān)研究表明,植物體內(nèi)游離脯氨酸的含量與植物組織的脫水程度是密切相關(guān)的,可以說(shuō)植物體內(nèi)游離脯氨酸的含量在一定程度上就反映了該植物組織的水分虧缺狀況, 是組織脫水的敏感標(biāo)記1920,植物體內(nèi)失水的情況下,游離脯氨酸的含量會(huì)迅速增加促使植物吸水。本試驗(yàn)中,經(jīng)過(guò)水楊酸噴灑處理的月季,花瓣內(nèi)
33、的游離脯氨酸含量在前4 d維持在一個(gè)較低的水平, 4d 后含量才開(kāi)始緩慢上升。其中,用SA 2處理的月季切花其體內(nèi)游離脯氨酸含量增幅最慢;而CK組游離脯氨酸含量增幅速度快,并且總是比SA處理高。水楊酸濃度為30mg/L時(shí),有效地提高切花組織內(nèi)的水平衡,這一結(jié)果與李軍萍21等研究的結(jié)果一致。其中30mg/L水楊酸處理具有較大的花徑和花枝鮮重, 也說(shuō)明了這一點(diǎn)。 5 結(jié) 論 根據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果,可以得出以下結(jié)論:1、 水楊酸溶液噴灑處理月季切花,能夠有效的抑制花朵變藍(lán)萎焉、彎莖的現(xiàn)象,延長(zhǎng)月季切花瓶插觀賞時(shí)間。2、 水楊酸可以提高SOD、CAT的活性,減輕瓶插期間的膜脂過(guò)氧化和活性氧的毒害,延緩衰老。
34、3、 水楊酸能抑制游離脯氨酸的生成,維持切花組織內(nèi)的水分平衡。 4、設(shè)置的3個(gè)水楊酸濃度中,30mg/L的水楊酸溶液保鮮效果最好。參考文獻(xiàn)1周華新. 貿(mào)住春天的探索鮮切花保鮮劑的研究開(kāi)發(fā) J. 廈門科技, 1998,(1): 35-35.2胡緒嵐. 切花保鮮新技術(shù) M. 北京: 中國(guó)畢業(yè)出版社, 1996. 1-2.3趙聚仁. 花卉采后技術(shù) M. 昆明: 云南科技出版社, 2001. 14-15.4王鐘建. 花卉質(zhì)量分級(jí)檢驗(yàn)與保鮮的國(guó)際經(jīng)驗(yàn) J. 世界農(nóng)業(yè), 1999, (6): 37-39.5Haley A H, Mayk S, Senescence
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