動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

1、 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)考綱要求：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆 A級(jí)。細(xì)胞融合與單克隆抗體 A級(jí)。學(xué)習(xí)重點(diǎn): 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件；單克隆抗體的制備過程及其應(yīng)用。學(xué)習(xí)難點(diǎn): 動(dòng)物細(xì)胞工程與植物細(xì)胞工程技術(shù)的比較。教學(xué)步驟：一、 課前自主學(xué)習(xí)1其它動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是 。2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是 。用于培養(yǎng)的材料大多取自 或 。將離體的動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞需用 酶處理，原代培養(yǎng)后的細(xì)胞仍需用該酶處理分瓶進(jìn)行 培養(yǎng)。一般分裂 代后的細(xì)胞，其核型可能發(fā)生變化，獲得 性。3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)為了防止雜菌感染，需加入 ，為了防止有害代謝產(chǎn)物的影響，需要 ；加入的O2的作用是 ，CO2的作用是 。為了提供一些未知

2、成分，可加入 。4用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為 。它的原理是 。核移植的受體細(xì)胞是處于 期的卵母細(xì)胞，供體細(xì)胞是 代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是 。胚胎細(xì)胞核移植較體細(xì)胞核移植容易的原因是 。5動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是 。動(dòng)物細(xì)胞融合不同于植物原生質(zhì)體融合的方法是 。動(dòng)物細(xì)胞融合的主要用途是 。6單克隆抗體制備過程中的第一次篩選的目的是 ；第二次篩選的目的是 。雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是 。單克隆抗體的特點(diǎn)是 。二、課內(nèi)互動(dòng)學(xué)習(xí)（一）合作探究1.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是 （ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞A. B. C. D.2甘草酸是中

3、藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測(cè)甘草酸，科研人員利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如下圖。相關(guān)敘述正確的是（） A過程注射相應(yīng)抗原后應(yīng)立即從小鼠脾臟中提取細(xì)胞甲B過程誘導(dǎo)細(xì)胞融合，利用了細(xì)胞膜的選擇透過性C過程、的篩選方法相同，細(xì)胞丙、丁遺傳物質(zhì)相同D過程無(wú)論在體內(nèi)還是體外進(jìn)行，細(xì)胞丁都可大量增殖3.回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：（1）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面 時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是 。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用酶處理，可用的酶是 。（2）隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞

4、分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn) 的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性 ，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量 。（3）現(xiàn)用某種大分子染料，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是 。（4）檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到 期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。（5）在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在 條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中 的活性降低，細(xì)胞 的速率降低。（6）給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作 進(jìn)行攻擊。4右圖是制備分泌抗X抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題：（1）

5、給小鼠注射抗原的目的是_。（2）在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_的特性。（3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了_ _和_的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段，前者常用的誘導(dǎo)劑與植物原生質(zhì)體融合不同的是可用_。（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有_。（5）在動(dòng)物細(xì)胞融合過程中，需要將所選取的組織細(xì)胞離散開，以利于細(xì)胞融合，可用_處理離體組織細(xì)胞使之分散開。（6）圖中有兩次篩選過程，其中步驟的目的是篩選出_，步驟的目的是篩選出_。（7）請(qǐng)根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），

6、從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。方法： 。原理： 。（二）拓展延伸（三）小結(jié)與反思鞏固練習(xí)1用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述不正確的是 ()A都需用CO2培養(yǎng)箱 B都須用液體培養(yǎng)基C都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 D都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性2對(duì)于下面制備單克隆抗體過程示意圖，不正確的敘述是 ()A表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的B中的篩選是通過抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行的

7、C促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo)D可以無(wú)限增殖3.一只羊的卵細(xì)胞的核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過多次卵裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)有多種用途，但是不能（ ） A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體 C用于保存物種 D改變動(dòng)物的基因型4.下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞工程應(yīng)用的是 （ ） A大規(guī)模生產(chǎn)干擾素，用于預(yù)防病毒引起的感染 B為大面積燒傷病人提供移植的皮膚細(xì)胞 C大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、香料等 D利用胚胎移植技術(shù)，加快良種家畜的繁殖5.生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，在培養(yǎng)液中加入某種試劑能篩選出雜交瘤細(xì)胞，因?yàn)樵撛噭?） A能抑制淋巴細(xì)胞和

8、雜交瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制 B能阻止淋巴細(xì)胞的原癌基因被激活 C選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制 D能阻止雜交瘤細(xì)胞核糖體上所有蛋白質(zhì)的合成6.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的敘述，不正確的是 （ ） A動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需人工誘導(dǎo) B動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)應(yīng)先用纖維素酶處理 C動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)存在細(xì)胞核的融合 D該技術(shù)的主要用途是制備單克隆抗體鞏固提高題7下圖是制備抗體的兩個(gè)途徑的模式圖，下列敘述正確的是（多選） （） A圖中獲得的抗體1和抗體2結(jié)構(gòu)完全相同B抗體1和抗體2的制備過程均涉及細(xì)胞篩選C過程所需的氣體CO2的作用維持培養(yǎng)液的pHD和過程的原理分別是細(xì)胞增殖和堿基互補(bǔ)配對(duì)原則8下列過程中，發(fā)生膜的融合的是（多選） （ ） A植物體細(xì)胞雜交 B受精過程 C氧進(jìn)入細(xì)胞中的線粒體 D效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體9自然界中有一種含有葉綠體的原生動(dòng)物眼蟲，這說明植物的細(xì)胞器同樣可以在某些動(dòng)物細(xì)胞中存活。某同學(xué)提出問題“動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞之間可以實(shí)現(xiàn)雜交嗎？”他嘗試設(shè)計(jì)出下列具體的實(shí)驗(yàn)方案。結(jié)合實(shí)驗(yàn)方案回答：實(shí)驗(yàn)原理：根據(jù)眼蟲的特點(diǎn)，動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞之間在理論上是可以實(shí)現(xiàn)雜交的。實(shí)驗(yàn)步驟如下：（1）中選的植物材料細(xì)胞中，必須有的細(xì)胞器是 。（2）過程所用的酶是 和 （3）過程除