專(zhuān)題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)專(zhuān)題整合練習(xí)人教版選修1

1、專(zhuān)題檢測(cè)A卷(時(shí)間：60分鐘滿分：100分)考查知識(shí)點(diǎn)及角度難度及題號(hào)基礎(chǔ)中檔稍難DNA的粗提取與鑒定1、2、6、13多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA3、45、14血紅蛋白的提取和分離7、8、9、1011、1215一、選擇題(12小題，每小題5分，共60分)1下列敘述中錯(cuò)誤的是()。A改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B在沸水浴中，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色C兩次用到蒸餾水的作用不同D高濃度與低濃度NaCl溶液均能除去雜質(zhì)解析第二次加蒸餾水改變NaCl溶液濃度，調(diào)節(jié)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L，目的是使DNA析出。答案A2下列關(guān)于DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)和血紅蛋白的提取實(shí)

2、驗(yàn)，敘述正確的是()。A前者選擇雞血細(xì)胞作材料較好；后者選擇哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料較好B樣品預(yù)處理時(shí)，前者靜置1 d除去上清液即可；后者要加入清水反復(fù)低速短時(shí)間離心洗滌，至上清液無(wú)黃色即可CDNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，向質(zhì)量濃度為2 mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時(shí)，應(yīng)緩慢加入，直到出現(xiàn)黏稠物為止D血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)的原理是在電場(chǎng)中帶電顆粒遷移的速度不同解析雞血細(xì)胞有細(xì)胞核，哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，故前者適于提取DNA，后者適于提取血紅蛋白；提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)中，洗滌紅細(xì)胞時(shí)，不能加清水，而應(yīng)加入生理鹽水，否則細(xì)胞提早釋放出血紅蛋白與雜質(zhì)混合，會(huì)加大提取難度；

3、DNA初次析出時(shí)，加清水至黏稠物不再增加時(shí)為止；血紅蛋白提取和分離的原理是透析和在凝膠色譜柱中分子量大小不同的蛋白質(zhì)遷移速率不同而實(shí)現(xiàn)分離。答案A3下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述不正確的是()。A聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是用DNA聚合酶在體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)B在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，DNA的復(fù)制過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類(lèi)似CPCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，只需提供：DNA模板以及四種脫氧核苷酸DPCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)分為變性、復(fù)性和延伸解析PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，需提供DNA模板，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，耐熱的DNA聚合酶，同時(shí)通過(guò)控制溫度使

4、DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。答案C4PCR利用了DNA熱變性的原理，PCR儀實(shí)際上也是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器，對(duì)PCR過(guò)程中“溫度的控制”的說(shuō)法錯(cuò)誤的是()。A酶促反應(yīng)需要高的溫度，是為了確保模板是單鏈B延伸的溫度必須大于退火溫度，而小于變性溫度CDNA聚合酶不能熱變性，要用耐高溫的聚合酶DDNA解旋酶不能熱變性，為了確保模板是單鏈解析PCR是體外DNA擴(kuò)增，DNA雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶，靠高溫使其變性，雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開(kāi)。在復(fù)性后，在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA，因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度小于變性溫度。答案D5下圖表示DNA變性和復(fù)性過(guò)程，相關(guān)說(shuō)法正

5、確的是()。A向右的過(guò)程為加熱(80100 )變性的過(guò)程B向左的過(guò)程是DNA雙鏈迅速致冷復(fù)性C變性與在生物體內(nèi)解旋過(guò)程的條件、實(shí)質(zhì)都相同D圖中DNA片段共有4個(gè)游離的磷酸基、4個(gè)3端解析變性后的DNA在緩慢降溫后才會(huì)復(fù)性；變性與在生物體內(nèi)解旋過(guò)程的條件不同、實(shí)質(zhì)相同；任一DNA片段都有兩個(gè)游離的磷酸基(5端)和兩個(gè)3端。答案A6下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有()。A提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水脹破細(xì)胞B用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)C蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNAD蛋白質(zhì)可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化，但DNA不可用該方

6、法純化解析DNA也可用電泳法分離純化；透析只能除去小分子雜質(zhì)。答案B7下列有關(guān)蛋白質(zhì)的提取和分離的操作，其中排序正確的是()。A樣品處理、凝膠色譜操作、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳B樣品處理、凝膠色譜操作、純化C樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定D樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定解析蛋白質(zhì)的提取和分離分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步。A中凝膠色譜操作及SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳為實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中的技術(shù)。答案C8下列對(duì)在凝膠柱上加入樣品和洗脫的操作不正確的是()。A加樣前要使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液下降到與凝膠面平齊B讓吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)，貼壁加樣至色譜柱頂端，不要破壞凝膠面C打開(kāi)下端出口，待樣品

7、完全進(jìn)入凝膠層后直接連接緩沖液洗脫瓶開(kāi)始洗脫D待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)，每5 mL收集一管，連續(xù)收集流出液解析待樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口，小心加入緩沖液到適當(dāng)高度，連接緩沖液洗脫瓶，打開(kāi)下端出口，進(jìn)行洗脫。答案C9在蛋白質(zhì)的提取和分離中，下列對(duì)樣品處理過(guò)程的分析正確的是()。A洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽B洗滌時(shí)離心速度過(guò)小，時(shí)間過(guò)短，白細(xì)胞等會(huì)沉淀，達(dá)不到分離的結(jié)果C洗滌過(guò)程選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的NaCl溶液(生理鹽水)D透析的目的是去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)解析洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中除血紅蛋白以外的雜蛋白；洗滌時(shí)離心速度過(guò)大，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，白細(xì)胞等會(huì)

8、沉淀，達(dá)不到分離的效果；洗滌過(guò)程選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液(生理鹽水)。答案D10下列是有關(guān)血紅蛋白提取和分離的相關(guān)操作，其中正確的是()。A可采集豬血作為實(shí)驗(yàn)材料B用蒸餾水重復(fù)洗滌紅細(xì)胞C血紅蛋白釋放后應(yīng)低速短時(shí)間離心D洗脫液接近色譜柱底端時(shí)開(kāi)始收集流出液解析為防止細(xì)胞吸水漲破，洗滌時(shí)要用生理鹽水；釋放出血紅蛋白后，以2 000 r/min進(jìn)行高速離心；在分離時(shí)，要等到紅色蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時(shí)開(kāi)始收集流出液。答案A11(2012廣州模擬)蛋白質(zhì)的分離與純化技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是()。A根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜的特性，可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離B

9、根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等，可通過(guò)電泳分離蛋白質(zhì)C根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，可通過(guò)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)D根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過(guò)離心沉降法分離蛋白質(zhì)解析蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜，而溶液中的小分子物質(zhì)則可以透過(guò)半透膜，因此可以將蛋白質(zhì)和溶液中的小分子物質(zhì)分離。答案A12凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG75)，其中G、75的含義分別是()。AG表示凝膠的使用量，75表示加75 g水BG表示凝膠的交聯(lián)程度，75表示需加熱75 CG表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍，75表示每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5 gDG表示凝膠的膨脹體積，75

10、表示每克凝膠膨脹后體積可達(dá)75 cm3解析G表示凝膠交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5 g。答案C二、非選擇題(3小題，共40分)13(13分)DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性，隨著NaCl溶液濃度的變化而變化。(1)下列NaCl溶液中能使DNA析出最徹底的一種是_；溶解度最高的一種是_。A質(zhì)量濃度為0.14 mol/L B質(zhì)量濃度為2 mol/LC質(zhì)量濃度為0.15 mol/L D質(zhì)量濃度為0.3 mol/L(2)DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液，利用這一原理可以_，可以推測(cè)溶于酒精中的物質(zhì)可能有_。(3)利用DNA遇

11、_變藍(lán)色的特性，將該物質(zhì)作為鑒定_的試劑。其實(shí)驗(yàn)過(guò)程要點(diǎn)是向盛有_的試管中加入4 mL的_。混合均勻后，將試管置于_5 min，待試管_，觀察試管中溶液顏色的變化，這個(gè)實(shí)驗(yàn)也說(shuō)明DNA耐_溫。解析根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理可知DNA在質(zhì)量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，在質(zhì)量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中，溶解度最高。DNA存在于染色體上，為了把DNA和其他物質(zhì)分開(kāi)，利用DNA不溶于酒精而細(xì)胞中的某些物質(zhì)溶于酒精的方法，除去雜質(zhì)。利用DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成藍(lán)色的特性，可以鑒定提取的DNA。答案(1)AB(2)除去雜質(zhì)某些脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)或其他大分子物質(zhì)(3)二苯胺DNA

12、DNA二苯胺試劑沸水浴中加熱冷卻后高14(11分)PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答下面的問(wèn)題。(1)A過(guò)程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過(guò)程的原理敘述正確的是_。A該過(guò)程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵B該過(guò)程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵C該過(guò)程不需要解旋酶的作用D該過(guò)程與人體細(xì)胞的過(guò)程完全相同(2)C過(guò)程要用到的酶是耐高溫的_。這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以_加入，_(需要/不需要)添加。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有：_。(3)如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控

13、制“94 55 72 ”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占_。解析(1)高溫所起的作用類(lèi)似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂湣?2)C過(guò)程中PCR技術(shù)的延伸階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升到72 左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。這種DNA聚合酶在高溫下不變性，所以一次性加入即可。(3)PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過(guò)三次循環(huán)，共產(chǎn)生23個(gè)DNA分子，其中有2個(gè)DNA分子含有15N標(biāo)記。答案(1)C(2)DNA聚合酶一次不需要DNA模板、兩種引物、四種脫氧核苷酸，通過(guò)控制溫度和酸堿度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行(3)25%15(16分)(2

14、011高考信息卷)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的功能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白。根據(jù)材料回答下列問(wèn)題。(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液，要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_。(2)在對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí)，主要包括_、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析技術(shù)的原理是_。(3)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，在電泳過(guò)程中，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素包括蛋白質(zhì)分子的_、_以及分子的形狀等。(4)同學(xué)乙利用凝膠色譜

15、法進(jìn)行血紅蛋白分離(如圖一)，他在操作中加樣的正確順序是_，在執(zhí)行圖一中所示操作時(shí)，色譜柱下端連接的尼龍管應(yīng)該_(打開(kāi)或關(guān)閉)圖一加樣示意圖圖二圖三(5)圖二、圖三分別是同學(xué)甲、乙利用同一種樣品分離得到的結(jié)果，則圖三中與圖二中蛋白質(zhì)P對(duì)應(yīng)的是_。解析(1)加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固。(2)對(duì)樣品的處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析的原理是小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜)，而大分子不能通過(guò)。(3)電泳時(shí)，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素有蛋白質(zhì)分子大小、帶電性質(zhì)及分子的形狀等。(4)正確的加樣順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進(jìn)行分析，可以得出是；

16、同時(shí)進(jìn)行所示環(huán)繞加樣時(shí)，應(yīng)關(guān)閉下出口。(5)SDS凝膠電泳裝置是垂直的裝置，此種電泳方法主要取決于蛋白質(zhì)分子量的大小，與電荷無(wú)關(guān)，同時(shí)加樣在“”極，通電后，樣品蛋白質(zhì)向“”極移動(dòng)，分子量相對(duì)小的，移動(dòng)距離大，因此從圖二的電泳結(jié)果分析，P比N、M移向“”距離大，說(shuō)明P的分子量相對(duì)比較小，因此洗脫出來(lái)的時(shí)間比較長(zhǎng)，符合圖三中的丙。答案(1)防止血液凝固(2)紅細(xì)胞的洗滌小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜)，而大分子不能通過(guò)(3)大小帶電性質(zhì)(4)關(guān)閉(5)丙B卷(時(shí)間：45分鐘滿分：100分)考查知識(shí)點(diǎn)及角度難度及題號(hào)基礎(chǔ)中檔稍難DNA的粗提取與鑒定1、2、3、47多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA5、613

17、15血紅蛋白的提取和分離8、9、10、11、1214一、選擇題(12小題，每小題5分，共60分)1下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是()。A利用DNA溶于酒精，而蛋白質(zhì)不溶于酒精，可將DNA與蛋白質(zhì)分離B利用高溫能使蛋白質(zhì)變性，卻對(duì)DNA沒(méi)有影響的特性，可將DNA與蛋白質(zhì)分離C在溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水，輕輕攪拌后過(guò)濾，取濾液進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)D在DNA濾液中加入嫩肉粉，通過(guò)木瓜蛋白酶的作用，可將DNA與蛋白質(zhì)分離解析利用DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)溶于酒精，可將DNA和蛋白質(zhì)分開(kāi)。溫度過(guò)高也會(huì)影響DNA的特性，如PCR技術(shù)。在物質(zhì)的量濃

18、度為0.2 mol/L的氯化鈉溶液中DNA溶解度最大，但加入蒸餾水后，DNA溶解度降低，DNA析出，過(guò)濾后應(yīng)取其黏稠物進(jìn)行以后的實(shí)驗(yàn)。蛋白酶能分解蛋白質(zhì)，而不能分解DNA。答案D2若從植物細(xì)胞中提取DNA，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效果不好，如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時(shí)不顯示顏色反應(yīng)等。其可能的原因是()。植物細(xì)胞中DNA含量低研磨不充分過(guò)濾不充分體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精的量過(guò)大A B C D導(dǎo)析細(xì)胞釋放DNA析出DNADNA解析研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少；過(guò)濾不充分，也會(huì)導(dǎo)致提取的DNA量過(guò)少；若用于沉淀DNA的酒精量過(guò)少，也會(huì)導(dǎo)致DNA的沉淀量少，影響實(shí)驗(yàn)效果。答案D3

19、在提取DNA的過(guò)程中，最好使用塑料試管和燒杯，目的是()。A不易破碎 B減少DNA的損失C增加DNA的含量 D容易涮洗解析DNA容易吸附在玻璃容器上，所以在提取過(guò)程中為了減少DNA的損失，最好使用塑料燒杯和試管盛放雞血細(xì)胞液。答案B4從雞血細(xì)胞濾液中提取DNA所用的提取液是()。ANaCl溶液 B酒精C二苯胺 D檸檬酸鈉解析本題考查各試劑在“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的作用：NaCl溶液：溶解、析出DNA；酒精：溶解蛋白質(zhì)，提純DNA；二苯胺：鑒定DNA；檸檬酸鈉：防止血液凝固。答案A5PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問(wèn)題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽(yáng)

20、性的產(chǎn)生。下列防止污染的辦法中不包括的是()。A將樣品的處理、配制PCR反應(yīng)液、PCR循環(huán)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進(jìn)行B吸樣槍吸樣要慢，吸樣時(shí)盡量一次性完成，槍頭小套、小離心管應(yīng)一次性使用，以免交叉污染C所有PCR試劑都應(yīng)放置于大瓶分裝，以減少重復(fù)加樣次數(shù)，避免污染機(jī)會(huì)DPCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開(kāi)保存，不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱解析所有的PCR試劑都應(yīng)放置于小瓶分裝，一次性用完，避免因多次使用造成污染。答案C6在PCR實(shí)驗(yàn)操作中，下列說(shuō)法不正確的是()。A在微量離心管中添加各種試劑時(shí)，只需一個(gè)槍頭B離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)，防止液體外溢C用手輕彈離心管壁的目的

21、是使反應(yīng)液充分混合D離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部，提高反應(yīng)效果導(dǎo)析PCR操作步驟：準(zhǔn)備移液混合離心反應(yīng)。解析在微量離心管中添加各種試劑時(shí)，每吸取一種試劑后，移液器上的槍頭必須更換，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性；離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)，防止實(shí)驗(yàn)中脫落或液體外溢；離心10 s的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部，提高反應(yīng)效果。答案A7(2011江蘇南京一模)下列關(guān)于DNA和血紅蛋白的提取與分離的敘述中，錯(cuò)誤的是()。A可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取到DNA和蛋白質(zhì)B用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除部分雜質(zhì)C透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是利用蛋白質(zhì)不能通過(guò)半透膜的特性D進(jìn)一步分離與純化

22、血紅蛋白可用凝膠色譜法、離心法、電泳法等解析提取DNA的方法是利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}溶液，就能使DNA充分溶解，使雜質(zhì)沉淀，或相反。提取蛋白質(zhì)的方法有透析法。進(jìn)一步分離DNA和蛋白質(zhì)可利用DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)溶解于酒精這一原理。哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和其他膜結(jié)構(gòu)，而DNA的提取實(shí)驗(yàn)需要獲取較多DNA，因此一般不用哺乳動(dòng)物的血(包括豬血)做實(shí)驗(yàn)，所以蒸餾水漲破細(xì)胞的方法不適用于豬血提取DNA。答案A8下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的敘述中，錯(cuò)誤的是()。A透析法分離蛋白質(zhì)的原理是利用蛋白質(zhì)不能通過(guò)半透膜的特性B采用透析法使蛋白質(zhì)與其他

23、小分子化合物分離開(kāi)來(lái)C離心沉降法通過(guò)控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離D蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中可以向與其自身所帶電荷相同的電極移動(dòng)解析蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中應(yīng)向與其自身所帶電荷相反的電極移動(dòng)。答案D9根據(jù)血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳圖譜示意圖分析，所帶負(fù)電荷最多的球蛋白是()。A1球蛋白 B2球蛋白C球蛋白 D球蛋白解析根據(jù)電泳的原理進(jìn)行分析。帶電粒子在電場(chǎng)中向與其電性相反的電極泳動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳，因此，移動(dòng)越慢的，所帶負(fù)電荷就越少(點(diǎn)樣是在負(fù)極)。答案A10釋放血紅蛋白時(shí)，下列有關(guān)紅細(xì)胞膜破裂的原因中，不包括的是()。A紅細(xì)胞吸水膨脹 B磁力攪拌器的充分?jǐn)嚢鐲血紅蛋白的變性 D甲苯對(duì)細(xì)胞膜的溶解解析

24、紅細(xì)胞洗滌去除血漿蛋白后，再加入一定量的蒸餾水，利用滲透作用原理，使紅細(xì)胞吸水漲破。同時(shí)，加入甲苯有助于對(duì)膜的溶解。B項(xiàng)可以加速膜的破裂。答案C11細(xì)胞破碎后，各種蛋白質(zhì)就會(huì)被釋放出來(lái)，再根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性進(jìn)行提取。下列關(guān)于蛋白質(zhì)提取的措施中，不正確的是()。A酸性蛋白質(zhì)可用稀堿性溶液提取B水溶性蛋白質(zhì)可用透析液(中性緩沖液)提取C脂溶性蛋白質(zhì)可用有機(jī)溶劑提取D堿性蛋白質(zhì)可用強(qiáng)酸性溶液提取解析提取蛋白質(zhì)的基本原理是根據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)，加入不同的試劑，使蛋白質(zhì)溶于試劑中而提取蛋白質(zhì)。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿都會(huì)使蛋白質(zhì)變性而沉淀。答案D12凝膠柱的制作常用玻璃管，在選擇玻璃管時(shí)應(yīng)該考慮的因素有()。玻璃管

25、的高度玻璃管的直徑樣品的體積緩沖溶液的pHA B C D解析影響分離度的主要因素是層析柱的柱高，但在選擇玻璃管時(shí)，也要考慮玻璃管的直徑，保證柱高與直徑的比為51101。樣品的體積也要考慮，緩沖溶液的pH不影響選擇玻璃管。答案A二、非選擇題(3小題，共40分)13(10分)在遺傳病及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析，PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝，有效地解決了因?yàn)闃悠分蠨NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題。(1)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出引物，并在復(fù)性這一步驟中將引物置于合適的位置。(2)在相應(yīng)的橫線上寫(xiě)出循環(huán)一次后生成的DNA分子。

26、(3)若將作為原料的4中脫氧核苷酸用32P標(biāo)記，請(qǐng)分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的特點(diǎn)：_，循環(huán)n次后生成的DNA分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為_(kāi)。(4)PCR反應(yīng)過(guò)程的前提條件是_，PCR技術(shù)利用了DNA的_原理解決了這個(gè)問(wèn)題。(5)在對(duì)樣品DNA分析過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，DNA摻雜著一些組蛋白，要去除這些組蛋白，加入的物質(zhì)是_。解析引物的作用是提供DNA聚合酶的起點(diǎn)3端；DNA體外擴(kuò)增同細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制一樣都是半保留復(fù)制，DNA分子的兩條母鏈分別作為模板，合成新的DNA鏈。答案(1)5GAOHHOAG5(2)或(3)每個(gè)DNA分子各有一條鏈含32P1/2n(4)DNA解旋熱變性(5)蛋白酶1

27、4(18分)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白，請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題。(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檬酸鈉，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_以上所述的過(guò)程即是樣品處理，它包括_、_、收集血紅蛋白溶液。(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是_。(3)你如何知道紅細(xì)胞已洗滌干凈？_。(4)分離紅細(xì)胞時(shí)的離心速度及離心時(shí)間分別是_。(5)若離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)結(jié)果會(huì)怎樣？_。(6)將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析，即樣品的粗分離。透析的目的是_。透析的原

28、理是_。(7)然后通過(guò)凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是_。解析人或哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核和細(xì)胞器，雜質(zhì)相對(duì)較少，提取血紅蛋白相對(duì)較容易，而其他動(dòng)物如鳥(niǎo)類(lèi)、兩棲類(lèi)等動(dòng)物紅細(xì)胞中含細(xì)胞核及大量的細(xì)胞器不易提取血紅蛋白。為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)幟仕徕c。樣品的處理包括紅細(xì)胞洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液。洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜質(zhì)蛋白，以利于后續(xù)步驟分離純化。重復(fù)洗滌三次，直至上清液中沒(méi)有黃色，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。采集的血樣要及時(shí)分離紅細(xì)胞，分離時(shí)采取低速短時(shí)間離心，如500 r/min 離心2 min。若離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一起沉淀