中蒙藥制劑分析新方法新技術(shù)

1、中蒙藥制劑分析的新方法新技術(shù)姓名：黃月學(xué)號(hào)：2011110087專(zhuān)業(yè)：藥物化學(xué)摘要目的 通過(guò)介紹中蒙藥制劑分析的新方法進(jìn)一步了解中蒙藥制劑分析的優(yōu)點(diǎn)及好處。方法 以國(guó)內(nèi)外大量有代表性的論文為依據(jù)進(jìn)行分析和歸納整理。并簡(jiǎn)單舉兩個(gè)具體事例來(lái)進(jìn)一步了解中蒙藥制劑的新方法。結(jié)論 采用新的中蒙藥制劑分析方法可以有效的控制其有效性及安全性。關(guān)鍵詞：中蒙藥制劑 二維液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) 復(fù)方銀黃制劑 近紅外光譜 復(fù)方丹參片 前言 中蒙藥是中華民族寶貴的文化遺產(chǎn)，是中醫(yī)用來(lái)防病和治病的重要手段，由于其獨(dú)特的理論思想體系及悠久的臨床實(shí)踐史，已經(jīng)受到世界各國(guó)的廣泛關(guān)注。眾所周知，中蒙藥及其制劑是一個(gè)非常復(fù)雜的有

2、機(jī)整體，其中包括很多復(fù)雜的化學(xué)成分，即使是一味中藥都包含很多不同的成分，而復(fù)方制劑中的化學(xué)成分更是數(shù)不勝數(shù);另外，人的機(jī)體是一個(gè)無(wú)時(shí)無(wú)刻不在變化、復(fù)雜而又充滿(mǎn)聯(lián)系的有機(jī)體，而中藥及其制劑防病治病的思想恰恰符合了人體是一個(gè)復(fù)雜且充滿(mǎn)無(wú)限聯(lián)系的有機(jī)體的特點(diǎn)，其所產(chǎn)生的療效也是多種成分多重貢獻(xiàn)的結(jié)果。1、中蒙藥制劑的的分類(lèi)中國(guó)藥典（2000年版）一部共記載了二十六種：丸劑、膠劑、膏藥、顆粒劑、滴眼劑、散劑、合劑、露劑、糖漿劑、軟膏劑、片劑、酒劑、茶劑、滴丸劑、注射劑、錠劑、酊劑、搽劑、膠囊劑、滴鼻劑、栓劑、巴布膏劑、橡膠膏劑、氣霧劑噴霧劑、煎膏劑（膏滋）、流浸膏劑與浸膏劑。液體制(用藥材提取物制備的

3、液體制劑):合劑、糖漿劑、酒劑、茶劑、酊劑 滴鼻劑、滴眼劑、露劑、搽劑等。無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)顯微鑒別。半固體制劑（軟膏）：藥物、藥材細(xì)粉、藥材提取物與適量基質(zhì)混合制成的半固體外用制劑。常用基質(zhì)有油脂性、水溶性、乳劑型（乳膏劑）；檢查項(xiàng)目包括裝量、微生物。半流體制劑（藥材提取液的濃縮液）：煎膏劑(膏滋)、流浸膏劑與浸膏劑（半流體或固體），無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)顯微鑒別。固體制劑（藥材提取物、藥材粉末加賦形劑、制備而成）：丸劑、膠劑、顆粒劑、散劑、片劑、膠囊劑、錠劑、膠劑、茶劑、栓劑。有植物組織與細(xì)胞，可做顯微鑒別。2、中藥制劑分析的特點(diǎn)2、1中藥制劑化學(xué)成分的多樣性與復(fù)雜性任何一種中藥的化學(xué)

4、成分都十分復(fù)雜，包括各類(lèi)型的有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物，由幾味以至幾十味藥組成的復(fù)雜中藥制劑所含成分更為復(fù)雜；中藥制劑化學(xué)成分可以是不同類(lèi)別的，如生物堿，黃酮等，在相同類(lèi)別的成分中可能含有性質(zhì)相近的多種同系物；中藥制劑中所含成分的含量高低差別很大，含量高者可達(dá)百分之幾十，低者可至千成分之幾；有些化學(xué)成分還會(huì)相互影響，含量發(fā)生較大變化，給質(zhì)量分析增加難度。2.2中藥制劑原料藥材質(zhì)量的差別原料藥材的品種，規(guī)格，產(chǎn)地，生長(zhǎng)環(huán)境，藥用部位，采收季節(jié)，加工方法等均會(huì)影響藥材中有效成分的含量，從而影響中藥制劑的質(zhì)量和臨床療效。炮制方法的影響中藥材經(jīng)加工炮制后，其化學(xué)成分，性味，藥理作用等方面都會(huì)發(fā)生一定的變化，為了

5、保證中藥制劑的質(zhì)量，藥材應(yīng)嚴(yán)格遵守中藥炮制規(guī)范，對(duì)炮制工藝，成品質(zhì)量都要嚴(yán)格把關(guān)，才能保證中藥制劑質(zhì)量穩(wěn)定，可靠。2.3以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)原則，評(píng)價(jià)中藥制劑質(zhì)量中藥制劑的組方原則有君，臣，佐，使之分，在進(jìn)行質(zhì)量分析時(shí)，首先進(jìn)行組方分析，按功能主治分出君，臣，佐，使藥味，選擇合適的化學(xué)成分為指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)中藥制劑的質(zhì)量。由于中藥成分的復(fù)雜性，藥理作用的多方面性，難于以某個(gè)或某些成分的含量評(píng)價(jià)中藥制劑質(zhì)量。目前多根據(jù)制劑中單味藥有效成分的特性建立控制制劑中某味藥質(zhì)和量的檢測(cè)方法，隨方分析主藥或藥群的有效成分，進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。在檢測(cè)成分上也要注意中醫(yī)臨床功能主治與現(xiàn)代藥理學(xué)相結(jié)合進(jìn)行研究。2.4中藥制劑工

6、藝及輔料的特殊性同一種中藥制劑，由于不同生產(chǎn)廠(chǎng)家生產(chǎn)工藝上的差別，將會(huì)影響到制劑中化學(xué)成分的含量。中藥制劑的劑型種類(lèi)繁多，制備方法各異，工藝較為復(fù)雜，很多在單味中藥鮮品中存在的化學(xué)成分，經(jīng)過(guò)炮制或制備工藝中經(jīng)加熱處理后，結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，已不復(fù)存在或含量甚微，有些則在制備過(guò)程中因揮發(fā)，分解，沉淀等原因使質(zhì)量分析更加困難。中藥制劑所用輔料各式各樣，如蜂蜜，蜂蠟，糯米粉，植物油，鉛丹等都可作為輔料，這些輔料的存在，則對(duì)質(zhì)量分析均有一定的影響，需選擇合適的方法，將其干擾排除，才能獲得準(zhǔn)確的分析結(jié)果。2.5中藥制劑雜質(zhì)來(lái)源的多途徑性中藥制劑的雜質(zhì)來(lái)源要比化學(xué)制劑復(fù)雜的多，由生產(chǎn)過(guò)程中帶入的；藥材中非藥用部

7、位及未除凈的泥沙；藥材中所含的重金屬及殘留農(nóng)藥；包裝，保管不當(dāng)所產(chǎn)生的霉變，走油，泛糖，蟲(chóng)蛀等產(chǎn)生的雜質(zhì)；洗滌原料的水質(zhì)二次污染等途徑均可混入雜質(zhì)。所以中藥制劑易含有較高的重金屬，砷鹽，殘留農(nóng)藥等雜質(zhì)。2.6中藥制劑有效成分的非單一性中藥制劑產(chǎn)生的療效不是某單一成分作用的結(jié)果，也不是某些成分簡(jiǎn)單作用的加和，是各成分之間的協(xié)同作用。用一種成分衡量其質(zhì)量?jī)?yōu)劣有失偏頗，某單一成分的含量高低并不一定與其臨床作用效果具有簡(jiǎn)單的線(xiàn)性關(guān)系，檢測(cè)任何一種活性成分均不能反映它所體現(xiàn)的整體療效。研究復(fù)方中藥制劑的物質(zhì)基礎(chǔ)，應(yīng)用靈敏可靠的分析儀器，測(cè)定多種有效成分，才能更加科學(xué)，客觀(guān)地評(píng)價(jià)中藥制劑質(zhì)量。3、中蒙藥制

8、劑分析的新方法、新技術(shù)3.1二維液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在復(fù)方銀黃制劑成分研究中的應(yīng)用銀黃制劑是由金銀花和黃芩兩種中藥材經(jīng)過(guò)提取、加工而成的中藥制劑，同時(shí)具有金銀花和黃答的多種藥理作用，可以抗菌消炎、清熱解毒，臨床上多用于急性扁桃體炎、咽喉炎、上呼吸道感染等癥的治療。目前，銀黃制劑的種類(lèi)主要有銀黃口服液、銀黃顆粒、銀黃膠囊、銀黃片、銀黃沖劑、銀黃注射液等。據(jù)報(bào)道，對(duì)于銀黃制劑的質(zhì)量控制多為采用高效液相色譜法測(cè)定其中兩種主要成分綠原酸和黃芩苷的含量1-5和其指紋圖譜協(xié)6-10的研究，但中藥復(fù)方的化學(xué)成分非常復(fù)雜，其中包括上百種化學(xué)成分，據(jù)目前的報(bào)道還不能全面地反映銀黃制劑的內(nèi)在組分信息。為了更好地

9、將其應(yīng)用于臨床疾病的治療，全面地對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制，需要深入研究其中的活性成分。對(duì)混合提取液進(jìn)行高效液相色譜分離，采用離線(xiàn)二維液相色譜方法對(duì)其中的有效成分進(jìn)行二維分離，采用液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)混合提取液中的組分進(jìn)行了初步分析，為復(fù)方銀黃制劑的研究提供了更廣闊的思路，為其進(jìn)行全面的質(zhì)量控制奠定基礎(chǔ)。將樣品溶液按照液相色譜條件:LC-20AT，島津高效液相色譜儀，SPD-20A檢測(cè)器，N-2000色譜工作站;色譜柱為 Hypersil CN基柱 (250mm×4.6mmi.d.，5m，大連依利特分析儀器有限公司);流動(dòng)相:A液為甲醇，B液為0.1%(v/v)甲酸水溶液;梯度洗脫:0-10min

10、，10%A-20%A;10-20min，20%A-40%A;20-30min，40%A-45%A:30-40min，45%A-50%A；流速為 1.0mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm;進(jìn)樣量:20L。進(jìn)樣，從進(jìn)樣開(kāi)始每5min收集一次流分，重復(fù)進(jìn)樣6次并收集流分。合并相同時(shí)間段收集的流分并旋轉(zhuǎn)濃縮，自然風(fēng)干后，用70%甲醇水溶液定量至0.2mL，得到8個(gè)流分。取每個(gè)流分按照液相色譜條件:LC-20AT島津高效液相色譜儀，SPD-20A檢測(cè)器，N-2000色譜工作站;色譜柱為 Agilent Eclipse XDB-C18:色譜柱(250mm×4.6mm,5m，Unim

11、iero Technologies .Inc,USA);流動(dòng)相：A液為乙腈，B液為0.1%(v/v)甲酸水溶液;梯度洗脫：0-20min，10%A-35%A;20-40min，35%A-60%A；檢測(cè)波長(zhǎng):254nm；流速：1.0mL·min-l；進(jìn)樣量:20L。進(jìn)樣。圖1金銀花和黃芩的混合提取液在CN柱上的分離色譜圖圖2金銀花和黃芩的混合提取液在C18柱上的分離色譜圖 在一維分離中CN柱上得到了16種組分，C18柱上得到了20種組分。在二維分離中共得到53種組分，比一維分離中得到了更多的組分。但是，從二維圖上看到，二維的分離仍然有些不完全，有些組分還分不開(kāi)，仍需進(jìn)行多維分離。以CN

12、柱為第一維分離柱，C18柱為第二維分離柱，構(gòu)建了一個(gè)二維色譜分離體系。圖3、4分別為收集的每一個(gè)流分在第二維C18柱上的色譜分離圖。從圖3、4可以看到，至少有53種成分得到了較好的分離，比一維色譜顯著地提高了分離效率。圖3 流分1，2，3，4在C18柱上的分離色譜圖圖4流分5，6，7，8在CI，柱上的分離色譜圖3.2 近紅外光譜分析技術(shù)在復(fù)方丹參片質(zhì)量控制中的應(yīng)用傳統(tǒng)中藥的質(zhì)量控制和分析方法也正向著一體化與綜合性的方向前進(jìn)。同時(shí)，我國(guó)對(duì)于中藥及其制劑質(zhì)量控制手段也在不斷的革新，一些新技術(shù)也被人們廣泛接受。近年來(lái)，近紅外光譜分析技術(shù)得到了飛速的發(fā)展，且在農(nóng)業(yè)11，食品及石油化學(xué)工業(yè)降等方面取得了

13、較好的成績(jī)。因此，應(yīng)用近紅外光譜技術(shù)對(duì)中藥及其制劑進(jìn)行全面、有效、快速的質(zhì)量控制具有非常大的潛力。復(fù)方丹參片為中國(guó)藥典收載的中成藥，其療效確切，不良反應(yīng)少，且價(jià)格低廉，所以為臨床常用的復(fù)方制劑之一12。眾所周知，復(fù)方丹參片所含成分復(fù)雜多樣，其療效可能是通過(guò)多靶點(diǎn)、多途徑的作用形式發(fā)揮，很難確定哪一種藥材是有效藥材或哪幾種化學(xué)成分是有效成分。同時(shí)，因?yàn)閺?fù)方丹參片生產(chǎn)廠(chǎng)家眾多，不同廠(chǎng)家不同批次間有效成分的含量差異較大，僅用其中任何一種或幾種活性成分為控制指標(biāo)則不能完全反映其所體現(xiàn)的整體療效13。因此，現(xiàn)有的質(zhì)量控制方法，諸如一種或多種有效成分的含量測(cè)定，不能滿(mǎn)足從中藥制劑的整體化學(xué)成分出發(fā)且快速控

14、制其質(zhì)量的要求。另外，由于復(fù)方丹參片成分與其藥效間的復(fù)雜性，現(xiàn)有的化學(xué)指紋圖譜質(zhì)量控制方法不能體現(xiàn)復(fù)方丹參片中多種成分間“協(xié)同作用”或“拮抗作用”的藥效特征。因此，特別需要將藥效和不同廠(chǎng)家不同批次復(fù)方丹參片化學(xué)成分及含量之間的差異有機(jī)結(jié)合起來(lái)，從而滿(mǎn)足全面、有效、快速控制復(fù)方丹參片質(zhì)量的要求。目前，中國(guó)藥典采用高效液相色譜法（HPCL)控制復(fù)方丹參片質(zhì)量，定量檢測(cè)指標(biāo)是丹參酮IIA和丹酚酸14。也有學(xué)者針對(duì)一種或幾種藥材中不同類(lèi)型的有效成分的鑒別或含量測(cè)定對(duì)復(fù)方丹參片的質(zhì)量進(jìn)行控制15-22。但是，復(fù)方丹參片一為復(fù)方制劑，所含成分多種多樣，通過(guò)多靶點(diǎn)、多途徑的作用形式發(fā)揮其療效，很難確定哪一種

15、藥材是有效藥材或哪幾種化學(xué)成分是有效成分同時(shí)因?yàn)閺?fù)方丹參。采用近紅外光譜分析技術(shù)建立不同種黨參藥材隨機(jī)森林分類(lèi)模型。采用近紅外光-譜分析技術(shù)建立一種快速區(qū)別不同產(chǎn)地黨參藥材的隨機(jī)森林、決策樹(shù)以及K-最近鄰分類(lèi)模型。采用近紅外光譜技術(shù)獲得復(fù)方丹參片粉末的光譜指紋圖譜，并利用偏最小二乘多元線(xiàn)性回歸建立復(fù)方丹參片近紅外光譜與其活血化瘀藥效之間的定量譜-效關(guān)系模型。結(jié)論中蒙藥制劑分析在中蒙藥的應(yīng)用中占有和重要的位置。中蒙藥制劑的質(zhì)量控制則是確定其能安全、有效地被利用的重要保證。本文通過(guò)對(duì)金銀花和黃芩分別提取，制得提取液后，參照中國(guó)藥典銀黃口服液項(xiàng)下比例混合，得到混合提取液后并應(yīng)用二維液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

16、技術(shù)對(duì)其進(jìn)行研究。近年來(lái)，隨著藥物分析工作者的努力及分析技術(shù)的發(fā)展，中藥質(zhì)量控制逐漸向綜合性和一體化的方向發(fā)展。在眾多綜合性分析方法中，色譜指紋技術(shù)仍然是最普遍的用于中藥及其制劑的質(zhì)量控制的一種方法。與色譜指紋圖譜一樣，近紅外光譜也是一種能夠反映中藥及其制劑各成分綜合信息的指紋圖譜，且更側(cè)重于中藥及其制劑的整體信息的體現(xiàn)，因此也同樣用于中藥及其制劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)。這些新技術(shù)、新方法將會(huì)為中蒙藥制劑分析錦上添花。參考文獻(xiàn)1 張俊瑋，楊翠微.銀黃口服液中黃芬營(yíng)與綠原酸的含量測(cè)定J.湖南醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2002，8(7):389-390.2 朱嘯風(fēng)，孫欽美，劉景俊.銀黃口服液中黃答普和綠原酸含量的測(cè)定J1.齊

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