微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用試題AB合卷

1、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用試題1. 以下有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，不正確的是( )A. 在大腸桿菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗中，劃線后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng) B. 某同學(xué)用帶蓋的瓶子制備葡萄酒的過程中，每隔12小時左右將瓶蓋擰松一次，其目的是向瓶中通氣，以保證微生物的發(fā)酵 C. 將顯色后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量 D. 可以用稀釋涂布平板法來測定某土壤溶液活菌數(shù)目2. 在從土壤中分離出分解纖維素的微生物的實(shí)驗中，先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，再進(jìn)行剛果紅染色法分離。先選擇培養(yǎng)的目的是( )A. 濃縮目標(biāo)菌種B. 除去雜菌，獲得能分解纖維素的純菌種C. 殺滅不需要的微生物D

2、. 在微生物的菌落上獲得纖維素分解菌種3. 在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)實(shí)驗時，甲組實(shí)驗用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實(shí)驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養(yǎng)與觀察，則乙組實(shí)驗屬于( )A. 空白對照 B. 標(biāo)準(zhǔn)對照 C. 相互對照 D. 條件對照4. (2009上海高考T16)在光照下，將等細(xì)胞數(shù)量的衣藻和大腸桿菌分別接種到只含無機(jī)鹽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，結(jié)果是(虛線和實(shí)線分別表示大腸桿菌和衣藻的生長曲線)5. (2009廣東高考T15)有關(guān)“探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量動態(tài)變化”的實(shí)驗，正確的敘述是( )A. 改變培養(yǎng)液的pH值不影響K值(環(huán)境容納量)大小B.

3、 用樣方法調(diào)查玻璃容器中酵母菌數(shù)量的變化C. 取適量培養(yǎng)液滴于普通載玻片后對酵母菌準(zhǔn)確計數(shù)D. 營養(yǎng)條件并非影響酵母菌種群數(shù)量變化的唯一因素6. 在細(xì)菌的連續(xù)培養(yǎng)過程中，要以一定速度不斷添加新的培養(yǎng)基，同時以同樣速度放出老的培養(yǎng)基。下圖表示培養(yǎng)基的稀釋率(培養(yǎng)基的更新速率)與培養(yǎng)容器中營養(yǎng)物質(zhì)濃度、細(xì)菌代時(細(xì)菌數(shù)目增加一倍所需的時間)、細(xì)菌密度的關(guān)系。下列相關(guān)敘述不正確的是( )A. 在稀釋率很低的情況下，稀釋率的增加會導(dǎo)致細(xì)菌密度增加B. 稀釋率從a到b的變化過程中，細(xì)菌生長速度不斷提高C. 稀釋率超過b點(diǎn)后，營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高導(dǎo)致細(xì)菌死亡率增大，細(xì)菌密度降低D. 為持續(xù)高效地獲得發(fā)酵產(chǎn)品，

4、應(yīng)將稀釋率控制在b點(diǎn)附近7能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是( )A稀釋涂布平板法 B直接計數(shù)法 C重量法 D比濁法8下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗操作的敘述，其中錯誤的是( )A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105 、106倍的土壤稀釋液和無菌水各01ml，分別涂布于各組平板上C將實(shí)驗組和對照組平板倒置，370C恒溫培養(yǎng)24-48小時D確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗組平板進(jìn)行計數(shù)9消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害。下列哪些事物適用于消毒

5、處理( )皮膚 飲用水 牛奶 注射器 培養(yǎng)皿接種環(huán) 培養(yǎng)基 果汁 醬油 手術(shù)刀A BC D以上全部10.可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是( )A以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑11下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是( )A利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對微生物進(jìn)行計數(shù)B接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少12微生物培養(yǎng)過程中，

6、要十分重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗中的許多方面也要進(jìn)行無菌操作，防止雜菌污染，請分析下列操作中錯誤的是( )煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢 接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行 無菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進(jìn)行消毒 家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌 培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌 加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌A BC D12345678910111213. (2010全國卷T34)下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問題，請回答：(1)某細(xì)菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的

7、細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長，故該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。按照化學(xué)成分分類，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。從同化作用類型看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于_。(2)將少量細(xì)菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)，定時取樣測定菌體數(shù)目，以時間為橫坐標(biāo)，以菌體數(shù)目的對數(shù)為縱坐標(biāo)，可以得到細(xì)菌的_曲線。該曲線中以菌體數(shù)目的對數(shù)作為縱坐標(biāo)的原因是_。實(shí)驗室中，為了獲得形態(tài)和生理特征一致的菌體，一般應(yīng)在_期取材；在生產(chǎn)中，常收集培養(yǎng)至_期的細(xì)菌用于次生代謝產(chǎn)物的提取。14. (2010全國卷T34)某種細(xì)菌體內(nèi)某氨基酸(X)的生物合成途徑如圖：這種細(xì)菌的野生型能在基本培養(yǎng)基(滿足野生型細(xì)菌生長的簡單培養(yǎng)基)上生長，而

8、由該種細(xì)菌野生型得到的兩種突變型(甲、乙)都不能在基本培養(yǎng)基上生長；在基本培養(yǎng)基上若添加中間產(chǎn)物2，則甲、乙都能生長；若添加中間產(chǎn)物1，則乙能生長而甲不能生長。在基本培養(yǎng)基上添加少量的X，甲能積累中間產(chǎn)物1，而乙不能累。請回答：(1)根據(jù)上述資料推論：甲中酶_的功能喪失；乙中酶_的功能喪失，甲和乙中酶_的功能正常。由野生型產(chǎn)生甲、乙這兩種突變型的原因是野生型的_(同一、不同)菌體中的不同_發(fā)生了突變，從而導(dǎo)致不同酶的功能喪失。如果想在基本培養(yǎng)基上添加少量的X來生產(chǎn)中間產(chǎn)物1，則應(yīng)選用_(野生型、甲、乙)。(2)將甲、乙混合接種于基本培養(yǎng)基上能長出少量菌落，再將這些菌落單個挑出分別接種在基本培養(yǎng)

9、基上都不能生長。上述混合培養(yǎng)時乙首先形成菌落，其原因是_。(3)在發(fā)酵過程中，菌體中X含量過高時，其合成速度下降。若要保持其合成速率，可采取的措施是改變菌體細(xì)胞膜的_，使X排出菌體外。15. 某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗。實(shí)驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實(shí)驗相關(guān)的問題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。(2)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37 。要使該實(shí)驗所得結(jié)果可靠，還

10、應(yīng)該同時在另一平板上接種_作為對照進(jìn)行實(shí)驗。(4)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為_。16富集培養(yǎng)的微生物學(xué)中的最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是指利用不同微生物間生命活動特點(diǎn)的不同，制定環(huán)境條件，是僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點(diǎn)，從物理、化學(xué)、生物及綜合多個方面進(jìn)行選擇，如溫度、PH、紫外線、高壓、光照、氧

11、氣、營養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗過程。利用富集培養(yǎng)技術(shù)從土壤中分離能降解對羥基苯甲酸的微生物請分析回答：(1)本實(shí)驗所需培養(yǎng)基為碳源為。(2)實(shí)驗原理是。(3)重復(fù)培養(yǎng)的目的是。(4)的菌落中大部分是降解微生物。(5)為組，為組，設(shè)置的目的是。(6)采用法，接種到的培養(yǎng)基中，在操作過程中為防止污染應(yīng)注意的事項是。17下表為牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表，據(jù)此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量05g1g05g100mL蛋白胨在培養(yǎng)基中的作用是。要用此材料配制觀察細(xì)菌菌落狀況的培養(yǎng)基，還需添加的成分是。表中各成分含量確定的原則是

12、。培養(yǎng)基配制好后，分裝前應(yīng)進(jìn)行的工作是。從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成，所采用的預(yù)防雜菌感染的方法是。在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面，其目的是。18.（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗材料。（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。（3）若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，

13、還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的_。（5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。19氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，原因不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗方案（圖1）篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培養(yǎng)基配方如表1。（1）配制號固體培養(yǎng)基時，除添加號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的_。（2）培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)PH的先后順序是_。（3）從用途上來說，號培養(yǎng)基和號

14、培養(yǎng)基分別屬于_培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。在號培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是_。（4）在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為_。（5）將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線（如圖2）。從圖2可知SP1菌在_培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是_。專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用試題B1A 2D 3A 4A 5A 6D7.答案： （1）選擇培養(yǎng)基 對羥基苯甲酸 （2）利用以對羥基苯甲酸為唯一的碳源選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物 （3）增大分解對羥基苯甲酸微生物的比例 （4）對羥基苯甲酸 （5）對照 實(shí)驗 說明通過富

15、集培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物 （6）單細(xì)胞挑取 接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻，同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物8答案：提供碳源、氮源、生長因子 瓊脂（凝固劑） 所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需要量調(diào)整pH 高壓蒸汽滅菌、燒灼接種環(huán)、酒精棉擦手、棉塞塞試管口、在火焰旁接種 擴(kuò)大接種面積9.答案：（1）溫度 酸堿度 易培養(yǎng) 生活周期短（2）滅菌 消毒 損傷DNA的結(jié)構(gòu)（3）比例合適（4）鑒定(或分類)（5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.（6）滅菌10.答案：（1）瓊脂（2）先調(diào)PH，后滅菌

16、（3）通用 選擇 硝酸銨（4）芽孢（5）20mg/L氯苯 硝酸最早耗盡專題二課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)一、1（1）目的菌珠 抑制 阻止 （2）特定 抑制 阻止(3)自養(yǎng)能固氮的微生物；2(1)有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)。(2).稀釋度 細(xì)菌 30-300 顯微鏡3.非測試因素 可信度 無雜菌污染二、1. 土壤，鏟去表層土。2. 培養(yǎng)基 多于 對照 3.培養(yǎng) 1ml 9ml 0.1mL 4.30-300 平均數(shù)三：思考與討論（1）統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計3個平板，計算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計算（2）這是因為土壤中各類微生物的數(shù)量（單位

17、：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2185萬，放線菌數(shù)約為477萬，霉菌數(shù)約為23.1萬。因此，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離，同時還應(yīng)當(dāng)有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。*（3）提供碳源的是 葡萄糖 ，提供氮源的的是 尿素（4） 具有 只有能夠以尿素作為氮源的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長 。（5）第 二 位同學(xué)的結(jié)果接近真實(shí)值改進(jìn)的操作是第一位同學(xué)需設(shè)置重復(fù)實(shí)驗組；第二位同學(xué)統(tǒng)計的三個菌落數(shù)相差太大，說明操作有誤，需重新實(shí)驗。（6）方案1：其他同學(xué)用A同學(xué)的土樣進(jìn)行實(shí)驗。方案2：A同學(xué)以不接種的培養(yǎng)基作為空白對照。專題2 課題3 分解

18、纖維素的微生物的分離參考答案：一、1.C H O 多糖 2.棉花 3.復(fù)合酶 C1 Cx 葡萄糖苷 纖維二糖 葡萄糖二 1. 剛果紅 2.紅色復(fù)合物，纖維素分解菌，是否產(chǎn)生透明圈三、（流程參考課本P138） 1. 纖維素 2思考1液體，沒有添加瓊脂成分.思考2以纖維素粉為唯一碳源，只有纖維素分解菌才能生存。思考3將纖維素粉改為葡萄糖。(1)純度 (3).搖床 混濁(4)參照專題1的稀釋操作， (6).透明圈思考4尿素分解菌的分離實(shí)驗流程是將土樣制成的菌懸液直接涂布在選擇培養(yǎng)基上；本課題通過選擇培養(yǎng)使細(xì)菌增殖后，再涂布在鑒別培養(yǎng)基上。其它操作基本基本共同。3.一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時就加入剛果紅。方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點(diǎn)是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點(diǎn)是由于在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因為培養(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)