重組人血管內(nèi)皮抑素I期臨床研究

1、重組人血管內(nèi)皮抑素I期臨床研究作者；佟仲生，閻昭，巴一，李淑芬，史業(yè)輝，何麗宏，汪旭，王忱，郝春芳摘要 目的 評價重組人血管內(nèi)皮抑素的人體安全性和藥代動力學(xué)特征。方法 將27例健康受試者分成4個劑量組，分別為30 mg/m2(3例)、60 mg/m2（8例）、120 mg/m2（8例）、180 mg/m2（8例），均單次靜脈輸注重組人血管內(nèi)皮抑素；16例惡性腫瘤患者，分3個劑量組，分別為10 mg/m2(10例)、20 mg/m2（3例）、30 mg/m2（3例），每組連續(xù)靜脈輸注重組人血管內(nèi)皮抑素28天；27例健康受試者及10例惡性腫瘤患者（10 mg/m2）采用美國Quantikine免疫

2、分析藥盒測定血清重組人血管內(nèi)皮抑素濃度，進(jìn)行藥代動力學(xué)研究。結(jié)果 全組未見明顯的劑量限制性毒性，少數(shù)出現(xiàn)一定的心臟毒性，如竇性心動過速、心肌缺血、室性期前收縮、竇性心律不齊。其他不良反應(yīng)有皮疹、腹瀉、發(fā)熱、疲勞?？稍u價患者16例中，MR 1例、SD 14例、PD 1例。單次給藥組Cmax和AUC隨給藥劑量提高呈線性增加，Vd和Cl也隨劑量相應(yīng)提高；多次給藥組藥物谷濃度在連續(xù)給藥1周左右達(dá)到穩(wěn)態(tài)水平，連用28天，在體內(nèi)的維持濃度較低且不會產(chǎn)生明顯蓄積。結(jié)論 初步觀察治療腫瘤有一定療效，推薦期臨床試驗的劑量為每次10 mg/m2，每日1次，連續(xù)給藥28天，以進(jìn)一步考察本藥對腫瘤患者的療效和安全性。

3、 關(guān)鍵詞 重組人血管內(nèi)皮抑素;期臨床研究;劑量限制性毒性;藥動學(xué) 重組人血管內(nèi)皮抑素(rh-Endostatin)于1997年初從小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞瘤的細(xì)胞(EOMA)培養(yǎng)液中分離得到，是一種小鼠膠原蛋白十八(collagen )C末端183個氨基酸20 kD的蛋白質(zhì)片斷，具有抗血管生成（anti-angiogenesis）抑制腫瘤生長的作用。本試驗的重組人血管內(nèi)皮抑素采用大腸桿菌表達(dá)制備獲得，分子量為20 kDa，共由184個氨基酸、552個核苷酸組成，有2對二硫鍵，無糖基化位點，不加任何修飾，與天然人源的內(nèi)皮抑素氨基酸序列相同，屬于抗血管生成療法中的腫瘤血管形成抑制劑類型?，F(xiàn)對本品的臨床期研

4、究結(jié)果報告如下。 1 資料與方法 1.1 病例選擇 健康受試者 入選標(biāo)準(zhǔn)：年齡1845歲，50 kg以上標(biāo)準(zhǔn)體重。無心、肝、腎及血液系統(tǒng)疾病史，試驗前臨床體檢、血常規(guī)、肝腎功能、心電圖檢查均為正常并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：體檢及各項檢查超過正常范圍者；年齡未滿18周歲或超過45周歲者，妊娠和哺乳期婦女；近4周內(nèi)參與其他臨床試驗者；長期服藥、吸煙、飲酒者；有藥物過敏者。 腫瘤患者 入選標(biāo)準(zhǔn)：有明確病理或組織學(xué)依據(jù)診為惡性腫瘤、因各種原因難以實施其他更有效治療者；1865歲，男女性別不限；ECOG體力狀況：01分；預(yù)期生存期超過3個月；血常規(guī)、肝腎功能基本正常，心電圖檢查均為正常，距上次化療至少

5、4周。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠和哺乳期婦女;血液系統(tǒng)疾?。粐?yán)重腦疾病，原發(fā)或轉(zhuǎn)移性腦瘤；4周內(nèi)參加過其他臨床試驗者；有藥物過敏史者；試驗中采用其他抗腫瘤藥物治療者。 1.2 試驗方法 藥物來源 重組人血管內(nèi)皮抑素注射液由江蘇吳中實業(yè)股份有限公司蘇州中凱生物制藥廠提供(生產(chǎn)批號： 20050901)，水針劑，15 mg/（15 ml支），2 8 冰箱避光保存。 給藥方法 （1）取出本品，注入250 ml生理鹽水中靜脈滴注，勻速滴注時間2 h。（1）單次給藥：按照臨床前試驗數(shù)據(jù)和臨床劑量遞增原則，設(shè)計4個劑量組，分別為30 mg/m2、60 mg/m2、120 mg/m2、180 mg/m2，最小劑量組為3

6、例，其余3組各8例。(2)連續(xù)給藥：選擇惡性腫瘤患者，設(shè)計3個劑量組，分別為10 mg/m2(10例)、20 mg/m2（3例）、30 mg/m2（3例），每組連續(xù)給藥28天，給藥結(jié)束后繼續(xù)觀察1周。（3）終止劑量升級的標(biāo)準(zhǔn)：如某組中出現(xiàn)1例劑量限制性毒性（DLT），還需在同一劑量組增加3例，在增加的病例中如未發(fā)現(xiàn)DLT，可升至下一個劑量組，如再出現(xiàn)1例以上DLT即終止試驗。在給予試驗設(shè)計的最大劑量仍未出現(xiàn)度及以上毒性反應(yīng)，研究者認(rèn)為該劑量范圍已經(jīng)可以滿足有效性研究的需要，此時也可終止試驗1。（4）伴隨用藥：試驗中如出現(xiàn)度以上不良反應(yīng)，應(yīng)給予積極的搶救及治療。試驗中可使用必要的藥物治療感染、出

7、血及其他伴隨疾病，但應(yīng)記錄在案。一般不宜預(yù)防性使用抗過敏及對出、凝血功能及心功能有明顯影響的藥物2。 1.3 觀察指標(biāo) 單次給藥組受試者給藥前、后測定心率、呼吸、血壓、脈搏、體溫，給藥后每2 h測定1次血壓、心率至24 h，并隨時記錄與用藥有關(guān)的不良反應(yīng)，治療前、治療后第3、7天測定血常規(guī)、凝血、二聚體檢查、肝腎功能、尿常規(guī)、心電圖。 多次給藥組腫瘤患者給藥前、后，每天測定心率、呼吸、血壓、脈搏、體溫，并進(jìn)行心電監(jiān)護(hù)至停藥后2 h，若給藥過程中出現(xiàn)心臟的不良反應(yīng)，行心電監(jiān)護(hù)及對癥處理，給藥前3天內(nèi)、給藥后3天、10天、17天、24天、31天測定血常規(guī)、凝血、二聚體檢查、肝腎功能、尿常規(guī)、心電圖

8、檢查。 1.4 不良反應(yīng)及療效評價標(biāo)準(zhǔn) 不良反應(yīng)按照美國國立癌癥研究所（NCI）制定的通用毒性評價標(biāo)準(zhǔn)（CTC）分為04級。療效根據(jù)2000年NCI提出的實體瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn)（RECIST）進(jìn)行3。 1.5 重組人血管內(nèi)皮抑素藥代動力學(xué)檢測 采血時間4：在單次給藥組的60 mg/m2、120 mg/m2、180 mg/m2劑量組進(jìn)行藥代動力學(xué)試驗，分別在給藥前、靜脈注射后1、5、15、30 min、1、2、4、8、12、24、48和72 h取靜脈血。多次給藥的10 mg/m2劑量組參加藥代試驗，第1、7次給藥前以及給藥后15、30、45 min，1、1.5、2、4、8、12和24 h。第3、5、

9、14、28次給藥前2 h（根據(jù)單次給藥峰濃度時間而定）和24 h。第28次給藥后48 h、72 h取靜脈血。每次采集靜脈血約3 ml，4 3000 r/min，離心10 min后取出血清，置-20 冰箱保存待測。采用美國R&D Systems公司重組人內(nèi)皮抑素為抗原免疫動物生成的多克隆抗體藥盒測定人血清中重組人血管內(nèi)皮抑素。 1.6 藥代動力學(xué)參數(shù)計算及統(tǒng)計學(xué)方法 用3p97實用藥代動力學(xué)計算程序及統(tǒng)計矩法估算藥代動力學(xué)參數(shù)，用梯形法計算藥-時曲線下面積AUC。同一受試者數(shù)據(jù)用配對t檢驗，不同組間用組間t檢驗。采用方差分析或2檢驗來比較人口學(xué)資料和其他基礎(chǔ)值指標(biāo)。計量資料行配對t檢驗，計數(shù)資料

10、行2檢驗。所有統(tǒng)計學(xué)計算采用Excel或SPSS統(tǒng)計軟件。 2 結(jié)果 2.1 耐受性試驗 單次給藥組 （1）入組情況：共納入健康受試者27例。其中，30 mg/m2劑量組3例，60 mg/m2、120 mg/m2、180 mg/m2劑量組各為8例，各劑量組受試者的年齡、身高和體重資料均具有可比性（P0.05)。（2）安全性結(jié)果：60 mg/m2劑量組受試者用藥后體溫、呼吸、心率及收縮壓的均值較用藥前高，經(jīng)配對t檢驗，差異有顯著性(P0.05)。（3）不良反應(yīng)結(jié)果：30 mg/m2和60 mg/m2劑量組在用藥前后，均未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。120 mg/m2劑量組出現(xiàn)度皮疹1例，在用藥后第1天，以

11、面部及雙上肢稍多，持續(xù)5天，未經(jīng)任何治療痊愈；度惡心伴腹瀉1例，度腹瀉1例，均在用藥結(jié)束后第4天恢復(fù)正常；180 mg/m2劑量組出現(xiàn)度腹瀉2例，用藥結(jié)束后第3天恢復(fù)正常。各劑量組均未出現(xiàn)血液學(xué)、生化及肝腎功能毒性。30 mg/m2劑量組中出現(xiàn)1例竇性心律不齊，60 mg/m2劑量組中出現(xiàn)3例竇性心律不齊。120、180 mg/m2劑量組中未見心電圖改變。見表1。表1 健康志愿者不同劑量人重組血管內(nèi)皮抑素治療后髓外不良反應(yīng) （例） 連續(xù)給藥組 入組情況：本組納入腫瘤受試者16例。其中10 mg/m2劑量組入選受試者10例，20、30 mg/m2劑量組各3例，未有脫落病例。 各劑量組患者的性別分

12、布相當(dāng)，年齡、身高和體重資料均相近。ECOG評分等無差異。（1）其中乳腺癌4例，大腸癌3例，腎癌2例，卵巢癌2例，胃癌、頜下腺癌、肺癌、肝癌、淋巴瘤各1例。（2）重組人血管內(nèi)皮抑素注射液臨床療效結(jié)果：16例患者中，可評價患者12例，MR 1例，SD 10例，PD 1例。（3）安全性結(jié)果：各劑量組受試者的生命體征用藥前后均保持穩(wěn)定，經(jīng)配對t檢驗，差異無顯著性(P0.05)。（4）不良反應(yīng)結(jié)果：各劑量組在用藥過程中及用藥后，血液學(xué)、血生化、肝腎功能未出現(xiàn)不良反應(yīng)。20 mg/m2劑量組中，出現(xiàn)1例級發(fā)熱病例，于給藥第410天發(fā)熱，常在每次輸液后2 h內(nèi)，考慮與用藥有關(guān)。10 mg/m2劑量組用藥后出現(xiàn)1例心肌缺血、1例出現(xiàn)室性期前收縮；20 mg/m2劑量組用藥后出現(xiàn)