無菌藥品包裝容器的密封性驗(yàn)證方案

1、XXMX項(xiàng)目方臬建議書無菌藥品包裝容器的密封性驗(yàn)證方案無菌藥品包裝容器的空封性驗(yàn)證方案制定人審核人批準(zhǔn)人日期日期日期生效日期修訂日期1 .概述：無菌藥品的容器應(yīng)能在整個(gè)有效期內(nèi)有完好的密封性，防止微生物的浸入。藥 品包材的設(shè)計(jì)及選擇要考察相互的配合情況。無菌容器/密封件系統(tǒng)的完整性測試可以在培 養(yǎng)基灌裝時(shí)進(jìn)行。2 .目的：評估產(chǎn)品包裝的密封性，以充分保護(hù)產(chǎn)品在儲存期的無菌狀態(tài)。3 .依據(jù)：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010修訂版：附錄力第九十五條無菌藥品包裝 容器的密封性應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證，以避免產(chǎn)品遭受污染。4 .責(zé)任：質(zhì)量部、生產(chǎn)部對本驗(yàn)證負(fù)責(zé)。5 .微生物浸入試驗(yàn)法驗(yàn)證密封完整性：往產(chǎn)品容器內(nèi)灌入培養(yǎng)

2、基并按照常規(guī)方式壓塞封蓋，滅菌后冷卻備用。將冷卻后的容 器倒置并將瓶口完全浸沒于高濃度dosCJV/mC）的運(yùn)動性菌液中，4小時(shí)后，將容器外 表面消毒并培養(yǎng)，看是否有挑戰(zhàn)性細(xì)菌在容器內(nèi)生長。多準(zhǔn)備一些灌裝培養(yǎng)基的樣品，在與產(chǎn)品相同地的貯存條件下貯存。在貯存的一定時(shí) 間間隔（12,24, 36和48個(gè)月等），取出部分樣品，進(jìn)行微生物浸入試驗(yàn)，以確定密封系 統(tǒng)在貯存期內(nèi)的有效性。6 .范圍：西林瓶、膠塞及鋁蓋的密封性驗(yàn)證，共有及2相/兩種規(guī)格。7 .用品：膽鹽乳糖培養(yǎng)基銅綠假單胞菌（幺7CC 9027） 乙酸異丙醇8 .實(shí)施：8.1 制備樣品：取已經(jīng)按相應(yīng)清洗滅菌操作規(guī)程制備好的西林瓶、膠塞及鋁塑

3、組合蓋150套，西林 瓶內(nèi)灌裝入已滅菌的膽鹽乳糖培養(yǎng)基，在正常生產(chǎn)線上抽真空、壓塞、軋蓋。將每一試樣品 倒轉(zhuǎn)，使培養(yǎng)基與西林瓶內(nèi)表面及膠塞充分接觸，在3。35豎立倒置培養(yǎng)14天，培養(yǎng)基 應(yīng)澄清，無菌落生長。8.2 制備微生物菌懸液：從銅綠假單胞菌（47CC9O27）的新鮮斜面上取培養(yǎng)物，分別接入含6根，無菌膽鹽乳 糖培養(yǎng)基的試管中，在3。35下培養(yǎng)824任將每管的培養(yǎng)物分別轉(zhuǎn)入含6oom相同 培養(yǎng)基的容器內(nèi)，于3。35下培養(yǎng)（約24小時(shí)），在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，能明顯見容器內(nèi)培養(yǎng) 基出現(xiàn)渾濁，計(jì)數(shù)，當(dāng)菌落數(shù)大于io$C尸n/租，時(shí)，停止培養(yǎng)，待用（在微生物侵入試驗(yàn)開 始，所用菌懸液濃度（活菌數(shù)）必須達(dá)

4、到】8.3 營養(yǎng)試驗(yàn)：8.4 該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖谴_認(rèn)膽鹽乳糖培養(yǎng)基對銅綠假單胞菌促菌生長能力。所有樣品培養(yǎng)14天均不長菌時(shí).，從上述8.1試驗(yàn)樣品中隨機(jī)取20個(gè)帶蓋試驗(yàn)樣品，每 個(gè)試驗(yàn)樣品內(nèi)接種loocyn銅綠假單胞菌。在3。35下培養(yǎng)7天，或培養(yǎng)至所有試樣品 都呈陽性結(jié)果。832結(jié)果判斷：若7天內(nèi)，所有接種銅綠假單胞菌的試驗(yàn)樣品中，微生物生長良好，則容器內(nèi)培養(yǎng)基 的促菌生長能力可判為合格。使用革蘭染色鏡檢，置于紫外燈下，培養(yǎng)基呈藍(lán)綠色熒光，則 確認(rèn)試驗(yàn)樣品容器內(nèi)生長的菌為接入的銅綠假單胞菌，即為陽性。若7天內(nèi)，所有接種銅綠假單胞菌的試樣品中，微生物生長條件不好或經(jīng)鑒別后受其 它菌種污染，則試驗(yàn)失敗

5、，需重新作營養(yǎng)試驗(yàn)。8.5 微生物侵入試驗(yàn):.38.4將銅綠假單胞菌（幺7as 9。27）的菌懸液倒入適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，從上述&】樣品中 取IOO只試驗(yàn)樣品倒置于菌懸液中，使試樣容器內(nèi)的培養(yǎng)基充分接觸封口內(nèi)表面，樣品的頸部 及封口的外表面應(yīng)完全浸泡在菌懸液中（如圖】所示）。待確認(rèn)密封口圖I微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)示意圖8.4.2將試驗(yàn)樣品在菌懸液中持續(xù)浸泡約46后，取出試驗(yàn)樣品，擦干容器外殘余的菌懸 液，其外表用含0.5%過乙酸的7。%異丙醇消毒五分鐘（注意不要破壞其密封口），放入塑料 袋中，置3。35c下培養(yǎng)7天。檢查試驗(yàn)樣品內(nèi)微生物生長情況，有生長記作“ + ”，無生 長記作“843陽性對照：陽

6、性對照試驗(yàn)樣品不經(jīng)菌懸液浸泡，其外表用含0.5%過乙酸的7。% 異丙醇消毒五分鐘后，接種io1OOCH7銅綠假單胞菌，進(jìn)行陽性對照試驗(yàn)。8.6 結(jié)果評價(jià)要求：營養(yǎng)試驗(yàn)和陽性對照試驗(yàn)都合格，微生物侵入試驗(yàn)才有效。挑戰(zhàn)試驗(yàn)中如有長菌，需記錄長菌的瓶數(shù)并須按下述要求作進(jìn)一步調(diào)查。仔細(xì)去除微生物生長的容器的蓋和塞，檢查容器封口是否有缺損，造成微生物侵入。將觀察到試驗(yàn)樣品封口的缺陷，采用拍照或其他適當(dāng)方式詳細(xì)記錄。如果任何挑戰(zhàn)試驗(yàn)中長菌的試驗(yàn)樣品不是由于容器封口明顯的物理性缺損所致，容器 密封性挑戰(zhàn)試驗(yàn)作失敗論。9注意事項(xiàng)：微生物侵入試驗(yàn)用菌懸液經(jīng)滅菌后丟棄。在培養(yǎng)期內(nèi)，當(dāng)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)任何帶蓋試樣品長菌時(shí)，則試驗(yàn)無效，須棄去全部試樣品,