五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀操作保養(yǎng)規(guī)程_第1頁(yè)
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1、ABX DX120全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀操作程序1.檢測(cè)原理1.1 RBC/PLT通過(guò)電阻抗變化原理測(cè)定RBC和PLT。這意味著血細(xì)胞通過(guò)池內(nèi)微孔時(shí)會(huì)產(chǎn)生電場(chǎng)。樣品稀釋在電解質(zhì)稀釋溶液里(電流導(dǎo)電場(chǎng)),混合后被真空吸引通過(guò)校準(zhǔn)孔的微孔。兩個(gè)電極置于微孔兩側(cè),恒定電流不斷流過(guò)兩電極間。當(dāng)血細(xì)胞通過(guò)微孔時(shí),它們?cè)趦呻姌O之間的電場(chǎng)內(nèi)產(chǎn)生電阻(阻抗)。測(cè)量細(xì)胞的電壓與細(xì)胞的尺寸成比例。由于電流是持續(xù)不變的,大細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生更大的電阻,小細(xì)胞電阻也小一些(即兩電極間的阻抗變化與細(xì)胞體積呈正比)。當(dāng)細(xì)胞通過(guò)微孔時(shí),電壓隨著脈沖振幅大小而變化。脈沖被放大、根據(jù)尺寸和閾值被引導(dǎo)、聚集、然后連同定標(biāo)系數(shù)進(jìn)行數(shù)學(xué)計(jì)算給出

2、RBC和PLT的最終數(shù)值。1.1.1結(jié)果:?jiǎn)挝惑w積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)定標(biāo)系數(shù)。1.1.2直方圖:a RBC: 分布在30fl到300fl間的256通道上。b PLT:分布在2fl到活動(dòng)閾值間的256通道上。該閾值根據(jù)分析區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)的小細(xì)胞個(gè)數(shù)而移動(dòng)。1.2 HGB紅細(xì)胞溶解后釋放的血紅蛋白與氰化鉀結(jié)合形成氰化高鐵血紅蛋白化合物。在550nm波長(zhǎng)下,利用分光光度法測(cè)出吸光度,測(cè)得的吸光度值定標(biāo)系數(shù)=血紅蛋白數(shù)值。在閉管自動(dòng)進(jìn)樣循環(huán)中,兩次計(jì)數(shù)池沖洗之間做一個(gè)HGB空白,與上次的空白值合并得出最終HGB的空白值(1/5新值,4/5上一次的空白值)。在手工模式下,每個(gè)循環(huán)都做HGB空白。 1.2.1結(jié)果:H

3、GB=Log(空白值/樣品值)K1.3 MCV、MCH和MCHC 1.3.1 MCV(平均紅細(xì)胞體積)由RBC直方圖直接計(jì)算得出。 1.3.2 MCH(紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量)根據(jù)HGB值和RBC結(jié)果計(jì)算。結(jié)果:MCH(pg)=(HGB/RBC)10 1.3.3 MCHC(紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度)根據(jù)HGB值和HCT值計(jì)算。結(jié)果:MCHC(g/dL)=(HGB/HCT)1001.4 HCT細(xì)胞通過(guò)校準(zhǔn)孔的微孔產(chǎn)生的脈沖高度與所分析的RBC體積成正比,HCT是利用與MCV相關(guān)的函數(shù)測(cè)得。1.5 RDW 研究RBC分布可以檢測(cè)與RBC大小不同相關(guān)的RBC異常。RDW(紅細(xì)胞分布寬度)讓你根據(jù)細(xì)胞數(shù)

4、目和平均體積去研究曲線(xiàn)寬度。 1.5.1結(jié)果:RDW=KSD/MCV 其中 K=系統(tǒng)常數(shù) SD=通過(guò)對(duì)細(xì)胞分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)研究得出的標(biāo)準(zhǔn)差 MCV=平均RBC體積。1.6 MPV研究血小板直方圖可直接得出MPV(平均血小板體積)。1.7 PCT根據(jù)下列公式計(jì)算 PCT%=(PLTMPV)/100001.8 PDWPDW(血小板分布寬度)根據(jù)PLT直方圖來(lái)計(jì)算。從2fl開(kāi)始的占PLT總數(shù)15%的閾值S1與從活動(dòng)閾值開(kāi)始向后的占PLT總數(shù)15%的閾值S2之間的曲線(xiàn)寬度代表PDW。1.9 WBC 計(jì)數(shù)通道:檢測(cè)原理與RBC計(jì)數(shù)方法相同。WBC計(jì)數(shù)在WBC/HGB通道內(nèi)進(jìn)行,信號(hào)處理設(shè)備在WBC和PLT(

5、和已溶解的RBC)之間置一電子閾值。 1.9.1結(jié)果:?jiǎn)挝惑w積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)定標(biāo)系數(shù)。計(jì)數(shù)結(jié)果與BASO通道和LMNE通道內(nèi)的測(cè)量結(jié)果作對(duì)比,以絕對(duì)值和百分?jǐn)?shù)形式給出完整的分類(lèi)結(jié)果。1.10 BASO檢測(cè)原理與RBC的方法相同。利用特定的溶血?jiǎng)ˋBX嗜堿溶血?jiǎng)┰讵?dú)立的BASO通道內(nèi)進(jìn)行計(jì)數(shù)。血樣與ABX嗜堿溶血?jiǎng)┓磻?yīng)后,除了嗜堿性粒細(xì)胞之外,全部白細(xì)胞失去細(xì)胞膜和胞漿,將嗜堿性粒細(xì)胞與其他白細(xì)胞裸核分開(kāi)將變得十分容易。從體積坐標(biāo)軸開(kāi)始到閾值1之間可見(jiàn)細(xì)胞溶解后剩余的碎片,從閾值2到直方圖尾部是嗜堿性粒細(xì)胞。WBC總數(shù)包括全部裸核數(shù)目加上嗜堿性粒細(xì)胞。嗜堿性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)根據(jù)閾值2和上限間的細(xì)胞數(shù)

6、計(jì)算。1.10.1結(jié)果:1.10.1.1計(jì)數(shù)細(xì)胞(BASO+WBC裸核)總數(shù)=單位體積細(xì)胞數(shù)定標(biāo)數(shù)100%;1.10.1.2 BASO通道的結(jié)果也與其它通道(WBC和LMNE)的結(jié)果作對(duì)比,以絕對(duì)值和百分?jǐn)?shù)形式給出完整的分類(lèi)結(jié)果。1.11雙矩陣 雙矩陣基于三條原理: DHSS(雙鞘流)原理(ABX專(zhuān)利) 體積檢測(cè):阻抗變化 細(xì)胞化學(xué)法染色和吸光度測(cè)量。采樣閾LMNE管路內(nèi)的全血樣本注入LMNE池,與ABX嗜酸染色劑混合,此試劑溶解掉RBC,并使WBC 穩(wěn)定在原始狀態(tài)并分別染色。在加熱池反應(yīng)/稀釋后在進(jìn)入測(cè)量池分析之前,溶液被吸引送到光學(xué)反應(yīng)通道。在雙層鞘流作用下,該溶液通過(guò)LMNE流式細(xì)胞通道

7、的光窗和60um微孔,每個(gè)細(xì)胞均被檢測(cè)吸光度(細(xì)胞化學(xué)法)和阻抗(體積)。通過(guò)上述測(cè)量以體積為X軸,以吸光度為Y軸繪制WBC散點(diǎn)圖。2.試劑2.1 稀釋液(DILUENT)2.1.1試劑品牌:ABX,包裝規(guī)格,20L.2.1.2儲(chǔ)存條件:5-30避光保存。2.1.3使用期限:有效期內(nèi)使用,試劑開(kāi)封后科可穩(wěn)定60d。2.1.4安全事項(xiàng):避免和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,必要時(shí)尋求醫(yī)療救助。2.1.5注意事項(xiàng):注意防塵。2.2 嗜堿溶血?jiǎng)˙ASOLYSE)2.2.1試劑品牌:ABX;包裝規(guī)格,5L.2.2.2儲(chǔ)存條件:18-25避光保存。2.2.3使用期限:有效期內(nèi)使用,試劑開(kāi)封后

8、科可穩(wěn)定60d。2.2.4安全事項(xiàng):避免和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,必要時(shí)尋求醫(yī)療救助。2.2.5注意事項(xiàng):在試劑使用前須確認(rèn)是否有污染或顏色變化,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),須速更換。若試劑出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,用前將其解凍充分混勻后使用。2.3嗜酸溶血?jiǎng)↙EUCODIFF)2.3.1試劑品牌:ABX,包裝規(guī)格1L。2.3.2儲(chǔ)存條件:18-25避光保存。2.3.3使用期限:有效期內(nèi)使用,試劑開(kāi)封后科可穩(wěn)定60d。2.3.4安全事項(xiàng):避免和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,必要時(shí)尋求醫(yī)療救助。2.3.5注意事項(xiàng):在試劑使用前須確認(rèn)是否有污染或顏色變化,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),須速更換。若試劑出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,

9、用前將其解凍充分混勻后使用。2.4血紅蛋白溶血?jiǎng)↙YSEBIO)2.4.1試劑品牌:ABX,包裝規(guī)格1L.2.4.2儲(chǔ)存條件:15-30避光保存。2.4.3使用期限:有效期內(nèi)使用,試劑開(kāi)封后科可穩(wěn)定60d。2.4.4安全事項(xiàng):避免和眼睛、皮膚接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,必要時(shí)尋求醫(yī)療救助。2.4.5注意事項(xiàng):在試劑使用前須確認(rèn)是否有污染或顏色變化,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),須速更換。若試劑出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象,用前將其解凍充分混勻后使用。2.5清洗液(CLEANER)2.5.1試劑品牌:ABX,包裝規(guī)格1L。2.5.2儲(chǔ)存條件:5-30避光保存。2.5.3使用期限:有效期內(nèi)使用。2.5.4安全事項(xiàng):本品為強(qiáng)堿性

10、洗滌劑,避免和眼睛、皮膚、衣物接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,必要時(shí)尋求醫(yī)療救助。2.5.5注意事項(xiàng):若試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須速更換。若試劑發(fā)生凝固,須替換。2.6網(wǎng)織紅細(xì)胞染液(Fluoyte)2.6.1試劑品牌:ABX,包裝規(guī)格0.5L。2.6.2儲(chǔ)存條件:18-25避光保存.2.6.3使用期限:有效期內(nèi)使用。2.6.4安全事項(xiàng):避免和眼睛、皮膚、衣物接觸,一旦接觸,用大量清水沖洗,必要時(shí)尋求醫(yī)療救助。2.6.5注意事項(xiàng):若試劑有任何污損、渾濁、不穩(wěn)定或顏色變化的跡象,須速更換。若試劑發(fā)生凝固,須替換。2.7校準(zhǔn)品及質(zhì)控品2.7.1試劑品牌:ABX。2.7.2儲(chǔ)存

11、條件:2-8垂直保存,避免冷凍。2.7.3使用期限:有效期內(nèi)使用,其中校準(zhǔn)品開(kāi)封后必須4h內(nèi)使用,如未用完,應(yīng)廢棄剩余部分。2.7.4注意事項(xiàng):校準(zhǔn)品上清液有輕微溶血現(xiàn)象是正?,F(xiàn)象。溫度超出規(guī)定范圍可導(dǎo)致嚴(yán)重溶血,校準(zhǔn)品平均值超出測(cè)試限,并且實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控歷史數(shù)據(jù)和室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)表示良好的結(jié)果時(shí),可視為本校準(zhǔn)品失效。應(yīng)更換校準(zhǔn)品,重新校準(zhǔn)。2.8試劑的更換2.8.1更換試劑以后,先進(jìn)行空白檢查,確認(rèn)空白計(jì)數(shù)符合要求(WBC0.1109/L;RBC0.021012/L;HGB1g/L;PLT5.0109/L),再開(kāi)始進(jìn)行樣本分析2.8.2以上所有試劑開(kāi)封后應(yīng)在外包裝注明啟用日期。2.8.3進(jìn)入檢驗(yàn)L

12、IS系統(tǒng)試劑出庫(kù)登記。3.校準(zhǔn)程序 3.1校準(zhǔn)周期 正常展開(kāi)工作半年校準(zhǔn)一次。儀器投入使用前;更換配件維修后,可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果有影響時(shí);室內(nèi)質(zhì)控顯示系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果有漂移時(shí);比對(duì)結(jié)果超出允許誤差時(shí)可校準(zhǔn)。但校準(zhǔn)應(yīng)被視為故障排除步驟中的最后一步,執(zhí)行不必要的校準(zhǔn)會(huì)掩蓋儀器性能中存在的潛在問(wèn)題。 3.2校準(zhǔn)前檢查 3.2.1檢查校準(zhǔn)品批號(hào)和有效期。使用配套試劑,試劑必須充足。如果室溫超過(guò)30,不能進(jìn)行校準(zhǔn),在校準(zhǔn)前30分鐘打開(kāi)儀器電源。 3.2.2確認(rèn)是否按廠(chǎng)家建議進(jìn)行儀器保養(yǎng)。盡可能不要在進(jìn)行保養(yǎng)或試劑更換的當(dāng)天進(jìn)行校準(zhǔn)或校準(zhǔn)驗(yàn)證。 3.2.3瀏覽最近的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù),確保分析儀性能穩(wěn)定。 3.2.4檢測(cè)

13、手工進(jìn)樣模式及自動(dòng)進(jìn)樣模式的精確性:各取1份新鮮全血標(biāo)本進(jìn)行儀器的精密度試驗(yàn),連續(xù)檢測(cè)11次,統(tǒng)計(jì)第211次結(jié)果的CV值。3.2.5進(jìn)行自動(dòng)清洗,確認(rèn)空白計(jì)數(shù)沒(méi)有超出規(guī)定范圍。3.3校準(zhǔn)方法3.3.1校準(zhǔn)ABX DF120手工進(jìn)樣模式3.3.1.1校準(zhǔn)品的準(zhǔn)備a) 從冰箱或包裝取出1瓶校準(zhǔn)品,放置30分鐘使其溫度升至室溫(18-25)。b) 保持瓶子直立的狀態(tài)放在雙手中輕輕搓動(dòng)20秒,然后將其顛倒后再搓動(dòng)20秒以上。c) 輕輕來(lái)回倒轉(zhuǎn)12次使其混合均勻,確保所有細(xì)胞都已經(jīng)懸浮起來(lái)。d) 進(jìn)行分析前在平面上靜置瓶子15秒,使泡沫散去。3.3.1.2校準(zhǔn)品檢測(cè):在手工進(jìn)樣模式下連續(xù)進(jìn)行11次分析,

14、在分析當(dāng)中不要混勻校準(zhǔn)品。分析結(jié)束后,使用潔凈無(wú)屑的紗布擦拭干凈瓶子及瓶蓋螺紋,之后蓋上瓶蓋。3.3.1.3平均值的計(jì)算及校核數(shù)據(jù):去除第1次分析結(jié)果,計(jì)算其余10次分析結(jié)果的平均值,確認(rèn)各參數(shù)的平均值與靶值差異絕對(duì)值都在可接受范圍內(nèi)(WBC1.5%,RBC1.0%HGB1.0%HCT2.0%PLT3.0%)。如果某個(gè)參數(shù)的平均值與靶值差異絕對(duì)值超出了可接受范圍,并且內(nèi)部質(zhì)控和(或)室間質(zhì)評(píng)的結(jié)果也顯示出類(lèi)似偏差,表示需要重新校準(zhǔn)分析儀。計(jì)算新的校準(zhǔn)設(shè)定值:校準(zhǔn)設(shè)定值的修改是非常關(guān)鍵的操作,只能由ABX現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)服務(wù)代表進(jìn)行。校準(zhǔn)后用另一只校準(zhǔn)品連續(xù)測(cè)定11次,計(jì)算第211次檢測(cè)結(jié)果均值與靶值的

15、差異百分比絕對(duì)值是否在可接受范圍內(nèi)(WBC1.5%,RBC1.0%HGB1.0%HCT2.0%PLT3.0%)。3.3.2校準(zhǔn)ABX DF120自動(dòng)進(jìn)樣模式3.3.2.1校準(zhǔn)前準(zhǔn)備a) 校準(zhǔn)前確認(rèn)ABX DF120手工進(jìn)樣模式已被正確校準(zhǔn)。b) 新鮮全血標(biāo)本的準(zhǔn)備:選擇同血型各參數(shù)均正常的新鮮全血標(biāo)本多份混合成約22ml全血標(biāo)本,分裝4ml/管,共5管,分別用于該份全血標(biāo)本的定值,ABX DF120自動(dòng)進(jìn)樣模式校準(zhǔn),ABX DF120自動(dòng)進(jìn)樣模式校準(zhǔn)驗(yàn)證,ABX DF120手工進(jìn)樣模式校準(zhǔn),ABX DF120手工進(jìn)樣模式校準(zhǔn)驗(yàn)證,標(biāo)本盡量在2小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),最長(zhǎng)不能超過(guò)4小時(shí)。3.3.2.2樣

16、品的檢測(cè)及計(jì)算:先取上述標(biāo)本1份在靶儀器連續(xù)檢測(cè)11次,計(jì)算第211次各參數(shù)檢測(cè)結(jié)果均值,以此為該新鮮全血標(biāo)本的靶值;再用其他份相同的新鮮全血標(biāo)本在要校準(zhǔn)模式上連續(xù)檢測(cè)11次,計(jì)算第211次檢測(cè)結(jié)果均值與靶值的差異百分比絕對(duì)值是否在可接受范圍內(nèi)(WBC1.5%,RBC1.0%HGB1.0%HCT2.0%PLT3.0%),超出范圍的參數(shù)需做校準(zhǔn)。計(jì)算新的校準(zhǔn)設(shè)定值:校準(zhǔn)設(shè)定值的修改是非常關(guān)鍵的操作,只能由ABX現(xiàn)場(chǎng)技術(shù)服務(wù)代表進(jìn)行。校準(zhǔn)后用其他份相同的新鮮全血標(biāo)本連續(xù)測(cè)定11次,計(jì)算第211次檢測(cè)結(jié)果均值與靶值的差異百分比絕對(duì)值是否在可接受范圍內(nèi)(WBC1.5%,RBC1.0%HGB1.0%HC

17、T2.0%PLT3.0%)。3.4校準(zhǔn)后程序:每次校準(zhǔn)完后立即做質(zhì)控比對(duì),質(zhì)控應(yīng)在控。4. 儀器的常規(guī)操作4.1開(kāi)機(jī):打開(kāi)儀器后部電源開(kāi)關(guān),待儀器屏幕右上角出現(xiàn)“ABX”時(shí),-enter-startUp-按y清除工作列表按n不清除-Enter,儀器開(kāi)機(jī)循環(huán)管路自動(dòng)清洗模式,如果空白值符合下列條件,表示啟動(dòng)通過(guò):WBC0.1109/L;RBC0.021012/L;HGB1g/L;PLT5.0109/L。4.2查看試劑量或更換試劑:menus-4-4-2,儀器屏幕上顯示試劑量,若試劑量不足,需更換試劑,按F1用機(jī)子上紅外掃描儀掃描試劑條碼-成功裝好試劑后-enter-escOther cycles

18、-灌注相應(yīng)的試劑。4.3批量做標(biāo)本:將樣品架裝好標(biāo)本放入進(jìn)樣器中,點(diǎn)擊stark rack(注意:手工進(jìn)樣針處的門(mén)必須處于關(guān)閉狀態(tài)),儀器自動(dòng)分析。4.4手工做標(biāo)本:將標(biāo)本手動(dòng)混勻,置于手動(dòng)進(jìn)樣針處,使進(jìn)樣針沒(méi)入液面下足夠的位置(儀器需要樣本量130ul/每次)觸動(dòng)吸樣開(kāi)關(guān),聽(tīng)到“嘟嘟”聲后移開(kāi)樣本,儀器自動(dòng)分析。4.5批量檢測(cè)時(shí)插入急診:點(diǎn)擊rack stop/start,待儀器停止批量時(shí)打開(kāi)手動(dòng)進(jìn)樣門(mén)做急診樣本,步驟同4.4,完成后關(guān)上手動(dòng)進(jìn)樣門(mén)點(diǎn)擊stark rack,儀器恢復(fù)批量檢測(cè)。4.6強(qiáng)制做標(biāo)本模式:標(biāo)本HGB含量低于40g/L時(shí),結(jié)果有可能做不出,需將儀器調(diào)成強(qiáng)制做標(biāo)本模式,步

19、驟:點(diǎn)擊worklist-鍵盤(pán)上的end鍵(將光標(biāo)切換到最后的位置)-空格鍵打鉤-將標(biāo)本手動(dòng)混勻,置于手動(dòng)進(jìn)樣針處,使進(jìn)樣針沒(méi)入液面下足夠的位置(儀器需要樣本量130ul/每次)-觸動(dòng)吸樣開(kāi)關(guān)-待進(jìn)樣針上端的指示燈開(kāi)始數(shù)3個(gè)數(shù)(大概3秒)后再觸動(dòng)吸樣開(kāi)關(guān)1下-之后移開(kāi)標(biāo)本。4.7手工復(fù)查:worklist-光標(biāo)上下移動(dòng)至需復(fù)查樣本號(hào)-手動(dòng)做標(biāo)本(步驟同4.4)-完成測(cè)試后,原來(lái)的結(jié)果將被覆蓋。4.8網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)步驟:4.8.1首先更換網(wǎng)織紅細(xì)胞試劑-儀器主界面點(diǎn)other cycles-點(diǎn)E(fluocyte priming)更換試劑4.9結(jié)果傳送及審核4.9.1結(jié)果傳送:標(biāo)本檢測(cè)完畢,結(jié)果

20、設(shè)定為自動(dòng)傳輸?shù)絃IS系統(tǒng),當(dāng)數(shù)據(jù)不能正常接收時(shí),需手動(dòng)傳輸結(jié)果:memeroy-上下光標(biāo)選擇到要傳的結(jié)果-點(diǎn)擊空格鍵打鉤-F10-3,儀器重新自動(dòng)傳輸結(jié)果。4.9.2結(jié)果審核:在LIS系統(tǒng)上根據(jù)圖像及數(shù)據(jù)信息進(jìn)行結(jié)果的審核,對(duì)符合推片鏡檢的標(biāo)本要通過(guò)人工鏡檢血涂片來(lái)分析結(jié)果,并在LIS系統(tǒng)的備注欄內(nèi)注明鏡檢情況,并保存在LIS系統(tǒng)血液超高倍圖文報(bào)告里面。4.10標(biāo)本復(fù)查(重新測(cè)定)規(guī)則.方法及顯微鏡復(fù)檢規(guī)則4.10.1含較高冷凝素的標(biāo)本:1)判斷方法:審核測(cè)定結(jié)果時(shí),發(fā)現(xiàn)RBC和HGB不成常規(guī)比例,MCV常大于100Fl,MCH常大于10pg,MCHC常大于380g/L。更重要的是,輕輕傾斜

21、標(biāo)本就會(huì)發(fā)現(xiàn)管壁或多或少的顆粒狀沉淀物(常見(jiàn)于室溫較低的冬天)。2)復(fù)查方法:將該份標(biāo)本橡皮頭蓋嚴(yán),放入37水浴恒溫箱中孵育1520分鐘,快速混勻后立即上機(jī)檢測(cè),同時(shí)制備血涂片1張,顯微鏡確認(rèn)復(fù)查后的測(cè)定結(jié)果,如果符合,即可發(fā)出該報(bào)告,如果不符合,應(yīng)按含很高冷凝素的標(biāo)本復(fù)查方法執(zhí)行。4.10.2含很高冷凝素/高球蛋白的標(biāo)本1)判斷方法:審核測(cè)定結(jié)果時(shí),發(fā)現(xiàn)測(cè)定結(jié)果非常異常,甚至有些項(xiàng)目為0,查看標(biāo)本時(shí),發(fā)現(xiàn)標(biāo)本呈半流體或膠凍狀。此點(diǎn)應(yīng)注意與標(biāo)本凝塊區(qū)別。2)復(fù)查方法:a.將相同體積稀釋液加入到標(biāo)本中,然后將該標(biāo)本橡皮頭蓋嚴(yán),放入37水浴恒溫箱孵育1520分鐘,快速混勻后立即上機(jī)檢測(cè),同時(shí)制備血

22、涂片1張,顯微鏡確認(rèn)復(fù)查后的測(cè)定結(jié)果,如果符合,即可發(fā)出該報(bào)告。b.如果“a”不能發(fā)出報(bào)告,應(yīng)重新將標(biāo)本密封后放入37水浴恒溫箱中保溫約10分鐘,快速混勻后分裝成2管,1管備用,另1管重復(fù)步驟“a”,檢測(cè)結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)“4”。4.10.3超過(guò)儀器檢測(cè)線(xiàn)性的標(biāo)本1)判斷方法:儀器分析結(jié)果WBC,RBC,HGB,HCT,PLT中任何一項(xiàng)的數(shù)值大于該儀器中規(guī)定的檢測(cè)線(xiàn)性,需稀釋后重測(cè)。2)復(fù)查方法a.取生理鹽水作為稀釋劑,用定量毛細(xì)吸管稀釋?zhuān)畲笙♂尡稊?shù)“4”稀釋標(biāo)本,然后上機(jī)檢測(cè),換算稀釋倍數(shù)后,替換其超過(guò)檢測(cè)線(xiàn)性項(xiàng)目的結(jié)果。為了減少稀釋誤差,只需替換超過(guò)檢測(cè)線(xiàn)性的結(jié)果,其余項(xiàng)目保留原來(lái)測(cè)定結(jié)果

23、。b.如果WBC100.0109/L或超過(guò)檢測(cè)線(xiàn)性,應(yīng)同時(shí)校正RBC,HGBRBC校正公式:校正后RBC=校正前RBC1012/L-(WBC109/L1000).當(dāng)WBC100.0109/L時(shí),首先應(yīng)校正RBC,然后重新計(jì)算HCT,MCH,MCHC,如果MCHC小于380g/L,HGB的“偏差”可以接受,不必校正HGB,如果MCHC大于380g/L, ,HGB的“偏差”不能接受,應(yīng)按下述步驟校正HGB。HGB校正方法:將原來(lái)標(biāo)本2500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘后,用吸管盡量吸出“WBC”層,不能觸及“RBC”層,然后加入同等體積的生理鹽水,混勻后再次檢測(cè)標(biāo)本,只取“HGB”檢測(cè)結(jié)果,重新計(jì)算其MC

24、H,MCHC后方能發(fā)出報(bào)告。4.10.4需顯微鏡復(fù)檢標(biāo)本:顯微鏡復(fù)檢規(guī)則見(jiàn)下表檢驗(yàn)項(xiàng)目復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)復(fù)檢要求PLT首次PLT500109/L或50109/L(齒狀波明顯,尾部抬高大于峰值20%)涂片鏡檢,如結(jié)果不符,人工計(jì)數(shù)RBCRBC直方圖出現(xiàn)雙峰或多峰涂片鏡檢RBC儀器提示eryt(有核RBC)涂片鏡檢,如發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞,應(yīng)人工分類(lèi)計(jì)數(shù)并校正WBC數(shù),校正公式為:校正后WBC數(shù)=校正前WBC數(shù)100(100+分類(lèi)100個(gè)白細(xì)胞遇到的有核紅細(xì)胞總數(shù))WBC首次WBC30109/L或2.5109/L涂片鏡檢,如結(jié)果不符,人工計(jì)數(shù)WBC儀器報(bào)警left shit(核左移)涂片鏡檢MCV首次MCV120

25、fL或60fL涂片鏡檢MCHCMCHC380g/L檢查標(biāo)本有無(wú)脂血,溶血,標(biāo)本量或涂片鏡檢RDW首次RDW22%涂片鏡檢異型淋巴細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞5%涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)巨大不成熟細(xì)胞巨大不成熟細(xì)胞3%涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)中性粒細(xì)胞首次中性粒細(xì)胞90%涂片鏡檢單核細(xì)胞首次單核細(xì)胞15%涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)淋巴細(xì)胞首次淋巴細(xì)胞50%(成人)或70%(兒童)涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)嗜酸性粒細(xì)胞首次嗜酸性粒細(xì)胞15%涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)嗜堿性粒細(xì)胞首次嗜堿性粒細(xì)胞3%涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)其他首次新生兒標(biāo)本涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)其他未分類(lèi)或分類(lèi)不全標(biāo)本涂片鏡檢,不符應(yīng)人工分類(lèi)其他明

26、確為血液病患者或服務(wù)對(duì)象要求人工鏡檢分類(lèi)的標(biāo)本涂片鏡檢5. 質(zhì)控程序5.1質(zhì)控參數(shù)的設(shè)定:在LIS系統(tǒng)里面,進(jìn)入質(zhì)控監(jiān)測(cè)畫(huà)面,點(diǎn)擊相應(yīng)選項(xiàng)進(jìn)行質(zhì)控水平,質(zhì)控品批號(hào),有效期,項(xiàng)目靶值,標(biāo)準(zhǔn)差,變異系數(shù)等內(nèi)容的輸入。5.2質(zhì)控標(biāo)本的檢測(cè)5.2.1質(zhì)控品的準(zhǔn)備:從冰箱或包裝盒內(nèi)拿出質(zhì)控品,檢查有效期及狀況(如極度溶血或過(guò)期,應(yīng)及時(shí)更換),在室溫平衡15分鐘,期間不能混勻,避免光照,然后將質(zhì)控品垂直置于兩手掌中前后搓勻20秒,再將質(zhì)控品倒轉(zhuǎn)后垂直置于兩手掌中前后搓勻20秒,輕輕顛倒混勻10次,繼續(xù)上述操作直到細(xì)胞完全懸浮起來(lái)(最少3次,大約2分鐘)。5.2.2質(zhì)控品上機(jī)檢測(cè):將已搖勻的質(zhì)控品按標(biāo)本檢測(cè)

27、方法手動(dòng)進(jìn)樣上機(jī)檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果傳輸?shù)絃IS系統(tǒng)內(nèi)設(shè)定為相應(yīng)水平的質(zhì)控結(jié)果。5.3手工進(jìn)樣模式與自動(dòng)進(jìn)樣模式驗(yàn)證:每日隨機(jī)取1份新鮮全血標(biāo)本進(jìn)行手工進(jìn)樣模式與自動(dòng)進(jìn)樣模式結(jié)果比對(duì),以手工進(jìn)樣模式檢測(cè)結(jié)果為靶值,通過(guò)公式來(lái)計(jì)算WBC,RBC,HGB,HCT,MCV,PLT等參數(shù)的偏倚,結(jié)果在允許誤差范圍內(nèi)為符合比對(duì)要求,其誤差范圍為(WBC7.5%,RBC3.0%HGB3.0%HCT3.0%PLT15.0% MCV3.0%),驗(yàn)證結(jié)果輸入電子表格文檔中保存。5.4兩臺(tái)儀器間的比對(duì):每日隨機(jī)取1份新鮮全血標(biāo)本在ABX DF120儀器上進(jìn)行手工進(jìn)樣模式與自動(dòng)進(jìn)樣模式結(jié)果比對(duì)后,再用同份標(biāo)本在另1臺(tái)AB

28、X DX120儀器上進(jìn)行手工進(jìn)樣模式與自動(dòng)進(jìn)樣模式檢測(cè),兩臺(tái)儀器檢測(cè)結(jié)果比對(duì),通過(guò)公式來(lái)計(jì)算WBC,RBC,HGB,HCT,MCV,PLT等參數(shù)的偏倚,結(jié)果在允許誤差范圍內(nèi)為符合比對(duì)要求,其誤差范圍為(WBC7.5%,RBC3.0%HGB3.0%HCT3.0%PLT15.0% MCV3.0%),比對(duì)結(jié)果輸入電子表格文檔中保存。6.性能參數(shù)ABX DF120線(xiàn)性范圍和不精密度見(jiàn)下表 檢驗(yàn)項(xiàng)目線(xiàn)性范圍不精密度WBC(0100)109/L3.0%RBC(08.00)1012/L1.5%HGB(0250)g/L1.0%HCT(060.0)%1.5%PLT(01000)109/L15%7.儀器保養(yǎng)7.1

29、每日保養(yǎng)7.1.1每天上班前用濃縮清洗液清洗儀器1次,然后執(zhí)行1次start up,各項(xiàng)參數(shù)空白通過(guò)方能進(jìn)行日常工作,下班前執(zhí)行start down,儀器自動(dòng)清洗完畢后關(guān)掉電源。7.2每周保養(yǎng)7.2.1自動(dòng)濃縮清洗:RBC池,WBC池,BASO池7.2.1.1準(zhǔn)備工作:備好5ml注射器,4%次氯酸鈉濃縮清洗溶液,打開(kāi)儀器外殼,排空RBC,WBC,BASO池,按下menuos-3-8-2-1,提升儀器壓力。7.2.1.2清洗RBC池:打開(kāi)RBC池上蓋,用注射器吸取5ml濃縮清洗液到RBC池,重新蓋好蓋子,按下22#閥15秒,模擬計(jì)數(shù)過(guò)程;然后同時(shí)按下42#和22#閥,對(duì)RBC池進(jìn)行反沖,持續(xù)時(shí)間

30、大約10秒,放置儀器10分鐘以上。7.2.1.3清洗WBC池:松開(kāi)WBC/HGB池保護(hù)罩上螺絲,取下保護(hù)罩,用注射器吸取2ml濃縮清洗液到WBC/HGB池,重新蓋好蓋子,按下23#閥15秒,模擬計(jì)數(shù)過(guò)程;然后同時(shí)按下42#和22#閥,對(duì)RBC池進(jìn)行反沖,持續(xù)時(shí)間大約5秒,再蓋上WBC/HGB池保護(hù)罩,擰緊螺絲,放置儀器10分鐘以上。7.2.1.4清洗BASO池:打開(kāi)BASO池上蓋,用注射器吸取5ml濃縮清洗液到BASO池,按40#閥排出到剩余3/4的濃縮清洗液,重新蓋好蓋子,按下24#閥15秒,模擬計(jì)數(shù)過(guò)程,然后同時(shí)按下42#和24#閥,對(duì)RBC池進(jìn)行反沖,持續(xù)時(shí)間大約10秒,放置儀器10分鐘以上。7.2.1.5以上各池子濃縮清洗完

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