醛酮類化合物檢測方法

1、醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法中華民國898月29日（89）環(huán)署檢字第48966號(hào)公告自中華民國8911月29日起實(shí)施NIEA R502.10C中華民國913月5日 環(huán)署檢字第0910014627號(hào)公告修正為NIEA R502.11C一、方法概要本方法用以檢測非氣體基質(zhì)中具游醛酮基 (free carbonyl) 化合物。固態(tài)樣品萃取液或水樣經(jīng)過后，在 40 下與 2,4-二硝基苯胼(2,4-dinitrophenylhydrazine, DNPH) 反應(yīng)，生成相對(duì)應(yīng)之 DNPH 衍生物，經(jīng) C18 管柱萃取或二氯甲烷液相液相萃取及濃縮后，取適當(dāng)體積注入高效液相層析儀 (HPLC) 。使用

2、逆相層析管柱及梯沖提分出各種醛與酮之 DNPH 衍生物，用紫外光偵測器在 360 nm 之波長測其吸收強(qiáng)，進(jìn)目標(biāo)待測物的確認(rèn)與定。二、適用范圍（一）本方法適用于水樣、土壤、廢棄物、及毒性化學(xué)物質(zhì)樣品檢測。各目標(biāo)待測物出如下：（二）方法偵測極限在表一及表二。視樣品基質(zhì)干擾情形及步驟中所使用的樣品體積，各樣品的方法偵測極限，可能與表中所之值同。三、干擾（一）方法的干擾可能源自于溶劑、試劑、玻璃器皿和樣品處用設(shè)備的污染，導(dǎo)致隨機(jī)干擾，或使層析圖譜的基線升高，因此必須使用相同的檢測條件設(shè)定，依七、（四）節(jié)步驟執(zhí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)試劑及器皿之方法空白檢測，以確定無干擾物存在。待測物 CAS No.a甲醛(Form

3、aldehyde) 50-00-0乙醛(Acetaldehyde) 75-07-0丙醛(Propanal, Propionaldehyde) 123-38-6巴豆醛(Crotonaldehyde) 123-73-9丁醛(Butanal, Butyraldehyde) 123-72-8環(huán)己酮(Cyclohexanone) 108-94-1戊醛(Pentanal, Valeraldehyde) 110-62-3己醛(Hexanal, Hexaldehyde) 66-25-1庚醛(Heptanal) 111-71-7辛醛(Octanal) 124-13-0壬醛(Nonanal) 124-19-6癸醛

4、(Decanal) 112-31-2注：a 化學(xué)文摘社登記號(hào)碼。醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 1 頁，共 20 頁1.玻璃器皿必須絕對(duì)潔凈，使用后必須即以最后所使用的溶劑沖洗，接著用清潔劑和熱水清洗，再用自水和含有機(jī)物的試劑水清洗，清洗完成后，晾干并干燥之，使用前再于 130 烘箱中烘 2-3 小時(shí)。乙腈的沖洗步驟可以烘箱烘烤步驟取代，可用甲醇或丙酮清洗玻璃器皿，因這些溶劑會(huì)與 DNPH 反應(yīng)而生成干擾物。于干燥并卻后，玻璃器皿應(yīng)保存于一潔凈區(qū)域，避免灰塵堆積或其它污染物的污染。2.使用高純?cè)噭┖腿軇┛蓽p少干擾，并可使用全玻璃蒸餾系統(tǒng)蒸餾純化溶劑。3.當(dāng)

5、執(zhí)硅膠管處步驟時(shí)，必須戴聚乙烯 (PE) 材質(zhì)的手套，以避免可能的污染。（二）由于環(huán)境中自然存在甲醛，故常發(fā)生 DNPH 試劑被甲醛污染，所使用的DNPH試劑必須以 HPLC 級(jí)的乙腈進(jìn)多次再結(jié)晶純化步驟，再結(jié)晶純化步驟系于 40 - 60 慢慢將溶劑蒸發(fā)以得到最多的結(jié)晶，純化后的 DNPH 結(jié)晶保存于 HPLC 級(jí)的乙腈中。于執(zhí)樣品檢測前應(yīng)先執(zhí) DNPH 中所含醛酮化合物純物的檢測，純物的應(yīng)小于 25 mg/L。附之 DNPH 再結(jié)晶步驟。（三）基質(zhì)干擾可能自于與樣品共同被萃取出的污染物，基質(zhì)干擾情形可分成樣品源和基質(zhì)本身。一系樣品都有干擾問題，則應(yīng)換移動(dòng)相或進(jìn)必要的清洗步驟。（四）樣品中含

6、有乙醇則于進(jìn)衍生步驟時(shí)，會(huì)產(chǎn)生乙醛，此背景問題，將無法檢測濃低于 0.5 ppm ( 500 ppb ) 的乙醛。四、設(shè)備（一）高效液相層析儀(組裝式)1.泵系統(tǒng)：可梯沖提，固定控制可達(dá) 1.5 mL/min.。2.高壓注射閥，附 20 L樣品回。3.管柱：250 mm 4.6 mm 內(nèi)徑， 5 - m 徑之 C18 填充劑 (Zorbax）或同級(jí)品。4.吸光偵測器：360 nm。5.與偵測器通的記器：最好用據(jù)處系統(tǒng)以測尖峰面積及滯時(shí)間。6.氦氣：供移動(dòng)相溶劑除氣。7.移動(dòng)相盛裝容器和抽氣過裝置：供盛裝和過 HPLC 移動(dòng)相之用，過裝置必須全為玻璃和鐵氟材質(zhì)，并使用 0.22 m 聚酯膜。8.

7、樣品注射針：將樣品注入 HPLC 樣品回中，至少需承裝樣品回體積之四倍的容。（二）衍生反應(yīng)設(shè)備1.反應(yīng)瓶：250 mL 平底長頸圓燒瓶。2.分液斗：250 mL 附鐵氟栓。3.K-D裝置：分液斗液相液相萃取法（NIEA R106.00C）或其它萃取方法系的適當(dāng)方法。(其它濃縮裝置經(jīng)實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，具同等功能者亦可使 用)。4.沸石：以二氯甲烷溶劑萃取潔凈處過，約為 10 / 40 mesh (碳化硅或同級(jí)品)。5.pH計(jì)：能測精確至 0.01 單位。6.玻璃纖維紙：孔徑 1.2 m (Fisher G4 級(jí)或同級(jí)品)。醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 2 頁，共

8、 20 頁7.固相吸附管：內(nèi)部充填 2 g C18 (Baker 或同級(jí)品)。8.真空固相萃取裝置：能同時(shí)萃取 12 個(gè)樣品 (Supelco 或同級(jí)品)。9.樣品容器：容為 60 mL (Supelco 或同級(jí)品)。10.微吸管：能精確轉(zhuǎn)置 0.10 mL 的溶液。11.水浴槽：加熱用，附同心圓蓋，可控制溫(精確至 2 )，需在抽氣柜中操作。12.樣品震蕩器：回轉(zhuǎn)震蕩式及附溫控制烘箱(精確至 2 ) (Lab-Line OrbitEnviron-Shaker Model 3527 或同級(jí)品)。13.注射針：5 mL、500 L、100 L，(附旋轉(zhuǎn)密合接頭或同級(jí)品)。14.針筒過片：0.45

9、 m 片匣，(Gelman Acrodisc 4438 或同級(jí)品)。（三）瓶：5 mL 、10 mL 及 250 mL 或 500 mL。（四）樣品瓶：10 或 25 mL 玻璃瓶，附鐵氟內(nèi)襯旋蓋或加壓密合蓋。（五）天平：分析天平，精確至 0.0001 g。（）玻璃斗。（七）聚乙烯 (PE) 手套：用處硅膠吸附管。（八）固體樣品萃取設(shè)備1.旋轉(zhuǎn)裝置：此裝置必須能以每分鐘 30 2 次之頻旋轉(zhuǎn)萃取容器。2.萃取容器：500 mL 含鐵氟墊片旋轉(zhuǎn)式蓋或壓合式蓋。3.過器附玻璃纖維紙。五、試劑（一）所有檢測所需的無機(jī)試藥皆需使用試藥級(jí)。需使用其它等級(jí)試藥，則在使用前必須確認(rèn)該試藥的純足夠高，使檢測結(jié)

10、果的準(zhǔn)確致低。（二）含有機(jī)物的試劑水：所使用的試劑水中干擾物的濃，應(yīng)小于目標(biāo)待測物方法偵測極限值。（三）甲醛溶液：濃為 37.6 % (w/w)，將甲醛溶于含有機(jī)物的試劑水中。依下述步驟執(zhí)甲醛儲(chǔ)備溶液的正確濃確認(rèn)。（四）醛和酮標(biāo)準(zhǔn)品：分析級(jí)，用制備除甲醛外之其它目標(biāo)待測物的 DNPH 衍生標(biāo)準(zhǔn)品，目標(biāo)待測物表。市售已衍生化標(biāo)準(zhǔn)品亦可使用（照水中甲醛、乙醛和丙醛檢測方法液相層析儀/紫外光偵測器法 NIEA W782.50B 五（）、節(jié)）。（五）使用之試劑1.二氯甲烷，CH2Cl2：HPLC 級(jí)或同級(jí)品。2.乙腈，CH3CN： HPLC 級(jí)或同級(jí)品。3.氫氧化鈉，NaOH：1.0 N 和 5 N。

11、4.氯化鈉飽和溶液，NaCl：于含有機(jī)物的試劑水中加入過的試藥級(jí)的氯化鈉固體。5.亞酸鈉溶液，Na2SO3：0.1 M。6.酸鈉，Na2SO4：，無水。醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 3 頁，共 20 頁7.檸檬酸，C8H8 O7：1.0 M溶液。8.檸檬酸鈉，C6H5 Na3O7 2 H2O：1.0 M 含二個(gè)結(jié)晶水的三鈉鹽。9.冰醋酸，CH3 CO2H。10.醋酸鈉，CH3 CO2Na。11.鹽酸，HCl：0.1 N。12.檸檬酸鹽緩沖液，1 M，pH = 3：將 80 mL 之 1 M 檸檬酸溶液加入于 20 mL 之 1M 檸檬酸鈉溶液中，混合均勻

12、，視需要使用 NaOH 或 HCl 調(diào)整 pH 值。13.醋酸鹽緩沖液，5 M，pH = 5（分析甲醛時(shí)使用）：將 40 mL 之 5 M 醋酸溶液加入于 60 mL 之 5 M 醋酸鈉溶液中，混合均勻，視需要使用 NaOH 或 HCl 調(diào)整pH 值。14.2,4-二硝基苯胼，2,4-(O2N)2C6H3NHNH2 (DNPH)，70 % (w/w) 于含有機(jī)物的試劑水中：將 428.7 mg 之 70 % (w/w) DNPH 溶液溶于 100 mL 乙腈中，即制備成濃為 3.00 mg/mL 之溶液。15.萃取液：將 64.3 mL 之 1.0 N NaOH 和 5.7 mL 之冰醋酸加入

13、于 900 mL 含有機(jī)物的試劑水中，再以含有機(jī)物的試劑水稀釋至 1 L，pH 應(yīng)為 4.93 0.02。（）儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液1.甲醛儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液，約 1000 mg/L：取適當(dāng)之甲醛確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品，或甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液(約 265 L )于含有機(jī)物的試劑水中稀釋。無法取得甲醛確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品，或甲醛確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量無法確定時(shí)，需依下述步驟執(zhí)進(jìn)溶液的標(biāo)定。 甲醛儲(chǔ)備溶液標(biāo)定：取 25 mL 之 0.1 M Na2SO3 溶液置于燒杯中并記 pH值，加入 25.0 mL 之甲醛儲(chǔ)備溶液，記pH值，以 0.1 N HCl 滴定此混合溶液，使 pH 回至原 pH 值。依下式計(jì)算甲醛的濃：式中：N HCl =所使用 HC

14、l 溶液之當(dāng)濃，毫當(dāng) (meq)/mL (1 mmole HCl = 1meq HCl)mL HCl =標(biāo)定所使用之 HCl 溶液體積30.03 =甲醛之分子，mg/mmole2.醛及酮儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液：取適當(dāng)之標(biāo)準(zhǔn)品加入于 90 mL 之乙腈中，稀釋至100 mL，濃即為 1000 mg/L。（七）標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存：所有標(biāo)準(zhǔn)溶液需儲(chǔ)存于附鐵氟內(nèi)襯旋蓋的玻璃瓶中，應(yīng)盡充滿，使瓶端空間盡小，于 4 暗處保存，標(biāo)準(zhǔn)品可穩(wěn)定保存6周。應(yīng)經(jīng)常檢查儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液是否有解或蒸發(fā)現(xiàn)象，尤其是制備校正標(biāo)準(zhǔn)品前應(yīng)作檢查。（八）校正標(biāo)準(zhǔn)品取儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液，于含有機(jī)物的試劑水中，配制至少五種同濃之包含每一目標(biāo)待測物的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液

15、，每一目標(biāo)待測物的低濃，應(yīng)恰好或稍高于表一或表二中所之方法偵測極限，其它校正標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃，則可配合預(yù)期之真實(shí)樣品的濃范圍作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 4 頁，共 20 頁（一）事業(yè)廢棄物采樣方法 NIEA R118.00B有關(guān)有機(jī)待測物相關(guān)之采樣與保存規(guī)范。（二）采樣后之樣品需于 4 以下藏，但毒性化學(xué)物質(zhì)在此限。水溶液樣品必須采樣后三天內(nèi)進(jìn)衍生反應(yīng)及萃取步驟。固體萃取液樣品應(yīng)盡早檢測。所有衍生反應(yīng)后的樣品萃取液應(yīng)于制備后三天內(nèi)完成檢測。七、步驟（一）樣品萃取處1.含固體及水溶液相樣品萃取法樣品中包含固體，及水溶液樣品中所含固體物大于百分之

16、一，則應(yīng)將水相與固相分，依、（二）節(jié)步驟分別保存，供日后檢測之用。有需要， 應(yīng)將廢棄物中固體顆磨碎減小顆之體積，以相當(dāng)于 20 倍固體樣品重的溶劑進(jìn)萃取。萃取完成后，萃取液需以孔徑為 0.6 至 0.8 m 之玻璃纖維紙過。(1)樣品水相與萃取液互溶(混合后未顯示多層相)，則樣品中的水相直接加入于萃取液中，一并進(jìn)分析；樣品水相與萃取液互溶，將水相與萃取 液分別分析，檢測結(jié)果為按體積比計(jì)算之平均濃。(2)只檢測甲醛，則水樣及/或固體樣品萃取液需調(diào)整 pH 至 5.0，以避免甲醛干擾物的形成。2.固體樣品萃取法(1)所有固體樣品應(yīng)充分?jǐn)嚢枋钩示鶆颍瑢渲?、樹及石塊等質(zhì)物丟棄 用。樣品潮濕，則需取具

17、有代表性的樣品，進(jìn)樣品干重測定。固體 樣品子固體每克之表面積大于或等于 3.1 cm2 或最窄處小于 1 cm，即可通過 9.5 mm 之標(biāo)準(zhǔn)篩網(wǎng)，則需減小顆尺寸，否則應(yīng)先壓碎、割或磨細(xì)，使能通過 9.5 mm之標(biāo)準(zhǔn)篩網(wǎng)。壓碎、割或磨細(xì)的方法可產(chǎn)生 熱，且樣品應(yīng)避免曝于空氣，最好先將樣品及工具卻至 4 再用。 樣品干重測定：在某些況，樣品測試結(jié)果需以干重為計(jì)算依據(jù)，需 此種據(jù)，則于秤取樣品進(jìn)檢測的同時(shí)，另外秤一份樣品作為干重測定之用。需注意干燥烘箱應(yīng)放置在抽氣柜內(nèi)或附排氣裝置，高污染的 有害廢棄物樣品的干燥步驟可能導(dǎo)致嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)室污染。秤取樣品作萃取之用后，即秤取 5 至 10 g 樣品于已在

18、天平上歸之 坩堝內(nèi)，于 105 烘箱內(nèi)隔夜干燥，測定其干重百分比，于干燥瓶內(nèi) 卻后，秤重：(2)秤 25 g 固體樣品于一附鐵氟內(nèi)襯密封旋蓋或加壓密封蓋的 500 mL 樣品瓶中，加入 500 mL 萃取液(五、（五）15. 節(jié))，以 30 rpm 轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)18 小時(shí)，進(jìn)固體樣品萃取，再將萃取液用玻璃纖維紙過后，密封于 樣品瓶內(nèi)于 4 儲(chǔ)存。每 mL 萃取液相當(dāng)于 0.050 g 固體樣品。較小的樣品可使用較小體積的萃取液，一般依固體重：萃取液體積 = 1 ： 20 的比調(diào)整。3.毒性化學(xué)物質(zhì)樣品萃取法醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 5 頁，共 20 頁4

19、.水溶液樣品直接進(jìn)下述步驟。（二）凈化和分1.對(duì)基質(zhì)單純的樣品一定需執(zhí)樣品凈化步驟。本凈化步驟適用于各種樣品基質(zhì)型式，因樣品基質(zhì)特殊而需使用特殊的凈化步驟，檢測人員必須確定洗程序，并進(jìn)甲醛添加樣品測定，其添加回收應(yīng)大于85%，樣品呈泡沫乳液時(shí)之回收會(huì)較低。2.樣品是澄清液或知樣品基質(zhì)的復(fù)雜性，則需將樣品于 2500 rpm 心 10 分鐘，倒出上清液，以玻璃纖維紙過收集于密封的容器中。（三）衍生反應(yīng)1.水樣：先預(yù)估水樣的取用，使目標(biāo)待測物的預(yù)估濃能在校正濃范圍內(nèi)(一般為 100 mL )，將適當(dāng)?shù)臉悠分萌敕磻?yīng)瓶中(四、（二）節(jié))。2.固體樣品：一般約需 1 至10 mL 萃取液(七、(一)節(jié))

20、，是較特殊的樣品，則取用需由預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果決定之。所使用的樣品或萃取液體積小于100mL，則應(yīng)使用含有機(jī)物的試劑水將總液體之體積調(diào)整為100 mL，稀釋前應(yīng)記樣品的原始體積。3.目標(biāo)待測物的衍生反應(yīng)和萃取，可依下述 4. 或 5. 節(jié)步驟執(zhí)。4.液相-固相衍生反應(yīng)和萃取步驟(1)于除檢測甲醛外之目標(biāo)待測物樣品中，加入 4 mL 檸檬酸鹽緩沖液，并以 6M 鹽酸或 6 M 氫氧化鈉調(diào)整 pH 至 3.0 0.1，再加入 6 mL 之 DNPH 試劑，密封此樣品容器，放入以預(yù)先加熱至 40 之回轉(zhuǎn)振蕩器(四、（二）12. 節(jié))中一小時(shí)。調(diào)整振蕩器旋鈕，使反應(yīng)容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。(2)只檢測甲

21、醛，則加入 4 mL 醋酸鹽緩沖液，并以 6 M 鹽酸或 6 M 氫氧化鈉調(diào)整 pH 至 5.0 0.1，再加入 6 mL 之 DNPH 試劑，密封此樣品容器，放入以預(yù)先加熱至 40 之回轉(zhuǎn)振蕩器(四、（二）12. 節(jié))中一小時(shí)。調(diào) 整振蕩器旋鈕，使反應(yīng)容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。(3)組裝接至水壓吸氣器或真空泵上的固相萃取裝置，將內(nèi)部已填裝 2 g 吸附劑之吸附管接到真空歧管上，于每一吸附管各以 10 mL 之稀釋檸檬酸鹽 緩沖液( 10 mL 之 1 M 檸檬酸鹽緩沖液溶于 250 mL 含有機(jī)物之試劑水中)洗，進(jìn)吸附管調(diào)整。(4)于一小時(shí)反應(yīng)時(shí)間到達(dá)后，即將樣品反應(yīng)容器自振蕩器上取出，并加

22、入 10 mL 飽和 NaCl 溶液。(5)將反應(yīng)溶液全轉(zhuǎn)置入吸附管，能失，并以真空系統(tǒng)進(jìn)抽氣，使溶 液以 3-5 mL/min 通過吸附管，當(dāng)所有液體皆通過吸附管后，再持續(xù)抽氣約 1 分鐘。(6)以 9 mL 乙腈加入吸附管系進(jìn)洗步驟，并直接收集于 10 mL 瓶中，以乙腈稀釋至標(biāo)線，混合均勻后，轉(zhuǎn)置入樣品中并密封保存之，以備檢 測。（因本步驟使用過的 DNPH，于完成洗步驟后，吸附管的顏色仍 是黃色，并表示待測物的衍生物有殘?jiān)诠苤校?.液相-液相衍生反應(yīng)和萃取步驟(1)于除甲醛外之目標(biāo)待測物樣品中，加入 4 mL 檸檬酸鹽緩沖液，并以 6 M 鹽酸或 6 M 氫氧化鈉調(diào)整 pH 至 3

23、.0 0.1，再加入 6 mL 之 DNPH 試劑，密封此樣品容器，放入已預(yù)先加熱至 40 之回轉(zhuǎn)振蕩器中一小時(shí)。調(diào)整振蕩 器旋鈕，使反應(yīng)容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 6 頁，共 20 頁(2)只檢測甲醛，則加入 4 mL 醋酸鹽緩沖液，并以 6 M 鹽酸或 6 M 氫氧化鈉調(diào)整 pH 至 5.0 0.1，再加入 6 mL 之 DNPH 試劑，密封此樣品容器，放入已預(yù)先加熱至 40 之回轉(zhuǎn)振蕩器中一小時(shí)。調(diào)整振蕩器旋鈕，使反應(yīng) 容器內(nèi)之液體和緩回轉(zhuǎn)搖晃。(3)于 250 mL 分液斗中，每次以 20 mL 二氯甲烷進(jìn)樣品溶液萃取

24、，續(xù)執(zhí)三次。于萃取過程中形成泡沫乳液情況，則于 2000 rpm 心機(jī)心10 分鐘，將二層液分，將泡沫乳液移除，再進(jìn)下萃取步驟。將所有 二氯甲烷萃取液一同倒入 125 mL 內(nèi)含 5.0 g 無水酸鈉之三角錐瓶中，旋轉(zhuǎn)搖晃內(nèi)容物進(jìn)溶液去除水份之干燥程序。(4)將 10 mL濃縮管裝在 500 mL蒸發(fā)瓶上，組裝K-D濃縮裝置，分液斗液相液相萃取法（NIEA R106.00C）方法之四、設(shè)備。將萃取液小心倒入蒸 發(fā)瓶中，需注意要將酸鈉固體倒入，以 30 mL 二氯甲烷清洗三角錐 瓶，并將此洗液一同倒入蒸發(fā)瓶中，能有任何樣品失。(5)依分液斗液相液相萃取法之 K-D 濃縮步驟，進(jìn)萃取液濃縮，使最終

25、體積為 5 mL，于進(jìn)檢測前，將溶劑置換成乙腈。（四）建議之層析檢測條件1.驗(yàn)證適用于水樣，土壤或廢棄物樣品。管柱：C-18， 4.6 mm 250 mm 內(nèi)徑，5 m 徑移動(dòng)相梯：70 / 30 乙腈/水 (v/v)，維持 20 分鐘由 70 / 30 乙腈/水改成 100 % 乙腈，于 15 分鐘內(nèi)完成 100 % 乙腈，維持 15 分鐘：1.2 mL/分偵測器：紫外光，360 nm樣品注射體積：20 L2.依下述步驟進(jìn)移動(dòng)相的過，并去除其中溶解之氣體：(1)于抽氣過裝置中，將每一種溶劑(水和乙腈)，以 0.22 m 之聚酯薄膜紙進(jìn)過。(2)于已過之溶劑中，通入為 100 mL/min 氦

26、氣 10 至 15 分鐘進(jìn)除氣；或?qū)⒁堰^之溶劑置于三角錐瓶中，瓶口蓋上表玻璃，加熱至 60 ，持續(xù) 5 至 10 分鐘，進(jìn)除氣。于偵測器之后應(yīng)接一固定背壓控制閥 (350 kPa)或 0.25 mm 內(nèi)徑，15 - 30 cm 長之鐵氟管，以避免移動(dòng)相發(fā)生氣現(xiàn)象。(3)將各移動(dòng)相裝入固定使用的容器中，依七、（四）1.節(jié)所的分析條件，設(shè)定溶劑梯改的程序，將系統(tǒng)之高壓泵于起始溶劑混合比( 70 % / 30 % 之乙腈/水)以 1.2 mL/min 速，運(yùn)轉(zhuǎn) 20 至 30 分鐘，打開偵測器，將偵測結(jié)果印在記器的記紙上或似的輸出訊號(hào)記器上，以建一穩(wěn)定的 基線。（五）校正1.建液相層析操作條件，使進(jìn)

27、液相-固相衍生反應(yīng)和萃取所得之各待測物滯時(shí)間與表一中所之值相近；或進(jìn)液相-液相衍生反應(yīng)和萃取所得之各待測物滯時(shí)間與表二中所之值相近。各待測物滯時(shí)間窗口的測定，層析檢測方法總則NIEA M102.01C 之七、（五）節(jié)。建議之層析分析條件于本方法七、（四）、1.節(jié)中。2.依與樣品制備相同之步驟，執(zhí)校正標(biāo)準(zhǔn)溶液之衍生反應(yīng)及萃取步驟(本方法七、（三）4. 或 5. 節(jié))。如使用已衍生化標(biāo)準(zhǔn)品則依照水中甲醛、乙醛和丙醛檢測方法液相層析儀/紫外光偵測器法五（）、及七（一）、節(jié)標(biāo)準(zhǔn)溶醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 7 頁，共 20 頁3.執(zhí)溶劑空白檢測以確保系統(tǒng)潔凈無

28、污染。（檢測前，必需將樣品及標(biāo)準(zhǔn)品先回溫至室溫）。4.依本方法七、（四）節(jié)所建議之層析分析條件進(jìn)經(jīng)樣品前處之校正標(biāo)準(zhǔn)品之檢測，并將尖峰面積與校正標(biāo)準(zhǔn)溶液之濃(單位為 g/L )制表。5.將尖峰面積與對(duì)應(yīng)之注入儀器中之校正標(biāo)準(zhǔn)溶液之濃制表，以計(jì)算各待測物于每一濃之校正因子(八、(一)節(jié)計(jì)算公式)，校正標(biāo)準(zhǔn)品之平均校正因子的百分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 (%RSD) 應(yīng) 20 %，否則，即應(yīng)進(jìn)系統(tǒng)檢查。經(jīng)進(jìn)系統(tǒng)檢查后，校正標(biāo)準(zhǔn)品查核仍無法符合規(guī)范需求，系統(tǒng)即應(yīng)進(jìn)重新校正。經(jīng)重新校正后仍無法符合規(guī)范需求，即應(yīng)重新制備校正標(biāo)準(zhǔn)品。6.每日于進(jìn)樣品檢測前及檢測后，必須以一個(gè)或個(gè)校正標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)校正曲線的確認(rèn)，確認(rèn)所得

29、之校正因子必須在最初建之校正因子的 15 % 之內(nèi)，否則，即應(yīng)進(jìn)系統(tǒng)檢查。經(jīng)進(jìn)系統(tǒng)檢查后，校正標(biāo)準(zhǔn)品查核仍無法符合規(guī)范需求，系統(tǒng)即應(yīng)進(jìn)重新校正。7.每檢測 10 個(gè)樣品或每批少于 10 個(gè)樣品時(shí)，必須進(jìn)一個(gè)校正標(biāo)準(zhǔn)品檢測，以確認(rèn) DNPH 衍生物校正因子仍然在最初校正因子的 15 % 之內(nèi)。 （）樣品檢測1.以高效能液相層析儀依本方法七、（四）節(jié)之條件進(jìn)樣品檢測，表一及表二所之滯時(shí)間和方法偵測極限，即是依七、（四）節(jié)之條件針對(duì)待測物檢測而得。2.尖峰面積超出校正曲線之線性范圍，則應(yīng)注入較小體積的樣品；或者，以乙腈稀釋此處完成的樣品溶液，再重新檢測。3.于目標(biāo)待測物皆沖提出，依八、（二）節(jié)中公式

30、計(jì)算樣品中待測物的濃，或是使用檢測方法中適當(dāng)?shù)挠?jì)算步驟。4.因明顯的干擾因素而妨礙尖峰面積的計(jì)算，則需進(jìn)樣品的再凈化步驟。八、結(jié)果處（一）校正因子、平均校正因子、標(biāo)準(zhǔn)偏差、和百分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算： 式中：= 由五個(gè)同校正濃所得之平均校正因子CFi= 每一校正標(biāo)準(zhǔn)品之校正因子i (i=1-5)RSD= 校正因子之相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差n= 校正標(biāo)準(zhǔn)品醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 8 頁，共 20 頁（二）依下式計(jì)算液體樣品之濃式中：= 待測物之平均校正因子Vs= 樣品之 mL (無單位)（三）依下式計(jì)算固體樣品之濃式中：= 待測物之平均校正因子Vex= 樣品萃取液之

31、 mL (無單位)九、質(zhì)量管理（一）考有機(jī)物萃取及樣品制備法中的質(zhì)量管理步驟，及層析檢測方法總則方法中的質(zhì)量管理規(guī)范。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建質(zhì)量保證計(jì)劃書，并據(jù)以執(zhí)，并應(yīng)將所有據(jù)及記建檔保存。（二）依層析檢測方法總則方法中，七、步驟進(jìn)必要的質(zhì)量管理程序，以執(zhí)HPLC 操作系統(tǒng)查核，如滯時(shí)間窗口、校正確認(rèn)、樣品的層析檢測等的查核。（三）起始績效查核：每一實(shí)驗(yàn)室應(yīng)針對(duì)樣品制備及后續(xù)配合的檢測方法，于潔凈的基質(zhì)中進(jìn)目標(biāo)待測物的檢測，所得據(jù)準(zhǔn)確和精密必須符合實(shí)驗(yàn)室的品保規(guī)范。執(zhí)新進(jìn)人員訓(xùn)時(shí)或儀器功能改變時(shí)，必須持續(xù)執(zhí)績效查核。層析檢測方法總則之九、節(jié)中的相關(guān)規(guī)定。（四）樣品制備及檢測之質(zhì)量管理：實(shí)驗(yàn)室必須針對(duì)樣品

32、基質(zhì)影響，建方法績效檢查(精密、準(zhǔn)確和偵測極限)之書面資檔，對(duì)每十個(gè)或每一批次檢測樣品，至少需包含方法空白、基質(zhì)添加、重復(fù)樣品、實(shí)驗(yàn)室品管樣品等質(zhì)量管理樣品檢測據(jù)資。1.樣品基質(zhì)影響之績效檢查的書面資檔，應(yīng)包含至少一個(gè)基質(zhì)添加和一對(duì)未添加的重復(fù)樣品；或者，一對(duì)基質(zhì)添加/基質(zhì)添加之重復(fù)樣品的檢測。需依據(jù)批次樣品基質(zhì)的基本背景資，才能決定該制備及檢測重復(fù)樣品或基質(zhì)添加/基質(zhì)添加重復(fù)樣品。預(yù)期樣品中含有目標(biāo)待測物，則實(shí)驗(yàn)室必須執(zhí)一個(gè)基質(zhì)添加和一對(duì)未添加的重復(fù)樣品檢測；預(yù)期樣品中含目標(biāo)待測物，則實(shí)驗(yàn)室必須執(zhí)一對(duì)基質(zhì)添加/基質(zhì)添加之重復(fù)樣品檢測。2.每十個(gè)或每一批次樣品檢測時(shí)，必須伴同實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理樣品

33、之檢測，此質(zhì)量管制樣品之基質(zhì)，必須為與真實(shí)樣品基質(zhì)似之潔凈(管制)基質(zhì)，取用于檢測之體積或重與真實(shí)樣品相同。于實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理樣品中添加與基質(zhì)添加樣品中相同之待測物及相同之濃。當(dāng)基質(zhì)添加樣品檢測結(jié)果顯示有樣品基質(zhì)本身的干擾問題時(shí)，則實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理樣品的檢測結(jié)果，可用證明實(shí)驗(yàn)室于潔凈基質(zhì)樣品的檢測結(jié)果符合質(zhì)量規(guī)范。3.依本方法所執(zhí)之多間實(shí)驗(yàn)室方法驗(yàn)證，所得之質(zhì)量管理規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，表醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 9 頁，共 20 頁4.層析檢測方法總則之九、節(jié)中，對(duì)樣品制備和檢測的質(zhì)量管理步驟。（五）建議實(shí)驗(yàn)室針對(duì)本檢測方法，可采用特定的質(zhì)量保證規(guī)范 ，此規(guī)范應(yīng)符

34、合實(shí)驗(yàn)室及樣品特性的需求，有可能，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)執(zhí)標(biāo)準(zhǔn)考樣品的檢測，并加相關(guān)的績效評(píng)估能比試計(jì)劃。十、精密與準(zhǔn)確（一）表一中所為使用液相固相萃取步驟而得之各待測物的方法偵測極限，系以含有機(jī)物的試劑水為基質(zhì)，使用液相-固相萃取步驟而得。表二中所為使用二氯甲烷液相液相萃取步驟而得之各待測物的方法偵測極限，亦以含有機(jī)物的試劑水為基質(zhì)，使用二氯甲烷萃取步驟而得。表一及表二中用進(jìn)添加的試劑水總體積為100 mL，使用較大的試劑水總體積，可得到較低的方法偵測極限值。1.本方法針對(duì)回收的線性關(guān)系測試，系于含有機(jī)物的試劑水中進(jìn)添加，適用的濃范圍為 50 - 1000 g/L。2.本節(jié)之方法偵測極限和精密及準(zhǔn)確據(jù)結(jié)果

35、，系將待測物分成A和B二組，分別進(jìn)添加，分別使用液相-固相和液相-液相萃取之層析圖譜，如圖一、二及圖 三、四。（二）12家實(shí)驗(yàn)室曾用本方法，分別于含有機(jī)物的試劑水、地下水二種基質(zhì)中，添加濃范圍為 30 至 2200 g/L 的種同濃的樣品，進(jìn)測試，結(jié)果顯示，方法的準(zhǔn)確和精密，和待測物之濃有直接相關(guān)，但和樣品的基質(zhì)無關(guān)。以添加濃為變，計(jì)算所得之平均回收線性回歸方程式，及以平均回收為變，計(jì)算所得之總精密和單一檢測精密回歸方程式，于表四。這些方程式可用評(píng)估于檢測濃范圍內(nèi)的任何濃的平均回收和精密。十一、考資（一）U.S. EPA, Determination of Carbonyl Compounds

36、 by High Performance LiquidChromatography (HPLC), Test Methods for Evaluating Solid Waste, Method 8315A,1996.Occupational Safety and Health Administration (OSHS), 1976（三）政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測方法，事業(yè)廢棄物采樣方法，NIEAR108.00B，1996。（四）政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測方法，事業(yè)廢棄物檢測方法總則，NIEAR101.00C，1999。（五）政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測方法，層析檢

37、測方法總則，NIEAM102.01C，1999。（）政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，廢棄物檢測方法，分液斗液相液相萃取法，NIEA R106.00C，1996。（七）政院環(huán)境保護(hù)署環(huán)境檢驗(yàn)所，水質(zhì)檢測方法，水中甲醛、乙醛和丙醛檢測方法液相層析儀/紫外光偵測器法，NIEA W782.50B，1997。注：一、考資中公告方法內(nèi)容及編碼以環(huán)保署最新公告為準(zhǔn)。醛酮化合物檢測方法高效能液相層析法(NIEA R502.11C) 第 10 頁，共 20 頁二、廢液分處原則：檢測項(xiàng)目所產(chǎn)生之廢液，依照非含氯有機(jī)溶劑、含氯有機(jī)溶劑、氰系廢液及一般重屬廢液處原則辦。三、安全事宜(一)本方法中所使用之每一試劑的毒性或致癌性，尚未確定；但每一化合物皆應(yīng)視為對(duì)健康有潛在危害的物質(zhì)，因此，應(yīng)以各種方式盡減少對(duì)這些化合物的。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備有關(guān)法規(guī)中對(duì)本方法中所使用化合物的安全使用及處置方法的檔案，需提供