烏苯美司文獻(xiàn)依據(jù)資料整理

1、烏苯美司文獻(xiàn)資料整理2009年9月藥學(xué)基礎(chǔ)部分藥學(xué)基礎(chǔ)部分一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的抗腫瘤新藥烏苯美司胡其樂，等，一種具有免疫調(diào)節(jié)作用的抗腫瘤新藥Bestatin，國(guó)外醫(yī)藥抗生素分冊(cè)1990;11(3):222-227概述 烏苯美司是日本著名學(xué)者梅澤濱夫等于1976年從橄欖網(wǎng)狀鏈球菌(Streptomyces olivoreticuli)培養(yǎng)液中發(fā)現(xiàn)的一種小分子肽，最初觀察到的生物活性是對(duì)細(xì)胞膜上的亮氨酸氨基肽酶及氮基肽酶B的抑制作用隨后的研究提示對(duì)動(dòng)物的同系及自體腫瘤有抑制作用 ，并對(duì)免疫反應(yīng)有促進(jìn)作用，從而使其受到重視。一、臨床前研究1. 烏苯美司的理化特性（略）2. 烏苯美司的抗腫瘤活性3.

2、 烏苯美司的作用機(jī)理4. 體內(nèi)代謝5. 毒性作用2.烏苯美司的抗腫瘤活性 體外試驗(yàn)中： 對(duì)人白血病細(xì)胞K562、HL-60及U-937；組織細(xì)胞性淋巴瘤細(xì)胞的增殖均有直接抑制作用。 動(dòng)物試驗(yàn)中： 單獨(dú)給藥降低自發(fā)腫瘤發(fā)生率，延長(zhǎng)小鼠的生存期； 對(duì)化學(xué)致癌劑MNNG誘發(fā)的大鼠胃癌具有抑制作用； 對(duì)腫瘤細(xì)胞在小鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)移具有抑制作用 與其他化療藥物聯(lián)用治療腫瘤，烏苯美司具有明顯抑制效果，延長(zhǎng)荷瘤動(dòng)物生存期3.烏苯美司的作用機(jī)理 活化巨噬細(xì)胞作用腹腔注射給藥后，小鼠巨噬細(xì)胞對(duì)K562等多種小鼠腫瘤的細(xì)胞毒性作用都大大增強(qiáng) 增強(qiáng)T細(xì)胞活性烏苯美司的抗腫瘤作用通過T細(xì)胞介導(dǎo) 增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞(NK)的活

3、性 促進(jìn)骨髓干細(xì)胞的增殖和分化對(duì)小鼠 和人的骨髓細(xì)胞集落的形成都有促進(jìn)作用，從而改善受化療藥物或其他因素抑制的骨髓造血功能 改善調(diào)節(jié)性T細(xì)胞OKT4OKT8 比例增高，改善機(jī)體免疫狀況 促進(jìn)IL-1和IL-2等 白介素的產(chǎn)生3.烏苯美司的作用機(jī)理4.體內(nèi)代謝 成年男子口服30mg后，血濃度在1小時(shí)后達(dá)高峰(2.2ug/ml)，此后呈雙相性下降，24小時(shí)后消失?？诜?0mg/d，連續(xù)29周，服藥后24小時(shí)內(nèi)血中濃度呈上升趨勢(shì)，最高血濃度也略有增加，但半衰期并無延長(zhǎng)。5.毒性作用烏苯美司毒性作用較低；亞急性及慢性毒性試驗(yàn)均表明的毒性作用較低。妊娠前及妊娠初期(大鼠)器官形成期(大鼠、家兔)、圍產(chǎn)期

4、及哺乳期(大鼠)給予烏苯美司均未見致畸作用。烏苯美司為小分子化合物，無抗原性及過敏原性，對(duì)眼粘膜無刺激性。對(duì)中樞、運(yùn)動(dòng)、感覺、植物神經(jīng)系統(tǒng)，呼吸、循環(huán)、血液系統(tǒng)及腎臟功能等完全無影響。烏苯美司的藥物動(dòng)力學(xué)及對(duì)實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移的治療作用陸瑤華，等，烏苯美司的藥物動(dòng)力學(xué)及對(duì)實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移的治療作用，新藥與臨床 1997年3月;16(2):71-74摘要 目的：探討烏苯美司對(duì)小鼠藥物動(dòng)力學(xué)及與實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移治療活性間的關(guān)系。 方法：用放射免疫法測(cè)定小鼠在不同給藥途徑下的烏苯美司血清藥物動(dòng)力學(xué)及觀察烏苯美司對(duì)黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型的治療活性。 結(jié)果：烏苯美司iv 的T1/2較短，初始血藥濃度較高。iv和im

5、給藥后的曲線下面積較大；po及ip則較小。不同給藥途徑對(duì)實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移均有治療作用。 結(jié)論:烏苯美司的血清T1/2較短，其治療活性取決于沖擊和高劑量的給藥方式。陸瑤華，等，烏苯美司的藥物動(dòng)力學(xué)及對(duì)實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移的治療作用，新藥與臨床 1997年3月;16(2):71-74烏苯美司具有抑制黑色素瘤B16 - BL6 肺轉(zhuǎn)移的治療作用陸瑤華，等，烏苯美司的藥物動(dòng)力學(xué)及對(duì)實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移的治療作用，新藥與臨床 1997年3月;16(2):71-74烏苯美司具有抑制黑色素瘤B16 - BL6 肺轉(zhuǎn)移的治療作用 烏苯美司對(duì)B16-BL6肺轉(zhuǎn)移數(shù)的影響陸瑤華，等，烏苯美司的藥物動(dòng)力學(xué)及對(duì)實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移的治療

6、作用，新藥與臨床 1997年3月;16(2):71-74050100150200250300350空白對(duì)照組陽性對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組1實(shí)驗(yàn)組2實(shí)驗(yàn)組3實(shí)驗(yàn)組4Po烏苯美司烏苯美司50mg/kg*4w顯著抑制黑色素瘤轉(zhuǎn)移顯著抑制黑色素瘤轉(zhuǎn)移*烏苯美司具有抑制黑色素瘤B16 - BL6 肺轉(zhuǎn)移的治療作用 烏苯美司對(duì)B16-BL6肺轉(zhuǎn)移數(shù)的影響陸瑤華，等，烏苯美司的藥物動(dòng)力學(xué)及對(duì)實(shí)驗(yàn)性腫瘤轉(zhuǎn)移的治療作用，新藥與臨床 1997年3月;16(2):71-740246810121416空白對(duì)照組陽性對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組1實(shí)驗(yàn)組2實(shí)驗(yàn)組3實(shí)驗(yàn)組4烏苯美司的抑制轉(zhuǎn)移作用與給藥濃度和頻次相關(guān)烏苯美司的抑制轉(zhuǎn)移作用與給藥濃度和頻

7、次相關(guān)*產(chǎn)品綜述部分產(chǎn)品綜述部分烏苯美司應(yīng)用研究進(jìn)展 生物反應(yīng)修飾劑(BRM)類藥物的研究則日趨活躍，并已取得了一定進(jìn)展。日本科學(xué)家梅澤濱夫1976年從橄欖網(wǎng)狀鏈霉菌(Streptomyces olivoreticuli)的培養(yǎng)液中發(fā)現(xiàn)了被稱作bestatin的括性物質(zhì)，后來根據(jù)世界衛(wèi)生組織的建議，將其國(guó)際通用名(INN)定為ubenimex。中國(guó)藥典委員會(huì)決定國(guó)內(nèi)正式品名定為烏苯美司。周善學(xué)，等，烏苯美司應(yīng)用研究進(jìn)展雷 國(guó)外醫(yī)藥抗生素分冊(cè) 1997;18(4):304-307烏苯美司在白血病和實(shí)體腫瘤的臨床試驗(yàn)Clinical trials of bestatin for leukemia

8、and solid tumorsK. Ota, et al. Clinical trials of bestatin for leukemia and solid tumors. Biotherapy, 1992(4): 205-214, AbstractA new immunomodulating agent, bestatin (INN: ubenimex) has low toxicity after long-term oral administration and significantly modifies immunological responses. Prolongation

9、 of remission duration and survival was achieved in adult acute nonlymphocytic leukemia with bestatin immunotherapy combined with remission maintenance chemotherapy. Patients with myelodysplatic syndrome (MDS) and chronic myelogenous leukemia (CML) responded to bestatin, and it is noted that cytogen

10、etic remission was obtained in CML. MDS and CML are thought to be a family of clonal malignant disorders in which malignant transformations occurs at the level of the pluripotent stem cell. Bestatin may be capable of modifying the biological-proliferative disequilibrium of the disease, and the thera

11、py opens new and promising prospects in the treatment of both MDS and CML. Randomized controlled studies of bestatin immunotherapy were performed in solid tumors including malignant melanoma, carcinoma of the lung, stomach, bladder, head and neck, and esophagus, and therapeutic benefits on disease f

12、ree-interval or survival were observed in certain types of these cancers. However, the adjuvant activity of bestatin immunotherapy for these cancers should be further investigated to confirm its activity.摘要 一種新型的免疫調(diào)節(jié)劑烏苯美司（Ubenimex）長(zhǎng)期治療毒性低，顯著改善免疫反應(yīng)。 烏苯美司與化療聯(lián)合治療顯著延長(zhǎng)急性非淋巴性白血?。ˋNLL）的緩解期和生存期；對(duì)骨髓異常增生綜合癥（M

13、DS）和慢性白血?。–ML） 烏苯美司免疫治療的隨機(jī)、對(duì)照研究還在惡性黑色素瘤、肺癌、胃癌、膀胱癌、頭頸癌等實(shí)體腫瘤的治療中開展，治療價(jià)值在無病間隔期和生存期得到體現(xiàn)1. Acute nonlymphocytic leukemia (ANLL )After a follow-up period of 2 years to 4 years and 7 months after registration, the bestatin group had achieved a longer remission duration than the control (P =0.06 by the Cox-

14、Mantel method (CM) and also showed a statistically longer survival (P = 0.007 (CM) .Patients were analyzed in relation to age group. In the 15-49 year group, the prolongation of remission duration was not significant in the bestatin group (P = 0.139 (CM), but survival was significantly longer than i

15、n the control group (P = 0.049 (CM). In the 50-65 age group, however bestatin patients achieved both a significantly longer duration of remission and survival (P = 0.044 and P=0.003 (CM) . Recurrence was observed in 58.3% of the bestatin.After a follow-up period of 5 years and 10 months following co

16、mpletion of the study, the bestatin group in overall ANLL achieved a statistically significant prolongation of survival compared to the control group (P=0.034 (generalized Wilcoxon method) (Figure 2). The remission duration of the bestatin group, however, was not significantly longer than the contro

17、l groups.2. Myelodysplastic syndromes ( MDS)Ten patients with MDS out of 13 (77%) responded to the bestatin treatment. Two of the three patients with RAEB-t and 3 of 6 patients with RAEB and 1 of 3 with RA achieved complete response. Another patient with RAEB achieved good response, and one with RAE

18、B, one with RA and one with CMML achieved partial response. Three patients failed to respond. Bestatin was administrated for 46 to 722 days (median 143 days+), and the days required for responses were from 28 to 97 days. The duration of remission ranged from 21 to 131+ weeks. No side effects were ob

19、served in any case.3. Chronic myelogenous leukemia (CML)Induction therapy with busulfan alone resulted in complete hematologic remission in 11 patients (44%), but the malignant clone remained fully predominant in all 25 patients. The combination therapy resulted in complete hematologic remission in

20、all 14 patients. The median time to achieve complete hematologic remission was 10 weeks with a range of 5 to 20 weeks from the initiation of bestatin therapy. Complete cytogenetic remission (CCR) was achieved in 3 patients (21%), partial cytogenetic remission (PCR) in 1 (7%), and minor cytogenetic r

21、esponse (MCR) in 5(36%) (Table 4). The cytogenetic responses were observed in the patients at various disease stages. Among the 5 patients in the early chronic phase (within 12 monthsfrom the diagnosis), 3 achieved CCR, 1 achieved PCR, and 1 MCR. Moreover, the disappearance of the BCR-ABL rearrangem

22、ent was observed in 3 of 5 patients with early chronic CML. The results in the late chronic phase CML was less favorable. Two of 5 patients in the late chronic phase obtained MCR, but none obtained significant cytogenetic response (CCR + PCR). Among the 4 patients in the accelerated phase 1 obtained

23、 CCR and 2 obtained MCR. After a median follow-up of 11 months all patients are alive, and no progression of the disease nor serious side effects were observed in any case.Solid tumors血液腫瘤部分血液腫瘤部分烏苯美司聯(lián)合化療治療急、慢性白血病的臨床研究朱煥玲，等，烏苯美司聯(lián)合化療治療急、慢性白血病的臨床研究 四川醫(yī)學(xué)2001,22(2):146-148烏苯美司顯著延長(zhǎng)AML、CML患者生存期朱煥玲，等，烏苯美司聯(lián)

24、合化療治療急、慢性白血病的臨床研究 四川醫(yī)學(xué)2001,22(2):146-1480100200300400500緩解期生存期單位：天烏苯美司延長(zhǎng)烏苯美司延長(zhǎng)AML患者緩解期、生存期患者緩解期、生存期對(duì)照組烏苯美司治療組P=0.001P0.05對(duì)照組（n=41） 化療烏苯美司治療組（n=82） 化療方案與對(duì)照組相同，自誘導(dǎo)化療開始給予烏苯美司30mg/d,清晨空腹口服，治療時(shí)間6月-2年，平均1年烏苯美司顯著延長(zhǎng)AML、CML患者生存期朱煥玲，等，烏苯美司聯(lián)合化療治療急、慢性白血病的臨床研究 四川醫(yī)學(xué)2001,22(2):146-1480200400600緩解期慢性期單位：天烏苯美司延長(zhǎng)烏苯美司

25、延長(zhǎng)CML患者緩解期、慢性期患者緩解期、慢性期對(duì)照組烏苯美司治療組P=0.001P0.05對(duì)照組（n=21） 化療烏苯美司治療組（n=43） 化療方案與對(duì)照組相同，自誘導(dǎo)化療開始給予烏苯美司30mg/d,清晨空腹口服，治療時(shí)間6月2年，平均1年烏苯美司顯著延長(zhǎng)AML、CML患者生存期朱煥玲，等，烏苯美司聯(lián)合化療治療急、慢性白血病的臨床研究 四川醫(yī)學(xué)2001,22(2):146-1480%20%40%60%80%100%AML顯效率AML總有效率CML顯效率CML總有效率烏苯美司增強(qiáng)烏苯美司增強(qiáng)AML、CML患者免疫功能患者免疫功能對(duì)照組烏苯美司治療組P0.01結(jié)論 烏苯美司顯著延長(zhǎng)AML患者生

26、存期 烏苯美司顯著延長(zhǎng)CML患者慢性期、緩解期，減少羥基脲(HU)用量 烏苯美司提高AML、CML患者免疫功能，降低患者感染率烏苯美司對(duì)成人急性非淋巴性白血?。ˋNLL）患者的免疫治療Immunotherapy with bestatin for acute nonlymphocytic leukemia in adultsKazuo Ota, et al. Immunotherapy with ubenimex for acute nonlymphocytic leukemia in adults. Cancer Immunol lmmunother, 1986; 23: 5-10Summa

27、ryIn a cooperative randomized control study of immunotherapy with bestatin in combination with chemotherapy in adults with acute nonlymphocytic leukemia (ANLL), 101 patients (48 in the bestatin group and 53 in the control group) out of 115 patients registered were evaluated as eligible. The bestatin

28、 group achieved a statistically significant prolongation of survival compared with the control group in overall ANLL and acute myelogenous leukemia. In the analysis of patient age, the bestatin group achieved a statistically significant prolongation of both the remission duration and survival in pat

29、ients aged 50 to 65 years, while the differences were not significant in the 15 to 49 age group. The bestatin group tended to achieve a higher rate of reinduction of remission in patients who had recurrence of leukemia. Side effects developed in only 5 (9.6%) of 52 patients treated with bestatin. No

30、ne of these side effects were particularly serious in nature. It is concluded that bestatin is useful for prolongation of survival of adult patients with ANLL, making for a longer remission duration especially in elderly patients and with few side effects烏苯美司延長(zhǎng)ANLL患者生存Kazuo Ota, et al. Immunotherapy

31、 with ubenimex for acute nonlymphocytic leukemia in adults. Cancer Immunol lmmunother, 1986; 23: 5-1025.9%46.1%0%10%20%30%40%50%4年生存率對(duì)照組烏苯美司治療組193301020304050%生存期對(duì)照組烏苯美司治療組對(duì)照組（n=53），化療烏苯美司治療組（n48），化療基礎(chǔ)上給予烏苯美司30mg/d，清晨空腹口服，盡可能延長(zhǎng)烏苯美司治療時(shí)間，甚至延續(xù)至復(fù)發(fā)對(duì)老年患者組，效果更為顯著Kazuo Ota, et al. Immunotherapy with ubenime

32、x for acute nonlymphocytic leukemia in adults. Cancer Immunol lmmunother, 1986; 23: 5-1015.8%44.6%0%10%20%30%40%50%4年生存率對(duì)照組烏苯美司治療組153301020304050%生存期對(duì)照組烏苯美司治療組烏苯美司治療淋巴瘤 14例淋巴瘤患者化療基礎(chǔ)上加用烏苯美司治療，觀察治療前后療效 治療方案： 聯(lián)合化療CHOP方案，每月1次，連續(xù)2-3療程后換用其他化療方案 烏苯美司與化療藥物伍用，能提高難治、復(fù)發(fā)性惡性淋巴瘤的治療效果，調(diào)節(jié)ML患者的細(xì)胞免疫功能。還能增強(qiáng)阿霉素等抗癌劑的效果夏

33、順中，等，國(guó)產(chǎn)烏苯美司聯(lián)合化療治療難治復(fù)發(fā)性惡性淋巴瘤的臨床觀察，浙江實(shí)用醫(yī)學(xué) 2000;5(6):8-9烏苯美司治療淋巴瘤 改善難治復(fù)發(fā)性淋巴瘤患者緩解狀況 1個(gè)療程后完全緩解(CR)1114例(78.57)，部分緩解(PR)314例(21.43)2個(gè)療程后PR3例亦達(dá)CR。夏順中，等，國(guó)產(chǎn)烏苯美司聯(lián)合化療治療難治復(fù)發(fā)性惡性淋巴瘤的臨床觀察，浙江實(shí)用醫(yī)學(xué) 2000;5(6):8-9烏苯美司治療淋巴瘤 烏苯美司增強(qiáng)患者免疫功能 化療前一天開始用烏苯美司膠囊30mg/d，每日晨起空腹口服，連續(xù)治療6個(gè)月夏順中，等，國(guó)產(chǎn)烏苯美司聯(lián)合化療治療難治復(fù)發(fā)性惡性淋巴瘤的臨床觀察，浙江實(shí)用醫(yī)學(xué) 2000;5

34、(6):8-92.1.1烏苯美司對(duì)人白血病細(xì)胞生長(zhǎng)抑制其機(jī)制探討 目的：研究國(guó)產(chǎn)氨肽酶N 抑制劑鳥苯美司(Ubenimex)對(duì)人白血病細(xì)胞的作用及其機(jī)理。 方法：應(yīng)用MTT 比色法觀察Ubenimex對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，DNA 凝膠電泳、DNA片段原位末端標(biāo)記及流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)，分析細(xì)胞凋亡。結(jié)果討論Ubenimex對(duì)HL60細(xì)胞和K562細(xì)胞均有抑制作用，這種作用具有劑量依賴關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r值分別為0641，0632，P 值均小于001。結(jié)果 1、Ubenimex明顯抑制HL60細(xì)胞的生長(zhǎng)，半數(shù)抑制濃度(IC 50)為1303gml；而K562細(xì)胞

35、的敏感性較差。其抑制作用均呈劑量效應(yīng)關(guān)系。 2、典型的細(xì)胞形態(tài)改變，DNA 片段化，DNA 末端原位標(biāo)記的檢出及流式細(xì)胞儀結(jié)果，均證實(shí)Ubenimex能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞的凋亡。 3、 10gml Ubenimex作用12 h即可明顯誘導(dǎo)HL60細(xì)胞DNA 斷裂，K562細(xì)胞的凋亡敏感性顯著低于HL60細(xì)胞；兩者凋亡率均呈劑量和時(shí)間依賴性，經(jīng)Ubenimex處理后，HL60細(xì)胞出現(xiàn)G1期阻滯。結(jié)論：Ubenimex能抑制K562，HL60細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是其機(jī)制之一。結(jié)論Ubenimex能抑制K562，HL60細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是其機(jī)制之一。2.1.2 氨肽酶抑制劑Bestatin誘導(dǎo)人

36、白血病細(xì)胞凋亡的研究 目的：研究國(guó)產(chǎn)氨肽酶N 抑制劑bestatin對(duì)人自血病細(xì)胞的作用及其機(jī)理。 方法：應(yīng)用MTT 比色法觀察bestatin對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD13的表達(dá)；光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變；DNA 凝膠電泳、DNA 片段原位末端標(biāo)記及流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)，分析細(xì)胞凋亡，Rhodamln(Rb) 123染色后，F(xiàn)CM 檢測(cè)細(xì)胞線粒體跨膜電位。結(jié)果討論(1)Bestatin明顯抑制HL60細(xì)胞的生長(zhǎng)，半數(shù)抑制(IC50)約為13.03gml，而K562細(xì)胞的敏感性較差，IC50大于400gml其抑制作用均呈劑量-時(shí)間效應(yīng)關(guān)系。結(jié)果討論(2)典型的

37、細(xì)胞形態(tài)改變，DNA片段化DNA 末端原位標(biāo)記的檢出及FCM 結(jié)果，均證實(shí)bestatin能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞的凋亡.結(jié)果討論 3)10g/ml bestatin作用24h即可明顯誘導(dǎo)HL60細(xì)胞凋亡K562細(xì)胞的凋亡敏感性顯著低于HL60細(xì)胞，兩者凋亡率均呈劑量和時(shí)間依賴性; (4)經(jīng)bestatin作用后,細(xì)胞出現(xiàn)G1期阻滯； (5)經(jīng)bestatin處理的HL60細(xì)胞出現(xiàn)線粒體跨膜屯位()下降;結(jié)論Bestatin能抑制K562、HI 60細(xì)胞生長(zhǎng),誘導(dǎo)凋亡是其機(jī)制之一，該效應(yīng)可能與線粒體下降有關(guān)2.1.3 目的：觀察烏苯美司對(duì)白血病細(xì)胞 長(zhǎng)及白血病細(xì)胞生長(zhǎng)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的抑制作用。 方法：將

38、HL-60，K562，MT-1，MT-2，MOLT-4和Raji白血病細(xì)胞分別與烏苯美司培育，計(jì)數(shù)存活細(xì)胞，測(cè)定MT一1和MT一2的3HTdR參入量及P388細(xì)胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。對(duì)人白血病細(xì)胞生長(zhǎng)及MT-1，MT-2DNA合成的抑制作用烏苯美司4500 mg/L 使HL-60，MT-1，MT-2和Raji細(xì)胞存活數(shù)明顯減少(P0 01)0.1，1，10，100和1000mg/L 可明顯抑制MT-1,MT-2細(xì)胞攝入3HTdR(P0. 01)對(duì)白血病P388細(xì)胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及體外生長(zhǎng)的抑制作用每日ip烏苯美司1，3，l0，30g鼠11 d，與0組相比，小鼠平均生存時(shí)間均顯著延長(zhǎng)(P001或P005)，

39、并發(fā)現(xiàn)P388細(xì)胞在小鼠腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移效明顯減少，P0.01。結(jié)論 烏苯美司能抑制人白血病細(xì)胞生長(zhǎng)及MT-1，MT-2細(xì)胞的DNA合成，有效抑制P388細(xì)胞的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。2.1.12氨膚酶抑制劑Bestatin通過激活半胱天冬酶3誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡 目的：研究半胱天冬酶3在國(guó)產(chǎn)氨膚醉N抑制劑Bestatin(商品名百士欣）誘導(dǎo)人白血病細(xì)胞凋亡過程中的變化及其意義。 方法：用光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，通過DNA片段原位末端標(biāo)記法及流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢側(cè)細(xì)胞凋亡。用發(fā)色底物法檢側(cè)細(xì)胞半脆天冬酶3活性。Rhodamin(Rh) 123染色后，采用FCM檢測(cè)細(xì)胞線粒體跨膜電位。1、凋亡檢

40、測(cè)結(jié)果 細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變:經(jīng)100g/mlBS 作用24h ,姬姆薩染色后光鏡下可見BL-60細(xì)胞核固縮呈凝塊狀，并碎裂呈大小不等的圓滴狀小體;而對(duì)照組細(xì)胞大小均一，形態(tài)正常。 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果:AnnexinFTIC，及P1雙標(biāo)記后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，10g/ml及100g/ml BS作用于H1.60細(xì)胞24 h，分別有23.86%,36.07%細(xì)胞發(fā)生凋亡，且大部分細(xì)胞處于晚期凋亡，空白對(duì)照的凋亡率為8.23%。結(jié)果討論-1凋亡檢測(cè)結(jié)果白血病細(xì)胞凋亡與百士欣的濃度及時(shí)間關(guān)系：用10g/ml及100 4m BS分別作用于BL-60細(xì)胞6,12,24及48 h，隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng)

41、及藥物濃度的增加，凋亡率也增加。表明，BS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡存在藥物濃度及時(shí)間依賴性。結(jié)果討論-2、3、4 2、 細(xì)胞內(nèi)半朧天冬酶3活性隨作用時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高，至48 h達(dá)到最高峰,A.為0.210，對(duì)照組A.為0.032，然后逐漸下降。 3 、半朧天冬酶3抑制劑對(duì)BS誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡,作用24h后，凋亡率從對(duì)照(BS+基質(zhì)DMSO)的22.2%，下降至11.7%. 4 、BS誘導(dǎo)細(xì)胞線粒體m下降，。ML-60細(xì)胞經(jīng)BS 100g/ml作用12及24 h后分別有10.77%, 18.07%的細(xì)胞線粒體m下降，10g/ml 11.52%BS作用24 h線粒體m下降的細(xì)胞為11.52%，對(duì)照組

42、為8.87%。結(jié)論通過激活半胱天冬酶3而誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡。2.1.14氨酞酶抑制劑Bestatin對(duì)人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用 目的：以人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat細(xì)胞為靶細(xì)胞，進(jìn)一步研究Bestatin對(duì)淋巴系腫瘤細(xì)胞的作用。Bestatin對(duì)Jurkat細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用Bestatin對(duì)Jurkat細(xì)胞具有生長(zhǎng)抑制作用表I).不同濃度(0-400ug/ ml)B estatin處理Jurkat細(xì)胞，具有不同的生長(zhǎng)抑制作用(F=11.771, P0.001) 、;Bestatin作用于Jurkat細(xì)胞不同時(shí)間(24h-72h)，其生長(zhǎng)抑制作用亦不同，(F=378.3

43、17,P0.001) ，50 u g/ml濃度Bestatin可明顯抑制Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)(p=0.004). Bestatin對(duì)Jurkat細(xì)胞的抑制作用具有劑量依賴關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.815, p0.001)。Bestatin聯(lián)用DNR對(duì)Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用0.1ug/mlDNR處理24h和48h能顯著抑制Jurkat細(xì)胞生長(zhǎng), 0.1ug/ ml DNR分別聯(lián)合1-100ug/ml Bestatin處理Jurkat細(xì)胞24h，其細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用無明顯變化；聯(lián)合應(yīng)用48h，對(duì)于Jurkat細(xì)胞具有不同的生長(zhǎng)抑制作用，并隨著Bestatin濃度的增加，其抑制率也隨之增大, 1

44、00ug/ mlBestatin可明顯增強(qiáng)DNR對(duì)Jurka:細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，與DNR呈協(xié)同作用。Bestatin聯(lián)用MPD對(duì)Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用 0.4mg/mlMPD處理24h和48h能顯著抑制urkat細(xì)胞生長(zhǎng)。0.4mg/ml MPD分別聯(lián)合1-100 ug/ml Be statin處理Jurkat細(xì)胞24h,48 h,對(duì)Jurkat細(xì)胞具有不同的生長(zhǎng)抑制作用，并隨著Bestatin濃度的增加，其抑制率也隨之增大.10 ug/ml Bestatin作用24h, 5 ug/ml Bestatin作用48h可顯著增強(qiáng)MPD對(duì)Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用(p均小于0.05)，

45、后者與MPD呈協(xié)同作用(F=10.563,p=0.012)。Bestatin聯(lián)用HHT對(duì)Jurkat細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用0.01ug/mlHH T處理24h和48h能顯著抑制Jurkat細(xì)胞生長(zhǎng),0.01 ug/mlHHT分別聯(lián)合1-100 ug/mlBestatin處理Jurkat細(xì)胞24h, 48h，對(duì)Jurkat細(xì)胞具有不同的生長(zhǎng)抑制作用。并隨著Bestatin濃度的增加，其抑制率也隨之增大,Bestatin即可顯著增強(qiáng)HHT對(duì)Jurkat細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用(p=0.001)，與HHT呈協(xié)同作用F=26.882 p=0.001)結(jié)論 Bestatin對(duì)淋巴系腫瘤細(xì)胞株Jurkat細(xì)胞有直接的

46、生長(zhǎng)抑制作用，井與多種化療藥物具有協(xié)同作用，為進(jìn)一步拓寬該藥的臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù).2.1.15烏苯美司增強(qiáng)全反式維甲酸誘導(dǎo)急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞分化的體外研究 目的探討氨肽酶抑制劑烏苯美司對(duì)全反式維甲酸誘導(dǎo)人急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)細(xì)胞分化的影響及可能機(jī)制。 方法采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面分化抗原CD11b, 四氮唑藍(lán)（NBT）還原實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞分化，weslern blot法檢測(cè)細(xì)胞c-Myc、ERK12及p- ERK12、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表達(dá)。結(jié)果討論 Ubenimex增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化的作用 烏苯美司增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)原代API細(xì)胞的NBT還原能

47、力 烏苯美司增強(qiáng)ATRA下調(diào)NB4細(xì)胞c-Myc蛋白的表達(dá)結(jié)果討論 烏苯美司不改變ATRA引起的NB4ERK12的磷酸化 烏苯美司抑制ATRA引起的p38MAPK的磷酸化結(jié)論能夠增強(qiáng)ATRA對(duì)APL細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用, 可能與抑制p38MAPK的磷酸化及對(duì)原癌基因c-Myc表達(dá)的調(diào)控有關(guān)。2.2.4.3百士欣治療CML的藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)價(jià) 采用回顧 臨床試驗(yàn)病例資料對(duì)照分析方法對(duì)在相同的化療方案基礎(chǔ)上加用百士欣(烏苯美司膠囊，以下類同)和不加用百士欣兩種治療方案治療慢性髓性白血病(CML)進(jìn)行藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)價(jià)。結(jié)果討論 1百士欣和羥基脲并用對(duì)CML的療效評(píng)價(jià)試驗(yàn)結(jié)果顯示：百士欣組對(duì)CML血液學(xué)完全緩

48、解率極顯著提高，慢性期、緩解期顯著延長(zhǎng)，生存期顯著延長(zhǎng)，急變率顯著下降，羥基脲用量顯著減少。百士欣組的感染率、感染總頻度 發(fā)熱及抗生素使用天數(shù)均比對(duì)照組低，有極顯著差異2CML患者百士欣組和對(duì)照組治療藥物費(fèi)用情況3百士欣組和對(duì)照組CML患者治療后的經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)分析4百士欣組和干擾能組CML患者治療后的藥物成本指標(biāo)分析 在本項(xiàng)分析中，僅計(jì)主藥費(fèi)用，干擾能較百士欣增加的注射治療等費(fèi)用未計(jì)。結(jié)果顯示：百士欣組和干擾能組CML患者藥物治療費(fèi)用有極顯著差異，干擾能組要遠(yuǎn)高于百士欣組。結(jié)論 兩種研究方法均顯示：百士欣治療CML療效顯著，在藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)上具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。如能更廣泛應(yīng)用，可以減少血液腫瘤病人的

49、醫(yī)療費(fèi)，節(jié)省衛(wèi)生資源。2.2.6.2國(guó)產(chǎn)烏苯美司聯(lián)合化療治療難治復(fù)發(fā)性惡性淋巴瘤的臨床觀察 聯(lián)合化療方法所有病例均用CHOP方案，VCP 2mgd1，ADM 4060mg d1、d3，CTX 400600mg d1、d4，Pred 4060mg d1- d6。6天為1療程，每月化療一次，連續(xù)2 3療程后換用其它方案治療。 化療前一天開始用烏苯美司膠囊30mg，每日晨起空腹口服一次，連續(xù)服藥16月。結(jié)果討論 1個(gè)療程后完全緩解(CR)11/14例(78.57)，部分緩解(PR)3/14例(21.43)2個(gè)療程后PR3例亦達(dá)CR。治療后至今無復(fù)發(fā)患者。 Kamofsky功能狀態(tài)評(píng)分90.27.8，

50、較治療前有明顯改善。結(jié)果討論免疫指標(biāo)評(píng)價(jià) 烏苯美司膠囊聯(lián)合化療治療6月后NK細(xì)胞活力、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、OKT4/OKT8比值均較治療前明顯提高，有顯著差異 ,OKT4/OKT8比值在治療后1、3、6月與治療前比較顯著提高。NK細(xì)胞活性在治療后3、6月比較，顯著提高 。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率在治療后1月與治療前比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 烏苯美司膠囊和化療藥物伍用，能提高難治、復(fù)發(fā)性惡性i林巴瘤的治療效果，調(diào)節(jié)ML患者的細(xì)胞免疫功能。它還能增強(qiáng)阿霉素等抗癌劑的效果。2.2.7.3烏苯美司加改良VAD方案治療26例漿細(xì)胞骨髓瘤患者療效觀察 目的：應(yīng)用烏苯美司加改良VAD方案治療漿細(xì)胞骨髓瘤患者，提高了治療效果

51、，延長(zhǎng)了生存期。 方法：觀察組采用烏苯美司加改良VAD方案，化療間歇期為1015d。烏苯美司30mg/d口服，持續(xù)應(yīng)用3月以上。治療緩解后用烏苯美司加COP方案，烏苯美司30mgd持續(xù)服用。對(duì)照組采用VAD方案加馬法蘭誘導(dǎo)緩解，VAD方案劑量及用法與觀察組一致，而馬法蘭8mgd，口服7d。化療間歇期1015d。維持治療用COP方案加馬法蘭，劑量及用法同前。結(jié)果討論 療效：觀察組13例用烏苯美司加改良VAD方案誘導(dǎo)緩解2療程后，完全緩解9例，完全緩解率69.2 ，部分緩解2例，有效率846 ；對(duì)照組13例用改良VAD方案加馬法蘭治療2療程后，完全緩解5例，完全緩解率384 ，部分緩解4例，有效率

52、692。兩組緩解率和有效率比較差別均有顯著性意義(均P 005)。 不良反應(yīng)：觀察觀察組中所有病例均有不同程度的消化道反應(yīng)，1例并發(fā)消化性潰瘍，同時(shí)加用解痙制酸護(hù)胃藥后癥狀好轉(zhuǎn)，未見有骨髓抑制及心臟毒性反應(yīng)。對(duì)照組病例除消化道反應(yīng)外，有3例出現(xiàn)嚴(yán)重感染導(dǎo)致口腔潰瘍、感染性休克而停用馬法蘭，未見心臟毒性反應(yīng)。 生存期隨訪結(jié)果:觀察組13例中有9例生存期大于5年(5年生存率為692)。對(duì)照組13例中生存期大于5年5例(5年生存率384)，兩組5年生存率差別有顯著性意義(P0.05)。結(jié)論 烏苯美司不良反應(yīng)程度輕，誘導(dǎo)緩解率高，可明顯延長(zhǎng)患者生存期。消化道腫瘤消化道腫瘤烏苯美司抑制胃癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)

53、移臨床研究方勇，等，烏苯美司抑制胃癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移臨床研究，癌癥進(jìn)展雜志 2007；5(4):398-401.摘要 目的：目的：評(píng)價(jià)烏苯美司對(duì)胃癌患者術(shù)后免疫功能及遠(yuǎn)處復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的影響。 方法：方法：60例經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)為期和期胃癌患者隨機(jī)分成3組, 均行術(shù)后常規(guī)輔助化療,A、B兩組分別加服6 個(gè)月、12 個(gè)月烏苯美司, 對(duì)照C組不服烏苯美司。觀察3組的CD4/CD8、NK細(xì)胞活性,以及無病生存期、中位生存時(shí)間。 結(jié)果：結(jié)果：在可評(píng)價(jià)的60例患者中, A、B組兩組在服用烏苯美司后CD4 /CD8比值及NK細(xì)胞活性, 均較治療前自身對(duì)照組及C組明顯提高( P0105);A、B兩治療組的無病生存期

54、和中位生存時(shí)間較對(duì)照C組時(shí)間延長(zhǎng)(P0105)。烏苯美司在胃癌治療的臨床應(yīng)用烏苯美司改善胃癌患者免疫功能，抑制腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、延長(zhǎng)患者生存時(shí)間方勇，等，烏苯美司抑制胃癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移臨床研究，癌癥進(jìn)展雜志 2007；5(4):398-401. 經(jīng)烏苯美司經(jīng)烏苯美司30mg/天治療后，患者免疫指標(biāo)顯著改善天治療后，患者免疫指標(biāo)顯著改善3435363738394041424344對(duì)照組治療6月組治療12月組對(duì)照組治療6月組治療12月組00.20.40.60.811.21.41.61.8對(duì)照組治療6月組治療12月組*與對(duì)照組比較P0.05NK細(xì)胞活力細(xì)胞活力(kU/L)CD4/CD8*0246810

55、12中位無病生存期總無病生存期單位：月單位：月烏苯美司延長(zhǎng)胃癌烏苯美司延長(zhǎng)胃癌患者生存期患者生存期對(duì)照組治療6月組治療12月組烏苯美司在胃癌治療的臨床應(yīng)用烏苯美司改善胃癌患者免疫功能，抑制腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、延長(zhǎng)患者生存時(shí)間方勇，等，烏苯美司抑制胃癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移臨床研究，癌癥進(jìn)展雜志 2007；5(4):398-401.*結(jié)論 胃癌術(shù)后輔助化療患者,服用烏苯美司可顯著改善CD4/CD8比值、NK細(xì)胞活； 延長(zhǎng)無病生存期和中位生存時(shí)間,抑制腫瘤的復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。烏苯美司對(duì)消化道癌癥化療患者免疫功能影響方法：方法： 分組情況：隨機(jī)數(shù)字法分為試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組分組情況：隨機(jī)數(shù)字法分為試驗(yàn)組和對(duì)照組

56、。試驗(yàn)組5151例，例，男男3737例，例， 女女1414例；例； 平均年齡平均年齡(46.8(46.89.6)9.6)歲。對(duì)照組歲。對(duì)照組5151例，男例，男3131例，女例，女2O2O例；平均年齡例；平均年齡(48(483 310102)2)歲。試驗(yàn)歲。試驗(yàn)組包括胃癌組包括胃癌3838例，大腸癌例，大腸癌1313例；對(duì)照組包括胃癌例；對(duì)照組包括胃癌3030例，大例，大腸癌腸癌2l2l例。例。 給藥方法：給藥方法： 試驗(yàn)組患者，從化療第試驗(yàn)組患者，從化療第1 1天開始，晨空腹口服天開始，晨空腹口服30 mg30 mgd d，連續(xù)服藥，連續(xù)服藥6 6個(gè)月。對(duì)照組不用藥。個(gè)月。對(duì)照組不用藥。中國(guó)

57、臨床康復(fù)中國(guó)臨床康復(fù)20042004年第年第8 8卷第卷第2929期期62996299頁頁結(jié)果討論應(yīng)用烏苯美司的實(shí)驗(yàn)組各項(xiàng)免疫指標(biāo)均較用藥前明顯提高，隨著用藥應(yīng)用烏苯美司的實(shí)驗(yàn)組各項(xiàng)免疫指標(biāo)均較用藥前明顯提高，隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，療效更為明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異有顯著性意義時(shí)間的延長(zhǎng)，療效更為明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異有顯著性意義(P0(P005)05)，進(jìn)一步說明烏苯美司確有提高免疫功能的作用。進(jìn)一步說明烏苯美司確有提高免疫功能的作用。組別SIL-2白細(xì)胞介素-2NK細(xì)胞活力OKT4/T8實(shí)驗(yàn)組508811.402.043.48.9 1.70.3對(duì)照組702966.92.0 30.6450.90.3t9.

58、7116.287.423.69p0.050.050.050.05正常人數(shù)據(jù)1.660.33烏苯美司對(duì)消化道癌癥化療患者生活質(zhì)量調(diào)查目前試用的生活質(zhì)量分級(jí)：生活質(zhì)量滿分為目前試用的生活質(zhì)量分級(jí)：生活質(zhì)量滿分為6060分，生活質(zhì)量極差分，生活質(zhì)量極差的為的為2020分，差的為分，差的為21302130分，一般為分，一般為31403140分，較好的為分，較好的為41415050分，良好的為分，良好的為51605160分。分?？偨Y(jié) 烏苯美司有減輕免疫功能抑制，提高腫瘤患者免疫能力的作用。 同時(shí)還能減輕化療給患者帶來的不適反應(yīng)和機(jī)體損傷，改善化療患者的生活質(zhì)量。 患者服用后較少發(fā)現(xiàn)有副作用。Prospe

59、ctive randomize congtrolled study on ubenimex in resectable gastric cancerM Niimoto, et al. Prospective randomize congtrolled study on ubenimex in resectable gastric cancer. Biomed & Pharmacother, 1991;(45)121-124ABSTRACTThe efficacy of Bestatin as adjuvant immunochemotherapy for patients with r

60、esectable gastric cancer was investigated. Ninety-six patients with similar background factors were randomized into two groups; a control group and an experimental group, the patients in the experimental group receiving a daily oral dose of 60 mg Bestatin over a long period. All 96 patients were treated wit