二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析 (2)

1、關(guān)于二氫吡啶類鈣通關(guān)于二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析道阻滯藥物的分析 (2)現(xiàn)在學習的是第1頁，共34頁學習要求：學習要求： 1. 掌握：二氫吡啶類藥物的基本結(jié)構(gòu)及主要理化掌握：二氫吡啶類藥物的基本結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)；結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系；鈰量法性質(zhì)；結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系；鈰量法的原理、方法及注意事項。的原理、方法及注意事項。 2. 熟悉：二氫吡啶類藥物的化學鑒別反應(yīng)及有關(guān)熟悉：二氫吡啶類藥物的化學鑒別反應(yīng)及有關(guān)物質(zhì)檢查的方法；物質(zhì)檢查的方法； 3. 了解：二氫吡啶類藥物其他的鑒別試驗及了解：二氫吡啶類藥物其他的鑒別試驗及含量測定方法、及體內(nèi)分析中樣品的處理方含量測定方法、及體

2、內(nèi)分析中樣品的處理方法。法?，F(xiàn)在學習的是第2頁，共34頁本章背景：本章背景：離子通道示意圖離子通道示意圖現(xiàn)在學習的是第3頁，共34頁本章背景：本章背景：鈣離子通道模型及及蛋白結(jié)構(gòu)鈣離子通道模型及及蛋白結(jié)構(gòu)現(xiàn)在學習的是第4頁，共34頁第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、常見藥物的結(jié)構(gòu)一、常見藥物的結(jié)構(gòu)二氫吡啶類藥物的二氫吡啶類藥物的基本骨架：基本骨架：為活性必需為活性必需，變成吡啶，變成吡啶環(huán)或六氫吡環(huán)或六氫吡啶環(huán)活性消啶環(huán)活性消失失為活性必需，為活性必需，若為乙?；蛉魹橐阴；蚯杌钚越档颓杌钚越档?，若為硝基則，若為硝基則激活鈣通道激活鈣通道鄰、間位有吸電子基鄰、間位有吸電子基團活性較佳

3、，對位取團活性較佳，對位取代活性下降代活性下降取代基與活性關(guān)系次序：取代基與活性關(guān)系次序：H 甲甲基環(huán)烷基苯基或取代苯基基環(huán)烷基苯基或取代苯基現(xiàn)在學習的是第5頁，共34頁硝苯地平硝苯地平尼群地平尼群地平尼莫地平尼莫地平現(xiàn)在學習的是第6頁，共34頁苯磺酸氨氯地平苯磺酸氨氯地平非洛地平非洛地平現(xiàn)在學習的是第7頁，共34頁激活開放鈣通道的二氫吡啶類化合物激活開放鈣通道的二氫吡啶類化合物HNNO2OOFFFHNOOOOOFFFHNNO2OONONBayK8644PN202791CGP28392現(xiàn)在學習的是第8頁，共34頁二、主要理化性質(zhì)二、主要理化性質(zhì)1. 二氫吡啶環(huán)的還原性二氫吡啶環(huán)的還原性 氧化還

4、原反應(yīng)鑒別或氧化還原滴定法含量測定氧化還原反應(yīng)鑒別或氧化還原滴定法含量測定2. 硝基的氧化性硝基的氧化性 重氮化重氮化-偶合反應(yīng)鑒別偶合反應(yīng)鑒別現(xiàn)在學習的是第9頁，共34頁3. 二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性4. 穩(wěn)定性穩(wěn)定性5. 旋光性旋光性6. 吸收光譜特性吸收光譜特性現(xiàn)在學習的是第10頁，共34頁第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗鑒別試驗一、化學鑒別法一、化學鑒別法（一）與亞鐵鹽反應(yīng)（一）與亞鐵鹽反應(yīng) 二氫吡啶類藥物苯環(huán)上硝基具有氧化性，可二氫吡啶類藥物苯環(huán)上硝基具有氧化性，可將將氫氧化亞鐵氫氧化亞鐵氧化為氧化為紅棕色紅棕色氫氧化鐵沉淀。氫氧化鐵沉淀?，F(xiàn)在學習的是第11頁，共34頁

5、ChP2010尼莫地平的鑒別：尼莫地平的鑒別： 取本品約取本品約20mg，加乙醇，加乙醇2ml溶解后，加新制的溶解后，加新制的5%硫酸亞鐵銨溶液硫酸亞鐵銨溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液硫酸溶液1滴與滴與0.5mol/L氫氧化鉀溶液氫氧化鉀溶液1ml，強烈振搖，強烈振搖，1分鐘內(nèi)沉淀分鐘內(nèi)沉淀由灰綠色變?yōu)榧t棕色由灰綠色變?yōu)榧t棕色?，F(xiàn)在學習的是第12頁，共34頁（二）與氫氧化鈉試液反應(yīng)（二）與氫氧化鈉試液反應(yīng)ChP2010硝硝苯地平的鑒別：苯地平的鑒別： 取本品約取本品約25mg，加丙酮，加丙酮1ml溶解，加溶解，加20%氫氧氫氧化鈉溶液化鈉溶液35滴，振搖，溶液滴，振搖，溶液顯橙紅色顯橙紅

6、色。藥物的丙酮溶液與氫氧化鈉試液反應(yīng)顯橙紅色藥物的丙酮溶液與氫氧化鈉試液反應(yīng)顯橙紅色現(xiàn)在學習的是第13頁，共34頁（三）沉淀反應(yīng)（三）沉淀反應(yīng)ChP2010尼莫地平注射液的鑒別：尼莫地平注射液的鑒別： 取本品適量（約相當于尼莫地平取本品適量（約相當于尼莫地平20mg），置分），置分液漏斗中，加液漏斗中，加乙醚乙醚30ml振搖提取，靜置，分取乙振搖提取，靜置，分取乙醚層，置水浴上蒸干，放冷，殘渣加醚層，置水浴上蒸干，放冷，殘渣加乙醇乙醇2ml，攪，攪拌使溶解，移至試管中，加拌使溶解，移至試管中，加1%氯化汞溶液氯化汞溶液3ml，即發(fā)生即發(fā)生白色沉淀白色沉淀。1,4-1,4-二氫吡啶結(jié)構(gòu)與重二氫吡

7、啶結(jié)構(gòu)與重金屬鹽形成沉淀金屬鹽形成沉淀現(xiàn)在學習的是第14頁，共34頁（四）重氮化（四）重氮化-偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)BP2010硝苯地平的鑒別：硝苯地平的鑒別： 取本品取本品25mg，加，加10ml鹽酸鹽酸-水水-乙醇混合溶液（乙醇混合溶液（1.5 3.5 5），溫熱，加入鋅粒），溫熱，加入鋅粒0.5g，放置，放置5分分鐘，濾過，濾液加亞硝酸鈉溶液（鐘，濾過，濾液加亞硝酸鈉溶液（10g/L）5ml，放置放置2分鐘，再加入氨基磺酸銨溶液（分鐘，再加入氨基磺酸銨溶液（50g/L）2ml，搖勻，加入鹽酸搖勻，加入鹽酸萘乙二胺萘乙二胺溶液（溶液（5g/L）2ml，即顯，即顯紅色（持續(xù)紅色（持續(xù)5分鐘以上）。

8、分鐘以上）。苯環(huán)硝基有氧化性，在苯環(huán)硝基有氧化性，在酸性條件下被鋅粉還原酸性條件下被鋅粉還原為芳伯氨基為芳伯氨基現(xiàn)在學習的是第15頁，共34頁二、分光光度法二、分光光度法（一）紫外分光光度法（一）紫外分光光度法ChP2010尼群地平軟膠囊的鑒別：尼群地平軟膠囊的鑒別： 避光操作。取本品的內(nèi)容物約避光操作。取本品的內(nèi)容物約1g，置，置100ml量瓶中量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，取，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，取10ml，置，置100ml量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，在量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，在353nm與與303nm的波長處分別測定吸光度，在的波長處分別測定吸光度，在353nm與與

9、303nm的吸光度比值應(yīng)為的吸光度比值應(yīng)為2.12.3?，F(xiàn)在學習的是第16頁，共34頁（二）紅外分光光度法（二）紅外分光光度法ChP2010尼群地平片的鑒別：尼群地平片的鑒別： 避光操作。取本品（約相當于尼群地平避光操作。取本品（約相當于尼群地平100mg），研細，加），研細，加丙酮丙酮10ml，振搖使溶解，濾過，濾液，振搖使溶解，濾過，濾液暗暗處處揮干，殘渣經(jīng)揮干，殘渣經(jīng)減壓干燥減壓干燥，依法測定。本品的紅外，依法測定。本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集600）一致。）一致。現(xiàn)在學習的是第17頁，共34頁五、色譜法五、色譜法（一）高效液相色譜法（一）高

10、效液相色譜法ChP2010尼莫地平片的鑒別：尼莫地平片的鑒別： 在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留液主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留時間一致。時間一致?，F(xiàn)在學習的是第18頁，共34頁（二）薄層色譜法（二）薄層色譜法BP2010硝苯地平的鑒別：硝苯地平的鑒別： 取本品加取本品加甲醇甲醇制成每制成每1ml 中約含中約含1mg的溶液，作為供的溶液，作為供試品溶液；另取硝苯地平對照品適量，加甲醇制成每試品溶液；另取硝苯地平對照品適量，加甲醇制成每1ml 約含約含1mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述兩種溶液各的溶液

11、，作為對照品溶液。吸取上述兩種溶液各5ul，分別點于同一硅膠，分別點于同一硅膠F254薄層板上，以薄層板上，以乙酸乙酯乙酸乙酯-環(huán)己烷環(huán)己烷（40 60）為展開劑，展開，晾干，置紫外光燈（）為展開劑，展開，晾干，置紫外光燈（254nm）下）下檢視，供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應(yīng)與對照品溶液的檢視，供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應(yīng)與對照品溶液的主斑點一致。主斑點一致。現(xiàn)在學習的是第19頁，共34頁第三節(jié)第三節(jié) 有關(guān)物質(zhì)的檢查有關(guān)物質(zhì)的檢查 二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學歧二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學歧化作用，引入雜質(zhì)，因此各國藥典標準中均規(guī)定在化作用，引入雜質(zhì)，因此各

12、國藥典標準中均規(guī)定在避光條件避光條件下進行有關(guān)物質(zhì)檢查，大多采用下進行有關(guān)物質(zhì)檢查，大多采用HPLC法。法?，F(xiàn)在學習的是第20頁，共34頁 硝苯地平在光照和氧化劑存在條件下分別生硝苯地平在光照和氧化劑存在條件下分別生成兩種降解氧化產(chǎn)物：成兩種降解氧化產(chǎn)物：雜質(zhì)雜質(zhì)I：2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基苯基硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯雜質(zhì)雜質(zhì)II：2,6-二甲基二甲基-4-(2-亞硝基苯基亞硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯現(xiàn)在學習的是第21頁，共34頁ChP2010硝苯地平有關(guān)物質(zhì)的檢查：硝苯地平有關(guān)物質(zhì)的檢查： 避光操作。取本品，精密稱定，加甲醇溶

13、解并定量稀釋避光操作。取本品，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每制成每1ml中約含中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；另取的溶液，作為供試品溶液；另取2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基苯基硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯(雜質(zhì)雜質(zhì))對照對照品與品與2,6-二甲基二甲基-4-(2-亞硝基苯基亞硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯(雜雜質(zhì)質(zhì))對照品，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每對照品，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1ml中各約含中各約含10g的混合溶液，作為對照品貯備液；分別的混合溶液，作為對照品貯備液；分別精密量取供試品溶液與對照品貯備液各適

14、量，用流動相精密量取供試品溶液與對照品貯備液各適量，用流動相定量稀釋制成每定量稀釋制成每1ml中分別含硝苯地平中分別含硝苯地平2g、雜質(zhì)、雜質(zhì)1g與與雜質(zhì)雜質(zhì)1g的混合溶液，作為對照溶液。的混合溶液，作為對照溶液?，F(xiàn)在學習的是第22頁，共34頁 對照高效液相色譜法試驗。用對照高效液相色譜法試驗。用十八烷基硅烷鍵合硅膠十八烷基硅烷鍵合硅膠為填為填充劑；以充劑；以甲醇甲醇-水水(60:40)為流動相；檢測波長為為流動相；檢測波長為235nm。取硝。取硝苯地平對照品、雜質(zhì)苯地平對照品、雜質(zhì)對照品與雜質(zhì)對照品與雜質(zhì)對照品各適量，加對照品各適量，加甲甲醇醇溶解并稀釋制成每溶解并稀釋制成每1ml中各約含中

15、各約含1mg、10g與與10g的混合的混合溶液，取溶液，取20l，注入液相色譜儀，注入液相色譜儀，雜質(zhì)雜質(zhì)峰、雜質(zhì)峰、雜質(zhì)峰與硝苯峰與硝苯地平峰之間的分離度地平峰之間的分離度均應(yīng)符合要求。取對照溶液均應(yīng)符合要求。取對照溶液20l，注入，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使硝苯地平色譜峰的峰高使硝苯地平色譜峰的峰高約為滿量程的約為滿量程的50%；現(xiàn)在學習的是第23頁，共34頁再精密量取供試品溶液與對照溶液各再精密量取供試品溶液與對照溶液各20l，分別注入液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。供倍。供試品溶液的

16、色譜圖中如有與雜質(zhì)試品溶液的色譜圖中如有與雜質(zhì)峰、雜質(zhì)峰、雜質(zhì)峰保留時峰保留時間一致的色譜峰，間一致的色譜峰，按外標法以峰面積計算，均不得過按外標法以峰面積計算，均不得過0.1%；其他單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液中硝；其他單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液中硝苯地平峰面積（苯地平峰面積（0.2%）；雜質(zhì)總量不得過）；雜質(zhì)總量不得過0.5%?，F(xiàn)在學習的是第24頁，共34頁第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定一、鈰量法一、鈰量法NHNO2CO2CH3CH3CH3H3COO2Ce(SO4)26HClO4NNO2CO2CH3CH3CH3H3COO2Ce(ClO4)34H2SO4硝苯地平與硫酸鈰反應(yīng)硝苯地平與硫

17、酸鈰反應(yīng)的摩爾比為的摩爾比為1 2。利用二氫吡啶的還原性利用二氫吡啶的還原性現(xiàn)在學習的是第25頁，共34頁ChP2010硝苯地平的含量測定：硝苯地平的含量測定： 取本品約取本品約0.4g，精密稱定，加無水乙醇，精密稱定，加無水乙醇50ml，微熱使溶解，微熱使溶解，加高氯酸加高氯酸溶液（取溶液（取70%高氯酸高氯酸8.5ml，加水至，加水至100ml）50ml、鄰二氮菲鄰二氮菲指示液指示液3滴，立即用硫酸鈰滴定液（滴，立即用硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，在水浴中加熱至滴定，至近終點時，在水浴中加熱至50左右，繼續(xù)緩緩左右，繼續(xù)緩緩滴定至橙紅色滴定至橙紅色消失，并將滴定的結(jié)果用

18、空白試驗校正。每消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml硫酸鈰滴定液（硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）相當于）相當于17.32mg的的C17H18N2O6?，F(xiàn)在學習的是第26頁，共34頁二、紫外二、紫外-可見分光光度法可見分光光度法ChP2010尼群地平軟膠囊的含量測定：尼群地平軟膠囊的含量測定： 避光操作，取本品避光操作，取本品10粒置小燒杯中，用粒置小燒杯中，用剪刀剪破剪刀剪破嚢嚢殼殼，加無水乙醇少量，加無水乙醇少量，振搖使溶解后，將，振搖使溶解后，將內(nèi)容物與內(nèi)容物與嚢嚢殼全部轉(zhuǎn)移至具塞錐形瓶中殼全部轉(zhuǎn)移至具塞錐形瓶中，用，用無水無水乙醇反復沖洗剪刀及小燒杯乙醇反復沖洗剪刀及小燒杯，洗

19、液并入，洗液并入錐形瓶錐形瓶中，將錐形瓶密塞，置中，將錐形瓶密塞，置40水浴中水浴中加熱加熱15分鐘，并時時振搖，將內(nèi)容物移入分鐘，并時時振搖，將內(nèi)容物移入100ml量瓶中，量瓶中，用無水乙醇用無水乙醇反復沖洗反復沖洗嚢嚢殼和錐形瓶，洗液并入量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻殼和錐形瓶，洗液并入量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取度，搖勻，精密量取2ml，置，置100ml量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，在搖勻，在353nm的波長的波長處測定吸光度；另取處測定吸光度；另取尼群地平對照品尼群地平對照品適量，精密稱適量，精密稱定，用無水乙醇溶解并定量稀釋制成定，用無

20、水乙醇溶解并定量稀釋制成1ml中約含中約含20g的溶液，同法測定，的溶液，同法測定，計算，即得。計算，即得。現(xiàn)在學習的是第27頁，共34頁三、高效液相色譜法三、高效液相色譜法ChP2010尼莫地平分散片的含量測定：尼莫地平分散片的含量測定： 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以鍵合硅膠為填充劑；以甲醇甲醇-乙腈乙腈-水（水（35 38 27）為流動相；檢測波長為流動相；檢測波長為為235nm。理論板數(shù)按尼莫。理論板數(shù)按尼莫地平峰計算不低于地平峰計算不低于8000，尼莫地平峰與相鄰雜質(zhì)峰，尼莫地平峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。的分

21、離度應(yīng)符合要求。現(xiàn)在學習的是第28頁，共34頁測定法測定法 避光操作避光操作。取本品。取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取片，精密稱定，研細，精密稱取適量適量(約相當于尼莫地平約相當于尼莫地平10mg)，置，置50ml量瓶中，量瓶中，加流動相加流動相適量適量，超聲處理超聲處理15分鐘分鐘使尼莫地平溶解，放冷，用使尼莫地平溶解，放冷，用流動相流動相稀稀釋至刻度，搖勻，釋至刻度，搖勻，離心離心10分鐘分鐘(每分鐘每分鐘3000轉(zhuǎn)轉(zhuǎn))，精密量取上，精密量取上清液清液5ml，置，置50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取密量取10l注入液相色譜儀，記錄色

22、譜圖；另取注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取尼莫地平尼莫地平對照品對照品，精密稱定，用流動相溶解并定量稀釋制成每，精密稱定，用流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約中約含含20ug的溶液，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。的溶液，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得?，F(xiàn)在學習的是第29頁，共34頁第五節(jié)第五節(jié) 體內(nèi)二氫吡啶類藥物的分析體內(nèi)二氫吡啶類藥物的分析 氨氯地平分子結(jié)構(gòu)中含有一個手性碳原子，氨氯地平分子結(jié)構(gòu)中含有一個手性碳原子，故具有一對光學異構(gòu)體故具有一對光學異構(gòu)體R-(+)-氨氯地平與氨氯地平與S-(-)-氨氯氨氯地平，僅地平，僅S-(-)-氨氯地平具有血管擴張作用氨氯地平具有血管擴張作用，其中，其中左旋氨氯地平左旋氨氯地平藥效是消旋氨氯地平的藥效是消旋氨氯地平的2倍，因此需倍，因此需進行血漿中氨氯地平對映體的手性分離與立體選進行血漿中氨氯地平對映體的手性分離與立體選擇性藥動學研究。擇性藥動學研究。現(xiàn)在學習的是第30頁，共34頁 人血漿中氨氯地平對映體的固相萃取人血漿中氨氯地平對映體的固相萃取LC-MS/MS法測定：法測定：現(xiàn)在學習的是第31頁，共34頁樣品處理：樣品處理