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1、l鴨病毒性肝炎(DVH)是6周齡以下雛鴨的一種急性、高度致死性和接觸傳染性的病毒病,主要以肝炎為特征。1、歷史、歷史 1945年,Levine和Hofstad首先發(fā)現(xiàn)一種雛鴨的急性疾病,以肝臟腫大和出血為特征。但是沒(méi)有分離到病毒。 1950年, Levine和Fabricant在紐約長(zhǎng)島用雞胚在發(fā)病的白羽北京鴨的組織分離到病毒,病命名為鴨肝炎病毒(Duck hepatitis virus, DHV)。 隨后,蔓延到英國(guó)、加拿大、德國(guó)、埃及、前蘇聯(lián)、日本、巴西等國(guó)家。 在我國(guó)黃均建1963年最早報(bào)道了本病; 隨后,北京、福建、廣東、廣西、浙江、湖南、四川、安徽等地均有本病存在和流行的報(bào)道; 19
2、80年,王平、潘文石等首先在北京分離到該病毒; 1984年,郭玉璞和李勁松等根據(jù)病毒中和試驗(yàn)和血清被動(dòng)免疫保護(hù)試驗(yàn)證實(shí)我國(guó)流行的DHV病原為型DHV。 2、流行與危害、流行與危害 目前,世界上所有的養(yǎng)鴨國(guó)家和地區(qū)都有本病的存在。 DVH主要侵害6周齡以下的雛鴨,尤以2日到3周齡的最為易感,成年鴨有抵抗力。不同日齡的雛鴨發(fā)病率有所不同,有的高達(dá)95%,有的低于15%。耐過(guò)鴨成為僵鴨,生長(zhǎng)和發(fā)育受到障礙,給養(yǎng)鴨業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。 近年,有發(fā)病日齡增大的趨勢(shì),偶見(jiàn)有1月齡發(fā)病的報(bào)道。3、病原學(xué)、病原學(xué) DVH是由DHV引起,現(xiàn)認(rèn)為DHV有、型血清型。 、 型為小RNA病毒科,腸道病毒屬。 為星狀
3、病毒,僅英國(guó)有報(bào)道。 我國(guó)主要為型DHV,1988 年底至1999年初有報(bào)道發(fā)現(xiàn)型DHV,至今未曾有型DHV感染致病鴨的報(bào)道。 1997年以來(lái),出現(xiàn)不能被標(biāo)準(zhǔn)DVH 型弱毒疫苗控制的毒株,懷疑是型病毒的變異株,也就是新型的DHV。3.1 型型DHV 型DHV為小RNA病毒科,腸道病毒屬,病毒粒子呈球形或類球形,核衣殼為二十面體對(duì)稱,直徑為20-40nm,無(wú)囊膜,在胞漿內(nèi)反之。 病毒的基因組為不分節(jié)段的單股的正鏈RNA.具有感染性,病毒蛋白分子質(zhì)量2.6106u,成熟病毒蛋白含有4種多肽蛋白,即VP1、VP2、VP3和VP4。 目前,對(duì)病毒的基因組還沒(méi)有更深入的研究。 鴨肝炎病毒對(duì)乙醚、氯仿和胰
4、酶有抵抗力;耐酸pH3.0達(dá)9 小時(shí);50以下保持熱穩(wěn)定性,對(duì)熱也有較強(qiáng)抵抗力;56加熱1小時(shí),仍有部分病毒存活,6230分鐘使其全部滅活。感染雞胚液中的病毒于4可以存活半年,置20則可保持活力達(dá)9年之久。 病毒對(duì)常用消毒劑也有明顯抵抗力,2來(lái)蘇兒37 60分鐘、1福爾馬林378小時(shí)均不能保證將其徹底滅活。 病毒在外界環(huán)境中能長(zhǎng)期存活,于污染鴨窩中存活10周以上,濕鴨糞中5周以上。孵化器內(nèi)的鴨肝炎病毒能存活10周。病毒增殖的宿主:可在鴨胚、雞胚、鵝胚的尿囊腔中增殖; 可以在雞胚組織中增殖,但是不產(chǎn)生病變;在鴨胚肝、腎細(xì)胞上增殖可以產(chǎn)生CPE。 有人報(bào)道, 、 型DHV在鴨胚肝、腎細(xì)胞上不產(chǎn)生細(xì)
5、胞病變,可以借此將 型與、 型區(qū)分。 病毒存在于病鴨的腦、肺、心、肝、脾等器官和肌肉組織中,感染雛鴨的肝、脾含病毒量最高,而心、腦、肺次之。感染雞胚的胚體含病毒量最多,而尿囊液含病毒量最少。3.2 型型 DHV 型 DHV屬于星狀病毒科,在電鏡下,病毒顆粒的形狀呈特征性的帶頂角的星形,直徑為28-30nm。耐受氯仿。病毒增殖宿主:可以在雞胚中增殖,但是不能在鴨和雞的細(xì)胞培養(yǎng)物中增殖。 3.3 型型DHV 型DHV為小RNA病毒科,與型沒(méi)有共同的抗原。病毒粒子直徑為30nm,耐受氯仿。 病毒增殖的宿主:鴨胚尿囊腔,鴨胚或雛鴨的肝、腎細(xì)胞。 4、發(fā)病機(jī)理、發(fā)病機(jī)理型DHV強(qiáng)毒肌注4日齡易感雛鴨3小
6、時(shí)后病毒到達(dá)肝、脾、腎、胰、腦、心肌、腿肌(組織細(xì)胞變性)24小時(shí)后病毒大量增殖,組織呈嚴(yán)重的壞死性變化24-48小時(shí)雛鴨大量死亡3-7天機(jī)體防御機(jī)能增強(qiáng),受損細(xì)胞再生,病毒增殖受到抑制死亡雛鴨減少型DHV對(duì)雛鴨神經(jīng)組織有直接的損傷作用,而且對(duì)中樞神經(jīng)的作用強(qiáng)于外周神經(jīng)雛鴨感染DHV后: 血清總蛋白下降; 谷丙氨酸梅(GPT)、堿性磷酸酶(ALP)、膽紅素、肌酸酐等指數(shù)明顯上升; 超氧化物酶(SOD)和谷氨酸甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)的活性顯著升高。5、診斷方法、診斷方法 DVH的診斷主要從流行病學(xué)、病原檢測(cè)和病理組織形態(tài)變化等進(jìn)行綜合判斷。 病原的檢測(cè)的方法主要是血清學(xué)方法,目前還沒(méi)有分
7、子生物學(xué)方面的報(bào)道。血清學(xué)的方法主要有中和試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、對(duì)流免疫電泳、血凝試驗(yàn)、熒光抗體技術(shù)、ELISA。其中,最常用和最經(jīng)典的方法是中和試驗(yàn)。5.1 中和試驗(yàn)中和試驗(yàn) 中和試驗(yàn)可以在雞胚、鴨胚、雛鴨上進(jìn)行,由于型DHV在細(xì)胞上很難產(chǎn)生細(xì)胞病變,所以一般不在細(xì)胞上進(jìn)行,只能進(jìn)行病毒適應(yīng)細(xì)胞中和試驗(yàn)。 中和試驗(yàn)工作煩瑣,費(fèi)事,不能用于快速診斷,不適用基層。5.2 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)和對(duì)流免疫電泳瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)和對(duì)流免疫電泳 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)結(jié)果確切,但是敏感性低,并且有干擾。 對(duì)流免疫電泳的檢測(cè)特異性存在爭(zhēng)議,所以在DHV的檢測(cè)方面很少使用。5.3 血凝試驗(yàn)血凝試驗(yàn) 在純化病毒的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步純化病毒
8、抗原,使用致敏的醛化綿羊紅血球建立間接血凝抑制試驗(yàn),陽(yáng)性結(jié)果的符合率與中和試驗(yàn)比為84.6%。 但是由于影響血凝抑制的因素太多,在敏感性和穩(wěn)定性方面有波動(dòng),限制了該法的推廣。5.4 熒光抗體檢測(cè)熒光抗體檢測(cè) 用直接熒光抗體試驗(yàn)檢測(cè)DHV是快速和準(zhǔn)確的診斷方法。郭玉璞就是應(yīng)用間接熒光抗體技術(shù)證實(shí)了我國(guó)流行的DVH是 型DHV引起的。 免疫熒光抗體法具有快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點(diǎn),但是費(fèi)用高,設(shè)備要求也高,所以很難推廣使用。5.5 ELISA 陳溥言報(bào)道DHV單抗研制成功,并用單抗建立了ELISA雙抗夾心法以檢測(cè)病毒。 孫泉云將單抗的高度特異性與ELISA 的高度靈敏性結(jié)合起來(lái), 建立了用以檢測(cè)DHV 抗體的單抗捕捉法ELISA方法。該法能有效區(qū)分陰、陽(yáng)性血清,非特異性背景很小。 總的來(lái)說(shuō), ELISA 方法在眾多的血清學(xué)方法具有靈敏度高,操作簡(jiǎn)便,特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。6、防制、防制 目前,防治以弱毒疫苗、滅活苗、高免血清和高免血清抗體為主,用中草藥進(jìn)行治療也有一定的效果。 預(yù)防:成鴨產(chǎn)蛋前用DHV 型弱毒疫苗進(jìn)行免疫接種,產(chǎn)蛋中期再加強(qiáng)免疫一次。雛鴨出殼后1日齡或7日齡免疫一次。 疫區(qū)的雛鴨在1-2日齡
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