微生物的培養(yǎng)與利用

1、微生物的培養(yǎng)與利用微生物的培養(yǎng)與利用微生物的微生物的培養(yǎng)與分離培養(yǎng)與分離某種微生物數(shù)量的某種微生物數(shù)量的測定測定培養(yǎng)基對微生物的培養(yǎng)基對微生物的選擇選擇作用作用利用微生物進行利用微生物進行發(fā)酵發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物發(fā)酵過程中發(fā)酵過程中亞硝酸鹽亞硝酸鹽含量的測定含量的測定微生物微生物 原核生物界原核生物界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界一、微生物的類群一、微生物的類群( (細菌、放線菌、藍藻細菌、放線菌、藍藻) )( (酵母菌、霉菌、大型真菌酵母菌、霉菌、大型真菌) )( (草履蟲、變形蟲、衣藻草履蟲、變形蟲、衣藻) )( (噬菌體、艾滋病毒噬菌體、艾滋病毒) )特點

2、：結(jié)構(gòu)都相當特點：結(jié)構(gòu)都相當簡單簡單, ,個體多數(shù)十分個體多數(shù)十分微小微小. .通通常要用常要用光學顯微鏡或電子顯微鏡光學顯微鏡或電子顯微鏡才能看到，有才能看到，有的甚至沒有細胞結(jié)構(gòu)的甚至沒有細胞結(jié)構(gòu). .類群類群結(jié)構(gòu)特點結(jié)構(gòu)特點遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)繁殖方式繁殖方式舉例舉例病毒病毒原核原核生物界生物界真菌界真菌界原生原生生物界生物界無細胞結(jié)構(gòu)無細胞結(jié)構(gòu)原核原核( (細胞細胞壁、膜、質(zhì)壁、膜、質(zhì)) )真核真核( (細胞壁、細胞壁、膜、質(zhì)、核膜、質(zhì)、核) )真核真核( (細胞膜、細胞膜、質(zhì)、核質(zhì)、核) )噬菌體噬菌體煙草花葉病煙草花葉病毒毒流感病毒流感病毒細菌細菌( (形狀形狀菌菌) )放線菌放線菌霉

3、菌、蘑霉菌、蘑菇、酵母菇、酵母菌菌衣藻、草衣藻、草履蟲、變履蟲、變形蟲形蟲DNADNA或或RNARNADNADNADNADNADNADNA增殖：吸附增殖：吸附注入注入合合成成裝配裝配釋放釋放分裂生殖分裂生殖( (二分裂二分裂) )孢子生殖孢子生殖出芽生殖出芽生殖分裂生殖分裂生殖有性生殖有性生殖擬核，大型環(huán)狀擬核，大型環(huán)狀DNADNA質(zhì)粒質(zhì)粒( (含抗生素抗藥性，固氮基因含抗生素抗藥性，固氮基因) )其成分為其成分為肽聚糖肽聚糖芽孢芽孢細菌的細菌的休眠體休眠體，對，對惡劣的環(huán)境有抵抗力惡劣的環(huán)境有抵抗力細菌的營養(yǎng)細菌的營養(yǎng)異養(yǎng)型異養(yǎng)型自養(yǎng)型自養(yǎng)型藍藻藍藻 硝化細菌等硝化細菌等寄生寄生腐生腐生菌落

4、菌落可作為可作為菌種鑒定的菌種鑒定的重要依據(jù)重要依據(jù)細菌的代謝細菌的代謝自養(yǎng)自養(yǎng)硝化細菌、鐵細菌、硫細菌等。硝化細菌、鐵細菌、硫細菌等。異養(yǎng)異養(yǎng)大腸桿菌、乳酸菌、枯草桿菌等。大腸桿菌、乳酸菌、枯草桿菌等。枯草桿菌、硝化細菌、鐵細菌、根瘤菌等。枯草桿菌、硝化細菌、鐵細菌、根瘤菌等。破傷風桿菌、乳酸菌等。破傷風桿菌、乳酸菌等。需氧型：需氧型：厭氧型：厭氧型：二、培養(yǎng)基：二、培養(yǎng)基：培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法配制而成的，培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。、概念：、概念：、營養(yǎng)成份：、營養(yǎng)成份：營養(yǎng)成份：水、碳源、氮源、無

5、機鹽營養(yǎng)成份：水、碳源、氮源、無機鹽其它：、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣（其它：、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣（15）3 3、培養(yǎng)基的類型和用途、培養(yǎng)基的類型和用途（1 1）按物理狀態(tài)來分：）按物理狀態(tài)來分：固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基和和液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基。 其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。（2 2）按功能來分，可分為）按功能來分，可分為選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基和和鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基。（3 3）按成分來分，可分為）按成分來分，可分為天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基和和合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基。（4 4）選擇培養(yǎng)基的常見用途）選擇培養(yǎng)基的常見用途 加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基 分離

6、酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌 加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌 不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基 分離固氮微生物分離固氮微生物 不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基 分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物 加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基 分離導入了目的基因的受體細胞分離導入了目的基因的受體細胞1 1、伊紅美藍培養(yǎng)基為常用鑒別培養(yǎng)基、伊紅美藍培養(yǎng)基為常用鑒別培養(yǎng)基 2 2、剛果紅與纖維素等多糖類物質(zhì)反應形成紅色復合剛果紅與纖維素等多糖類物質(zhì)反應形成紅色復合物，添加物，添加剛果紅剛果紅的培養(yǎng)基呈的

7、培養(yǎng)基呈紅色紅色，接種的微生物若，接種的微生物若能夠分解纖維素，就會在其菌落的周圍形成能夠分解纖維素，就會在其菌落的周圍形成透明圈透明圈 （5）鑒別培養(yǎng)基4、培養(yǎng)基配制的操作步驟：、培養(yǎng)基配制的操作步驟：三、無菌技術(shù)操作三、無菌技術(shù)操作 無菌操作泛指無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。所有防止雜菌污染的方法。 定義常用方法 微生物培養(yǎng)和組培的應用消毒使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分菌體,但不傷及活組織煮沸玻璃儀器紫外線實驗室、操作臺、衣物等酒精溶液手、外植體等次氯酸鈉溶液等外植體滅菌使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有菌體、芽孢和孢

8、子高壓蒸汽培養(yǎng)基、玻璃儀器、棉塞、牛皮紙等灼燒接種環(huán)、涂布器等干熱玻璃儀器四、微生物的純化培養(yǎng)：四、微生物的純化培養(yǎng)： 自然環(huán)境中，微生物混在一起生長，要想純自然環(huán)境中，微生物混在一起生長，要想純化培養(yǎng)，首先要將單個細胞與其他細胞分離開，化培養(yǎng)，首先要將單個細胞與其他細胞分離開，進而培養(yǎng)成可見的群體。進而培養(yǎng)成可見的群體。 包括培養(yǎng)基的制備和純化微生物兩個階段，包括培養(yǎng)基的制備和純化微生物兩個階段，純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。釋涂布平板法。1 1、器具的滅菌、器具的滅菌2 2、培養(yǎng)基的配制、培養(yǎng)基的配制3 3、培養(yǎng)基的滅菌、

9、培養(yǎng)基的滅菌4 4、倒平板、倒平板5 5、微生物接種、微生物接種6 6、恒溫箱中培養(yǎng)、恒溫箱中培養(yǎng)7 7、菌種的保存、菌種的保存1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計算計算稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板（1）、）、溶化時為什么要將牛肉膏連同稱量紙一起加熱溶化時為什么要將牛肉膏連同稱量紙一起加熱?可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中，減少誤差減少誤差。（2）、加瓊脂的目的是什么）、加瓊脂的目的是什么?作為凝固劑作為凝固劑（二）、純化大腸桿菌（二）、純化大腸桿菌計算計算稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板3、在滅菌前在滅菌前,

10、用牛皮紙、舊報紙包緊盛有培養(yǎng)用牛皮紙、舊報紙包緊盛有培養(yǎng)基的錐形瓶的目的是什么？基的錐形瓶的目的是什么？在滅菌時能避免水蒸汽凝結(jié)時浸濕棉塞在滅菌時能避免水蒸汽凝結(jié)時浸濕棉塞，在取出培在取出培養(yǎng)基錐形瓶時也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用養(yǎng)基錐形瓶時也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用。 4、培養(yǎng)皿能否用高壓蒸汽滅菌？培養(yǎng)皿能否用高壓蒸汽滅菌？不能不能，因為培養(yǎng)皿要保持干燥因為培養(yǎng)皿要保持干燥，應該用干熱滅菌應該用干熱滅菌。（一）（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基5、倒平板、倒平板（二）純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌（一）（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基三

11、、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌1、接種最常用方法有：、接種最常用方法有：（一）（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基三、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌1、接種最常用方法有：、接種最常用方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法平板劃線法和稀釋涂布平板法（一）（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基三、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌1、接種最常用方法有：、接種最常用方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法平板劃線法和稀釋涂布平板法2、平板劃線法、平板劃線法（一）（一）制

12、備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基三、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌劃線接種的基本步驟和說明: 序列序列 操作步驟操作步驟 分析說明分析說明1 1將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅將接種環(huán)滅菌，避免污染菌種將接種環(huán)滅菌，避免污染菌種2 2在火焰旁冷卻接種環(huán)，拔除盛有菌液的試管棉塞在火焰旁冷卻接種環(huán)，拔除盛有菌液的試管棉塞避免雜菌污染菌種避免雜菌污染菌種3 3將試管口通過火焰將試管口通過火焰灼燒滅菌，防止試管口菌體污染培養(yǎng)基灼燒滅菌，防止試管口菌體污染培養(yǎng)基4 4將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中，沾取菌液將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中，沾取菌液冷卻接

13、種環(huán)可避免殺死菌種冷卻接種環(huán)可避免殺死菌種5 5將試管口通過火焰，并塞上棉塞將試管口通過火焰，并塞上棉塞避免試管口雜菌污染菌種避免試管口雜菌污染菌種6 6左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基初步接種。劃破培養(yǎng)基不利于后續(xù)的繼初步接種。劃破培養(yǎng)基不利于后續(xù)的繼續(xù)劃線，長出的菌落不標準續(xù)劃線，長出的菌落不標準7 7灼燒接種環(huán)，冷卻后從第一區(qū)劃線的末端向第二灼燒接種環(huán)，冷卻后從第一區(qū)劃線的末端向第二區(qū)劃線。重復以上操作，在

14、第三、四、五區(qū)劃線。區(qū)劃線。重復以上操作，在第三、四、五區(qū)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連從上個區(qū)域的末端向下個區(qū)域劃線從上個區(qū)域的末端向下個區(qū)域劃線, ,可逐可逐步分離出單個菌體，從而實現(xiàn)微生物的步分離出單個菌體，從而實現(xiàn)微生物的純化純化8 8將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)倒置平板防止水分蒸發(fā)，也方便拿放倒置平板防止水分蒸發(fā)，也方便拿放1、接種最常用方法有：、接種最常用方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法平板劃線法和稀釋涂布平板法2、平板劃線法、平板劃線法3、稀釋涂布法、稀釋涂布法（1）系列稀釋操作系列稀釋操作：（二）純化

15、大腸桿菌（二）純化大腸桿菌（一）（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基三、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌（1）系列稀釋操作：1、接種最常用方法有：、接種最常用方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法平板劃線法和稀釋涂布平板法2、平板劃線法、平板劃線法3、稀釋涂布法、稀釋涂布法（1）系列稀釋操作系列稀釋操作：（二）純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌（一）（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基三、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌（2）涂布平板操作涂布平板操作（2）涂布平板操作1、接種最常用方法有：、接種最常用方法有：2、平板劃線法、平板劃線法3、稀釋涂布法、稀釋涂布法（二）

16、純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌（一）（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基三、純化大腸桿菌三、純化大腸桿菌將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基放入將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基放入3737恒溫箱中培養(yǎng)恒溫箱中培養(yǎng)12h12h和和24h24h后，觀察并記錄后，觀察并記錄四、菌種的保藏四、菌種的保藏1.斜面保藏斜面保藏臨時保存臨時保存2.甘油保藏甘油保藏長期保存長期保存 3、某種微、某種微生物數(shù)量的測定生物數(shù)量的測定生長：生長：個體體積的增加個體體積的增加繁殖繁殖：個體生長到一定階段，通過特定方式產(chǎn)生新個體生長到一定階段，通過特定方式產(chǎn)生新 個體，即引起生命個體數(shù)量增加的

17、生物學過程。個體，即引起生命個體數(shù)量增加的生物學過程。在微生物學中提到的在微生物學中提到的“生長生長”，一般均指群體生長，這一點與，一般均指群體生長，這一點與研究大生物時有所不同。研究大生物時有所不同。細菌太小，往往討論其群體生長。細菌太小，往往討論其群體生長。（一）微生物生長概述（一）微生物生長概述 1、稀釋平板計數(shù)法、稀釋平板計數(shù)法 對樣品進行適當稀釋對樣品進行適當稀釋 單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖單個微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖 肉眼可見的菌落肉眼可見的菌落 對菌落數(shù)目的計數(shù)推測樣品中的微生物細胞數(shù)對菌落數(shù)目的計數(shù)推測樣品中的微生物細胞數(shù)（二）以數(shù)量變

18、化對微生物生長情況進行測定（二）以數(shù)量變化對微生物生長情況進行測定同一稀釋度三個以上重復同一稀釋度三個以上重復,取平均值；取平均值；每支移液管及涂布器只能接觸一個每支移液管及涂布器只能接觸一個稀釋度的菌液；稀釋度的菌液；樣品充分混勻；樣品充分混勻；每個平板上的菌落數(shù)目合適，便于每個平板上的菌落數(shù)目合適，便于準確計數(shù)；準確計數(shù)；要要求：求：每克樣品中的菌株數(shù)=（C/V）* M2.顯微鏡直接計數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法采用采用細菌計數(shù)板細菌計數(shù)板或或血球計數(shù)板血球計數(shù)板，顯微鏡下直接計數(shù)，顯微鏡下直接計數(shù)（計算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量）。（計算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量）。取清潔無油的血球計數(shù)板，

19、在計數(shù)室上面加取清潔無油的血球計數(shù)板，在計數(shù)室上面加蓋血蓋片。蓋血蓋片。 取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計數(shù)室內(nèi)不得有一小滴，使菌液自行滲入，計數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。氣泡。用用10鏡觀察并將計數(shù)室移至視野中央。鏡觀察并將計數(shù)室移至視野中央。 在在10鏡下計數(shù)：計數(shù)鏡下計數(shù)：計數(shù)4個（或個（或5個）中格的個）中格的平均值，然后求得每個中格的平均值。乘上平均值，然后求得每個中格的平均值。乘上16（或（或25）就得出計數(shù)區(qū)總菌數(shù)，最后再換）就得出計數(shù)區(qū)總菌數(shù)，最后再換算到每算到每mL菌液中的含菌數(shù)。菌液中的含菌數(shù)。注意事項：注意事項：

20、計上不計下，計左不計右。出芽計上不計下，計左不計右。出芽計一半計一半必修必修3P3P6868顯微鏡直接計數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法缺點：缺點：不能區(qū)分死菌與活菌；不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對運動細菌的計數(shù)；不適于對運動細菌的計數(shù)；需要相對高的細菌濃度；需要相對高的細菌濃度；個體小的細菌在顯微鏡下難以觀察；個體小的細菌在顯微鏡下難以觀察； 課題名課題名稱稱實驗儀器和實驗儀器和設(shè)備設(shè)備 實驗試劑或藥品實驗試劑或藥品說明說明微生物的微生物的實驗室培實驗室培養(yǎng)養(yǎng)培養(yǎng)皿、培養(yǎng)皿、試管、錐形試管、錐形瓶、量筒、瓶、量筒、酒精燈、電酒精燈、電子天秤、高子天秤、高壓蒸汽滅菌壓蒸汽滅菌鍋、移液管、鍋、移液管、接種環(huán)、

21、涂接種環(huán)、涂布器、恒溫布器、恒溫箱、干熱滅箱、干熱滅菌箱、小鐵菌箱、小鐵鏟等鏟等 牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、鹽酸、氫氧化鈉、瓊脂等鹽酸、氫氧化鈉、瓊脂等干熱滅干熱滅菌箱能菌箱能夠迅速夠迅速地將洗地將洗干凈的干凈的培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿和試管和試管烘干，烘干，小鐵鏟小鐵鏟用于鏟用于鏟土土土壤中分土壤中分解尿素的解尿素的細菌的分細菌的分離與計數(shù)離與計數(shù)除配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基除配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需物質(zhì)外，增加所需物質(zhì)外，增加KHKH2 2POPO4 4 、NaHPONaHPO4 4、MgSOMgSO4 47H7H2 2O O、葡萄糖、葡萄糖、尿素、酚紅等尿素、酚紅等分解纖維分解纖

22、維素的微生素的微生物的分離物的分離除配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基除配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需物質(zhì)外，增加纖維素、所需物質(zhì)外，增加纖維素、NaNONaNO3 3、NaNa2 2HPOHPO4 47H7H2 2O O、KHKH2 2POPO4 4、KClKCl、酵母膏、水解酪素、酵母膏、水解酪素、CMC-Na(CMC-Na(羧甲基纖維素鈉羧甲基纖維素鈉) )、土豆汁、剛果紅等土豆汁、剛果紅等土壤取樣 選擇培養(yǎng)（此步是否需要，應根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定） 梯度稀釋 將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上 挑選單菌落 發(fā)酵培養(yǎng) 土壤中某樣品細菌的分離與計數(shù)流程圖表示如下：土壤中某樣品細菌的分離與計

23、數(shù)流程圖表示如下： （09寧夏理綜）寧夏理綜）32生物選考題生物選考題 A生物生物選修選修I生物技術(shù)實踐生物技術(shù)實踐 某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題。請回答與此實驗相關(guān)的問題。 （1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了提供了_ 和和_ 。除此之外，培養(yǎng)基還必須含。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的有的基本成分基本成分是是_ 和和 _。 （2）對培養(yǎng)基

24、進行滅菌，應該采用的方法是）對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是_ _ _。碳源碳源氮源氮源無機鹽無機鹽高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌水水（09寧夏理綜）寧夏理綜）32生物選考題生物選考題 （3）為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應將接）為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應將接種了湖水樣品的平板置于種了湖水樣品的平板置于_ 中培養(yǎng)，培養(yǎng)的中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在溫度設(shè)定在37。要。要使該實驗所得結(jié)果可靠使該實驗所得結(jié)果可靠，還應該，還應該同時在另一平板上接種同時在另一平板上接種_ 作為對照進行實驗。作為對照進行實驗。 （4）培養(yǎng)）培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有同的菌落，這說明湖水樣品中有_種細菌。一般種細菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越_。 （5）如果提高培養(yǎng)基中）如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選的濃度，可以用于篩選耐耐_細菌，這種培養(yǎng)基被稱為細菌，這種培養(yǎng)基被稱為_。恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱無菌水無菌水多多高高鹽（或鹽（或NaCl）選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基4、利用微生物進行發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物、利用微生物進行發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物（1）果酒和果醋的制作）果酒和果醋的制作（2 2）腐乳的制作）腐乳的制作（