艾肯菌的分離與鑒定

1、艾肯菌的分離與鑒定艾肯菌的分離與鑒定 北京醫(yī)院北京醫(yī)院陳東科陳東科 w 苛養(yǎng)菌苛養(yǎng)菌(fastidious microorganism)是一類(lèi)生長(zhǎng)需是一類(lèi)生長(zhǎng)需要特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的細(xì)菌，與許多感染性疾病有要特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的細(xì)菌，與許多感染性疾病有關(guān)，其分離培養(yǎng)較為困難，由這些菌引起的感關(guān)，其分離培養(yǎng)較為困難，由這些菌引起的感染發(fā)病率一直難以估計(jì)。因此，對(duì)苛養(yǎng)菌的分染發(fā)病率一直難以估計(jì)。因此，對(duì)苛養(yǎng)菌的分離鑒定和藥敏試驗(yàn)不僅是臨床迫切的需要，同離鑒定和藥敏試驗(yàn)不僅是臨床迫切的需要，同時(shí)也是衡量一個(gè)細(xì)菌室技術(shù)水平的重要標(biāo)志。時(shí)也是衡量一個(gè)細(xì)菌室技術(shù)水平的重要標(biāo)志。 w 其中“HACEK”細(xì)菌群生長(zhǎng)緩慢且

2、需CO2環(huán)境，所致感染有相關(guān)性。此群苛養(yǎng)菌系人類(lèi)口腔、呼吸道、泌尿生殖道的正常菌群，在一定條件下可引起嚴(yán)重感染。w H代表嗜血桿菌屬(Haemophilus)；w A代表放線(xiàn)桿菌屬(Actinobacillus)；w C代表心桿菌屬(Cardiobacterium)；w E代表艾肯菌屬(Eikenella)；w K代表金氏菌屬(Kingella)。 1.概概 述述w 腐蝕艾肯菌（Eikenella corrodens）系人類(lèi)口腔及泌尿生殖道的正常菌群，是苛養(yǎng)菌群中的慢速生長(zhǎng)菌，在一定條件下可引起嚴(yán)重感染，主要引起細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、菌血癥和混合性細(xì)菌感染（尤其在人咬傷感染標(biāo)本中多見(jiàn)）。 w 腐蝕艾

3、肯菌是艾肯菌屬中的唯一菌種，屬奈瑟菌科。腐蝕艾肯菌是人類(lèi)粘膜表面固有菌群的一部分，經(jīng)常從上呼吸道標(biāo)本中分離出該菌，也可從胃腸道或泌尿生殖道標(biāo)本中分離到，通常不致病，只形成帶菌狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體免疫力下降或粘膜表面破損時(shí)，此菌進(jìn)入周?chē)M織引起感染。 w 腐蝕艾肯菌可引起人類(lèi)的多種感染，如軟組織膿腫、中耳炎、鼻竇炎、肺炎、心內(nèi)膜炎、腦膜炎、敗血性關(guān)節(jié)炎及術(shù)后感染等，但該菌常與其他細(xì)菌一起引起混合感染，此類(lèi)感染常發(fā)生在頭頸部或腹部。在人咬傷感染標(biāo)本中經(jīng)常分離到此菌。2.鏡下形態(tài)鏡下形態(tài)w 取菌落涂片，革蘭染色后鏡下見(jiàn)到無(wú)芽孢的革蘭陰性多形態(tài)小桿菌。 3.生化特性生化特性w 觸酶試驗(yàn)陰性，氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，靛

4、基質(zhì)及尿素酶試驗(yàn)陰性，硝酸鹽還原試驗(yàn)陽(yáng)性，鳥(niǎo)氨酸脫羧酶陽(yáng)性，葡萄糖O-F陰性。 4.培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性w 腐蝕艾肯菌是兼性厭氧菌，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高，初代分離需要氯化血紅素，在含3%10%CO2的環(huán)境中生長(zhǎng)良好。腐蝕艾肯菌不能在MH、HTM、營(yíng)養(yǎng)瓊脂及中國(guó)蘭瓊脂平板上生長(zhǎng)。有文獻(xiàn)報(bào)道，再添加了5mg/L克林霉素（或5mg/L氯潔霉素）的選擇性培養(yǎng)基上可顯著提高腐蝕艾肯菌的分離率，但要注意應(yīng)與常規(guī)培養(yǎng)基一起使用，以免將其他致病菌丟失。5.菌落特征菌落特征w 在5%羊血瓊脂平板上經(jīng)24h培養(yǎng)后，可形成針尖大小的菌落。 w 培養(yǎng)48h該菌是沒(méi)有形態(tài)特點(diǎn)的(形成光滑、濕潤(rùn)、圓形、半透明的小菌落)，不易與其它

5、細(xì)菌相區(qū)別。 w 經(jīng)過(guò)72h以上培養(yǎng)后方呈現(xiàn)出該菌的典型菌落形態(tài)特征來(lái)，即較干燥、扁平、中心凸起、有擴(kuò)散生長(zhǎng)邊緣的菌落。 w 典型形態(tài)一：典型形態(tài)一：w 經(jīng)96 h培養(yǎng)后，在5%羊血瓊脂平板上呈干燥、扁平、圓形、透明、中間突起、邊緣呈擴(kuò)散生長(zhǎng)、直徑24mm的斗笠樣菌落 。 w 典型形態(tài)二：典型形態(tài)二：w 經(jīng)96 h培養(yǎng)后，在5%羊血瓊脂平板上呈扁平、圓形、表面粗燥、半透明、中央凸起、邊緣呈擴(kuò)散生長(zhǎng)、直徑24mm的草帽樣菌落 。 w 典型形態(tài)三：典型形態(tài)三：w 經(jīng)96 h培養(yǎng)后，在5%羊血瓊脂平板上呈光滑、圓形、半透明、中央突起、直徑13mm的菌落 。 w 形態(tài)四：形態(tài)四：w 經(jīng)96 h培養(yǎng)后，在5%羊血瓊脂平板上呈光滑、圓形、半透明、淡黃色、直徑23mm的菌落 。 w 培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)菌落周?chē)囵B(yǎng)基可呈草綠色，用棉簽?zāi)ㄈ【梢?jiàn)黃色。該菌的純培養(yǎng)物有一種類(lèi)似發(fā)霉的口腔菌群的特殊氣味。以上特點(diǎn)應(yīng)在實(shí)際操做中加以注意。6.耐藥性耐藥性w 腐蝕艾肯菌對(duì)克林霉素天然耐藥，但對(duì)其他如青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、碳青霉烯類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、氨基糖甙類(lèi)、大環(huán)內(nèi)