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文檔簡介
1、熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練12基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練課程標(biāo)準(zhǔn)課程標(biāo)準(zhǔn)概概述基因工程的基本操作程序。述基因工程的基本操作程序。課標(biāo)解讀課標(biāo)解讀1.通通過比較、分析,掌握目的基因獲取的常見方法。過比較
2、、分析,掌握目的基因獲取的常見方法。2.理解目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的具體過程。理解目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的具體過程。3.結(jié)合基因的表達(dá)過程,掌握目的基因檢測與鑒定的具體操作。結(jié)合基因的表達(dá)過程,掌握目的基因檢測與鑒定的具體操作。 熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練1基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序(1) 的的獲取。獲取。(2) 的構(gòu)建。的構(gòu)建。(3)將目的基因?qū)雽⒛康幕驅(qū)?。(4)目的基因的目的基因的 。目的基因的獲取目的基因的獲取 目的基因目的基因基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體受體細(xì)
3、胞受體細(xì)胞檢測與鑒定檢測與鑒定熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練2目的基因的獲取目的基因的獲取(1)目目的基因:主要是指的基因:主要是指 的基因,也可以是一些具的基因,也可以是一些具有有 的因子。的因子。(2)常見方法:常見方法:從基因文庫中獲取從基因文庫中獲取基因文庫的種類基因文庫的種類 編碼蛋白質(zhì)編碼蛋白質(zhì)調(diào)控作用調(diào)控作用基因組文庫基因組文庫cDNA文庫文庫熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練
4、練利用利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因a原理:原理: 。b條件:條件: 、DNA模板、模板、 、四種脫氧核苷酸。、四種脫氧核苷酸。c過程:目的基因過程:目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,受熱變性后解鏈為單鏈, 與單鏈與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在 作用下進(jìn)行延伸,如作用下進(jìn)行延伸,如此重復(fù)循環(huán)多次。此重復(fù)循環(huán)多次。d結(jié)果:每一次循環(huán)后,目的基因的量可以結(jié)果:每一次循環(huán)后,目的基因的量可以 ,即,即成指數(shù)形式擴(kuò)增成指數(shù)形式擴(kuò)增(約為約為2n,n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))。人工合成法:如基因比較小,人工合成法:如基因比較小, 又已知,可借又已知,可借助助
5、 用化學(xué)方法直接人工合成。用化學(xué)方法直接人工合成。DNA雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制引物引物Taq酶酶引物引物DNA聚合酶聚合酶增加一倍增加一倍核苷酸序列核苷酸序列DNA合成儀合成儀熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練思維激活思維激活1 PCR過過程中,需要解旋酶嗎?所需要的程中,需要解旋酶嗎?所需要的DNA聚合酶聚合酶應(yīng)具有什么特點(diǎn)?應(yīng)具有什么特點(diǎn)?提示提示PCR過程中,過程中,DNA雙鏈解開是在高溫下完成的,不需雙鏈解開是在高溫下完成的,不需要解旋酶;由于要解旋酶;由于PCR過程溫度較高,所以需要能耐高
6、溫的過程溫度較高,所以需要能耐高溫的DNA聚合酶。聚合酶。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練1提取目的基因方法的比較提取目的基因方法的比較方方法法基因文庫的構(gòu)建基因文庫的構(gòu)建PCR技技術(shù)擴(kuò)增術(shù)擴(kuò)增人工合成人工合成基因組文庫基因組文庫部分基因文庫部分基因文庫(如如cDNA文庫文庫)熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練過過程程供體細(xì)胞中供體細(xì)胞中的的DNA 限制酶限制酶許多許多DNA片段片段 連接連
7、接表達(dá)載體表達(dá)載體 導(dǎo)入導(dǎo)入受體細(xì)胞受體細(xì)胞外源外源DNA擴(kuò)擴(kuò)增,產(chǎn)生增,產(chǎn)生特定性狀特定性狀 分離分離目的基因目的基因目的基因的目的基因的mRNA 反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄單鏈單鏈DNA 合成合成雙鏈雙鏈DNA 插入插入載體載體 導(dǎo)入導(dǎo)入受體菌群受體菌群(cDNA文庫文庫) 分離分離目的基因目的基因目的基因目的基因DNA 高溫高溫 解鏈解鏈單鏈單鏈DNA 與引與引 物結(jié)物結(jié) 合、合、 DNA 聚合聚合 酶酶大量目大量目的基因的基因蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的氨基的氨基酸序列酸序列 推測推測mRNA的核苷的核苷酸序列酸序列 推測推測基因的基因的核苷酸核苷酸序列序列 化學(xué)化學(xué) 合成合成目的基因目的基因熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向
8、向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)操作簡單操作簡單專一性專一性可在短時(shí)間內(nèi)可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的大量擴(kuò)增目的基因基因?qū)R恍詮?qiáng),可產(chǎn)專一性強(qiáng),可產(chǎn)生自然界中不存生自然界中不存在的新基因在的新基因缺點(diǎn)缺點(diǎn)工作量大、工作量大、盲目性大、盲目性大、專一性差專一性差操作過程較操作過程較麻煩,技術(shù)麻煩,技術(shù)要求過高要求過高需要嚴(yán)格控制需要嚴(yán)格控制溫度、技術(shù)要溫度、技術(shù)要求高求高適用范圍小適用范圍小熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī)
9、范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練2PCR技術(shù)與技術(shù)與DNA復(fù)制的比較復(fù)制的比較比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目DNA復(fù)制復(fù)制PCR技術(shù)技術(shù)區(qū)區(qū)別別解旋解旋方式方式解旋酶催化解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋在高溫下變性解旋場所場所細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)(主要在細(xì)胞核內(nèi)主要在細(xì)胞核內(nèi))細(xì)胞外細(xì)胞外(主要在主要在PCR擴(kuò)增擴(kuò)增儀中儀中)酶酶解旋酶、解旋酶、DNA聚合酶聚合酶耐熱的耐熱的DNA聚合酶聚合酶溫度溫度細(xì)胞內(nèi)溫和條件細(xì)胞內(nèi)溫和條件控制溫度,需控制溫度,需90 95 高溫高溫結(jié)果結(jié)果合成合成DNA分子分子合成合成DNA片段或基因片段或基因熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探
10、究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練聯(lián)系聯(lián)系(1)模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板模板:均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料:均為四種脫氧核苷酸原料:均為四種脫氧核苷酸(3)酶:均需酶:均需DNA聚合酶聚合酶(4)引物:都需要引物,使引物:都需要引物,使DNA聚合酶從引物的聚合酶從引物的3端開始連端開始連接脫氧核苷酸接脫氧核苷酸熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練特別提醒特別提醒(1)真核細(xì)胞的基因編碼區(qū)含有不能表達(dá)的內(nèi)含子,因真核細(xì)胞的基因編碼區(qū)含有不能表達(dá)的內(nèi)含子,因此,不能直接用于基
11、因的擴(kuò)增和表達(dá)。獲得真核細(xì)胞中目的基因此,不能直接用于基因的擴(kuò)增和表達(dá)。獲得真核細(xì)胞中目的基因時(shí),一般用人工合成的方法。時(shí),一般用人工合成的方法。(2)PCR擴(kuò)增的過程:目的基因擴(kuò)增的過程:目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)的互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在物與單鏈相應(yīng)的互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延聚合酶作用下進(jìn)行延伸,如此重復(fù)循環(huán)多次。由于延伸后得到的產(chǎn)物同樣可以和引物伸,如此重復(fù)循環(huán)多次。由于延伸后得到的產(chǎn)物同樣可以和引物結(jié)合,因而每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一培,即成指數(shù)結(jié)合,因而每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一培,即成指數(shù)形式擴(kuò)增形式擴(kuò)
12、增(約為約為2n,其中,其中n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練【鞏固【鞏固1】 下下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是()。從基因文庫中獲取目的基因從基因文庫中獲取目的基因利用利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基技術(shù)擴(kuò)增目的基因因反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法通過通過DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成合成儀利用化學(xué)方法人工合成A BC D熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁
13、頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練解析解析PCR利用的是利用的是DNA雙鏈復(fù)制原理,即將雙鏈雙鏈復(fù)制原理,即將雙鏈DNA之間的之間的氫鍵打開,變成單鏈氫鍵打開,變成單鏈DNA,作為聚合反應(yīng)的模板。反轉(zhuǎn)錄法則是,作為聚合反應(yīng)的模板。反轉(zhuǎn)錄法則是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,先為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,先反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)的單鏈反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)的單鏈DNA,再合成雙鏈的,再合成雙鏈的DNA。、則均則均不需要模板。不需要模板。答案答案D熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn)
14、 練練1基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建(1)基基因表達(dá)載體的組成因表達(dá)載體的組成啟動(dòng)子啟動(dòng)子位置:基因的首端。位置:基因的首端。功能:是功能:是 識別和識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 ?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化基因表達(dá)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化 RNA聚合酶聚合酶mRNA熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練終止子終止子位置:基因的尾端。位置:基因的尾端。功能:使功能:使 在所需要的地方停止下來。在所需要的地方停止下來。標(biāo)記基因:鑒別受體細(xì)胞中是否含有標(biāo)記基因:鑒別受體細(xì)胞
15、中是否含有 。(2)基因表達(dá)載體的功能基因表達(dá)載體的功能使目的基因在受體細(xì)胞中使目的基因在受體細(xì)胞中 ,并且可以遺傳給下一,并且可以遺傳給下一代,使目的基因能夠代,使目的基因能夠 和發(fā)揮作用。和發(fā)揮作用。(3)基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建一般用同一種限制酶分別切割載體和目的基因,再用一般用同一種限制酶分別切割載體和目的基因,再用DNA連接酶連接酶把兩者連接。把兩者連接。轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄目的基因目的基因穩(wěn)定存在穩(wěn)定存在表達(dá)表達(dá)熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練2將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)?/p>
16、入受體細(xì)胞(1)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化的概念化的概念目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi) 的過程。的過程。(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 法:將目的基因?qū)腚p子葉植物和祼子植物。法:將目的基因?qū)腚p子葉植物和祼子植物。 法:將目的基因?qū)雴巫尤~植物常用的方法。法:將目的基因?qū)雴巫尤~植物常用的方法。 法:我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的一種方法。法:我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的一種方法。維持穩(wěn)定維持穩(wěn)定和表達(dá)和表達(dá)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化基因槍基因槍花粉管通道花粉管通道熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁
17、頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練(3)將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞方法:方法: 法。法。常用受體細(xì)胞:常用受體細(xì)胞: 。(4)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞第一步:首先用第一步:首先用Ca2處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為 細(xì)胞。細(xì)胞。第二步:將重組表達(dá)載體第二步:將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收合,在一定溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收 ,完成,完成轉(zhuǎn)化過程。轉(zhuǎn)化過程。顯微注射顯微注
18、射受精卵受精卵感受態(tài)感受態(tài)DNA分子分子熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練思維激活思維激活2 為為什么微生物細(xì)胞適合作為基因工程的受體細(xì)胞?什么微生物細(xì)胞適合作為基因工程的受體細(xì)胞?提示提示微生物細(xì)胞具有繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對微生物細(xì)胞具有繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少的優(yōu)點(diǎn),因此是基因工程常用的受體細(xì)胞。較少的優(yōu)點(diǎn),因此是基因工程常用的受體細(xì)胞。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn)
19、練練1基因表達(dá)載體的構(gòu)建步驟基因表達(dá)載體的構(gòu)建步驟(1)一一般用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,使其產(chǎn)生相同般用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,使其產(chǎn)生相同的末端。的末端。(2)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處,再加入適量將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處,再加入適量DNA連接酶,形成一個(gè)重組連接酶,形成一個(gè)重組DNA分子分子(重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒)。構(gòu)建過程。構(gòu)建過程(如下圖如下圖)。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課
20、 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練2將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法比較將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法比較細(xì)胞細(xì)胞類型類型方法方法說明說明特點(diǎn)特點(diǎn)植物植物細(xì)胞細(xì)胞農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化法目的基因插入到目的基因插入到Ti質(zhì)粒質(zhì)粒的的TDNA上上通過農(nóng)桿通過農(nóng)桿菌菌進(jìn)入植物細(xì)胞進(jìn)入植物細(xì)胞插插入到植物細(xì)胞中的染色入到植物細(xì)胞中的染色體體DNA上上目的基因表目的基因表達(dá)達(dá)經(jīng)濟(jì)、有效,適經(jīng)濟(jì)、有效,適合于雙子葉植物合于雙子葉植物和裸子植物和裸子植物熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn)
21、練練植植物物細(xì)細(xì)胞胞基因基因槍法槍法目的基因包裹在微小的金?;蜴u目的基因包裹在微小的金?;蜴u粒表面粒表面用基因槍高速射入到受用基因槍高速射入到受體細(xì)胞或組織中體細(xì)胞或組織中目的基因表達(dá)目的基因表達(dá)成本較高,是單成本較高,是單子葉植物中常用子葉植物中常用的基因轉(zhuǎn)化方法的基因轉(zhuǎn)化方法花粉花粉管通管通道法道法含目的基因的溶液含目的基因的溶液滴加在柱頭滴加在柱頭上上(或用含目的基因的溶液處理或用含目的基因的溶液處理花粉?;ǚ哿?花粉粒吸入目的基因花粉粒吸入目的基因授粉授粉目的基因表達(dá)目的基因表達(dá)簡便、經(jīng)濟(jì),我簡便、經(jīng)濟(jì),我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo)
22、 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞顯微注顯微注射法射法目的基因片段目的基因片段受精卵的核內(nèi)受精卵的核內(nèi)受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一般受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一般時(shí)間后移植到雌性動(dòng)物的輸卵時(shí)間后移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)管或子宮內(nèi)使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物因動(dòng)物最為有效地將目最為有效地將目的基因?qū)雱?dòng)物的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法細(xì)胞的方法微生微生物細(xì)物細(xì)胞胞感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞細(xì)胞Ca2處理微生物細(xì)胞處理微生物細(xì)胞感受感受態(tài)細(xì)胞態(tài)細(xì)胞將基因表達(dá)載體在緩將基因表達(dá)載體在緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合一一定溫度下促使感受態(tài)細(xì)胞
23、吸收定溫度下促使感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子分子簡便、經(jīng)濟(jì)、有簡便、經(jīng)濟(jì)、有效效熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練特別提醒特別提醒(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實(shí)施基因工程的第二步,也基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實(shí)施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。是基因工程的核心。(2)對于植物來說,受體細(xì)胞可以是受精卵和體細(xì)胞,但常用體細(xì)對于植物來說,受體細(xì)胞可以是受精卵和體細(xì)胞,但常用體細(xì)胞。胞。(3)對于動(dòng)物來說,受體細(xì)胞一般是受精卵。受精卵作為受體細(xì)胞對于動(dòng)物來說,受體細(xì)胞一般是受精卵。受精卵作為受體細(xì)胞具有體
24、積大、易操作、經(jīng)培養(yǎng)可直接表達(dá)性狀的優(yōu)點(diǎn)。而動(dòng)物體具有體積大、易操作、經(jīng)培養(yǎng)可直接表達(dá)性狀的優(yōu)點(diǎn)。而動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受限。細(xì)胞的全能性受限。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練【鞏固【鞏固2】 請請據(jù)圖回答下列問題。據(jù)圖回答下列問題。(1)基因工程的核心步驟是基因工程的核心步驟是_。(2)利用利用_技術(shù)可以獲得大量的目的基因。該技術(shù)利用技術(shù)可以獲得大量的目的基因。該技術(shù)利用_的原理,將基因的核苷酸序列不斷加以復(fù)制,使其的原理,將基因的核苷酸序列不斷加以復(fù)制,使其數(shù)量呈指數(shù)增長。數(shù)量呈指數(shù)增長。
25、(3)圖中圖中_位于目的基因的首端,位于目的基因的首端,是是_識別和結(jié)合的部位??股R別和結(jié)合的部位??股乜剐曰虻淖饔檬亲鳛樗乜剐曰虻淖饔檬亲鳛開,用用 于鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的于鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因?;颉釤?點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練解析解析本題考查基因表達(dá)載體的組成及其構(gòu)建?;蚬こ痰暮诵谋绢}考查基因表達(dá)載體的組成及其構(gòu)建?;蚬こ痰暮诵牟襟E是基因表達(dá)載體的構(gòu)建;目的基因的獲取方法很多,其中步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建;目的基因的獲取方法很多,其中PCR技術(shù)能迅速
26、獲得大量目的基因,其依據(jù)的原理是技術(shù)能迅速獲得大量目的基因,其依據(jù)的原理是DNA雙鏈雙鏈復(fù)制原理;基因表達(dá)載體必須包含目的基因、啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、復(fù)制原理;基因表達(dá)載體必須包含目的基因、啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、終止子,其中啟動(dòng)子位于目的基因的首端,是終止子,其中啟動(dòng)子位于目的基因的首端,是RNA聚合酶識別和聚合酶識別和結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄為結(jié)合的部位,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄為mRNA,抗生素抗性基因作為標(biāo)記,抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因用于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因。基因用于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因。答案答案(1)基基因表達(dá)載體的構(gòu)建因表達(dá)載體的構(gòu)建(2)PCRDNA雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制(3)啟啟動(dòng)子
27、動(dòng)子RNA聚合酶標(biāo)記基因聚合酶標(biāo)記基因熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練1分子檢測分子檢測(1)檢檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入了目的基因,這是目測轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入了目的基因,這是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。方法:方法: 技術(shù)技術(shù)(DNA探針轉(zhuǎn)基因生物探針轉(zhuǎn)基因生物 )。結(jié)果:如果顯示出雜交帶,就表明目的基因結(jié)果:如果顯示出雜交帶,就表明目的基因 。(2)檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄方法:方法: 技術(shù)技術(shù)(DNA探針轉(zhuǎn)
28、基因生物探針轉(zhuǎn)基因生物 )。結(jié)果:如果顯示出雜交帶,則表明目的基因結(jié)果:如果顯示出雜交帶,則表明目的基因 。目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定 DNA分子雜交分子雜交DNA已插入染色體已插入染色體DNA中中分子雜交分子雜交mRNA轉(zhuǎn)錄出了轉(zhuǎn)錄出了mRNA熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練(3)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法:方法: 。結(jié)果:若有雜交帶出現(xiàn),則表明目的基因結(jié)果:若有雜交帶出現(xiàn),則表明目的基因 。2個(gè)體水平鑒定個(gè)體水平鑒定包包括抗蟲、抗病的括抗蟲
29、、抗病的 實(shí)驗(yàn),以確定是否有抗性及抗性程實(shí)驗(yàn),以確定是否有抗性及抗性程度?;蚬こ坍a(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品活性進(jìn)行比較等。度?;蚬こ坍a(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品活性進(jìn)行比較等??乖乖贵w雜交抗體雜交已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品接種接種熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練思維激活思維激活3 進(jìn)進(jìn)行目的基因?qū)爰稗D(zhuǎn)錄檢測時(shí),均用到行目的基因?qū)爰稗D(zhuǎn)錄檢測時(shí),均用到DNA探針,探針,該探針的脫氧核苷酸序列如何?其檢測依據(jù)是什么?該探針的脫氧核苷酸序列如何?其檢測依據(jù)是什么?提示提示把把“目的基因片段目的基因片
30、段”進(jìn)行放射性同位素標(biāo)記或進(jìn)行熒進(jìn)行放射性同位素標(biāo)記或進(jìn)行熒光標(biāo)記,用標(biāo)記好的基因片段做探針,與受體生物的基因組光標(biāo)記,用標(biāo)記好的基因片段做探針,與受體生物的基因組DNA進(jìn)行雜交,如果有雜交帶出現(xiàn),根據(jù)分子雜交的基本原進(jìn)行雜交,如果有雜交帶出現(xiàn),根據(jù)分子雜交的基本原理,說明目的基因與受體細(xì)胞基因組理,說明目的基因與受體細(xì)胞基因組DNA具有同源性,也就具有同源性,也就是說目的基因已經(jīng)被導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi),反之,則說明目的基是說目的基因已經(jīng)被導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi),反之,則說明目的基因沒有進(jìn)入受體細(xì)胞中。因沒有進(jìn)入受體細(xì)胞中。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互
31、 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的結(jié)果分析目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的結(jié)果分析 熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練說明:說明:上上圖中發(fā)生圖中發(fā)生與發(fā)生與發(fā)生相比,相比,會(huì)使目的基因的遺傳特性會(huì)使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá),原因是在進(jìn)行細(xì)胞分裂時(shí),細(xì)胞核上的得以穩(wěn)定維持和表達(dá),原因是在進(jìn)行細(xì)胞分裂時(shí),細(xì)胞核上的DNA經(jīng)復(fù)制后平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中,保證了親子代遺傳性狀經(jīng)復(fù)制后平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中,保證了親子代遺傳性狀的穩(wěn)定性,而的穩(wěn)定性,而細(xì)胞分裂
32、時(shí),細(xì)胞質(zhì)是不均分的,子細(xì)胞不一定細(xì)胞分裂時(shí),細(xì)胞質(zhì)是不均分的,子細(xì)胞不一定含有目的基因。含有目的基因。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練【鞏固【鞏固3】 目目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性,只有通過鑒定和檢測才能知道。下列屬于目的其遺傳特性,只有通過鑒定和檢測才能知道。下列屬于目的基因檢測和鑒定的是基因檢測和鑒定的是()。檢測受體細(xì)胞是否有目的基因檢測受體細(xì)胞是否有目的基因檢測受體細(xì)胞是否有致檢測受體細(xì)胞是否有致病基因病基因
33、檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄mRNA檢測目的基因檢測目的基因是否翻譯蛋白質(zhì)是否翻譯蛋白質(zhì)A B C D熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練解析解析目的基因的檢測包括:首先檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體目的基因的檢測包括:首先檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是用上是否插入了目的基因,方法是用DNA探針,使探針,使DNA探針與基探針與基因組因組DNA雜交;其次檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了雜交;其次檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是,方法是用基因探針與用基因探針與mRNA雜
34、交;最后檢測目的基因是否翻譯了蛋白質(zhì),雜交;最后檢測目的基因是否翻譯了蛋白質(zhì),方法是進(jìn)行抗原方法是進(jìn)行抗原抗體雜交??贵w雜交。 答案答案C熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練【例【例1】 水水稻種子中稻種子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣的磷以植酸形式存在。植酸易同鐵、鈣等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外,是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因等金屬離子或蛋白質(zhì)結(jié)合排出體外,是多種動(dòng)物的抗?fàn)I養(yǎng)因子,同時(shí),排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。為從根本上子,同時(shí),排出的大量磷進(jìn)入水體易引起水華。為從根本上解決水稻中
35、的高植酸問題,可將植酸酶基因?qū)胨?,培育解決水稻中的高植酸問題,可將植酸酶基因?qū)胨?,培育低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。低植酸轉(zhuǎn)基因水稻品種。下圖是獲取植酸酶基因的流程。目的基因的獲取目的基因的獲取 熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練據(jù)圖回答下面的問題。據(jù)圖回答下面的問題。(1)圖中基因組文庫圖中基因組文庫_(填填“小于小于”“”“等于等于”“”“大于大于”)cDNA文庫。文庫。(2)B過程需要的酶是過程需要的酶是_;A、C過程中過程中_(填填“可以可以”“”“不可以不
36、可以”)使用同一種探針篩使用同一種探針篩選含目的基因的菌株。選含目的基因的菌株。(3)目的基因目的基因和和除從構(gòu)建的文庫中分離外,還可以分別利用圖除從構(gòu)建的文庫中分離外,還可以分別利用圖中中_和和_為模板直接進(jìn)行為模板直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增,該過程中所用擴(kuò)增,該過程中所用酶的顯著特點(diǎn)是酶的顯著特點(diǎn)是_。熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練思維導(dǎo)圖:思維導(dǎo)圖:熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練深度剖析
37、深度剖析基因組文庫包含本物種全部遺傳信息,基因組文庫包含本物種全部遺傳信息,cDNA文庫僅文庫僅包含部分遺傳信息;由包含部分遺傳信息;由mRNA構(gòu)建構(gòu)建cDNA文庫需逆轉(zhuǎn)錄酶,篩選文庫需逆轉(zhuǎn)錄酶,篩選目的基因時(shí),可用同一種探針對由基因組文庫或目的基因時(shí),可用同一種探針對由基因組文庫或cDNA文庫中獲文庫中獲取的目的基因予以檢測,若通過取的目的基因予以檢測,若通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,可利用技術(shù)擴(kuò)增目的基因,可利用DNA或或cDNA作為模板,該擴(kuò)增過程需耐高溫的作為模板,該擴(kuò)增過程需耐高溫的DNA聚合酶參與。聚合酶參與。答案答案(1)大大于于(2)逆轉(zhuǎn)錄酶可以逆轉(zhuǎn)錄酶可以(3)DNAcDNA耐
38、高溫耐高溫 熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練【例【例2】 1抗抗胰蛋白酶缺乏癥是北美常見的一種單基因遺傳病,胰蛋白酶缺乏癥是北美常見的一種單基因遺傳病,患者成年后會(huì)出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病,嚴(yán)重者甚至死亡。利患者成年后會(huì)出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病,嚴(yán)重者甚至死亡。利用基因工程技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫?,最用基因工程技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫?,最終培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人終培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人1抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊,抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊,從而更容易獲得這種酶。從而更容易獲得這
39、種酶?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化基因表達(dá)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化 熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練下列關(guān)于該過程的敘述中錯(cuò)誤的是下列關(guān)于該過程的敘述中錯(cuò)誤的是()。A載體上綠色熒光蛋白基因載體上綠色熒光蛋白基因(GFP)的作用是便于篩選含有目的的作用是便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞基因的受體細(xì)胞B將目的基因?qū)胙虬螂准?xì)胞中,將會(huì)更加容易得到將目的基因?qū)胙虬螂准?xì)胞中,將會(huì)更加容易得到1抗胰蛋抗胰蛋白酶白酶C培養(yǎng)出的轉(zhuǎn)基因羊的所有細(xì)胞中都含有該目的基因,故該羊培養(yǎng)出的轉(zhuǎn)基因羊的所有細(xì)胞中都含有該目的基因
40、,故該羊有性生殖產(chǎn)生的后代也都能產(chǎn)生有性生殖產(chǎn)生的后代也都能產(chǎn)生1抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶D目的基因與載體重組過程需要目的基因與載體重組過程需要DNA連接酶的催化作用連接酶的催化作用熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練思維導(dǎo)圖:思維導(dǎo)圖:熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練深度剖析深度剖析基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等;將目的基因?qū)?/p>
41、動(dòng)物細(xì)胞,常以受精卵作為受體細(xì)胞;基因等;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞,常以受精卵作為受體細(xì)胞;將目的基因與載體結(jié)合,需要將目的基因與載體結(jié)合,需要DNA連接酶的催化作用。連接酶的催化作用。答案答案C熱熱 點(diǎn)點(diǎn) 考考 向向 示示 例例隨隨 堂堂 達(dá)達(dá) 標(biāo)標(biāo) 檢檢 測測課課 堂堂 互互 動(dòng)動(dòng) 探探 究究活活 頁頁 規(guī)規(guī) 范范 訓(xùn)訓(xùn) 練練 思維拓展思維拓展基因表達(dá)載體的幾個(gè)關(guān)鍵組成的作用:基因表達(dá)載體的幾個(gè)關(guān)鍵組成的作用:標(biāo)記基因標(biāo)記基因便于篩選;目的基因便于篩選;目的基因使轉(zhuǎn)基因生物獲得我們所需使轉(zhuǎn)基因生物獲得我們所需的性狀;啟動(dòng)子的性狀;啟動(dòng)子啟動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄;終止子啟動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄;終止子終止目的基終止目的基因的轉(zhuǎn)錄;復(fù)制原點(diǎn)因的轉(zhuǎn)錄;復(fù)制原點(diǎn)使使DNA復(fù)制以便于進(jìn)行表達(dá)載體的擴(kuò)增。復(fù)制以便于進(jìn)行表達(dá)載體的擴(kuò)增。另外,一般情況下常用同一種限制酶切割目的基因和載體,以便另外,一般情況下常用同一種限制酶切割目的基因和載體,以便于表達(dá)載體的構(gòu)建,但是特殊情況下,用不
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