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1、實(shí)驗(yàn)二果蠅的雜交-分離定律一. 目的與要求1. 用肉眼熟練地鑒別果蠅的性別。2. 掌握果蠅單因子的雜交方法和雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)處理方法,掌握分離定律的原理。二. 原理 按照孟德爾第一定律,既分離定律,基因是一個(gè)獨(dú)立的單位。基因完整的從一代傳遞到下一代,由該基因的顯隱性決定其在下一代的性狀表現(xiàn)。一對(duì)雜合狀態(tài)的等位基因(如A/a)保持相對(duì)的獨(dú)立性,在減數(shù)分裂形成配子時(shí),等位基因(A/a)隨同源染色體的分離而分配到不同的配子中去。理論上配子的分離比是1:1,即產(chǎn)生帶A和a基因的配子數(shù)相等,因此等位基因雜合體的自交后代表現(xiàn)為基因型比AA:Aa:aa是1:2:1,如果顯性完全,其表型分離比為3:1,這就
2、是分離定律的基本內(nèi)容。通過果蠅一對(duì)因子的雜交實(shí)驗(yàn),即可以驗(yàn)證它。三. 果蠅雜交實(shí)驗(yàn)的步驟 實(shí)驗(yàn)用果蠅:野生型和殘翅 選取處女蠅:選取12小時(shí)之內(nèi)孵化出來的貞蠅 雜交:正交 長(zhǎng)翅殘翅 反交 殘翅長(zhǎng)翅 每瓶放入35對(duì)果蠅,貼好標(biāo)簽,注明雜交組合,雜交日期及實(shí)驗(yàn)者姓名。野生型果蠅殘翅果蠅殘翅勺狀翅2. 試劑:試劑:100%乙醚、瓊脂、紅糖/蔗糖、玉米粉 、酵母粉、丙酸。3. 3. 用具:用具:解剖針、直管瓶、麻醉瓶、棉塞 滅菌鍋。4. 4. 果蠅麻醉方法:果蠅麻醉方法:將直管瓶中的果蠅快速快速倒入麻醉瓶中并立即蓋上棉塞,向麻醉瓶的側(cè)口側(cè)口滴加2-3滴100%乙醚,晃動(dòng)麻醉瓶至果蠅麻醉,雜交實(shí)驗(yàn)需輕度輕度麻醉。四. 雜交實(shí)驗(yàn)安排 確定雜交組合并倒去父、母本親蠅。 1212小時(shí)之內(nèi)小時(shí)之內(nèi)挑選貞蠅,正交和反交管各放3 3對(duì)對(duì)果蠅置于25條件下培養(yǎng)。 雜交后7-107-10天時(shí)倒去雜交親蠅。 挑選F1代雌雄果蠅各3只進(jìn)行F2繁殖。 7-107-10天倒去F1代親蠅。 F2代數(shù)量及性狀分離統(tǒng)計(jì)(統(tǒng)計(jì)至F1代自交后2020天止)。五. 數(shù)據(jù)處理及X2測(cè)驗(yàn) 計(jì)算X2值,根據(jù)X2值和自由度(df=1),查X2表,若P5%,說明觀察值與理論值相符合,可以認(rèn)為觀察值是符合分離定律的。思考題1. 在
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