稻草秸稈中木質(zhì)素纖維素測(cè)定方法

1、稻草秸稈中木質(zhì)素纖維素測(cè)定方法第1頁，共9頁。v測(cè)定木質(zhì)素、纖維素含量的方法很多測(cè)定木質(zhì)素、纖維素含量的方法很多,如纖如纖維素含量的測(cè)定方法有濃酸水解定糖法、維素含量的測(cè)定方法有濃酸水解定糖法、硝酸乙醇法、氯化法等硝酸乙醇法、氯化法等;木質(zhì)素含量的測(cè)定木質(zhì)素含量的測(cè)定方法有濃酸水解法、紫外分光光度法、紅方法有濃酸水解法、紫外分光光度法、紅外光譜定量分析法和同位素標(biāo)記法。由于外光譜定量分析法和同位素標(biāo)記法。由于紅外光譜法和同位素標(biāo)記法對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求紅外光譜法和同位素標(biāo)記法對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求較高較高,所以應(yīng)用并不普遍。我們常用的是濃所以應(yīng)用并不普遍。我們常用的是濃酸水解法。本試驗(yàn)應(yīng)用酸水解法。本試驗(yàn)應(yīng)用中

2、性洗滌劑法、中性洗滌劑法、2M HCl水解法、水解法、72%H2SO4水解法及灰化法水解法及灰化法綜合運(yùn)用綜合運(yùn)用,一次性進(jìn)行木質(zhì)素、纖維素的測(cè)一次性進(jìn)行木質(zhì)素、纖維素的測(cè)定定,并將灰化時(shí)間縮短至并將灰化時(shí)間縮短至3h,所得結(jié)果較為準(zhǔn)所得結(jié)果較為準(zhǔn)確。確。第2頁，共9頁。1.1 材料材料 稻草經(jīng)機(jī)器粉碎成稻草經(jīng)機(jī)器粉碎成1cm長(zhǎng)細(xì)秸長(zhǎng)細(xì)秸,粉碎成粉碎成1cm長(zhǎng)稻長(zhǎng)稻草粉分別經(jīng)草粉分別經(jīng)Z17、921和和1024三種白腐真菌菌株發(fā)三種白腐真菌菌株發(fā)酵酵,每周取樣一次每周取樣一次,共共7周。周。1.2 主要試劑主要試劑 中性洗滌劑中性洗滌劑:按按Van Soest方法配制；方法配制； 2M 鹽酸溶

3、液鹽酸溶液:167ml濃鹽酸濃鹽酸(比重比重1.19)用蒸餾用蒸餾水定溶至水定溶至1000ml； 72% 濃酸溶液濃酸溶液: 665mlH2SO4(比重比重1. 84)加入加入300ml水中水中,冷至冷至20,補(bǔ)加水至補(bǔ)加水至1000ml。第3頁，共9頁?；^程本基過程本 1. 材料與方法材料與方法 1.1 材料材料 1.2 主要試劑主要試劑1.3 方法方法 2. 結(jié)果與討論結(jié)果與討論 2.1結(jié)果分析結(jié)果分析 2.2總結(jié)總結(jié)第4頁，共9頁。1.3 方法方法 取經(jīng)取經(jīng)803h烘至衡重的三個(gè)菌株各烘至衡重的三個(gè)菌株各5g。 1.3.1 取取1.0000g樣品置于樣品置于100ml碘瓶中碘瓶中,加入

4、加入70ml中性洗滌劑中性洗滌劑,之后放之后放入已沸的高壓鍋入已沸的高壓鍋,100保溫保溫40min,115121保溫保溫20min,取出用取出用3號(hào)號(hào)30ml沙芯坩堝過濾至沙芯坩堝過濾至pH 6.57.0,依次用依次用95%乙醇、無水乙醇和丙酮洗乙醇、無水乙醇和丙酮洗滌滌2次次,將殘?jiān)谜婵崭稍锲髦袑堅(jiān)谜婵崭稍锲髦?干燥干燥20min。 1.3.2 將殘?jiān)B同坩堝置于將殘?jiān)B同坩堝置于100ml燒杯中燒杯中,加入加入70ml 2M鹽酸溶液鹽酸溶液,然后然后放入已沸的高壓鍋放入已沸的高壓鍋,100保溫保溫50min,過濾至中性過濾至中性,依次用依次用95%乙醇、無乙醇、無水乙醇和丙酮洗滌水

5、乙醇和丙酮洗滌2次次,殘?jiān)鼩堅(jiān)?0烘至衡重為烘至衡重為W1。 1.3.3 將殘?jiān)B同坩堝置于將殘?jiān)B同坩堝置于150ml燒杯中燒杯中,加入加入10ml致冷的致冷的72%硫酸硫酸,20e降解降解4h,后加入后加入90ml蒸餾水蒸餾水,室室溫過夜溫過夜,次日用蒸餾水洗殘?jiān)链稳沼谜麴s水洗殘?jiān)羛H 6.5,烘干至衡重為烘干至衡重為W2,W1-W2為纖維素的含量。為纖維素的含量。 1.3.4 將殘?jiān)趯堅(jiān)?50e馬福爐中灰化馬福爐中灰化,干燥器中平衡干燥器中平衡至衡重為至衡重為W3,W2-W3即為木質(zhì)素的含量即為木質(zhì)素的含量第5頁，共9頁。2 結(jié)果與討論 本測(cè)定方法是在原有方法基礎(chǔ)上加以改進(jìn),按

6、照王玉萬(1987)半纖維素、纖維素、木質(zhì)素系統(tǒng)定量分析程序方法,纖維素測(cè)定前兩步同上面方法(1.3.1、1.3.2,1.3.3),于620nm測(cè)OD由葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線求出糖量,乘上系數(shù)0.9,求得纖維素,將殘?jiān)?0烘干,干燥器冷卻30min,稱重;在550e馬福爐中灰化4小時(shí),干燥器冷卻30min,稱重,前者稱重?cái)?shù)減去后者稱重?cái)?shù)即為木質(zhì)素含量。而經(jīng)我們改進(jìn)后的方法就直接按上面方法(1.3.3,1.3.4),所測(cè)結(jié)果見表1。第6頁，共9頁。第7頁，共9頁。 結(jié)果分析結(jié)果分析v 三個(gè)菌株的木質(zhì)素由接種前含三個(gè)菌株的木質(zhì)素由接種前含16.63%經(jīng)經(jīng)49d培養(yǎng)分別減少至培養(yǎng)分別減少至9.89%、10.

7、30%、10.87%,纖維素含量由接種前含纖維素含量由接種前含30. 35%經(jīng)經(jīng)49d培養(yǎng)后培養(yǎng)后分別減少至分別減少至23.12%、22.72%、25.03%,說明說明木質(zhì)素、纖維素含量都明顯減少木質(zhì)素、纖維素含量都明顯減少,同我們以往同我們以往所做的分析結(jié)果基本相似。所做的分析結(jié)果基本相似。第8頁，共9頁。優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn): (1) 節(jié)約試劑節(jié)約試劑:按照王玉萬按照王玉萬(1987)方法方法,纖維素纖維素含量的測(cè)定需要蒽酮試劑含量的測(cè)定需要蒽酮試劑,并且蒽酮試劑需要并且蒽酮試劑需要現(xiàn)配現(xiàn)用現(xiàn)配現(xiàn)用,相對(duì)來說我們的方法比較簡(jiǎn)便相對(duì)來說我們的方法比較簡(jiǎn)便,同時(shí)同時(shí)減輕了工作量減輕了工作量; (2) 減少人員減少人員,節(jié)約電源節(jié)約電源:王玉萬的方法灰化需王玉萬的方法灰化需要要4h,現(xiàn)在只要現(xiàn)在只要3h就可灰化好。而且所測(cè)結(jié)果就可灰化好。而且所測(cè)結(jié)果同以往我們所做的分析結(jié)果基本相似。同以往我們所做的