《組培實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建》ppt課件

1、 植物組織培育實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建 組織培育實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì) 常用設(shè)備和器材配置 附：器皿的選擇與清洗 附：組培室的衛(wèi)生與滅菌組織培育實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)主要內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)儀器設(shè)備和器皿器具配置一設(shè)計(jì)規(guī)模和原那么1.1.設(shè)計(jì)規(guī)模：取決于任務(wù)的目的。 以工廠化消費(fèi)為目的；以科研為目的；2.2.設(shè)計(jì)原那么：1 1. .保證無菌操作： 植物組織培育是在嚴(yán)厲無菌的條件下進(jìn)展的。要做到無菌的條件，需求一定的環(huán)境、設(shè)備、器材和器具。2 2. .任務(wù)方便：按組織培育程序來沒計(jì)，防止某些環(huán)節(jié)倒排，引起日后任務(wù)混亂。3 3. .培育條件：人工控制溫度、光照、濕度等。一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)二、組培實(shí)驗(yàn)室組成： 規(guī)范組織培育室包括規(guī)范組織培育室

2、包括: 藥品區(qū)藥品區(qū) 洗滌區(qū)洗滌區(qū) 制備區(qū)制備區(qū) 滅菌區(qū)滅菌區(qū) 儲放區(qū)儲放區(qū) 無菌操作區(qū)無菌操作區(qū) 培育區(qū)培育區(qū)可以根據(jù)本人的可以根據(jù)本人的實(shí)踐條件進(jìn)展合實(shí)踐條件進(jìn)展合并并預(yù)備室 分區(qū)：藥品區(qū)、洗滌區(qū)、制備區(qū)、滅菌區(qū)、儲放區(qū) 主要義務(wù)： 1. 藥品的貯備、稱量、溶解、配制、培育基分裝。 2. 器具的洗滌、枯燥、保管、培育基的滅菌等。 主要設(shè)備：藥品柜、防塵櫥放置培育容器、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計(jì)、水池、操作臺、高壓滅菌鍋、枯燥滅菌器如烘箱及常用的培育基配制用玻璃儀器. 詳見以下圖酸度計(jì)立式高壓自動(dòng)滅菌鍋 主要義務(wù)：主要用于植物資料的消毒、接種、培育物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及

3、一切需求進(jìn)展無菌操作的技術(shù)程序。 主要設(shè)備：紫外光源、超凈任務(wù)臺、消毒器、酒精燈、接種器械接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針等。無菌操作室接種室無菌操作室超凈任務(wù)臺 接種室宜小不宜大，普通78平米，要求地面、天花板及四壁盡能夠密閉光滑，易于清潔和消毒。配置拉動(dòng)門，以減少開關(guān)門時(shí)的空氣擾動(dòng)。 接種室要求干爽安靜，清潔亮堂。在適當(dāng)位置吊裝12盞紫外線滅菌燈，用以照射滅菌。最好安裝一小型空調(diào)，使室溫可控，這樣可使門窗緊閉，減少與外界空氣對流。 接種室應(yīng)設(shè)有緩沖間，面積1m2為宜。進(jìn)入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋，以減少進(jìn)出時(shí)帶入接種室雜菌。緩沖間最好也安一盞紫外線滅菌燈，用以照射滅菌。 培育室：是將接種的資

4、料進(jìn)展培育生長的場所。大?。焊鶕?jù)需求培育架的大小、數(shù)目、及其他附屬設(shè)備而定。其設(shè)計(jì)以充分利用空間和節(jié)省能源為原那么。高度比培育架略高為宜，周圍墻壁要求有絕熱防火的性能。培育室： 主要設(shè)備：培育架控溫控光控濕、搖床、培育箱、紫外光源等。培育資料放在由金屬制成培育架上培育。 培育架普通設(shè)5 5層，最低一層離地高約lOcmlOcm，其他每層間隔30cm30cm左右，培育架高1 17m7m左右。其長度根據(jù)日光燈長度而設(shè)計(jì)， 如采用40W40W日光燈，那么長I I3m3m，30W30W的長lmlm，寬度普通為60cm60cm。 培育室最重要的因子是溫度，普通堅(jiān)持在20272027左右，具備產(chǎn)熱安裝，并安

5、裝窗式或立式空調(diào)機(jī)。實(shí)驗(yàn)室培育架實(shí)驗(yàn)室培育架恒溫?fù)u床 由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度，最好不同種類有不同的培育室。室內(nèi)濕度也要求恒定，相對濕度以堅(jiān)持在70%70%80%80%為好，可安裝加濕器?？刂乒庹諘r(shí)間可安裝定時(shí)開關(guān)鐘，普通需求每天光照10-16h10-16h，也有的需求延續(xù)照明。 現(xiàn)代組培實(shí)驗(yàn)室大多設(shè)計(jì)為采用天然太陽光照作為主要能源，這樣不但可以節(jié)省能源，而且組培苗接受太陽光生長良好，馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補(bǔ)充。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室 該室用于對培育物的察看分析與培育物的計(jì)數(shù)等。主要設(shè)備：雙筒實(shí)體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。小型儀器設(shè)備有：分注器、血球計(jì)數(shù)器、移液槍、過濾滅

6、菌器、電爐等加熱器具、磁力攪拌器、低速臺式離心機(jī)等。顯微鏡 顯微鏡 第二節(jié) 常用設(shè)備和器材 一高壓蒸汽滅菌鍋：用于進(jìn)展培育基和器械器具的滅菌。 1種類：小型手提式高壓滅菌鍋、大型立式的或臥式的高壓滅菌鍋 2運(yùn)用方法和原理： 小型手提式高壓滅菌鍋：把分裝好的培育基及所需滅菌的各種器具、蒸餾水等，放入高壓滅菌鍋的消毒桶內(nèi)，將外層鍋內(nèi)加水至水位線。蓋好鍋蓋，上好螺絲，接通電源升溫。待鍋內(nèi)溫度達(dá)100。C0.05kgf/cm2或0.005MPa左右時(shí)，翻開排氣閥排凈鍋內(nèi)冷空氣，然后封鎖排氣閥，繼續(xù)加熱至溫度到達(dá)121。C1.05kgf/cm2或0.103MPa時(shí)，維持2030min即可切斷電源，讓鍋內(nèi)

7、氣壓自然下降，當(dāng)壓力降到零點(diǎn)后，翻開排氣閥，排出剩余蒸汽，再翻開鍋蓋取出培育基及滅菌物品。3本卷須知：1滅菌時(shí)，鍋內(nèi)冷氣必需排盡，否那么會影響滅菌效果。當(dāng)壓力到達(dá)1.05kgf/cm2或0.103MPa時(shí)，應(yīng)留意維持時(shí)間，時(shí)間過長會破壞培育基的化學(xué)成分，時(shí)間短那么達(dá)不到滅菌效果。 2鍋內(nèi)滅菌物品不能裝得太滿，要留有30%的空間。大型立式的高壓滅菌鍋：臥式滅菌鍋立式高壓自動(dòng)滅菌鍋二、凈化任務(wù)臺任務(wù)原理： 凈化任務(wù)臺普通由鼓風(fēng)機(jī)、濾板、操作臺、紫外光燈和照明燈等部分組成。根據(jù)風(fēng)幕構(gòu)成的方式，可分為垂直式和程度式兩種。超凈任務(wù)臺的任務(wù)原理是：鼓風(fēng)機(jī)送入的空氣經(jīng)過細(xì)菌過濾板除去微生物后，再流過任務(wù)臺面

8、，并在操作人員和操作臺之間構(gòu)成風(fēng)障，使雜菌不能進(jìn)入，構(gòu)成一個(gè)無菌的任務(wù)面。 優(yōu)點(diǎn)：是操作方便自若，比較溫馨，任務(wù)效率高，預(yù)備時(shí)間短。開機(jī)10分鐘即可操作，可進(jìn)展長時(shí)間運(yùn)用。超凈任務(wù)臺三接種工具：常用的有雙筒實(shí)體顯微鏡、鑷子、剪刀、解剖刀、酒精燈等。 四培育設(shè)備：常用的有空調(diào)機(jī)、定時(shí)器、溫度控制器、增濕和去濕機(jī)、培育瓶、培育架、搖床或旋轉(zhuǎn)床、日光燈、光照培育箱等。五化學(xué)實(shí)驗(yàn)及分析設(shè)備：天平、酸度計(jì)、蒸餾水器、烘箱、電爐、藥品柜、冰箱、廢污物桶等。六培育物細(xì)胞學(xué)察看設(shè)備：主要包括顯微察看設(shè)備、組織切片染色用設(shè)備、照相沖洗設(shè)備。七.微孔過濾器細(xì)胞過濾器 ：激素用于滅菌。附1：玻璃器皿的選擇與清洗 一

9、玻璃器皿的選擇： 培育用的玻璃器皿：試管、三角瓶、培育皿、果醬瓶等等； 顯微鏡下察看用的：細(xì)胞微室、載玻片、培育皿等。二玻璃器皿的清洗：1洗滌劑：肥皂、洗潔精、洗衣粉和鉻酸洗滌劑。普通用洗衣粉即可。2新購置的玻璃器皿由于它們或多或少含有游離堿性物質(zhì)，運(yùn)用前先用1%稀鹽酸內(nèi)浸泡一夜，然后用肥皂水洗凈，清水沖洗，最后用蒸餾水沖淋一便，干后備用。3對已被霉菌等雜菌污染的玻璃器皿那么必需如今121高壓蒸汽滅菌30分鐘后再清洗。4洗凈的玻璃器皿應(yīng)透明發(fā)亮、內(nèi)外壁水膜均勻，不掛水珠。 附2 、組培室的衛(wèi)生與滅菌 一、滅菌用品、器具 ：2%新潔爾滅、高錳酸鉀、甲醛、70%酒精、噴霧器、水桶、任務(wù)服、口罩和手

10、套 二、滅菌方法 1、清掃衛(wèi)生。 2、地面、墻壁和任務(wù)臺的滅菌 ：(1)配方:取新潔爾滅原液20ml，加水980m1，配成2%新潔爾滅溶液。 (2)方法:將配好的2%新潔爾滅溶液倒入塑料桶內(nèi)。把噴霧器的主體插入溶液中，并加壓，握著噴霧器的噴桿進(jìn)展均勻地噴霧。在噴房頂時(shí)，要特別小心，防止藥液霧滴掉入眼晴。 3、無菌室和培育室的滅菌 用甲醛和高錳酸鉀熏蒸 1配方:每立方米空間用甲醛l0ml加高錳酸鉀5g的配比液進(jìn)展熏蒸。 2方法:首先房子要密封。然后在房子中間放一玻璃器皿，將稱好的高錳酸鉀放入玻璃器皿內(nèi)，再把已稱量的甲醛溶液漸漸倒入，終了，人迅速分開，并關(guān)上門，密封3天 33天后，開啟房間，搬走玻璃器皿廢液，搞好地面衛(wèi)生 4在己經(jīng)熏蒸的房間里，用70%酒精紗布擦洗培育架、玻璃臺面及任務(wù)臺 實(shí)驗(yàn)安排： 07生物1：雙周星期二 、14-21：00 班長： ： 學(xué)習(xí)委員： ： 第一組：1-20 組長： ： 第二組：21-40 組長： ： 第三組：41-59 組長： ： 07生物