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文檔簡(jiǎn)介
1、-/獸醫(yī)微生物學(xué)緒論及第一章細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)1、微生物:是存在于自然界的一大群體型微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不見,必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍,甚至數(shù)萬(wàn)倍才能觀察到的微小生物。2、微生物的種類:三型八大類(三菌四體一病毒) 真核細(xì)胞型微生物:細(xì)胞核有核膜和核仁,細(xì)胞器完整,如真菌。 原核細(xì)胞型微生物:僅有原始核,無(wú)核膜、核仁。細(xì)胞器很不完善。DN府口 RNA同時(shí)存在。有細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。 非細(xì)胞型微生物:是最小的一類微生物。無(wú)典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu),只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。核酸類型為DNA或RNA病毒屬之。3、微生物的特點(diǎn) 體積小、面積大; 代謝能力強(qiáng)
2、,代謝類型多; 生長(zhǎng)繁殖快,容易培養(yǎng); 易變異,適應(yīng)強(qiáng);,種類多,分布廣。4、細(xì)菌的基本形態(tài)細(xì)菌按其外形,主要有:球菌、桿菌、螺旋狀菌。球菌菌體呈球形或近似球形,根據(jù)細(xì)胞分裂的方向及分裂后的各子細(xì)胞的空間排列狀態(tài)不同,可將球菌分為以 下幾種:?jiǎn)吻蚓㈦p球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌等。桿菌桿菌是細(xì)菌中種類最多的類型,因菌種不同,菌體細(xì)胞的長(zhǎng)短、粗細(xì)等都有所差異。桿菌的形態(tài):短桿狀、長(zhǎng)桿狀、棒桿狀、梭狀桿狀、月亮狀、竹節(jié)狀等;按桿菌細(xì)胞繁殖后的排列方式則 有鏈狀、柵狀、“八”字狀等。螺旋菌:弧菌、螺菌。5、科赫法則 特殊病原菌在同一疾病中查見,健康者中不存在; 該病原菌能被分離培養(yǎng)得
3、純種; 該純培養(yǎng)物接種至易感動(dòng)物,能導(dǎo)致同樣病癥; 自實(shí)驗(yàn)感染的動(dòng)物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)。6、細(xì)菌的衰老型或退化型:指在不良環(huán)境或老齡期時(shí), 細(xì)菌會(huì)出現(xiàn)與正常形狀不一樣的個(gè)體。若將其重新置于正常培養(yǎng)環(huán)境時(shí)可恢復(fù)正常狀態(tài)。7、細(xì)菌的多形性:指處于衰老型或退化型狀態(tài)的細(xì)菌即使置于適宜的環(huán)境中生長(zhǎng),其形狀也與正常的不一致,如嗜血桿菌。8、菌落:?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌在適當(dāng)?shù)墓腆w培養(yǎng)基表面或內(nèi)部,經(jīng)過一段時(shí)間培養(yǎng)后,生長(zhǎng)繁殖出數(shù)量巨大的菌體,形成肉眼可見、有一定形態(tài)的群體。可用于細(xì)菌的分離、純化、計(jì)數(shù)和鑒定。9、菌苔:各“菌落”相互連接形成一片。10、細(xì)菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài) (VBNC:指細(xì)菌處于不良環(huán)境條
4、件下,細(xì)胞縮成球形,用常規(guī)方法培養(yǎng)不能生長(zhǎng)繁殖 , 但仍是活的一種特殊存在形式,在一定條件下可復(fù)蘇,并仍具毒性。11、細(xì)菌的結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核體。 特殊結(jié)構(gòu):莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽胞。12、磷壁酸的功能 形成表面抗原決定簇的成分; 提高膜結(jié)合酶的能力(使細(xì)胞壁形成負(fù)電荷環(huán)境,以利于吸附鎂離子,維持酶活); 保證革蘭氏陽(yáng)性致病菌(如A族鏈球菌)與其寄主間的黏連;構(gòu)成噬菌體的吸附位點(diǎn)。13、細(xì)胞壁格蘭陽(yáng)性菌肽聚糖磷壁酸革蘭陰性菌脂多糖(LPS)組成: 類脂A:無(wú)種屬特異性,內(nèi)毒素的主要毒性成分; 側(cè)鏈多糖:即菌體抗原,有種、型特異性; 核心多糖:有屬特異性。功能: 能夠吸
5、附Ca2+、M0+等陽(yáng)離子; 為噬菌體提供特異性吸附受體。 外膜蛋白(OMP:包括微孔蛋白、脂蛋白。周質(zhì)間隙14、細(xì)胞壁的功能 維持菌體外形和提高機(jī)械強(qiáng)度,保護(hù)細(xì)菌耐受低滲環(huán)境; 阻擋有害物質(zhì)進(jìn)入菌體; 維持菌體內(nèi)外離子平衡; 參與細(xì)菌的正常分裂; 表面帶有多種抗原分子,可誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答。15、細(xì)菌細(xì)胞膜不含膽固醇。16、擬核:細(xì)菌不具有成形的核,無(wú)核膜、核仁,遺傳物質(zhì)稱為擬核(核質(zhì))。核質(zhì)由單一密閉環(huán)狀 DNA分子反復(fù)回旋卷曲盤繞組成松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。17、莢膜概念:某些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外周產(chǎn)生的一層包圍整個(gè)菌體、邊界清楚的黏液樣物質(zhì),理化方法去除后并不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)。功能 抗吞噬作用:莢
6、膜具有抵抗宿主吞噬細(xì)胞的作用,因而莢膜是病原菌的重要毒力因子。 抗有害物質(zhì)的損傷作用:莢膜處于細(xì)胞的最外層,可保護(hù)菌體避免和減少受有害物質(zhì)的損傷。 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的貯存場(chǎng)所與廢物排出。18、S層的功能 分子篩和離子通道; 屏障作用,保護(hù)細(xì)菌; 黏附宿主細(xì)胞; 重要的表面抗原。19、鞭毛的功能 是運(yùn)動(dòng)器官;,有抗原性; 與致病性有關(guān)。20、菌毛 與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無(wú)關(guān); 菌毛蛋白具有抗原性; 必須用電鏡觀察; 分普通菌毛、性菌毛。21、細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型 (細(xì)菌L型):細(xì)胞壁受損后仍能生長(zhǎng)和分裂的細(xì)菌。在一般環(huán)境中不耐受菌體內(nèi)的高滲-/ 透壓會(huì)漲破死亡,在高滲環(huán)境中仍可存活。革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁缺失后,原生質(zhì)僅被
7、一層細(xì)胞膜包住一一原生質(zhì)體。革蘭陰性菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù)一一原生質(zhì)球。將兩個(gè)不同的原生質(zhì)體或原生質(zhì)球融合并再生成一個(gè)細(xì)菌的技術(shù),稱原生質(zhì)體融合技術(shù)。22、研究L-細(xì)菌的意義 診斷困難,由于 L-細(xì)菌在通常培養(yǎng)條件下不易成功,所以常誤診為非病原體感染;對(duì)干擾細(xì)胞壁合成的藥物敏感性下降,如青霉素,多黏菌素等;由于細(xì)胞壁的少或無(wú),使抗原性下降,L-細(xì)菌的感染可逃避正常菌抗體的攻擊而長(zhǎng)期存在;與慢性病和一些復(fù)發(fā)性疾病有關(guān);用藥一一導(dǎo)致L型對(duì)藥不敏感一一進(jìn)一步感染等利用L-細(xì)菌是進(jìn)行細(xì)菌的基礎(chǔ)研究。23、革蘭氏染色原理G+菌:肽聚糖含量高,交聯(lián)度大,當(dāng)乙醇脫色時(shí),肽聚糖因脫水而孔徑縮小,故結(jié)晶紫
8、-碘復(fù)合物被阻留在細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞仍呈紫色。G菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,因其含脂量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大, 酒精將細(xì)胞脫色,呈無(wú)色,沙黃(石炭酸復(fù)紅)復(fù)染呈紅色。方法細(xì)菌標(biāo)本固定、結(jié)晶紫初染、碘液媒染、生成結(jié)晶紫-碘復(fù)合物、95%酉精脫色、稀釋的復(fù)紅復(fù)染。用途:細(xì)菌形態(tài)鑒定、菌種鑒定 意義:鑒別細(xì)菌,選擇抗菌藥物,研究細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性、對(duì)結(jié)晶紫的敏感性,細(xì)菌的等電點(diǎn),指導(dǎo) 臨床用藥。24、革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁成分比較革蘭氏陽(yáng)性菌革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁厚度厚(15 80nm)?。?015nm)層次主要為1層肽聚糖層2層,肽聚糖層和外膜層是否含磷壁酸有無(wú)脂
9、多糖無(wú)有對(duì)青霉素敏感性高低或/、敏感對(duì)溶菌酶敏感性高較低25、芽胞:某些革蘭陽(yáng)性菌在一定環(huán)境條件下,在菌體內(nèi)部形成的一個(gè)圓形或卵圓形的休眠體。芽胞形成后細(xì) 菌即失去繁殖能力。 芽胞的結(jié)構(gòu),由外向內(nèi):外衣一外膜一皮質(zhì)一芽抱壁一內(nèi)膜一芯髓。 性質(zhì):一個(gè)細(xì)菌只形成一個(gè)芽胞,一個(gè)芽胞發(fā)芽也只生成一個(gè)菌體,細(xì)菌數(shù)量并未增加,因而芽胞不是細(xì) 菌的繁殖方式。與芽胞相比,未形成芽胞而具有繁殖能力的菌體稱為繁殖體(營(yíng)養(yǎng)體)。特點(diǎn) 對(duì)高溫、干燥、輻射、化學(xué)藥物有強(qiáng)大抵抗力。 含水量低、壁厚而致密、通透性差、不易著色、折光性強(qiáng)。 芽胞內(nèi)新陳代謝幾乎停止,處于休眠狀態(tài),但保持潛在萌發(fā)力。 不是繁殖器官,一個(gè)芽胞萌發(fā)只
10、產(chǎn)生一個(gè)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)胞。意義 對(duì)外界不良環(huán)境有強(qiáng)大的抵抗力,是細(xì)菌保存生命的一種休眠結(jié)構(gòu); 消毒的指標(biāo)是以殺滅芽胞為準(zhǔn)(121c/30min,骯病毒除外); 反恐怖戰(zhàn)爭(zhēng)需要。第二章細(xì)菌的生理1、細(xì)菌與真核生物新陳代謝的主要區(qū)別-/ 生長(zhǎng)和繁殖速度快 利用各種化合物作為能源能力強(qiáng) 營(yíng)養(yǎng)需求多種多樣 可利用超常流水線合成大分子物質(zhì) 能產(chǎn)生特殊物質(zhì)2、細(xì)菌物質(zhì)攝取方式單純擴(kuò)散(被動(dòng)擴(kuò)散)促進(jìn)擴(kuò)散主動(dòng)運(yùn)輸基團(tuán)轉(zhuǎn)位需要載體蛋白和能量,有兩個(gè)突出特點(diǎn):轉(zhuǎn)運(yùn)過程中物質(zhì)發(fā)生了化學(xué)變化;主要存在于厭氧菌和兼性厭氧菌中。3、時(shí)代時(shí)間:一個(gè)菌體分裂為兩個(gè)菌體所需的時(shí)間。4、生長(zhǎng)曲線:將細(xì)菌接種在液體培養(yǎng)基并置于適宜
11、溫度中,定時(shí)取樣檢查活菌數(shù),可發(fā)現(xiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)過程具有規(guī)律性。以時(shí)間為橫坐標(biāo),以活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),可得一條生長(zhǎng)曲線。5、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的四個(gè)時(shí)期遲緩期:是細(xì)菌來(lái)到新環(huán)境的一個(gè)適應(yīng)過程。特點(diǎn): 代謝活躍,合成并積累所需酶系統(tǒng); RNA含量明顯增多,但 DN哈量無(wú)變化; 細(xì)菌數(shù)不增加。 對(duì)數(shù)期:細(xì)菌生長(zhǎng)迅速,以恒定速度進(jìn)行分裂繁殖,活菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),達(dá)到頂峰,生長(zhǎng)曲線接近一條斜的直線。此時(shí)病原菌致病力最強(qiáng),形態(tài)、染色特性及生理活性較典型,對(duì)抗菌藥物的作用較敏感。OD=0.40.6認(rèn)為處于對(duì)數(shù)期。穩(wěn)定期:因營(yíng)養(yǎng)的消耗、代謝產(chǎn)物的蓄積,細(xì)菌繁殖速度下降,死亡數(shù)逐步上升,新繁殖的活菌數(shù)與死 菌數(shù)大致平
12、衡。細(xì)菌的形態(tài)及生理性狀常有改變,格蘭陽(yáng)性菌此時(shí)可染成陰性,毒素、抗生素、芽抱多此時(shí)產(chǎn) 生。 衰亡期:死菌數(shù)超過活菌數(shù),細(xì)菌的菌體變形或自溶,染色不典型,難以進(jìn)行鑒定。6、培養(yǎng)基 概念:是人工配制的基質(zhì),含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基制成后,要經(jīng)滅菌處理。營(yíng)養(yǎng)條件 基本營(yíng)養(yǎng) 氧氣:根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧的需求,可分為需楊菌、厭氧菌及兼性厭氧菌 厭氧培養(yǎng)基:是為培養(yǎng)厭氧菌而設(shè)計(jì)的 溫度:根據(jù)細(xì)菌對(duì)溫度的適應(yīng)范圍,可將細(xì)菌分為嗜冷菌、嗜溫菌、嗜熱菌 酸堿度:多數(shù)病原菌的最適ph為7.27.6 ,鼻疽伯氏菌偏酸,霍亂弧菌偏堿7、培養(yǎng)基的分類按營(yíng)養(yǎng)成分 基礎(chǔ)培養(yǎng)基:基本營(yíng)養(yǎng)成分 營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基
13、中添加一些其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖、血液、血清、生長(zhǎng)因子等按狀態(tài) 固體培養(yǎng)基:1.5%2%瓊脂,用于細(xì)菌分離純化 半固體培養(yǎng)基:0.5%瓊脂,作穿刺試驗(yàn) 液體培養(yǎng):擴(kuò)增純培養(yǎng)的菌體按功能 鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入特定底物,觀察細(xì)菌生長(zhǎng)后的分解底物,從而鑒別細(xì)菌。 選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),使抑制一類細(xì)菌生長(zhǎng),而有利于另一類細(xì)菌生長(zhǎng),從而將后者選擇出來(lái)。麥康凱培養(yǎng)基內(nèi)含膽鹽,能抑制革蘭陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),大腸桿菌及沙門菌可生長(zhǎng)。 厭氧培養(yǎng)基:用于厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別。將普通培養(yǎng)基放在無(wú)氧環(huán)境中培養(yǎng),或者使培養(yǎng)基本身成 為無(wú)氧環(huán)境。庖肉培養(yǎng)基是常用的厭氧培養(yǎng)基之一,其中不含飽和脂肪酸和
14、谷胱甘肽的肉渣起到了還原劑的作用。8、分離培養(yǎng):將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基表面,因劃線的分散作用,許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面散開。9、液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象 渾濁:大多數(shù)細(xì)菌 沉淀:鏈狀生長(zhǎng)的細(xì)菌 菌膜:專性需氧菌,如結(jié)核桿菌、枯草桿菌10、生化反應(yīng):細(xì)菌對(duì)糖、蛋白質(zhì)的分解能力不同,代謝產(chǎn)物各異,利用生物化學(xué)方法鑒別不同細(xì)菌稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)。主要有氧化酶試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、口引喋試驗(yàn)等。11、生物被膜:通常生活在自然界中的細(xì)菌并非以游離的單個(gè)菌體形式存在,而是以群落形式出現(xiàn),這種群落 的主要表現(xiàn)形式稱生物被膜。是一種被自身產(chǎn)生的多聚基質(zhì)包裹著菌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)群體,是細(xì)菌具有
15、保護(hù)性的一 種生長(zhǎng)模式,其結(jié)構(gòu)中具有水和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的通道。12、生物膜的特性生長(zhǎng)速度緩慢且不均一。細(xì)菌生物膜是在不利環(huán)境下形成的,環(huán)境變化對(duì)其影響較小。在膜表面的細(xì)菌,由于營(yíng)養(yǎng)等因素,分裂較快,體積較大,內(nèi)層相反。細(xì)菌毒力下降毒力強(qiáng)的細(xì)菌形成被膜菌后,一般不會(huì)使動(dòng)物致死。耐藥性提高逃逸宿主的免疫監(jiān)視多糖膜能降低免疫細(xì)胞和免疫分子的趨化,使被膜菌與宿主長(zhǎng)期共存。13、密度感應(yīng)(Q9:多數(shù)細(xì)菌能合成并釋放一種稱為自身誘導(dǎo)素(信息Jt)的信號(hào)分子,胞外信號(hào)分子濃度隨細(xì)菌密度的增加而增加,達(dá)到一個(gè)臨界濃度時(shí),信息素會(huì)啟動(dòng)菌體中相關(guān)基因的表達(dá),調(diào)控細(xì)菌的生物行為,以 適應(yīng)環(huán)境的變化,這一現(xiàn)象稱群體感應(yīng)調(diào)節(jié)
16、。14、微生物種群間的關(guān)系:互生、共生、拮抗、寄生。15、正常菌群與其宿主之間形成共生關(guān)系,具體表現(xiàn)為營(yíng)養(yǎng)、免疫、生物拮抗三方面。16、菌膜?。貉乐苎?、中耳炎、壞死性筋膜炎、心內(nèi)膜炎。17、無(wú)特定病原體動(dòng)物(SPF):指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動(dòng)物。18、感受態(tài):細(xì)胞生活周期中一種特殊的生理狀態(tài)。第三章消毒與滅菌1、滅菌:指殺滅物體中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌抱子的方法。2、消毒:指殺滅物體中病原微生物的方法。只要求達(dá)到消除傳染性的目的,對(duì)非病原微生物及其芽胞、抱子 并不要求全部殺死。3、防腐:指阻止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法。4、無(wú)菌:指沒有活微生物的狀
17、態(tài)。5、無(wú)菌操作:防止微生物進(jìn)入機(jī)體或局部環(huán)境的操作技術(shù)。6、物理消毒滅菌法:熱力滅菌法、輻射滅菌法、超聲波滅菌法、濾過滅菌法。7、熱力滅菌法:干熱滅菌、濕熱滅菌。二者比較同一溫度下,濕熱滅菌效力比干熱滅菌大。原因: 濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固; 濕熱的穿透力比干熱大; 濕熱的蒸汽有潛熱存在。干熱滅菌法火焰滅菌法熱空氣滅菌法干熱滅菌器適用于高溫下不損壞、不變質(zhì)的物品,如玻璃器皿、瓷器等。滅菌溫度需160 c維持2h。濕熱滅菌法煮沸滅菌 巴氏消毒法:以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌或特定微生物,而不致嚴(yán)重?fù)p害其營(yíng)養(yǎng)成分和風(fēng)味。 低溫維持巴氏消毒法 6365C/30min 高溫瞬時(shí)巴氏消毒法 71
18、72 C/15s 超高溫巴氏消毒法 132C/12s 流通蒸汽滅菌法:是一種常壓蒸汽消毒法,細(xì)菌繁殖體1530min可殺滅,但芽胞不全被殺滅。(4)間歇滅菌法/丁達(dá)爾滅菌法(反復(fù)多次流通蒸汽):用于不耐高溫的培養(yǎng)基,如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、 糖培養(yǎng)基的滅菌。高壓蒸汽滅菌8、輻射滅菌法非電離輻射可見光線,日光.紫外線波長(zhǎng)200300nm部分有殺菌作用,實(shí)驗(yàn)室常用的紫外線殺菌燈紫外線波長(zhǎng)為253.7nm,用于:微生物實(shí)驗(yàn)室、無(wú)菌室、手術(shù)室的空氣消毒;不能用高溫或化學(xué)藥品消毒物品的表面消毒;誘變育種。紅外線:紅外線烤箱,微波 電離輻射:“射線、3射線、丫射線、X射線用途:忌熱物品的滅毒消菌、食品保
19、藏和育種等方面。9、超聲波滅菌法目前超聲波主要用于裂解細(xì)胞,提取細(xì)胞組分。10、濾過除菌法:通過機(jī)械、物理阻留作用將液體或空氣中的細(xì)菌等微生物除去的方法,不能除去病毒、支原 體以及細(xì)菌L型等微生物。11、消毒劑:用于殺滅病原微生物的化學(xué)藥品。分類 使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固,如酚類(高濃度)、醇類、重金屬鹽類(高濃度)、酸堿類; 損傷細(xì)菌細(xì)胞膜,如酚類(低濃度)、表面活性劑; 干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝,如某些氧化劑、重金屬鹽類(低濃度); 改變核酸的功能,如染料。 影響消毒劑作用的因素 消毒劑的性質(zhì)、濃度和作用時(shí)間; 微生物的污染程度; 微生物的種類和數(shù)量; 環(huán)境中有機(jī)物; 溫度、濕度、酸堿度; 化
20、學(xué)拮抗物。12、防腐劑:用于抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的化學(xué)藥品。13、抗生素:某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死另一些微生物的物質(zhì)。14、細(xì)菌素:某種細(xì)菌產(chǎn)生的具有殺菌作用的蛋白質(zhì),只作用于同種不同菌株的細(xì)菌及親緣關(guān)系相近的細(xì)菌。食品防腐領(lǐng)域的應(yīng)用:細(xì)菌素Nisin已被60多個(gè)國(guó)家批準(zhǔn)作為食品添加劑用于食品防腐。15、實(shí)驗(yàn)室生物安全的意義:防止病原微生物及其他有害生物或物質(zhì)傳入實(shí)驗(yàn)室;防止病原微生物等傳出實(shí)驗(yàn)室;實(shí)驗(yàn)人員的自身安全防護(hù)。第四章細(xì)菌的感染與致病機(jī)理1、感染:病原微生物在宿主體內(nèi)持續(xù)存在或增殖。2、發(fā)?。翰≡⑸锔腥竞?,對(duì)宿主造成明顯的損害。3、病原菌:導(dǎo)致機(jī)體發(fā)病的細(xì)菌。4、
21、致病性:病原菌在一定條件下,能在宿主體內(nèi)引起感染的能力稱致病性。致病性是細(xì)菌種的特征之一。5、毒力:病原菌致病力的強(qiáng)弱程度,同一細(xì)菌的不同菌株,其毒力不同,毒力是菌株的特征。6、基因水平柯赫法則在致病菌株中檢出某些基因或其產(chǎn)物,而無(wú)毒力菌株中無(wú);有毒力菌株的某個(gè)基因被損壞,則菌株的毒力減弱或消除,或?qū)⒋嘶蚩寺〉綗o(wú)毒菌株內(nèi),后者成為有毒力菌株;將細(xì)菌接種動(dòng)物時(shí),這個(gè)基因應(yīng)在感染的過程中表達(dá);在接種動(dòng)物檢測(cè)到這個(gè)基因產(chǎn)物的抗體,或產(chǎn)生免疫保護(hù)。7、半數(shù)致死量(LD50):能使接種的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在感染后一定時(shí)限內(nèi)死亡一半所需的微生物量或毒素量。8、半數(shù)感染量(IDs。):某些病原微生物只能感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
22、、雞胚或細(xì)胞,但不引致死亡,用ID50表示其毒力。9、干擾或逃避宿主的防御機(jī)制抗吞噬作用 不與吞噬細(xì)胞接觸(破壞,鏈球菌溶血素) 抑制吞噬細(xì)胞的攝?。ㄇv膜、菌毛) 在吞噬細(xì)胞內(nèi)生存(沙門菌、李氏桿菌) 殺死或損傷吞噬細(xì)胞抗體液免疫機(jī)制 抗原偽裝或抗原變異,金黃色葡萄球菌、SPA 分泌蛋白酶降解免疫球蛋白,嗜血桿菌分泌IgA蛋白酶 逃避補(bǔ)體,抑制抗體產(chǎn)生,LPS OMP莢膜、S層內(nèi)化作用:某些細(xì)菌粘附于細(xì)胞表面后,能進(jìn)入吞噬細(xì)胞或非吞噬細(xì)胞內(nèi)部的過程。意義:宿主細(xì)胞為進(jìn)入其內(nèi)的細(xì)菌提供了一個(gè)增殖的小環(huán)境和庇護(hù)所,使細(xì)菌逃避宿主免疫機(jī)制。也可隨吞噬細(xì)胞的游走擴(kuò)散至其他部位,造成廣泛病變。10、外毒
23、素 概念:某些病原菌在生長(zhǎng)繁殖過程中所產(chǎn)生的對(duì)宿主細(xì)胞有毒性的可溶性蛋白質(zhì),大多數(shù)外毒素在菌體內(nèi)合成后必須分泌于胞外。特性,毒性作用極強(qiáng) 有高度的特異性 不耐熱,多數(shù)在 6080c經(jīng)1080min即失去毒性 對(duì)宿主不致熱 抗原性強(qiáng),刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體組成 A亞單位:毒素的活性中心,決定毒素的毒性效應(yīng) B亞單位:結(jié)合單位,協(xié)助 A亞單位。可單獨(dú)與細(xì)胞膜受體結(jié)合,從而阻斷完整毒素結(jié)合細(xì)胞。刺激機(jī)體 產(chǎn)生相應(yīng)抗體,可作為良好的亞單位疫苗。11、抗毒素:外毒素刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體,可用于緊急治療和預(yù)防。12、類毒素:外毒素在 0.4%甲醛溶液作用下,經(jīng)過一段時(shí)間可以脫毒,但仍保留原有抗原性,稱為類
24、毒素。13、內(nèi)毒素 概念:指革蘭陰性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分,細(xì)菌在死亡后破裂或用人工方法裂解菌體后才釋放。特性 毒性弱,很少致死 致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐,耐熱 抗原性較弱,免疫應(yīng)答不足以中和毒性組成 多糖側(cè)鏈 核心多糖 類脂A:主要的毒性成分(保守)檢測(cè)賞試驗(yàn):賞變形細(xì)胞溶解物 14、內(nèi)毒素與外毒素的比較種類內(nèi)毒素外毒素來(lái)源革蘭陰性菌革蘭陽(yáng)性菌及部分陰性菌存在部位細(xì)胞壁成分、細(xì)菌裂解后釋放活菌分泌或細(xì)菌溶解后散出化學(xué)成分脂多糖蛋白質(zhì)穩(wěn)定性好,160c/24h破壞差,6080 C/30min破壞毒性作用較弱,各種內(nèi)毒素作用大致 相同,起休克,發(fā)熱強(qiáng),對(duì)機(jī)體組織器官有選擇性, 引起特殊臨床表現(xiàn)
25、抗原性弱,能刺激機(jī)體形成抗體,但無(wú)中和作用,甲醛處理后不能形成類毒素強(qiáng),能刺激機(jī)體形成抗毒素, 經(jīng)甲醛脫毒后能形成類毒素15、機(jī)會(huì)致病菌:正常菌群與宿主之間,正常菌群之間,通過營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)、代謝產(chǎn)物的相互制約等因素,維持著 良好的生存平衡。在一定條件下這種平衡關(guān)系被打破,原來(lái)不致病的正常菌群中的細(xì)菌可成為致病菌,這類細(xì) 菌稱機(jī)會(huì)性致病菌。16、細(xì)菌毒力減弱方法 長(zhǎng)時(shí)間在體外連續(xù)培養(yǎng)傳代 在高于最適生長(zhǎng)溫度條件下培養(yǎng) 在含有特殊化學(xué)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng) 在特殊氣體條件下培養(yǎng) 通過非易感動(dòng)物 通過基因工程的方法17、細(xì)菌毒力增強(qiáng)的方法:回歸易感動(dòng)物。第五章細(xì)菌的遺傳變異1、細(xì)菌的遺傳:指親代細(xì)菌與子代細(xì)
26、菌的相似性,它使細(xì)菌的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定,是各種細(xì)菌存在的根據(jù)。2、細(xì)菌的變異:指親代與子代及子代細(xì)菌之間的不相似性,細(xì)菌得以發(fā)展進(jìn)化。3、細(xì)菌常見的變異現(xiàn)象 形態(tài)和結(jié)構(gòu)變異,菌落形態(tài)變異 抗原變異 抗性變異 代謝變異,毒力變異4、質(zhì)粒:細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì),編碼細(xì)菌各種重要的生物學(xué)形狀。 嚴(yán)緊型復(fù)制 按轉(zhuǎn)移的特性,可分為接合性質(zhì)粒、非接合性質(zhì)粒 自殺性質(zhì)粒 穿梭載體:指含有兩個(gè)親緣關(guān)系不同的復(fù)制子,能在兩種不同的生物中復(fù)制。5、轉(zhuǎn)位因子:是細(xì)菌基因組中能改變自身位置的一類獨(dú)特的DNM段。6、毒力島(PAI):指病原菌的某個(gè)或某些毒力基因群,分子結(jié)構(gòu)與功能有別于細(xì)菌染色體,但位于細(xì)菌染色體之內(nèi)
27、。7、基因突變:指生物細(xì)胞遺傳物質(zhì) DNA分子結(jié)構(gòu)突然發(fā)生了穩(wěn)定的可遺傳變化。是生物進(jìn)化的一個(gè)重要因素。8、基因轉(zhuǎn)移:外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入受體菌細(xì)胞內(nèi)的過程。重組:轉(zhuǎn)移的基因與受體菌 DNA整合在一起?;蜣D(zhuǎn)移和重組的主要方式:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、原生質(zhì)融合等。9、轉(zhuǎn)化:供體菌游離的 DNA片段直接進(jìn)入受體菌,使受體菌獲得新的性狀。10、轉(zhuǎn)導(dǎo) 概念:以溫和噬菌體為媒介,把供體菌的DNA、片段攜帶到受體菌中,通過交換與整合,使受體菌獲得供體菌的部分遺傳性狀。 類型:普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(任何)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(特定,入)(完全轉(zhuǎn)導(dǎo),流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo))(特異性轉(zhuǎn)導(dǎo))DNA專移給受體細(xì)菌的過程。普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo):被裝入的
28、 DNA片段可以是供體菌染色體上的任何部分。局限性轉(zhuǎn)導(dǎo):為噬菌體所介導(dǎo)的供體菌染色體上個(gè)別特定基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)。12、接合:是兩個(gè)完整的細(xì)菌細(xì)胞通過性菌毛直接接觸,由供體細(xì)菌將質(zhì)粒第六章細(xì)菌的分類與命名1、古細(xì)菌無(wú)肽聚糖。2、微生物分類的最基本單元是種,其次是屬。3、菌株:是不同來(lái)源的某一細(xì)菌的純培養(yǎng)物。4、細(xì)菌的命名依據(jù)“國(guó)際細(xì)菌命名法規(guī)”的規(guī)定,學(xué)名用拉丁文,遵循“雙名法”。每種細(xì)菌的拉丁文名稱由屬名和種名兩部分構(gòu)成,屬名第一個(gè)字母大寫,其余均小寫。5、細(xì)菌分類采用傳統(tǒng)的雙歧檢索條目分類法。6、目前公認(rèn)的細(xì)菌分類體系是伯吉系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)。7、國(guó)際系統(tǒng)與演化微生物學(xué)雜質(zhì)是細(xì)菌分類命名的世界公認(rèn)的權(quán)
29、威期刊。8、國(guó)際公認(rèn)的菌種保藏權(quán)威機(jī)構(gòu)是美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC。第二十一章病毒的結(jié)構(gòu)1、病毒子:一個(gè)形態(tài)和結(jié)構(gòu)上完整的病毒顆粒。2、病毒的特點(diǎn) 形體微小,能通過細(xì)菌濾器,在電子顯微鏡下才能觀察;沒有細(xì)胞構(gòu)造;每種病毒只含一種核酸,DNA或RNA(4)既無(wú)產(chǎn)能酶系,也無(wú)蛋白質(zhì)和核酸合成酶系,只能利用宿主活細(xì)胞內(nèi)現(xiàn)成代謝系統(tǒng)合成自身的核酸和蛋 白質(zhì)成分; 對(duì)抗生素不敏感,對(duì)干擾素敏感;(6)以復(fù)制方式繁殖。3、痘病毒最大,圓環(huán)病毒最小。4、動(dòng)物病毒中螺旋對(duì)稱的病毒均屬有囊膜的單股RNAW毒。5、除痘病毒外,所有脊椎動(dòng)物DNAW毒土勻?yàn)?0面體。6、病毒的化學(xué)組成:核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水
30、化合物、其他組成。7、核酸的特點(diǎn)病毒只含一種核酸。構(gòu)成病毒體的芯髓;核酸類型多樣化; 分子量小,基因組結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,所含基因組數(shù)目少;病毒基因組核酸復(fù)制多樣化;病毒核酸更容易受宿主細(xì)胞的影響而發(fā)生基因突變和重組;(6)有些病毒去除囊膜和衣殼,裸露的DNA RNAtk能感染細(xì)胞,這種核酸稱傳染性核酸。8、感染性核酸具備條件病毒核酸能作為 mRN域能利用宿主細(xì)胞的 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄病毒的 mRNA病毒核酸不分節(jié)段。9、將mRNA勺堿基序列作為標(biāo)準(zhǔn),與其相同的稱正股,與其互補(bǔ)的稱負(fù)股。某些病毒(布尼病毒、砂粒病毒) 部分為正負(fù)鏈,稱為雙向。10、核酸可分單股或雙股、線狀或環(huán)狀、分節(jié)段或不分節(jié)段。11、擬
31、病毒又稱類類病毒,衛(wèi)星RNAs指一類包裹在真病毒粒子中的缺陷類病毒。擬病毒極其微小,僅由裸露 的RNA (300400個(gè)核甘酸)或 DN顏成。是一種環(huán)狀單鏈 RNA被侵染的植物病毒被稱為輔助病毒,擬病毒 必須通過輔助病毒才能復(fù)制。12、蛋白質(zhì) 結(jié)構(gòu)蛋白:指構(gòu)成一個(gè)形態(tài)成熟的、有感染性的病毒顆粒所必需的蛋白質(zhì)。是構(gòu)成病毒衣殼的全部成分 和囊膜的主要成分。 非結(jié)構(gòu)蛋白:指由病毒基因組編碼,在病毒復(fù)制或基因表達(dá)調(diào)控過程中具有一定功能,但不結(jié)合于病毒 顆粒中的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)功能 保護(hù)病毒核酸,使其免受核酸酶或其他理化因素的破壞; 參與病毒感染細(xì)胞的過程,決定病毒對(duì)宿主細(xì)胞的親嗜性; 抗原性:誘導(dǎo)特異性
32、抗體、致敏淋巴細(xì)胞。13、脂類、糖類主要存在于囊膜中,脂溶劑可去除囊膜,使病毒喪失活性;來(lái)自宿主細(xì)胞,與囊膜病毒的吸附和穿入宿主細(xì)胞的作用有關(guān)。14、病毒的命名要由公認(rèn)的國(guó)際專家小組負(fù)責(zé)不用拉丁文雙名法,而用英文或英語(yǔ)化的拉丁文,只用單名,目、科、屬分別用拉丁文后綴“-virales "、" -viridae ”及"-virus ”。15、類病毒:沒有蛋白質(zhì)外殼的病毒,由環(huán)狀RNA分子組成,在植物中發(fā)現(xiàn)。16、擬病毒:指一類包裹在真病毒粒子中的缺陷類病毒。17、感染性核酸:是由病毒質(zhì)?;蚋腥炯?xì)胞中分離出的具感染性的核酸。18、月元病毒:只含傳染性蛋白,無(wú)核酸。第二
33、十二章病毒的復(fù)制1、復(fù)制:病毒在活細(xì)胞內(nèi),以其基因?yàn)槟0?,在酶的作用下,分別合成病毒基因及蛋白質(zhì),再組裝成完整的病毒顆粒。2、復(fù)制周期:從病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞開始,經(jīng)過基因組復(fù)制和病毒蛋白合成,到釋放子代病毒的全過程。3、病毒的復(fù)制周期:吸附和穿入、脫殼、生物合成、組裝和釋放。4、隱蔽期:病毒侵入易感細(xì)胞后的短時(shí)間內(nèi)完全消失,細(xì)胞內(nèi)也找不到。該感染的病毒顆粒, 直到新的病毒子出現(xiàn)為止,這一段時(shí)間稱為病毒復(fù)制的隱蔽期。生物合成階段,病毒處于隱蔽期。5、感染比:在一個(gè)系統(tǒng)中,感染病毒細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞總數(shù)之比。6、病毒的一步生長(zhǎng)曲線:在幾乎 100%感染比體系中,一種病毒幾乎同時(shí)感染所有細(xì)胞,并進(jìn)行病毒復(fù)制
34、。這種同步復(fù)制繪制出的病毒生長(zhǎng)曲線,稱病毒的一步生長(zhǎng)曲線。7、某些病毒能凝集紅細(xì)胞,稱為病毒的血凝作用。8、病毒的特異抗體可抑制其血凝作用,稱為血凝抑制作用。9、血吸附是一種特殊形式的血凝作用,是將紅細(xì)胞吸附于病毒感染的宿主細(xì)胞表面。10、根據(jù)病毒基因組如何轉(zhuǎn)錄稱mRNA如何指令合成蛋白質(zhì),"""病毒的生物合成過程可基本歸于6大類:雙月DNA病毒、單股 DNAW毒、單正股 RNAW毒、單負(fù)股 RNAW毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、雙股 RNAW毒。11、病毒的mRN座多順反子。第二十三章病毒的遺傳與進(jìn)化1、突變:指基因組中核酸堿基順序上的化學(xué)變化,可以是一個(gè)核甘酸的改變,也可以
35、是成百上千個(gè)核甘酸的缺失或易位。2、回復(fù)突變(第二位點(diǎn)突變或基因內(nèi)校正):突變體經(jīng)過第二次突變又完全或部分地恢復(fù)為原來(lái)的基因型和表現(xiàn)型。由于它的表現(xiàn)型效應(yīng)被基因組第2位點(diǎn)的突變抑制,所以又稱抑制突變。3、缺損型干擾(DI)突變株:是一種缺失突變的產(chǎn)物。自身不能復(fù)制,在親本野生株作為輔助病毒存在時(shí)才能復(fù)制,但又干擾親本病毒的復(fù)制,導(dǎo)致后者數(shù)量減少。4、DI突變株特點(diǎn) 含正常的衣殼蛋白質(zhì)只含正?;蚪M的一部分只在正常同源病毒同時(shí)存在時(shí)繁殖,這時(shí)同源病毒成為輔助病毒(4)特異性干擾同源病毒的繁殖,經(jīng)連續(xù)傳代后,DI顆粒增多5、表型變異,毒力變異 抗原性變異(抗體逃逸變異株) 空斑變異(空斑變異株)
36、條件致死性突變株6、DNAW毒復(fù)制具校正功能,RNAM制缺少校正機(jī)制,病毒 RNAM制的錯(cuò)誤率遠(yuǎn)高于病毒 DNA7、分子內(nèi)重組:將兩個(gè)有親緣關(guān)系但生物學(xué)性狀不同的毒株感染同一宿主細(xì)胞,可發(fā)生核酸水平上的互換, 產(chǎn)生兼有兩親本特性的子代,稱重組。8、重配:對(duì)于分節(jié)段的 RNAW毒,通過交換 RNA節(jié)段而進(jìn)行的重組稱重配。9、補(bǔ)償作用:指在感染的細(xì)胞中, 病毒蛋白之間由于相互作用的結(jié)果,拯救了一種或兩種病毒或增加了病毒的產(chǎn)量。10、表型混合概念:兩種病毒混合感染后,一個(gè)病毒的基因組偶爾裝入另一病毒的衣殼內(nèi),或裝入兩個(gè)病毒成分構(gòu)成 的衣殼內(nèi),發(fā)生表型混合。特點(diǎn)兩株病毒混合感染時(shí),裝配過程發(fā)生錯(cuò)誤形成
37、;主要表現(xiàn)為耐藥性,抗原性等改變,基因并未改變,改變的生物學(xué)形狀不能遺傳。11、基因型混合:指兩種病毒的核酸偶爾混合裝在同一病毒衣殼內(nèi),或兩種病毒的核衣殼偶爾包在一個(gè)囊膜內(nèi),但它們的核酸都未重組合,所以沒有遺傳性。第二十四章病毒與細(xì)胞間的相互作用1、病毒是嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生微生物,培養(yǎng)病毒必須用細(xì)胞。根據(jù)病毒的不同選用敏感動(dòng)物(動(dòng)物接種)、雞胚(雞胚接種)或離體細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)(細(xì)胞培養(yǎng))。2、動(dòng)物接種的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備、技術(shù)簡(jiǎn)單、易成功缺點(diǎn):個(gè)體差異大、價(jià)格昂貴、數(shù)量有限、需要隔離畜舍3、雞胚接種的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn):技術(shù)簡(jiǎn)單、來(lái)源充沛、價(jià)格低廉、數(shù)量可大、不需特殊設(shè)備 缺點(diǎn):很多病毒
38、不能適應(yīng)(主要是哺乳動(dòng)物的病毒)4、細(xì)胞培養(yǎng):指利用機(jī)械、酶或化學(xué)方法使動(dòng)物組織或傳代細(xì)胞分散成單個(gè)乃至24個(gè)細(xì)胞團(tuán)懸液進(jìn)行培養(yǎng)。優(yōu)點(diǎn)每個(gè)細(xì)胞生理特性基本一致,對(duì)病毒易感性相等無(wú)個(gè)體差異,準(zhǔn)確性和重復(fù)性好可嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作(4)細(xì)胞培養(yǎng)本身就能顯示病毒的生長(zhǎng)特征應(yīng)用空斑技術(shù)可進(jìn)行病毒的克隆化細(xì)胞的類型根據(jù)細(xì)胞來(lái)源、染色體特征及傳代次數(shù),可分為三種類型:原代細(xì)胞:動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶消化處理,使細(xì)胞分散而得到的細(xì)胞。二倍體細(xì)胞株:將長(zhǎng)成單層的原代細(xì)胞消化分散成單個(gè)細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)傳代,其染色體數(shù)與原代細(xì)胞 一樣,保持其二倍染色體數(shù)目的細(xì)胞,稱為二倍體細(xì)胞。 傳代細(xì)胞系:能在體外持續(xù)增殖傳代的細(xì)胞,大多數(shù)由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而成。5、細(xì)胞培養(yǎng)的方法 靜置培養(yǎng):實(shí)驗(yàn)室常用,細(xì)胞懸液裝瓶,5%C端箱靜置培養(yǎng),細(xì)胞沉降并貼附在玻面上生長(zhǎng)分裂,最后長(zhǎng)成單層。 旋轉(zhuǎn)培養(yǎng):大規(guī)模生產(chǎn)疫苗,細(xì)胞在玻瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)時(shí),玻瓶不斷緩慢旋轉(zhuǎn),細(xì)胞貼附于玻瓶四周,長(zhǎng)成單 層。懸浮培養(yǎng)微載體培養(yǎng)6、細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE):由病毒感染導(dǎo)致的細(xì)胞損傷,在光學(xué)顯微鏡下觀察。 細(xì)胞圓縮,如痘病毒和呼腸孤病毒等;細(xì)胞聚合,如腺病毒; 細(xì)胞融合形成合胞體,如副粘病毒和皰疹病毒;(4)有些病毒能形成包涵體。7、合胞體:病毒感染后導(dǎo)致感染細(xì)胞及相鄰細(xì)胞細(xì)胞膜融合的產(chǎn)物,表現(xiàn)為若干細(xì)胞的相鄰細(xì)胞膜消失,成為多核巨細(xì)胞
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