高一生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)

1、一、顯微鏡的使用 光學(xué)系統(tǒng)：目鏡、物鏡、反光鏡 1.結(jié)構(gòu) 機(jī)械系統(tǒng)：鏡座、鏡柱、鏡臂、載物臺、壓片夾、遮光器、鏡筒、粗（細(xì)）準(zhǔn)焦螺旋。 2.使用方法：先在低倍鏡下尋找視野：取鏡安放對光安放玻片調(diào)焦觀察后用高倍鏡觀察：在低倍鏡下找到目標(biāo) 移動(dòng)裝片，使目標(biāo)位于視野中央 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換 器，使用高倍鏡 調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使物象清晰；調(diào)節(jié)反光鏡、通光孔，使視野變亮。 3.注意事項(xiàng)：換上高倍鏡后只能旋轉(zhuǎn)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，不能轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，否則會壓碎裝片或損壞物鏡。 物鏡越長，放大倍數(shù)越大，距載玻片的距離越近；反之放大倍數(shù)越小，距載玻片距離越遠(yuǎn)。 目鏡越長，放大倍數(shù)越小，反之放大倍數(shù)越大。 放大倍數(shù)是指物像的長度或者

2、寬度。 若視野一半亮一半暗，則可能是反光鏡的角度不對。 若觀察切片標(biāo)本材料一半清晰，一半模糊不清，則可能是切片薄厚不均。2、 染色實(shí)驗(yàn) 、還原糖的檢測和觀察 1.原理：糖類中的還原糖（葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生磚紅色沉淀。 2.材料：蘋果（梨）勻漿、斐林試劑（甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/mol的NaOH溶液，乙液：質(zhì)量濃度 為0.05g/mol的CuSO4溶液） 3.步驟：取樣液2mL于試管中加入剛配的斐林試劑1mL（甲、乙兩液等量混合均勻后再加入）水 浴加熱（50-65）2min左右觀察顏色變化（白色淺藍(lán)色磚紅色） 4.注意事項(xiàng)： 蘋果或梨組織液必須臨時(shí)制備。因?yàn)樘O果多酚氧

3、化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將 產(chǎn)生的顏色掩蓋。 斐林試劑現(xiàn)用現(xiàn)配。 、脂肪的檢測和觀察 1.原理：脂肪可以被蘇丹染成橘黃色（或被蘇丹染成紅色） 2.材料：花生種子勻漿（或切片）、蘇丹（或蘇丹）染液 3.步驟：制作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央 染色：用毛筆蘸取切片放在載玻片上滴蘇丹染液23滴切片上染色3min（蘇丹 染色1min）滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精12滴洗去浮色用吸水紙吸去多余的酒精 制作裝片：滴12滴清水于材料切片上蓋上蓋玻片 鏡檢鑒定：顯微鏡對光低倍鏡觀察高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒 4.注意事項(xiàng)： 干種子要浸泡34小時(shí)，新花生的浸泡時(shí)間可縮短。因?yàn)榻?/p>

4、時(shí)間短，不易切片；浸泡時(shí)間過 長，組織較軟，切片不易成形。切片要盡可能薄些，便于觀察。 染色時(shí)間不宜過長。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時(shí)，酒精是脂溶性溶劑， 可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴（裝片不宜久放）。 滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)生氣泡。 、蛋白質(zhì)的檢測和觀察 1.原理：蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。 2.材料：新鮮的肝臟組織研磨液（豆?jié){）、雙縮脲試劑（A液：質(zhì)量濃度為0.1g/mol的NaOH溶液， B液：質(zhì)量濃度為0.01g/mol的CuSO4溶液) 3.步驟：試管中加樣液2mL加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻觀察

5、顏 色變化(紫色) 4.注意事項(xiàng)：A液和B液也要分開配制，儲存。鑒定時(shí)先加A液后加B液。 用蛋清代替豆?jié){時(shí)，蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠，在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁，與 雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不容易徹底，并且試管也不易洗干凈。 、淀粉的檢測和觀察 1.原理：淀粉遇碘變藍(lán)。 2.材料：馬鈴薯勻漿、碘液。 3.步驟：向試管內(nèi)注入2ml待測組織樣液向試管內(nèi)滴加2滴碘液，觀察顏色變化（藍(lán)色）。 4.注意事項(xiàng)：碘液不能添加的太多，否則會影響反應(yīng)的顏色變化。 、觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布 1.原理：甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì) 胞染色

6、，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。 鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑的跨膜運(yùn)輸；鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質(zhì) 分離，便于DNA與染色劑的結(jié)合 2.材料：人的口腔上皮細(xì)胞、洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞。 3.用具：大小燒杯、溫度計(jì)、滴管、消毒牙簽、載玻片、蓋玻片、鐵架臺、石棉網(wǎng)、火柴、酒精燈、 吸水紙、顯微鏡 4.試劑：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸，吡羅紅甲基綠染色劑（取A液20ml、 B液80ml配成染色劑，使用時(shí)現(xiàn)配。A液：取吡羅紅甲基綠粉1g，加入100ml蒸餾水中溶 解，放入棕色瓶中備用。B液：取乙酸鈉（維持細(xì)胞原有形態(tài)）16.4g，用蒸餾水溶解至1000ml

7、。 取乙酸12ml，用蒸餾水稀釋至1000ml。取稀釋的乙酸鈉溶液30ml和乙酸20ml，加蒸餾水 50ml，配成PH為4.8的溶液）、蒸餾水。 5.步驟： 取口腔上皮細(xì)胞制片： 滴：在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液； 刮：用消毒牙簽在口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下； 涂：將牙簽上的碎屑涂抹在載玻片的生理鹽水中； 烘：將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片在酒精燈的火焰上烘干。 水解： 解：將烘干的載玻片放入裝有30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸的小燒杯中； 保：將小燒杯放入裝有30溫水的大燒杯中保溫5分鐘。 沖洗涂片：用緩緩的蒸餾水沖洗載玻片10秒鐘； 染色： 吸：用吸水紙吸去載玻片上的水分。

8、 染：用2滴吡羅紅甲基綠混合染色劑滴在載玻片上，染色5分鐘； 吸：吸去多余染色劑；蓋上蓋玻片。 觀察 低：在低倍物鏡下，尋找染色均勻，色澤淺的區(qū)域，移至視野中央，將物像調(diào)節(jié)清晰； 高：轉(zhuǎn)到高倍物鏡，調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色情況。 6.注意事項(xiàng)： 取口腔上皮細(xì)胞之前，應(yīng)先漱口，以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì)； 取洋蔥表皮細(xì)胞時(shí)，盡量避免材料上帶有葉肉組織細(xì)胞； 沖洗載玻片時(shí)水的流速要盡量慢，切忌直接用水龍頭沖洗； 用酒精燈烘烤載玻片時(shí)，不要只集中于材料處，而應(yīng)將載玻片在火焰上來回移動(dòng)，使載玻片均 勻受熱，以免破裂； 烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中，最好先自然冷卻1分鐘。

9、 ：用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體 1.原理： 葉肉細(xì)胞中的葉綠體，呈綠色、扁平的橢球形或球形，散布于細(xì)胞質(zhì)中，可以在高倍顯微鏡下觀 察它的形態(tài)。 健那綠染液是將活細(xì)胞中線粒體染色的專一染料可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色。通過染色， 可以在高倍顯微鏡下觀察到處于生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。 2.材料：新鮮的蘚類的葉、人的口腔上皮細(xì)胞。 3.試劑：新配制的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的健那綠染液（將0.5g健那綠溶解于50mL生理鹽水中,加溫 到30-40攝氏度,使其充分溶解） 4.用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、消毒牙簽。 5.步驟： 觀察葉綠體： 制作蘚類葉片臨時(shí)裝片：

10、在潔凈的載玻片中央滴一滴清水。用鑷子取一片蘚類的小葉，或者 取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮，放入水滴中，蓋上蓋玻片 觀察葉綠體：將制作好的葉片臨時(shí)裝片放在低倍鏡下觀察，找到葉片細(xì)胞后，換用高 倍顯微鏡，仔細(xì)觀察葉片細(xì)胞內(nèi)葉綠體的形態(tài)和分布情況. 觀察線粒體： 制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片：在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液。用消毒牙 簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一端，放在染液中 涂抹幾下，蓋上蓋玻片。 觀察線粒體：在高倍鏡下觀察經(jīng)過染色的人的口腔上皮細(xì)胞的臨時(shí)裝片，可以看到藍(lán) 綠色的線粒體，細(xì)胞質(zhì)接近無色。 6.注意事項(xiàng)： 蘚類葉為單層細(xì)胞，不需處理，選取菠菜作材料時(shí)

11、，選取帶少許葉肉細(xì)胞的下表皮， 因?yàn)橄卤砥さ娜~肉細(xì)胞時(shí)海綿組織，細(xì)胞排列疏松，分散易撕取。 觀察線粒體不選取植物細(xì)胞的原因是經(jīng)健那綠染色的線粒體與葉綠體顏色相近，會掩 蓋并影響對線粒體的觀察。 臨時(shí)裝片應(yīng)保持有水狀態(tài)，以免影響細(xì)胞活性。 取口腔上皮細(xì)胞前應(yīng)漱口，防止雜質(zhì)對觀察物像的干擾。 ：觀察根尖分身組織細(xì)胞的有絲分裂 1.原理：高等植物的分生組織有絲分裂較旺盛。 有絲分裂各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體的形態(tài)和行為變化不同，可用高倍顯微鏡根據(jù)各個(gè)時(shí) 期內(nèi)染色體的變化情況，識別該細(xì)胞處于那個(gè)時(shí)期。 細(xì)胞核內(nèi)的染色體易被堿性染料（如龍膽紫）染成深色。 2.材料：洋蔥（可用蔥，蒜代替）、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂

12、固定裝片 3.用具：顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，剪子，鑷子，滴管。 4.試劑：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸，體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精，質(zhì)量濃度為0.01g/ml或0.02g/ml的龍 膽紫溶液（將龍膽紫溶解在質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的醋酸溶液中配制而成）或醋酸洋紅液。 5.步驟： 洋蔥根尖的培養(yǎng)。 裝片的制作：解離漂洗染色制片 解離: 藥液: 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1 : 1混合液)。 時(shí)間: 35min。 目的: 使組織中的細(xì)胞相互分離開來。 漂洗: 用清水漂洗約10min。 目的: 洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色。 染色: 用質(zhì)量濃度為0.01g / mL或0.02g /

13、mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3 5min 目的：龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液能使染色體著色。 制片: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加 一片載玻片. 然后用拇指輕輕地按壓載玻片。 目的: 使細(xì)胞分散開來,有利于觀察。 洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察 先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞：細(xì)胞呈正方形，排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。 換高倍鏡下觀察：分裂中期分裂前、后、末期分裂間期。（注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài) 和分布的特點(diǎn)）。其中，處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。3、 提取和分離實(shí)驗(yàn) ：葉綠素的提取和分離 1.原理：綠葉中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無水乙醇中，所以用無水乙醇提取綠葉中的色素。 綠葉中的色