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文檔簡介
1、獸醫(yī)微生物學(xué)筆記重點(diǎn)串珠反應(yīng):在含青霉素0.5U/ml的培養(yǎng)基中,幼齡炭疽桿菌因細(xì)胞壁的肽聚糖合成受到抑制,形成原生質(zhì)體相互連接成串細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)莢膜(capsule謀些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外包繞一層黏液性物質(zhì),用理化方法去除后并不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)。1 .抗吞噬作用2.抗有害物質(zhì)的損傷作用3.營養(yǎng)物質(zhì)的貯存場所與廢物排出之地S層某些細(xì)菌的一種特殊的表層結(jié)構(gòu),完整包裹菌體,由單一的蛋白質(zhì)亞單位組成,排列規(guī)則,呈晶格樣結(jié)構(gòu)1. 分子篩和離子通道2.屏障作用,保護(hù)細(xì)菌3.黏附宿主細(xì)胞4.重要的表面抗原鞭毛(flagellum)許多細(xì)菌在菌體上附有細(xì)長并呈波狀彎曲的絲狀物,稱為鞭毛,是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官。鞭毛是
2、運(yùn)動(dòng)器官。鞭毛有抗原性。與致病性有關(guān)芽胞(spore)某些細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下,能在菌體內(nèi)部形成一個(gè)圓形或卵圓形小體,是細(xì)菌的休眠形式。芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖能力。產(chǎn)生芽胞的都是革蘭陽性菌。菌毛(filus菌體表面存在著一種比鞭毛更細(xì)、更短而直硬的絲狀物,與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無關(guān)。巴氏桿菌科巴氏桿菌屬(Pasteurella)兩端鈍圓,中央微凸的短桿菌G-菌抵抗力不強(qiáng)多殺性巴氏桿菌(P.muitocida是本屬中最重要的畜禽致病菌,可引起多種動(dòng)物發(fā)生出血性敗血癥或傳染性肺炎,如豬肺疫、禽霍亂、兔巴氏桿菌病等,動(dòng)物患病痊愈后,可獲得較強(qiáng)的免疫力,且對(duì)其他血清型具有交叉保護(hù)力在普通培養(yǎng)基上生長貧瘠,血
3、液或血清培養(yǎng)基中生長良好,不溶血,瑞氏染色或美藍(lán)染色時(shí),可見典型的兩極著色血清型:1.菌體抗原:16個(gè)型,以阿拉伯?dāng)?shù)字表示2.莢膜抗原:多糖成分,有6個(gè)型,微生物學(xué)診斷1.涂片或觸片鏡檢染色(美藍(lán)或瑞氏),兩極著色2.分離培養(yǎng)麥康凱瓊脂不生長,血平板不溶血3.動(dòng)物試驗(yàn)病料懸液或培養(yǎng)物接種小白鼠,引起小白鼠迅速死亡里氏桿菌屬(Riemerella)菌體呈桿狀或橢圓形,多為單個(gè),少數(shù)成雙或短鏈排列??尚纬汕v膜,無芽胞,無鞭毛。g-菌,兩極著色。鴨疫里氏桿菌(R.anatipestifei)是本屬白代表種,是雛鴨傳染性漿膜炎的病原菌。營養(yǎng)要求較高,普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上不生長,在巧克力或胰蛋白月
4、東大豆瓊脂(TSA)平板上,呈圓形、微突起、表面光滑、奶油狀小菌落。生化試驗(yàn)大多陰性,不發(fā)酵葡萄糖和蔗糖,與多殺性巴氏桿菌相區(qū)別。血清型:21個(gè)型致病性:主要感染雛鴨,尤其23周齡者,引起急性或慢性的敗血癥和漿膜炎。診斷:涂片鏡檢(兩極著色)、分離培養(yǎng)(巧克力培養(yǎng)基)、生化試驗(yàn)(不發(fā)酵葡萄糖和蔗糖)放線桿菌屬(Actinobacillus)小球桿菌,具多形性。新鮮病料呈兩極染色,有莢膜和鞭毛,具運(yùn)動(dòng)性。代表種:胸膜肺炎放線桿菌(A.pleuropneumoniae豬傳染性胸膜肺炎的病原菌在普通營養(yǎng)基不長,需添加V因子,常用巧克力培養(yǎng)基培養(yǎng)血清型:本菌分為15個(gè)血清型致病性:豬是本菌高度專一性的
5、宿主,寄生在豬肺壞死灶內(nèi)或扁桃體,較少在鼻腔毒素是本菌最重要的毒力因子,不同血清型的菌株可產(chǎn)生4種細(xì)胞毒素,名為Apx,是一種穿孔毒素嗜血桿菌屬(Haemophilus)多為短桿狀,無鞭毛,無芽胞,新分離的致病菌株有莢膜。g-菌,兩極著色,抵抗力不強(qiáng)嗜血桿菌是一群酶系統(tǒng)不完全的革蘭氏陰性桿菌,生長需要血液中的生長因子,尤其是X因子和V因子。培養(yǎng)特性:初次分離培養(yǎng)時(shí)供給5%10%CO2可促進(jìn)生長,本屬菌生長需供給X因子和V因子(細(xì)菌呼吸過程中起遞氫作用的兩種脫氫輔酶),在巧克力平板上生長較佳。致病性:毒力因子包括莢膜、菌毛和內(nèi)毒素等。與獸醫(yī)有關(guān)的嗜血桿菌有:1副豬嗜血桿菌:可引起豬的心肌炎、腹膜
6、炎、胸膜炎及關(guān)節(jié)炎等,常與豬流感病毒聯(lián)合引起豬流感。2副禽嗜血桿菌:可引起雞傳染性鼻炎,導(dǎo)致產(chǎn)蛋量迅速下降。微生物學(xué)診斷1.顯微鏡檢查:兩極著色2.分離培養(yǎng):血平板(生長不好或不長)巧克力平板(生長良好)3.衛(wèi)星現(xiàn)象:可疑菌落,鮮血平板,再接金葡菌,培養(yǎng),衛(wèi)星現(xiàn)象4.生化試驗(yàn)5.血清學(xué)試驗(yàn)衛(wèi)星現(xiàn)象:愈靠近金黃色葡萄球菌落生長的本屬菌菌落愈大,愈遠(yuǎn)的愈小,甚至不見菌落生長腸桿菌科(Enterobacteriaceae)埃希菌屬(Escherichia)革蘭氏陰性小桿菌,散在或成對(duì),周毛菌,有菌毛。人畜共患病最重要的是大腸埃希菌俗稱大腸桿菌(E.coli)培養(yǎng)特性:1.普通培養(yǎng)基上生長良好,光滑、
7、濕潤、半透明、灰白色菌落;2.麥康凱瓊脂上形成紅色菌落,伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落;3.致病菌株在綿羊血平板上呈0型溶血;4.生化特性:糖發(fā)酵試驗(yàn)(發(fā)酵乳糖)和IMViC(+-)試驗(yàn)。H2S陰性抗原:1,菌體抗原(O抗原):其成分為LPS的多糖側(cè)鏈。173種2,莢膜抗原(K抗原):其成分多數(shù)為多糖80種3,鞭毛抗原(H抗原)血清型(抗原式)表示方法:O:K:H,如:O8:K23(L):H19病原性大腸桿菌分為5類:(1)產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)(2)產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌(SLTEC)(3)腸致病性大腸桿菌(EPEC)(4)尿道致病性大腸桿菌(UPEC)(5)敗血性大腸桿菌(SEP
8、EC)(6)禽致病性大腸桿菌(APEC)(1) 產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)引起人和動(dòng)物腹瀉,主要毒力因子有兩類:1.黏附素(定居因子)2腸毒素:分泌到胞外的一種蛋白質(zhì)性毒素。(1)不耐熱腸毒素(heat-labileenterotoxin,LT)對(duì)熱敏感,可轉(zhuǎn)變成類毒素,具有A和B亞單位。(2)耐熱腸毒素(heat-stableenterotoxin,ST)耐熱,分子量小,無免疫原性。(2) 產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌(SLTEC)引起豬水腫病,有兩類毒力因子:1黏附素F18,有助于細(xì)菌在腸黏膜上皮細(xì)胞定居和繁殖。2類志賀毒素Vero毒素直接導(dǎo)致該病發(fā)生的主要毒力因子。(三)禽致病性大腸桿菌(AP
9、EC)表現(xiàn)為氣囊炎、肺炎、心包炎、肝周炎、腹膜炎、輸卵管炎等,有時(shí)表現(xiàn)為急性敗血癥。檢查方法:(一)分離培養(yǎng):選擇培養(yǎng)基(二)生化試驗(yàn):糖發(fā)酵、IMViC試驗(yàn)、H2S陰性(三糖鐵培養(yǎng)基)(三)血清學(xué)試驗(yàn):玻片凝集試驗(yàn)鑒定血清型沙門氏菌屬(Salmonella)與大腸桿菌相似,除雞白痢和雞傷寒沙門氏菌無鞭毛不運(yùn)動(dòng)外,其余均以周鞭毛運(yùn)動(dòng)。培養(yǎng)及生化特性:在選擇培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖而呈無色菌落。IMViC試驗(yàn):-+-+;多數(shù)菌株H2S陽性。人畜共患病血清型(抗原式)表示方法:O抗原:第1相H抗原:第2相H抗原,如:1,4,5,12:i:1,2;有Vi抗原的,則表示為O抗原:Vi抗原:第1相H抗原:第
10、2相H抗原致病性:1專嗜性:如雞白痢、雞傷寒沙門氏菌2.偏嗜性:如豬霍亂沙門氏菌3.泛嗜性:如腸炎沙門氏菌診斷:(一)分離培養(yǎng):選擇培養(yǎng)基(二)生化試驗(yàn):糖發(fā)酵、IMViC試驗(yàn)、H2S陽性(三糖鐵培養(yǎng)基)。(三)血清學(xué)試驗(yàn):玻片凝集試驗(yàn)鑒定血清型分枝桿菌屬人畜和禽類慢性傳染病牛分枝桿菌(M.bovis)細(xì)長、微彎的桿菌,無莢膜、芽孢和鞭毛革蘭氏陽性菌,抗酸染色為紅色專性需氧菌,對(duì)營養(yǎng)要求嚴(yán)格,在添加特殊營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基(羅杰二氏培養(yǎng)基)上才能生長,但生長緩慢,對(duì)外界環(huán)境的抵抗力很強(qiáng),耐酸耐堿致病性主要引起牛結(jié)核病。細(xì)胞內(nèi)寄生??ń槊纾˙CG)即將牛分枝桿菌在含甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中經(jīng)13
11、年230代傳代而獲得的減毒活疫苗株,現(xiàn)廣泛用于預(yù)防接種。微生物學(xué)診斷1.涂片鏡檢:抗酸染色紅色2.分離培養(yǎng):強(qiáng)酸或強(qiáng)堿處理后接種羅杰二氏培養(yǎng)基3.細(xì)菌鑒定:培養(yǎng)特性、生化特性4.動(dòng)物接種:兔有致病性5.變態(tài)反應(yīng):PPD皮內(nèi)注射法4mm以上為陽性;2-4mm為可疑;2mm以下為陰性。6.血清學(xué)檢查:ELISA檢測特異性抗體革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌芽胞桿菌屬(Bacillus)需氧炭疽芽胞桿菌(B.anthracis)俗稱炭疽桿菌,是引起人類、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽(Anthrax)的病原毒力主要與莢膜和毒素有關(guān)革蘭氏陽性大桿菌在組織中或含血液的培養(yǎng)基可形成莢膜。芽孢在有氧條件下形成,位于菌體中央,無
12、鞭毛培養(yǎng)特性1.需氧菌或兼性厭氧,最適生長溫度30-37,營養(yǎng)要求不高,普通培養(yǎng)基中即能生長良好。2.血瓊脂上一般不溶血,但個(gè)別菌株也可輕微溶血。3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長4.明膠穿刺培養(yǎng),呈倒松樹狀,表面液化呈漏斗狀5.在含青霉素的培養(yǎng)基中,可形成串珠反應(yīng),與其它需氧芽孢桿菌區(qū)別??乖Y(jié)構(gòu)(一)結(jié)構(gòu)抗原1.莢膜抗原:多肽,僅見于有毒菌株,與毒力和抗吞噬有關(guān)2.菌體抗原:多糖,與細(xì)菌毒力無關(guān)3.芽胞抗原:是芽胞的外膜和皮質(zhì)組成,具有免疫原性微生物學(xué)診斷1.細(xì)菌學(xué)檢查(1)鏡檢:大桿菌,兩端平截,竹節(jié)狀(2)分離培養(yǎng):用普通瓊脂或血瓊脂(3)純培養(yǎng):鏡檢、串珠試驗(yàn)、生化試驗(yàn)(4)動(dòng)物試驗(yàn):將
13、檢驗(yàn)材料制成懸液或純培養(yǎng)物給小鼠注射,24-36h,小鼠死于敗血癥梭菌屬(Clostridium)多數(shù)嚴(yán)格厭氧并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭狀,如破傷風(fēng)梭菌,芽孢位于菌體頂端,菌體呈鼓槌狀,產(chǎn)生多種外毒素和侵襲性酶,致病性強(qiáng)產(chǎn)氣莢膜梭菌(Cl.perfringens)可引起多種嚴(yán)重疾患,局部組織出現(xiàn)壞死、水腫、產(chǎn)氣。菌體直桿狀無糖培養(yǎng)基上可形成芽胞,多數(shù)菌株可形成莢膜,無鞭毛普通培養(yǎng)基上可生長,菌落多為圓形、光滑、隆起、灰白色的圓屋頂樣血平板上,多數(shù)菌株有雙層溶血環(huán),內(nèi)環(huán)完全溶血,外環(huán)不完全溶血。生化特性,是對(duì)牛乳培養(yǎng)基的“暴烈發(fā)酵”。微生物學(xué)診斷1.直接涂片鏡檢:G+大桿菌,并有莢膜2.分離培養(yǎng):接
14、種血平板,有雙層溶血環(huán)3.純培養(yǎng):引起牛奶暴烈發(fā)酵4.動(dòng)物試驗(yàn):小鼠、家兔或鴿5.腸毒素檢查:取回腸內(nèi)容物加適量滅菌生理鹽水稀釋,經(jīng)離心沉淀后取上清液分成兩份,一份不加熱,一份加熱,分別靜脈注射家兔或小鼠。如有毒素存在,不加熱組動(dòng)物常于數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡,而加熱組動(dòng)物不死亡。破傷風(fēng)梭菌(Cl.tetani)引起人畜破傷風(fēng)的病原,本病以骨骼肌發(fā)生強(qiáng)直性痙攣的癥狀為特征嚴(yán)格厭氧菌致病性此菌產(chǎn)生兩種毒素:1.破傷風(fēng)痙攣毒素2.破傷風(fēng)溶血素革蘭氏陽性球菌球菌陽性:葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌陰性:淋球菌、腦膜炎球菌葡萄球菌屬Staphylococcus起化膿性炎癥、敗血癥,食物中毒、毒性休克綜合征等疾
15、病。金黃色葡萄球菌S.aureus無芽胞和鞭毛,個(gè)別形成莢膜培養(yǎng)及生化特性1.普通培養(yǎng)基上生長良好2.血平板上生長更佳,致病菌株溶血3.產(chǎn)生金黃色色素4.高度耐鹽5.分解葡、乳、麥、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,致病菌株能分解甘露醇。致病性和毒力因子毒力因子主要包括酶和毒素1.a毒素(Alphatoxin)a溶血素(a-haemolysirt2.腸毒素(enterotoxin)可引起急性胃腸炎即嘔吐為主要癥狀的食物中毒。3.凝固酶(coagulase)能使含有抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝集的酶類物質(zhì)。4.耐熱核酸酶(thermonuclease)、纖維蛋白溶酶fibrinolysin)、透明質(zhì)酸酶(hyalu
16、ronidase)等利于細(xì)菌擴(kuò)散。5.毒素休克綜合癥毒素1(toxicshocksyndrometoxin1,tsst-1)鑒定:純培養(yǎng)物1致病性葡萄球菌的鑒定:(1)產(chǎn)生凝固酶和耐熱核酸酶(2)產(chǎn)生金黃色色素,有溶血性;(3)發(fā)酵甘露醇鏈球菌屬Streptococcus可引起多種動(dòng)物發(fā)病,如牛羊乳房炎,豬的敗血癥等。蘭氏(Lancefield)用溫?zé)岬南←}酸浸出C抗原,與特異性血清作沉淀反應(yīng),將鏈球菌分為20個(gè)血清群(A-V,缺I和J)鏈球菌間,因表面蛋白質(zhì)抗原不同,又分不同型。根據(jù)溶血現(xiàn)象分類a型溶血性鏈球菌菌落周圍有1-2mm寬的草綠色溶血環(huán)。多為條件性致病菌。0型溶血性鏈球菌菌落周圍形
17、成一個(gè)2-4mm寬、界限分明、完全透明的無色的溶血環(huán)。致病力強(qiáng)。丫型鏈球菌不產(chǎn)生溶血素,菌落周圍無溶血環(huán),也稱為不溶血性鏈球菌。無致病性培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求復(fù)雜,需補(bǔ)充血液、血清、葡萄糖等。在血液瓊脂平板上形成灰白色、表面光滑、邊緣整齊、直徑0.5-0.75mm的細(xì)小菌落。致病性胞壁脂磷壁酸(LTA)M蛋白一旦病菌大量繁殖則產(chǎn)生鏈球菌溶血素、致熱外毒素等毒性物質(zhì),透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、DNA酶等侵襲性物質(zhì)。革蘭氏陽性無芽孢桿菌李氏桿菌屬(Listeria)有7個(gè)種,代表種是產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌(L.monocytogenes引致人和動(dòng)物的李氏桿菌病。短桿狀,革蘭氏染色陽性。不形成莢膜、無芽胞,有鞭毛胞
18、內(nèi)寄生菌培養(yǎng)特性普通瓊脂平板上可生長,光滑型、藍(lán)綠色光澤菌落;血清瓊脂培養(yǎng)基上可見其周圍狹窄的0溶血環(huán);半固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng),沿穿刺線呈云霧狀生長。致病性不被宿主細(xì)胞吞噬而不被破壞。產(chǎn)生的李氏桿菌溶血素O(listeriolysinO,LLO),與其能在巨噬細(xì)胞內(nèi)生長有關(guān)。可使牛、綿羊、山羊、禽等動(dòng)物發(fā)病,成年牛、羊往往表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀的轉(zhuǎn)圈病5%10%的人是無癥狀健康帶菌者,孕婦感染本菌出現(xiàn)類似流感癥狀,并致胎兒流產(chǎn)。微生物學(xué)診斷鏡檢:G+小桿菌分離培養(yǎng):藍(lán)綠光澤的菌落,0溶血純培養(yǎng):溶血檢查、運(yùn)動(dòng)性檢查、生化特性鑒定動(dòng)物試驗(yàn):小鼠腹腔注射,剖檢肝臟壞死,分離細(xì)菌血清學(xué)檢查:凝集反應(yīng)丹毒絲菌
19、屬(Erysipelothrix)只有1種,即豬丹毒絲菌(E.rhuriopathiae),是豬丹毒病的病原體,通稱豬丹毒桿菌。無鞭毛、無莢膜、不產(chǎn)生芽胞培養(yǎng)與生化特性微需氧菌,普通瓊脂上生長不良,血平板上生長茂盛,灰白色露滴狀小菌落,并形成a溶血環(huán),微生物學(xué)診斷涂片鏡檢:G+纖細(xì)的小桿菌分離培養(yǎng):血平板細(xì)菌鑒定:培養(yǎng)特性和生化特性血清學(xué)診斷:凝集試驗(yàn)革蘭氏陰性需氧桿菌布氏桿菌屬(Brucella)布氏桿菌又名布魯菌主要寄居于肝、脾和淋巴組織內(nèi)的單核細(xì)胞中,是胞內(nèi)寄生菌。多單在,不形成芽胞和莢膜,無鞭毛。革蘭氏染色陰性,但著色不佳??缕澚_夫染色法染成紅色,其他菌呈綠色。在培養(yǎng)基中加入少量血液、
20、血清或肝浸液,可促進(jìn)生長,不溶血致病性主要致病物質(zhì)有內(nèi)毒素、莢膜和透明質(zhì)酸酶病畜主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺炎、子宮炎等。孕期動(dòng)物對(duì)布氏桿菌最敏感,感染后常引起流產(chǎn)血清學(xué)檢查:用已知的布氏桿菌檢查動(dòng)物的血清抗體凝集試驗(yàn)(虎紅平板凝集試驗(yàn))。大動(dòng)物血清凝集價(jià)達(dá)1:100時(shí)陽性,1:25可疑;小動(dòng)物1:50為陽性,1:25可疑補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)慢性布氏桿菌病診斷。規(guī)定1:10被檢血清阻止溶血在50%以上即陽性螺旋體(Spirochaeta)二分裂繁殖主要生物學(xué)特性1.形態(tài):螺旋狀,有些可通過細(xì)菌濾器或?yàn)V膜。2.結(jié)構(gòu):原生質(zhì)柱、軸鞭毛、外鞘。3.運(yùn)動(dòng)性:運(yùn)動(dòng)活躍4.繁殖方式:以二分裂法繁殖。5.核酸:核
21、酸兼有RNA和DNA。6.染色:革蘭氏陰性,但大多數(shù)不易著色。7.培養(yǎng)特性:多數(shù)需厭氧培養(yǎng),營養(yǎng)要求較高,有些不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng)。豬痢疾短螺旋體(B.hyodysenteriae)伯氏疏螺旋體(B.burgdorferi)引起萊姆病(Lymedisease的病原體,此病由硬蟬(Ixodes)為傳播媒介,感染人和犬、牛、馬等動(dòng)物,可致關(guān)節(jié)炎等多種疾病。病人出現(xiàn)的第一個(gè)病癥是被蜱叮咬的部位呈圓環(huán)狀疹塊。支原體(Mycoplasma)支原體又譯作霉形體,是一類無細(xì)胞壁的細(xì)菌,是目前已知能在無生命的培養(yǎng)基中繁殖的最小微生物具有多形性、可塑性和濾過性。無鞭毛,革蘭氏染色呈陰性,著色不良,姬姆薩或瑞氏染
22、色良好,呈淡紫色。霉形體的細(xì)胞膜具有三層結(jié)構(gòu),內(nèi)、外層主要是蛋白質(zhì),中間層主要是脂質(zhì)(固醇含量高)。培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高,需牛心浸液,酵母膏,輔酶I、氨基酸等。生長緩慢,菌落呈“荷包蛋狀”(豬肺炎霉形體除外)引起牛傳染性胸膜肺炎、豬喘氣病、禽敗血霉形體感染等,傳播途徑主要是呼吸道。與細(xì)菌 L 型的區(qū)別支原體?遺傳上與細(xì)菌無關(guān)?細(xì)胞膜含高濃度固醇?在一般培養(yǎng)基中穩(wěn)定?生長慢,菌落小0.1-0.3mm?菌落中心深埋于培養(yǎng)基中不易刮除?液體培養(yǎng)混濁度低立克次體(Rickettsia) 介于病毒與細(xì)菌之間L型與原菌有關(guān),??梢曰貜?fù)細(xì)胞膜不含固醇大多需要高滲培養(yǎng)菌落稍大0.5-1.0mm菌落生長于基質(zhì)表
23、面,易于刮除有一定混濁度引起人和動(dòng)物立克次體病(如Q熱、斑疹傷寒、恙蟲病等)生物學(xué)特性1.多形性,主要是球桿狀2.大小介于細(xì)菌和病毒之間,多數(shù)不能通過細(xì)菌濾器。3.革蘭氏陰性,有細(xì)胞壁4.專性細(xì)胞內(nèi)寄生5.以二分裂方式繁殖6.對(duì)理化因素抵抗力不強(qiáng),尤對(duì)熱敏感7.主要寄生于節(jié)肢動(dòng)物中,通過叮咬感染人和動(dòng)物衣原體(Chlamydia)細(xì)胞內(nèi)寄生引起人和家畜的衣原體病。生物學(xué)特點(diǎn)1.革蘭氏陰性,圓形或橢圓形2.含DNA和RNA兩種核酸3.有由粘肽組成的細(xì)胞壁4.細(xì)胞內(nèi)寄生(雞胚或細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物接種)5.獨(dú)特的發(fā)育周期,并以二分裂方式繁殖6.對(duì)某些抗生素敏感包涵體(inclusion):是衣原體在細(xì)胞
24、空泡內(nèi)繁殖過程中所形成的集團(tuán)形態(tài),內(nèi)含無數(shù)子代元體和正在分裂的網(wǎng)狀體。沙眼衣原體:人的沙眼肺炎親衣原體:人的急性呼吸道疾病鸚鵡熱親衣原體:畜禽肺炎、關(guān)節(jié)炎、流產(chǎn),也可引起人的肺炎牛羊親衣原體:牛羊關(guān)節(jié)炎、腦脊髓炎、腹瀉真菌(fungus)分為酵母菌霉菌擔(dān)子菌酵母菌(yeasts)單細(xì)胞真核微生物分無性繁殖和有性繁殖兩類,主要是無性繁殖。無性繁殖:包括芽殖、裂殖等,以芽殖為主。有性繁殖:主要是產(chǎn)生子囊胞子霉菌(molds)絲狀真菌的統(tǒng)稱形態(tài)與結(jié)構(gòu)絲狀菌能長出菌絲(hypha),有的菌絲上長出抱子,各絲狀菌長出的菌絲與胞子形態(tài)不同是鑒別霉菌的重要標(biāo)志。依功能分:營養(yǎng)菌絲氣生菌絲按分化程度分:無隔菌
25、絲有隔菌絲抱子(spore)真菌的繁殖結(jié)構(gòu)一條菌絲上可長多個(gè)抱子。在環(huán)境條件適宜時(shí),抱子可發(fā)育成菌絲體。真菌抱子與細(xì)菌芽胞不同。病毒形體微小,結(jié)構(gòu)簡單,僅含有1種核酸DNA或RNA,復(fù)制為其繁殖方式,嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生,非細(xì)胞形態(tài)微生物病毒的特點(diǎn)L形體微小,缺乏細(xì)胞結(jié)構(gòu);2.只含有一種核酸,DNA或RNA;3.以自身的核酸為模板進(jìn)行復(fù)制;4.缺乏完整的酶和能量系統(tǒng);5.嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生(利用宿主細(xì)胞的核糖體和轉(zhuǎn)移RNA合成病毒的蛋白質(zhì));6.對(duì)干擾素敏感,而抗菌藥物不敏感。病毒與其它微生物的區(qū)別人工培養(yǎng)基上上的生長二等分裂DNA和RNA核糖體對(duì)抗生素苗敏感性對(duì)干擾素的敏感性田菌卜+卜+一支原體卜+
26、卜+一k克次體一+卜+一武原體一+卜+十青毒-含1種一十病毒子(virion):一個(gè)形態(tài)和結(jié)構(gòu)上完整的病毒顆粒測量病毒的單位為納米(nanometer,nm),痘病毒最大,約300nm;圓環(huán)病毒最小,約17nm病毒的結(jié)構(gòu)(見課件)脂溶劑可去除囊膜,使病毒喪失活性。對(duì)稱型螺旋狀對(duì)稱20面體對(duì)稱鄰體復(fù)合對(duì)稱型有些病毒去除囊膜和衣殼,裸露的DNA或RNA也能感染細(xì)胞,這樣的核酸稱為傳染性核酸DNA病毒多數(shù)為雙股、線狀;RNA病毒多數(shù)為單股線狀,不分節(jié)段正股(positivesense以mRNA的堿基序列作為標(biāo)準(zhǔn),凡與此相同的核酸負(fù)股(negativesense與其互補(bǔ)的核酸動(dòng)物病毒中螺旋對(duì)稱的病毒均
27、屬有囊膜的單股RNA病毒,除痘病毒外,所有脊椎動(dòng)物DNA病毒均為20面體。復(fù)合對(duì)稱的病毒有噬菌體,痘病毒。科(family)和屬(genus是病毒分類系統(tǒng)的最主要單位三大類病毒:DNA病毒類、DNA反轉(zhuǎn)錄與RNA反轉(zhuǎn)錄病毒類、RNA病毒類。第7次分類報(bào)告在部分科之上建立了3個(gè)目:尾病毒目(Caudovirales涉及噬菌體,單負(fù)股病毒目Mononegaviraleg以及套式病毒目Nidovirirales”涉及動(dòng)物亞病毒(subvirus):1.類病毒(viroid):由環(huán)狀RNA分子組成,不含蛋白衣殼。在植物中發(fā)現(xiàn)。2元病毒(prion):只含傳染性蛋白病毒的復(fù)制主要包括吸附和穿入、脫殼、生
28、物合成、組裝和釋放四個(gè)連續(xù)步驟感染比(multiplicityofinfection,MOI)是指在一個(gè)系統(tǒng)中感染病毒的細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞總數(shù)之比血凝作用(HA)其本質(zhì)是病毒與細(xì)胞受體的結(jié)合血凝抑制作用(HI)病毒的特異抗體可抑制其血凝作用血吸附(haemadsorption)是一種特殊形式的血凝作用,是將紅細(xì)胞吸附于病毒感染的宿主細(xì)胞表面無囊膜的病毒一般經(jīng)過細(xì)胞膜吞入,稱為病毒胞飲,如腺病毒、小RNA病毒等有囊膜的病毒囊膜與宿主細(xì)胞膜融合,病毒的核衣殼直接進(jìn)入細(xì)胞漿內(nèi)絕大多數(shù)DNA病毒均在細(xì)胞核內(nèi)組裝,RNA病毒和痘病毒在細(xì)胞漿內(nèi)組裝。雙股DNA病毒的增殖周期(筆記)缺損型干擾(defective
29、interfering,DI)突變株(DI顆粒)自身不能復(fù)制,只有在親本野生株作為輔助病毒存在時(shí)才能復(fù)制,但又干擾親本病毒的復(fù)制,導(dǎo)致后者數(shù)量減少。是一種缺失突變的產(chǎn)物。DI突變株特點(diǎn)1.含正常的衣殼蛋白質(zhì)2.只含有正?;蚪M的一部分3.只能在正常同源病毒同時(shí)存在時(shí)才能繁殖,這時(shí)同源病毒成為輔助病毒(helpervirus)4.特異性地干擾同源病毒的繁殖,經(jīng)連續(xù)傳代后,DI顆粒增多重組(recombination)將兩個(gè)有親緣關(guān)系但生物學(xué)性狀不同的毒株感染同一個(gè)宿主細(xì)胞,從而可發(fā)生核酸水平上的互換,產(chǎn)生兼有兩親本特性的子代,稱為重組。重配(reassortment)對(duì)于分節(jié)段的RNA病毒,通過
30、交換RNA節(jié)段而進(jìn)行的重組稱為重配。病毒的培養(yǎng)動(dòng)物接種、雞胚接種,細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn):1.每個(gè)細(xì)胞生理特性基本一致,對(duì)病毒易感性相等2.無個(gè)體差異,準(zhǔn)確性和重復(fù)性好3.可嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.細(xì)胞培養(yǎng)本身就能顯示病毒的生長特征5.應(yīng)用空斑技術(shù)可進(jìn)行病毒的克隆化原代細(xì)胞(primarycell)動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶消化處理,使細(xì)胞分散而得到的細(xì)胞。二倍體細(xì)胞株(diploidcellstrain)將長成單層的原代細(xì)胞消化分散成單個(gè)細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)傳代,其染色體數(shù)與原代細(xì)胞一樣,保持其二倍染色體數(shù)目的細(xì)胞,稱為二倍體細(xì)胞。傳代細(xì)胞系(establishedcellline)能在體外持續(xù)增殖傳代的細(xì)胞,
31、大多數(shù)由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而成。細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)由病毒感染導(dǎo)致的細(xì)胞損傷。CPE能在光學(xué)顯微鏡下觀察。常見的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化為細(xì)胞變圓、壞死、溶解、脫落或形成合胞體。有些病毒能形成包涵體。病毒感染抗體依賴的增強(qiáng)作用(ADE)在病毒感染過程中,宿主產(chǎn)生的抗體與病毒結(jié)合,非但未能阻斷病毒吸附宿主細(xì)胞,反而增強(qiáng)了病毒對(duì)細(xì)胞的感染,提高了病毒的滴度。將適當(dāng)濃度的病毒懸液加入單層細(xì)胞培養(yǎng)中,當(dāng)病毒吸附細(xì)胞后,再覆蓋一層融化的瓊脂。病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制后產(chǎn)生局限性病灶,病灶逐漸擴(kuò)大,肉眼也能看見,此即空斑(plaque)??瞻呤怯梢粋€(gè)感染性病毒粒子復(fù)制形成的,類似于細(xì)
32、菌的菌落,稱為空斑形成單位(PFU)。包涵體(inclusionbody)是某些病毒感染細(xì)胞產(chǎn)生的特征性的形態(tài)變化,在普通光學(xué)顯微鏡下可見胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)的呈嗜酸性或嗜堿性染色、大小數(shù)量不等的圓形或不規(guī)則形的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu),稱為包涵體。干擾素(IFN)由病毒或誘生劑刺激機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生的具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用的糖蛋白抗病毒作用:干擾素不直接作用于病毒,而是作用于鄰近的細(xì)胞,使其產(chǎn)生抗病毒蛋白,這些抗病毒蛋白降解病毒mRNA、抑制蛋白合成。干擾素作用具有宿主特異性,而無病毒特異性。RNA干擾(,RNAi)指細(xì)胞利用內(nèi)源或外源的小分子雙股RNA片段,特異性地降解同源基因的mRNA,從而導(dǎo)致靶基因
33、轉(zhuǎn)錄后的基因沉默(posttranslationalgenesilence,PTGS的現(xiàn)象。具有反轉(zhuǎn)錄過程的病毒反轉(zhuǎn)錄病毒科(Retroviridae):RNA病毒嗜肝病毒科(Hepadnaviridae):DNA病毒,感染人。反錄病毒科的特點(diǎn)1.有囊膜,直徑80-100nm2.三層結(jié)構(gòu):基因組-核蛋白復(fù)合體螺旋對(duì)稱,衣殼20面體對(duì)稱,囊膜表面有糖蛋白突起(纖突)3.基因組為二倍體2條單股正鏈RNA組成的二聚體,4.病毒具有反轉(zhuǎn)錄酶反錄病毒科代表病毒禽白血病/肉瘤病毒(Avianleucosis/sarcomaviruses)馬傳染性貧血病毒(EIAV)朊病毒(Prion)可以導(dǎo)致人類和家畜患
34、中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性病變朊病毒是機(jī)體正常的PrPc變構(gòu)形成牛海綿狀腦病(BSE)俗稱瘋牛病工表現(xiàn)突然發(fā)作、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、性情暴躁癢病(Scrapie)雙股RNA病毒分節(jié)呼腸孤病毒科(Reoviridae)雙RNA病毒科(Birnaviridae)呼腸孤病毒科病毒顆粒近似球形,無囊膜,有內(nèi)、外雙層衣殼,20面體對(duì)稱,基因組為線狀雙股RNA,有10-12個(gè)節(jié)段,病毒在胞漿內(nèi)復(fù)制,某些種具有血凝性。雙RNA病毒科傳染性法氏囊病病毒(IBDV)傳染性胰壞死病毒(Infectiouspancreaticnecrosisvirus,IPNV)核衣殼20面體對(duì)稱,無囊膜,單層衣殼,基因組為雙股雙節(jié)段RNA,病毒在
35、胞漿內(nèi)復(fù)制。雙股DNA病毒痘病毒科非洲豬瘟病毒科虹彩病毒科皰疹病毒科腺病毒科多瘤病毒科乳頭瘤病毒科痘病毒科Poxviridae胞漿內(nèi)復(fù)制,出芽方式釋放代表性病毒:1.痘苗病毒(Vacciniavirus)2.綿羊痘病毒(Sheeppoxvirus)3雞痘病毒(Fowlpoxvirus)4.口瘡病毒(Ofvirus)非洲豬瘟病毒科Asfarviridae僅有一個(gè)病毒,即非洲豬瘟病毒(ASFV)。病毒特征:二十面體對(duì)稱,雙股DNA,有囊膜。有血吸附但無血凝作用。致病性:是唯一已知核酸為DNA的蟲媒病毒,由軟蜱傳遞,自然條件下僅家豬易感皰疹病毒科核衣殼20面體對(duì)稱.有囊膜,囊膜表面有纖突.基因組為dsDNA,病毒感染細(xì)胞內(nèi)可形成特征性嗜酸性核內(nèi)包涵體代表病毒偽狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus)馬立克氏病毒(Mareksdiseasevirus)禽傳染性喉氣管炎病毒(Avianinfectiouslaryngotracheitisvirus鴨瘟病毒(Duckplaguevirus)偽狂犬病病毒豬作為本病毒的原始宿主和儲(chǔ)存宿主馬立克
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