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1、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)緒論1 微生物:存在于自然界的一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不見,必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍。甚至數(shù)萬(wàn)倍才能觀察到的微小生物。2 微生物的分類: 種類細(xì)胞結(jié)構(gòu)核酸特點(diǎn)代表非細(xì)胞型微物無(wú)典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)構(gòu)或,兩者不同時(shí)存在無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng),只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)增值病毒原核細(xì)胞型微生物無(wú)核膜、核仁,僅有核糖體和古生菌、細(xì)菌(細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌)真核細(xì)胞型微生物細(xì)胞核分化程度很高,有核膜核仁,細(xì)胞器完整和真菌3、病原微生物:少數(shù)具有致病性,能引起人類、植物病害的微生物。 機(jī)會(huì)致病性微生物:在正常情況下不致病,只有在特定情況下導(dǎo)致疾病的微
2、生物。4,郭霍法則:特殊的病原菌應(yīng)在同一種疾病中查見,在健康人中不存在;該特殊病原菌能被分離培養(yǎng)得純種;該純培養(yǎng)物接種至易感動(dòng)物,能產(chǎn)生同樣病癥;自人工感染的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)能重新分離得到該病原菌純培養(yǎng)。5、湯飛凡6.諾貝爾獎(jiǎng)第一篇 細(xì)菌學(xué)第一章 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)第一節(jié) 細(xì)菌的大小與形態(tài)1、觀察細(xì)菌常采用光學(xué)顯微鏡,一般以微米為單位。2、按細(xì)菌外形可分為:球菌(雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌) 桿菌(鏈桿菌、棒狀桿菌、球桿菌、分枝桿菌、雙歧桿菌)螺形菌(弧菌、螺菌、螺桿菌)第二節(jié) 細(xì)菌的結(jié)構(gòu)1、基本結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì) 特殊結(jié)構(gòu):莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞2、 革蘭染色法將
3、細(xì)菌分為:革蘭陽(yáng)性菌():顯紫色;革蘭陰性菌():顯紅色。兩類細(xì)菌細(xì)胞壁共有組分為肽聚糖,為原核生物所特有。聚糖骨架由乙酰葡糖胺和乙酰胞壁酸交替排列,經(jīng)-1,4糖苷鍵聯(lián)結(jié)而成。3、 革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁特有組分為磷壁酸(膜磷壁酸和壁磷壁酸) 磷壁酸的功能:維持菌體內(nèi)離子平衡,穩(wěn)定細(xì)胞壁 抗原性強(qiáng),是陽(yáng)性菌表面特有抗原 與細(xì)菌的粘附作用有關(guān)4、菌特有組分外膜 脂蛋白、脂多糖()【脂質(zhì)A,核心多糖,特異多糖】、脂質(zhì)雙層、脂多糖():即菌的內(nèi)毒素。脂質(zhì)A:內(nèi)毒素的毒性和生物學(xué)活性的主要成分,無(wú)種屬特異性,不同細(xì)菌的脂質(zhì)A骨架基本一致,故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。核心多糖:有屬特異性,位于脂質(zhì)
4、A的外層。特意多糖:即菌的菌體抗原(O抗原),是脂多糖的最外層。 在菌的細(xì)胞膜與外膜的脂質(zhì)雙層之間有一空隙稱為周漿間隙5.細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)革蘭陽(yáng)性菌 革蘭陰性菌 肽聚糖組成由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋構(gòu)成堅(jiān)韌三維立體結(jié)構(gòu)由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈構(gòu)成疏松二維平面網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)肽聚糖厚度20801015肽聚糖層數(shù)可達(dá)50層僅12層肽聚糖含量占胞壁干重5080%僅占胞壁干重520%磷壁酸有無(wú)外膜無(wú)有6、細(xì)胞壁的功能:維持菌體固有的形態(tài) 保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境 參與菌體內(nèi)外的物質(zhì)交換 有多種抗原決定簇,決定了菌體的抗原性7、細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型(細(xì)菌L型):細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素的直接破壞或合成被抑制
5、,這種細(xì)菌壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。 原生質(zhì)體:菌細(xì)胞壁缺失后,原生質(zhì)層僅被一層細(xì)胞膜包住。不易成為細(xì)菌L型 原生質(zhì)球:菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù)。易成為細(xì)菌L型 細(xì)菌L型的形態(tài):高度多樣性,大小不一,有球形、桿狀和絲狀等 無(wú)論其為G菌或G菌,形成細(xì)菌L型大多染成革蘭陰性 具有可濾過(guò)性,能通過(guò)濾菌器 培養(yǎng)特性:營(yíng)養(yǎng)要求基本與原菌相似,但需在高滲低瓊脂含血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng) 生長(zhǎng)繁殖較原菌緩慢,一般培養(yǎng)27天形成荷包蛋樣細(xì)小菌落誘發(fā):細(xì)菌L型在體內(nèi)或體外、人工誘導(dǎo)或自然因素下均可形成(溶霉菌能裂解-1,4糖苷鍵,青霉素抑制四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋聯(lián)結(jié)),去除誘發(fā)因素后,
6、有些L型可恢復(fù)為原菌臨床特征:某些L型仍有一定的致病力,通常引起慢性感染,對(duì)細(xì)胞壁的抗生素有抵抗力8、細(xì)胞質(zhì):核糖體:沉降系數(shù)為70S,由50S和30S兩個(gè)亞基組成。鏈霉素(與細(xì)菌核糖體的30S亞基結(jié)合)和紅霉素(與細(xì)菌核糖體的50S亞基結(jié)合)均能干擾其蛋白質(zhì)合成,從而殺死細(xì)菌,但對(duì)人體核糖體無(wú)害。質(zhì)粒:染色體外的遺傳物質(zhì),為閉合環(huán)狀的雙鏈,帶有遺傳信息,控制細(xì)菌某些特定的遺傳性狀 特點(diǎn):能獨(dú)立自行復(fù)制,隨細(xì)菌分裂轉(zhuǎn)移到子代細(xì)胞中質(zhì)粒不是細(xì)菌生長(zhǎng)所必不可少的,失去質(zhì)粒的細(xì)菌仍能正常存活可從一個(gè)細(xì)菌轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)菌胞質(zhì)顆粒:貯藏有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。異染顆粒(主要成分為和多偏磷酸鹽,嗜堿性強(qiáng),用甲基藍(lán)染色
7、時(shí)著色較深呈紫色)常見于白喉棒狀桿菌。9、核質(zhì):或擬核,是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。無(wú)核膜,單一密閉環(huán)狀,不形成核小體10、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)莢膜:包繞在細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì),為多糖或蛋白質(zhì)的多聚體,用理化方法去除后并不影響菌細(xì)胞的生命活動(dòng)。 厚度0.2微米邊界明顯的稱為莢膜或大莢膜;厚度0、2微米的為微莢膜。 莢膜對(duì)一般堿性染料親和力低,不易著色。用負(fù)染法染色觀察莢膜的功能:抗吞噬作用;粘附作用;抗有害物質(zhì)的損傷作用抗原特異性高:莢膜腫脹試驗(yàn)。鞭毛:包括:?jiǎn)蚊?、雙毛菌、叢毛菌、周毛菌 鞭毛的功能:細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官,細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)有化學(xué)趨向性,常向營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)處前進(jìn),而逃離有害物質(zhì);與致病性有關(guān);有很強(qiáng)的抗原性
8、(H抗原)。菌毛:必須用電子顯微鏡觀察普通菌毛:數(shù)量多,每菌可達(dá)數(shù)百根,與細(xì)菌粘附有關(guān),與細(xì)菌的致病性密切相關(guān)。性菌毛:僅見于少數(shù)菌。數(shù)量少,每菌只有14根,中空呈管狀。性菌毛由一種稱致育因子(F)的質(zhì)粒編碼,又稱F菌毛。帶有性菌毛的細(xì)菌為F菌(雄),無(wú)性菌毛者稱為F菌(雌)。芽胞:細(xì)菌的休眠形式。產(chǎn)生芽胞的細(xì)菌都是菌。芽胞的形成與發(fā)芽:芽胞具有完整的核質(zhì)、酶系統(tǒng)和合成菌體組分的結(jié)構(gòu),能保存細(xì)菌的全部生命必須物質(zhì),芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖能力。細(xì)菌的芽胞并不直接引起疾病,僅當(dāng)發(fā)芽成為繁殖體后,才能迅速大量繁殖而致病。芽胞的功能:細(xì)菌的芽胞含水量少,芽胞具有多層致密的厚膜,對(duì)熱力、干燥、輻射、化
9、學(xué)消毒劑等理化因素均有強(qiáng)大的抵抗力;一個(gè)細(xì)菌只形成一個(gè)芽胞,一個(gè)芽胞也只能生成一個(gè)菌體,細(xì)菌數(shù)量未增加,因而芽胞不是細(xì)菌的繁殖方式。與芽胞相比,未形成芽胞而具有繁殖能力的菌體稱為繁殖體;芽胞的大小、形狀、位置等隨菌種而異,有重要的鑒別價(jià)值11、革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟,具體操作方法是:標(biāo)本固定后,先用堿性染料結(jié)晶紫染初染,再加碘液媒染,此時(shí)不同細(xì)菌均被染成深紫色。然后再用乙醇(95%)脫色,有些細(xì)菌能脫色,有些不能。最后用稀釋復(fù)紅或者沙黃復(fù)染。革蘭氏陽(yáng)性菌仍呈紫色,革蘭氏陰性菌則呈現(xiàn)紅色。 意義:將細(xì)菌分為和兩大類,在鑒別細(xì)菌、選擇抗菌藥物、研究細(xì)菌致病性等方面都有
10、重要意義。第二章 細(xì)菌的生理第一節(jié) 細(xì)菌的理化性質(zhì)1、細(xì)菌的化學(xué)組成:水、無(wú)機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、核酸。水占總重量的75902、細(xì)菌的物理性狀:光學(xué)性質(zhì),半透明,懸液呈混濁狀態(tài),使用比濁法或分光光度計(jì)可粗略估計(jì)細(xì)菌數(shù)量;表面積;細(xì)菌的相對(duì)表面積大,有利于同外界進(jìn)行物質(zhì)交換;帶電現(xiàn)象;半透性滲透壓第二節(jié) 細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)繁殖一、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類型1、自養(yǎng)菌:以簡(jiǎn)單無(wú)機(jī)物為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2、異養(yǎng)菌:以有機(jī)化合物為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),分為腐生菌、寄生菌所有的病原菌都是異養(yǎng)菌,大部分屬寄生菌。二、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)1、水2、碳源3、氮源:4、無(wú)機(jī)鹽5、生長(zhǎng)因子:生長(zhǎng)因子是指,某些細(xì)菌細(xì)菌生長(zhǎng)所必須的但自身又不能合成,必須
11、由外界供給的物質(zhì)。四、影響細(xì)菌生長(zhǎng)的環(huán)境因素(簡(jiǎn)答)1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子為細(xì)菌的代謝及生長(zhǎng)繁殖提供必需的原料和充足的能量2、酸堿度():多數(shù)病原菌最適為7.27.63、溫度:嗜冷菌生長(zhǎng)范圍-530,最適生長(zhǎng)1020;嗜熱菌生長(zhǎng)范圍2595,最適生長(zhǎng)5060;嗜溫菌生長(zhǎng)范圍1045,最適2040, 病原菌均為嗜溫菌,最適溫度為37。4、氣體:O2:根據(jù)細(xì)菌代謝時(shí)對(duì)氧氣的需要與否分四類:專性需氧菌:具有完善的呼吸酶系統(tǒng),僅能在有氧環(huán)境下生長(zhǎng)。微需氧菌:在低氧壓(56%)生長(zhǎng)最好,無(wú)氧和高氧壓時(shí)生長(zhǎng)不良。兼性厭氧菌:在有氧、無(wú)氧環(huán)境中均能生長(zhǎng),但以有氧時(shí) 生長(zhǎng)較好。大多數(shù)病
12、原菌屬于此。專性厭氧菌:缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng),必須在無(wú)氧環(huán)境中生長(zhǎng)。有氧存在時(shí)受到毒害2:對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)也很重要5、滲透壓:一般培養(yǎng)基的低鹽濃度和低滲透壓對(duì)大多數(shù)細(xì)菌安全。嗜鹽菌在高濃度的環(huán)境中才能生長(zhǎng)良好五、細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖1、細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖:繁殖方式細(xì)菌以簡(jiǎn)單的二分裂方式進(jìn)行無(wú)性繁殖。繁殖速度細(xì)菌分裂數(shù)量倍增所需要的時(shí)間稱為代時(shí),多數(shù)細(xì)菌約20-30。但少數(shù)細(xì)菌代時(shí)較長(zhǎng),如結(jié)核分枝桿菌代時(shí)為18小時(shí)。2、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖: 繁殖規(guī)律生長(zhǎng)曲線 :培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo),培養(yǎng)物中活細(xì)菌的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo) 遲緩期:體積增大,代謝活躍,但不分裂,菌數(shù)不增加。主要是適應(yīng)新環(huán)境,同時(shí)為分裂繁殖作物質(zhì)準(zhǔn)備,含有豐
13、富的酶和中間代謝產(chǎn)物。一般為14小時(shí)。對(duì)數(shù)期:細(xì)菌分裂繁殖最快的時(shí)期,菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)。此期細(xì)菌的形態(tài)、大小、染色性、生理活性等都是典型。研究細(xì)菌的生物學(xué)活性(形態(tài)染色、生化反應(yīng)、藥物敏感試驗(yàn)等)的最佳時(shí)期。818小時(shí)穩(wěn)定期:由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗,有害代謝產(chǎn)物的堆積,繁殖數(shù)與死亡數(shù)幾乎相等?;罹鷶?shù)保持穩(wěn)定。一些細(xì)菌的芽胞、外毒素和 抗生素等代謝產(chǎn)物大多在穩(wěn)定期產(chǎn)生。衰退期:死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)。第三節(jié) 細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換一、細(xì)菌的新陳代謝是指菌細(xì)胞內(nèi)分解代謝與合成代謝的總和,其顯著特點(diǎn)是代謝旺盛和代謝類型的多樣化。二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物分解代謝產(chǎn)物和細(xì)菌的生化反應(yīng)各種細(xì)菌所具有的酶不完全相同,對(duì)
14、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分解能力亦不一致,因而其代謝產(chǎn)物有別。根據(jù)此特點(diǎn),利用生物化學(xué)方法來(lái)鑒別不同細(xì)菌稱為細(xì)菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)。合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學(xué)上的意義1、熱原質(zhì)(致熱源):是細(xì)菌代謝過(guò)程中合成的一種物質(zhì),用極微量注入人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。產(chǎn)生熱致源的細(xì)菌大都為革蘭陰性菌,熱致源即其細(xì)胞壁的脂多糖。 2、毒素及侵襲性酶:外毒素:多數(shù)菌和少數(shù)菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中釋放菌體外的蛋白質(zhì); 內(nèi)毒素:菌細(xì)胞壁的脂多糖;外毒素毒性強(qiáng)于內(nèi)毒素。 侵襲性酶:某些細(xì)菌產(chǎn)生的,能損傷機(jī)體組織,促使菌體的侵襲和擴(kuò)散,是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。3、色素:水溶性,能彌散到培養(yǎng)基或周圍組織;脂溶性,不溶于水,只存在于菌體,使
15、菌落顯色而營(yíng)養(yǎng)基顏色不變。4、抗生素:某些微生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)??股卮蠖嘤煞啪€菌和真菌產(chǎn)生。5、細(xì)菌素:某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。細(xì)菌素作用范圍窄,僅對(duì)與產(chǎn)生菌有親緣關(guān)系的細(xì)菌有殺傷作用。6、維生素:細(xì)菌能合成某些維生素除供自身需要外,還能分泌至周圍環(huán)境中。第四節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng)一、培養(yǎng)基1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有多種細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分。2、增菌培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入某種營(yíng)養(yǎng)成分。3、選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),使之抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng),而有利于另一些細(xì)菌生長(zhǎng),從而將后者從混亂的標(biāo)本中分離出來(lái)。4、鑒別培養(yǎng)基
16、:用于培養(yǎng)和區(qū)分不同細(xì)菌種類的培養(yǎng)基。5、厭氧培養(yǎng)基二、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況 液體培養(yǎng)基:均勻混濁狀態(tài);生成沉淀;形成菌膜。純種細(xì)菌的增值或生化反應(yīng)。 固體培養(yǎng)基:用于細(xì)菌的分離和純化菌落:將細(xì)菌劃線接種在固體平板培養(yǎng)基表面,經(jīng)培養(yǎng)后單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成肉眼可見的細(xì)菌基團(tuán)。1、光滑型(S型)菌落2、粗糙型(R型)菌落3、粘液型(M型)菌落 半固體培養(yǎng)基:觀察細(xì)菌動(dòng)力和菌種短期保存。3、 培養(yǎng)方法:普通培養(yǎng)法;2培養(yǎng)法;厭氧培養(yǎng)法4、 細(xì)菌的分類:界、門、綱、目、科、屬、種種是細(xì)菌分類的基本單位。同一菌種的各個(gè)細(xì)菌差異大的叫亞種,差異小的叫型。對(duì)來(lái)源不同的同一菌種的細(xì)菌稱為該菌的不同菌株。五、
17、細(xì)菌的命名法:雙名法:前一字為屬名,用名詞,大寫;后一字為種名,用形容詞,人名或地名均小寫。中文譯名則種名在前,屬名在后,如 ,大腸埃希菌;屬名亦可不將全文寫出,只用第一個(gè)字母表示,如S. ;有時(shí)泛指某一屬細(xì)菌,不特指其中某個(gè)菌種,則在屬名后加.(單數(shù))或.(復(fù)數(shù));有些常見菌有習(xí)慣通用的俗名,如 ,結(jié)核桿菌。第三章 消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全第一節(jié) 消毒滅菌的常用術(shù)語(yǔ)1、滅菌:殺滅生物體上所有微生物的方法,包括殺死細(xì)菌芽胞、病毒和霉菌在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。2、消毒:殺死物體上或環(huán)境中的病原 微生物,并不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。消毒劑3、防腐:防止或抑制皮
18、膚表面細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。防腐劑4、清潔:指除去塵埃和一切污穢來(lái)減少微生物數(shù)量的過(guò)程。5、無(wú)菌:無(wú)菌即不存在活菌,多是滅菌的結(jié)果。無(wú)菌操作:防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。第二節(jié) 消毒滅菌的方法一、物理消毒滅菌法:熱力、輻射、濾過(guò)、干燥和低溫等。熱力滅菌法:繁殖體經(jīng)5560作用3060分鐘死亡,100立即死亡;芽胞煮沸35小時(shí)死亡。分為干熱滅菌和濕熱滅菌1、干熱滅菌法:一般細(xì)菌繁殖體在干燥狀態(tài)下,80-100經(jīng)1小時(shí)可被殺死,芽胞則需要更高溫度才能被殺死。 焚燒:焚燒爐內(nèi)焚燒或直接點(diǎn)燃,用于廢棄物、尸體灼燒:用火苗滅菌,用于接種環(huán)、試管口干烤:150180加熱24h滅菌,適用于耐高溫物品
19、紅外線:110m波長(zhǎng)的電磁波,用于醫(yī)療器械滅菌2、濕熱滅菌法:最常用,在相同溫度下濕熱滅菌法比干熱滅菌法效果更好,因?yàn)椋簼駸嶂屑?xì)菌菌體蛋白較易凝固變性;濕熱的穿透力比干熱大;濕熱的蒸汽有潛熱效應(yīng)存在。巴氏消毒法:用較低的溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物,以保持物品中所需的不耐熱成分不被破壞的消毒方法(61.1-62.8 30 或71.715-30s,主要用于牛乳消毒和酒類)。煮沸消毒法:100 ,一般細(xì)菌繁殖體5能被殺死。食具、注射器等消毒流動(dòng)蒸汽消毒法:100 細(xì)菌繁殖體1530分鐘可被殺滅,不能消滅全部細(xì)菌芽胞間歇蒸汽滅菌法:100 5-30,殺死其中繁殖體,取出放進(jìn)37 孵箱過(guò)夜,芽胞
20、發(fā)育成繁殖體,次日再蒸一次,重復(fù)3次。高壓蒸汽滅菌法:*密閉耐高壓蒸鍋中,壓力103.4,溫度121.3 ,時(shí)間15-20,殺滅包括芽孢在內(nèi)所有微生物。是一種滅菌效果最好的方法,適用于所有耐高溫、高壓、耐濕的物品。輻射殺菌法:紫外線:波長(zhǎng)240300的紫外線具有殺菌作用,機(jī)理是干擾細(xì)菌合成。手術(shù)室空氣消毒或用于耐熱物品表面消毒。 特點(diǎn):空氣穿透能力強(qiáng);固體穿透能力弱;對(duì)機(jī)體組織有損傷。電離輻射:高速電子、X射線、射線微波:可穿透玻璃、陶瓷、薄膜等,不能穿透金屬表面。濾過(guò)殺菌法:用物理阻留的方法除去微生物以達(dá)到無(wú)菌目的。 液體除菌用濾菌器,用于不耐高溫的血清、毒素、抗生素的除菌。 空氣除菌用空氣
21、過(guò)濾器二、化學(xué)消毒滅菌法原理(填空):破壞菌體蛋白;干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝;改變細(xì)胞膜的通透性?;瘜W(xué)消毒劑分為高效、中效、低效消毒劑3種。第四節(jié) 影響消毒滅菌效果的因素微生物對(duì)消毒滅菌的敏感性高低排序大致如下:真菌、細(xì)菌繁殖體、有包膜病毒、無(wú)包膜病毒、分枝桿菌、細(xì)菌芽胞。D值指在一定條件下滅活90最初的微生物群體所需的時(shí)間。第五節(jié) 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全一、病原微生物的分類第一類:能夠引起人類或動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類:能夠引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或間接在人與人、動(dòng)物與動(dòng)物、動(dòng)物與人間傳播的微生物。第三類:能夠引起人類或動(dòng)物疾病,但
22、一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險(xiǎn)有限,實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類:通常情況下不會(huì)引起人類或動(dòng)物疾病的微生物。第一、二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí):根據(jù)生物安全防護(hù)水平()及實(shí)驗(yàn)室生物安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)一級(jí):二級(jí):三級(jí):對(duì)人體、植物、動(dòng)物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性,主要通過(guò)氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病,或?qū)?dòng)物植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級(jí):對(duì)人體、植物、動(dòng)物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性,主要通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因子。沒(méi)有預(yù)防治療措施。第四章 噬菌體
23、噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒;具有病毒的基本特性:個(gè)體微小,可以通過(guò)細(xì)菌濾器;無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),主要由衣殼(蛋白質(zhì))和核酸組成;只能在活的微生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,是一種專性胞內(nèi)寄生的微生物。噬菌體分布極廣。第一節(jié) 噬菌體的生物學(xué)性狀1、形態(tài)與結(jié)構(gòu):噬菌體很小,在光鏡下看不見,需用電鏡觀察。不同的噬菌體在電鏡下有三種形態(tài):蝌蚪形、微球形和絲形。大多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形,由頭部和尾部?jī)刹糠纸M成。2、結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成:噬菌體頭部尾部:蛋白質(zhì) 與細(xì)菌(受體)接觸的部位核心:核酸(或),多位線狀雙鏈蛋白衣殼:蛋白質(zhì)呈20面體3、抗原性:噬菌體具有抗原性,能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。4、抵抗力:噬
24、菌體對(duì)理化因素及多數(shù)化學(xué)消毒劑的抵抗力比一般細(xì)菌的繁殖體強(qiáng),75 30滅活。噬菌體能耐受低溫和冰凍,但對(duì)紫外線和X射線敏感。第二節(jié) 毒性噬菌體1、噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果:毒性噬菌體( ):能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,產(chǎn)生許多子代噬菌體,并最終裂解細(xì)菌,建立溶菌周期。溫和噬菌體( ):噬菌體基因與宿主染色體整合,成為前噬菌體,細(xì)菌變成溶原性菌,不產(chǎn)生子代噬菌體,但噬菌體能隨細(xì)菌復(fù)制,并隨細(xì)菌的分裂而傳代,建立溶原狀態(tài)。 2、毒性噬菌體毒性噬菌體在宿主菌內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖,增殖過(guò)程包括:吸附、穿入、生物合成、成熟和釋放。液體培養(yǎng)基噬菌現(xiàn)象可使渾濁菌液變得澄清。固體培養(yǎng)基若用適量的噬菌體和宿主菌液混
25、合后接種培養(yǎng),培養(yǎng)基表面可有透亮的溶菌空斑出現(xiàn)。一個(gè)空斑系由一個(gè)噬菌體復(fù)制增殖并裂解細(xì)菌后形成,稱為噬斑(),不同噬菌體噬斑的形態(tài)與大小不盡相同。若將噬菌體按一定倍數(shù)稀釋,通過(guò)噬斑計(jì)數(shù),可測(cè)定一定體積內(nèi)的噬斑形成單位( ,)數(shù)目,即噬菌體的數(shù)目。第三節(jié) 溫和噬菌體前噬菌體()溫和噬菌體的基因組能與宿主菌基因組整合,并隨細(xì)菌分裂傳至子代細(xì)菌的基因組中,不引起細(xì)菌裂解。整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組稱為前噬菌體()。帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。溶原性轉(zhuǎn)換( ):某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變。例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理 。第五章 細(xì)菌的遺傳與變異遺傳():使微生物
26、的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定,子代與親代生物學(xué)的性狀基本相同,且代代相傳。變異():在一定條件下,子代與親代之間以及子代與子代之間的生物學(xué)性狀出現(xiàn)的差異,有利于物種的進(jìn)化?;蛐停ǎ杭?xì)菌的遺傳物質(zhì)。表型():基因表現(xiàn)出的各種性狀。遺傳性變異:是細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變,故又稱基因型變異。常發(fā)生于個(gè)別的細(xì)菌,不受環(huán)境因素的影響,變異發(fā)生后是不可逆的,產(chǎn)生的新性狀可穩(wěn)定地遺傳給后代。非遺傳性變異:細(xì)菌在一定的環(huán)境條件影響下產(chǎn)生的變異,其基因結(jié)構(gòu)未改變,稱為表型變異。易受到環(huán)境因素的影響,凡在此環(huán)境因素作用下的所有細(xì)菌都出現(xiàn)變異,而且當(dāng)環(huán)境中的影響因素去除后,變異的性狀又可復(fù)原,表型變異不能遺傳。第一節(jié) 細(xì)
27、菌的遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能:結(jié)構(gòu)兩條互相平行而方向相反的多核苷酸鏈功能儲(chǔ)存、復(fù)制和傳遞遺傳信息復(fù)制半保留復(fù)制特點(diǎn)復(fù)制中易發(fā)生錯(cuò)誤基因突變蛋白合成分子生物學(xué)中心法則(蛋白質(zhì))基因與基因的轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)基因編碼結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)基因結(jié)構(gòu)非結(jié)構(gòu)基因編碼功能蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)錄遺傳信息的翻譯第二節(jié) 細(xì)菌的遺傳與變異一 、染色體()一條環(huán)狀雙螺旋長(zhǎng)鏈,按一定構(gòu)型反復(fù)回旋形成松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);缺乏組蛋白,無(wú)核膜包裹;約含有5000個(gè)基因;二、質(zhì)粒是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì),是閉合環(huán)狀的雙鏈。1、質(zhì)粒的特征:質(zhì)粒具有自我復(fù)制的能力。質(zhì)粒所編碼的基因產(chǎn)物賦予細(xì)菌某些性狀特征。質(zhì)??勺孕衼G失與消除。質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性。質(zhì)粒可分為相容性與不相
28、容性兩種。2、質(zhì)粒的分類(1)根據(jù)質(zhì)粒能否通過(guò)細(xì)菌的接合作用進(jìn)行傳遞接合性質(zhì)粒非接合性質(zhì)粒(2)根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)拷貝數(shù)多少嚴(yán)緊型質(zhì)粒松弛型質(zhì)粒(3)根據(jù)相容性相容性幾種質(zhì)粒同時(shí)共存于同一菌體內(nèi)不相容性不能同時(shí)共存*可借此對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行分組、分群。(4)根據(jù)所編碼的生物學(xué)性狀質(zhì)?;蚩删幋a多種重要的生物學(xué)性狀:致育質(zhì)粒( 、F質(zhì)粒)編碼性菌毛,介導(dǎo)細(xì)菌之間的接合傳遞;耐藥性質(zhì)粒( 、R質(zhì)粒)編碼細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類的耐藥性。分兩類,一是接合性耐藥質(zhì)粒(R質(zhì)粒),另一是非接合耐藥性質(zhì)粒(r質(zhì)粒);毒力質(zhì)粒(質(zhì)粒) 編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子;細(xì)菌素質(zhì)粒:編碼細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)菌素;代謝質(zhì)粒:編碼產(chǎn)生
29、相關(guān)的代謝酶。 三、轉(zhuǎn)位因子轉(zhuǎn)位因子( ):是一類在細(xì)菌染色體、質(zhì)?;蚴删w之間可自行移動(dòng)的一段特異的具有轉(zhuǎn)位特性的核苷酸序列片段,又稱移動(dòng)基因。轉(zhuǎn)座子有二類:插入序列( ,):最小,不超過(guò)2,只攜帶與轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基因。轉(zhuǎn)座子(,):長(zhǎng)度一般超過(guò)2,除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外還攜帶其他基因(如耐藥性、毒素基因等)。四、整合子定位:細(xì)菌染色體、質(zhì)?;蜣D(zhuǎn)座子上?;窘Y(jié)構(gòu):兩端為保守末端(,59),中間為可變區(qū)( 1),含一個(gè)或多個(gè)基因盒。功能元件:重組位點(diǎn)(,59);整合酶基因();啟動(dòng)子()。功能:通過(guò)轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒,使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播。第三節(jié) 基因的轉(zhuǎn)移與重組基因轉(zhuǎn)移( )
30、:外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程?;蛑亟M():轉(zhuǎn)移的基因與受體菌整合在一起,使受體菌獲得供體菌某些特性。細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組方式:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合。1、轉(zhuǎn)化():受體菌直接攝取供體菌游離的片段獲得新的遺傳性狀的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化。2、接合():是細(xì)菌通過(guò)性菌毛相互連接溝通,將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌。能通過(guò)結(jié)合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒稱為接合性質(zhì)粒,不能通過(guò)性菌毛在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒為非接合性質(zhì)粒。F質(zhì)粒的接合 即F質(zhì)粒,編碼性菌毛,稱雄性菌F質(zhì)粒整合到細(xì)菌染色體上,使細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上的基因,故稱高頻重組菌F菌中的F質(zhì)粒可從染色體上脫離下來(lái)
31、,并帶染色體上幾個(gè)鄰近的基因,故稱F三者均有性菌毛,均可發(fā)生接合R質(zhì)粒的接合細(xì)菌的耐藥性與耐藥性的基因突變及R質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移等有關(guān)。R質(zhì)粒有耐藥傳遞因子和耐藥決定因子兩部分組成。耐藥傳遞因子的功能與F質(zhì)粒相似,可編碼性菌毛的產(chǎn)生和通過(guò)接合轉(zhuǎn)移;R決定子能編碼對(duì)抗菌藥物的耐藥性。3、轉(zhuǎn)導(dǎo)():是以溫和噬菌體為載體,將供體菌的一段轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi),使受體菌獲得新的性狀。根據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因片段的范圍,可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為兩類:普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的可是供菌染色體上的任何部分)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的只限供菌染色體上的特定基因)。4、溶原性轉(zhuǎn)換( ):溶原性細(xì)菌因染色體上整合有前噬菌體而獲得新的遺傳性狀稱為溶原性轉(zhuǎn)換。5、原
32、生質(zhì)體融合( ):G +菌形成原生質(zhì)體后,在聚乙二醇()作用下,可使兩種不同的細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生融合的過(guò)程。融合后形成雙倍體細(xì)胞,可短期生存,染色體重組,獲得多種不同表型的重組融合體。人為實(shí)驗(yàn)基因轉(zhuǎn)移與重組。第四節(jié) 基因突變一、基因突變規(guī)律:1、自發(fā)突變與誘發(fā)突變突變可以自然發(fā)生為:自發(fā)突變,具自發(fā)性,隨機(jī)性。彷徨試驗(yàn)( ,波動(dòng)試驗(yàn)):隨機(jī)的、非定向的突變是在接觸噬菌體之前就已發(fā)生,噬菌體對(duì)突變僅起篩選而不是誘導(dǎo)作用。人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的突變?yōu)檎T發(fā)突變,可提高突變率。2、突變率:是指細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)發(fā)生突變的頻率。3、突變與選擇影印試驗(yàn)( ):耐藥突變株在接觸藥物之前出現(xiàn),藥物的作用是選擇耐藥株,淘汰敏感株。4
33、、回復(fù)突變與抑制突變野生型( ):未發(fā)生突變的菌株。突變型( ):相對(duì)于野生型,某一性狀發(fā)生改變的菌株?;貜?fù)突變( ):有時(shí)突變株經(jīng)過(guò)又一次突變可恢復(fù)為野生型的性狀。第五節(jié) 細(xì)菌遺傳變異在醫(yī)學(xué)上的實(shí)際意義1、 影響細(xì)菌學(xué)診斷2、 預(yù)防耐藥菌株的擴(kuò)散3、 制備疫苗4、 檢測(cè)致癌物5、 基因工程方面的應(yīng)用第七章 細(xì)菌的感染與免疫第一節(jié) 正常菌落與機(jī)會(huì)致病菌1、正常菌群:當(dāng)人體免疫功能正常時(shí),對(duì)宿主無(wú)害的,某些還對(duì)人有利,是為正常微生物群。正常菌群對(duì)宿主的生理學(xué)作用:(問(wèn)答)生物拮抗,其作用機(jī)制為:受體競(jìng)爭(zhēng);產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物;營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng);合成細(xì)菌素。營(yíng)養(yǎng)作用:參與宿主的物質(zhì)代謝、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化和合成。免
34、疫作用抗衰老作用抗腫瘤作用:降解致癌物質(zhì);激活巨噬細(xì)胞抑制腫瘤細(xì)胞。2、機(jī)會(huì)致病菌(致病條件)填空正常菌群的寄生部位改變宿主免疫功能低下菌群失調(diào):在應(yīng)用抗生素治療感染性疾病的過(guò)程中,宿主某部位正常菌群中各菌種間的比例發(fā)生較大幅度的變化而產(chǎn)生的疾病。??梢鸲馗腥净蛑丿B感染,即在抗菌藥物治療感染性疾病的過(guò)程中,發(fā)生了另一種新致病菌引起的感染。第二節(jié) 細(xì)菌的致病作用(問(wèn)答)1、毒力:表示細(xì)菌致病性的強(qiáng)弱。半數(shù)致死量:在一定條件下能引起50%的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡的細(xì)菌數(shù)量或毒素劑量。半數(shù)感染量:在一定條件下能引起50%的組織培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)菌數(shù)量或毒素劑量。2、細(xì)菌的致病作用取決于:細(xì)菌的毒力、細(xì)菌侵入的數(shù)
35、量、細(xì)菌侵入的途徑一、細(xì)菌的毒力侵襲力:致病菌能突破宿主皮膚、粘膜生理屏障,進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定植、繁殖擴(kuò)散的能力。1、黏附素2、莢膜3、侵襲性物質(zhì):侵襲素、侵襲性酶4、細(xì)菌生物被膜毒素外毒素和內(nèi)毒素的主要區(qū)別(簡(jiǎn)述)外毒素內(nèi)毒素來(lái)源菌和部分菌菌存在部分從活菌分泌出,少數(shù)菌崩解后釋出細(xì)胞壁組分,菌裂解后釋出化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖穩(wěn)定性6080,30分鐘160,24小時(shí)毒性作用強(qiáng),對(duì)組織器官有選擇性毒害效應(yīng),引起特殊臨床表現(xiàn)較弱,各菌的毒性作用大致相同,引起發(fā)熱、白細(xì)胞增多、微循環(huán)障礙、休克、等全身反應(yīng)抗原性強(qiáng),刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素;甲醛液處理脫毒形成類毒素弱,刺激機(jī)體產(chǎn)生的中和抗體作用弱;甲醛液處理
36、不產(chǎn)生類毒素特點(diǎn)1、大多數(shù)的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)2、毒性作用強(qiáng),對(duì)組織器官有高度選擇性3、絕大多數(shù)不耐熱4、抗原性強(qiáng)5、可用人工化學(xué)方法脫去毒性(A亞基活性),保留其抗原性(B亞基結(jié)構(gòu))1、產(chǎn)生于菌細(xì)胞壁2、化學(xué)性質(zhì)是3、對(duì)理化因素穩(wěn)定4、毒素作用相對(duì)較弱5、不能用甲醛液脫毒而成為類毒素分類1、神經(jīng)毒素:破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌2、細(xì)胞毒素:能直接損失宿主細(xì)胞(成孔毒素、磷脂酶類)3、腸毒素:霍亂弧菌主要生物學(xué)作用1、 發(fā)熱反應(yīng)2、 白細(xì)胞反應(yīng)3、 內(nèi)毒素血癥和內(nèi)毒素休克第三節(jié) 宿主的免疫防御機(jī)制非特異性免疫(天然免疫)屏障結(jié)構(gòu)吞噬細(xì)胞體液因素皮膚與粘膜血腦屏障胎盤屏障補(bǔ)體溶菌酶防御素 特異性免疫(獲
37、得性免疫)體液免疫細(xì)胞免疫一、非特異性免疫機(jī)制(一)屏障結(jié)構(gòu)*皮膚與黏膜屏障 :機(jī)械阻擋、纖毛運(yùn)動(dòng);分泌殺菌物質(zhì);菌群拮抗作用*血腦屏障:軟腦膜+脈絡(luò)膜+腦毛細(xì)血管+星狀膠質(zhì)細(xì)胞*胎盤屏障:母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜+胎兒絨毛膜(二)吞噬作用吞噬細(xì)胞分為:大吞噬細(xì)胞:血液中單核細(xì)胞和組織中巨噬細(xì)胞小吞噬細(xì)胞:血液中中性粒細(xì)胞1、吞噬殺傷過(guò)程:趨化接觸吞入殺滅與消化殘?jiān)懦?、殺傷機(jī)制:依氧殺菌機(jī)制呼吸爆發(fā)(需分子氧參加)分子氧被還原為多種活性氧中介物():H2O2、O2-、O2等活性氮中介物():、2-、3-等 對(duì)細(xì)菌均有直接毒性作用(破壞細(xì)菌的、蛋白質(zhì)和膜脂類)髓過(guò)氧化物酶():存在于溶酶體中,與
38、H2O2及氯化物的共同參與,對(duì)細(xì)菌、真菌等具有強(qiáng)大殺傷活性。非依氧殺菌機(jī)制酸性作用:糖分解產(chǎn)酸而導(dǎo)致下降,抑制細(xì)菌生長(zhǎng)而殺菌。溶酶體酶及殺菌蛋白:溶酶體、乳鐵蛋白、蛋白水解酶、核酸酶、酯酶等,對(duì)細(xì)菌有殺傷、消化、分解作用。3、吞噬作用的后果完全吞噬:病原體在吞噬溶酶體內(nèi)被殺滅、消化、排除殘?jiān)倪^(guò)程。(5-10分鐘死亡,30-60分鐘破壞)不完全吞噬:只被吞噬,卻不被殺死。組織損傷:吞噬過(guò)程中,溶酶體酶(水解酶)也能破壞鄰近的正常組織,造成組織損傷和炎癥反應(yīng)。(三)體液因素 補(bǔ)體:調(diào)理,溶菌。溶菌酶:存在于血清,唾液,淚液,乳汁,主要作用于菌。防御素:多肽,破壞胞外菌細(xì)胞膜。二、特異性免疫(一)
39、體液免疫抗體的作用1、抑制病原體黏附2、調(diào)理吞噬作用3、中和細(xì)菌外毒素4、溶菌作用5、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用()(二)細(xì)胞免疫細(xì)胞毒T細(xì)胞()直接殺傷靶細(xì)胞效應(yīng)T細(xì)胞(1)產(chǎn)生細(xì)胞因子發(fā)揮作用(三)黏膜免疫( ,)三、抗細(xì)菌感染免疫的特點(diǎn)(一)抗胞外菌感染的免疫胞外菌:指寄生在宿主細(xì)胞外的組織間隙和血液、淋巴液和組織液中的細(xì)胞。如葡萄球菌??糠翘禺惷庖?;但主要是體液免疫發(fā)揮作用吞噬作用(非特異)抗體和補(bǔ)體的作用:阻止細(xì)菌定植(黏附);調(diào)理吞噬;激活補(bǔ)體溶菌;中和細(xì)菌外毒素。細(xì)胞免疫(2):輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體;產(chǎn)生細(xì)胞因子,促進(jìn)吞噬。(二)抗胞內(nèi)菌感染的免疫胞內(nèi)菌:寄生在細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌,分
40、專性胞內(nèi)菌(立克次體,衣原體)、兼性胞內(nèi)菌(結(jié)核分枝桿菌,麻風(fēng)分枝桿菌,傷寒沙門菌,布氏桿菌,肺炎軍團(tuán)菌,李斯特菌)。特點(diǎn):胞內(nèi)寄生、毒性低、呈慢性感染、免疫病理?yè)p傷,主要靠細(xì)胞免疫功能。吞噬作用:起一定作用細(xì)胞免疫():主要作用局部黏膜免疫:細(xì)菌未進(jìn)細(xì)胞前由阻止其黏附,使其不能侵入細(xì)胞內(nèi)。第四節(jié) 感染的發(fā)生與發(fā)展一感染的來(lái)源與傳播內(nèi)源性感染:來(lái)自宿主自身的細(xì)菌感染,主要指曾經(jīng)感染過(guò)而潛伏下來(lái)的微生物重新感染。比如結(jié)核分支桿菌。也常見于機(jī)體免疫力下降時(shí)。外源性感染:引起感染的細(xì)菌來(lái)源于宿主體外,主要有病人及帶菌者、患病及帶菌動(dòng)外源性感染內(nèi)源性感染傳染源病人、帶菌者、病畜及帶菌動(dòng)物致病菌主要來(lái)自
41、體內(nèi)正常菌群,少數(shù)是以潛伏狀態(tài)存在于體內(nèi)的致病菌傳播途徑呼吸道、消化道、皮膚創(chuàng)傷、經(jīng)節(jié)肢動(dòng)物媒介、性傳播二感染的類型(一)隱性感染:當(dāng)機(jī)體抗感染免疫力較強(qiáng)或入侵的細(xì)菌數(shù)量不多、毒力較弱,感染后損害較輕,使機(jī)體不出現(xiàn)或出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀者。一般在一次傳染病流行中,大多數(shù)人為隱性感染,如結(jié)核。(二)顯性感染:當(dāng)病原菌毒力強(qiáng),數(shù)量多且宿主機(jī)體抗感染免疫力相對(duì)較弱,機(jī)體受到嚴(yán)重?fù)p害,出現(xiàn)明顯臨床癥狀者。按病情緩急不同分:1、急性感染:發(fā)作突然,病情突然,一般為數(shù)日至數(shù)周。病愈后,致病菌消失。2、慢性感染:病程緩慢,一般為數(shù)月至數(shù)年。胞內(nèi)菌往往引起慢性感染。按感染部位不同分:1、局部感染2、全身感染:
42、毒血癥:致病菌侵入體內(nèi)后,只在機(jī)體局部生長(zhǎng)繁殖,病菌不進(jìn)入血循環(huán),但其產(chǎn)生的外毒素入血。(白喉)內(nèi)毒素血癥:菌侵入血液,并在其中大量繁殖、崩解后釋放大量?jī)?nèi)毒素;也可由病灶內(nèi)菌死亡釋放內(nèi)毒素入血。菌血癥:致病菌由局部侵入血流,但未在血流中生長(zhǎng)繁殖,只是短暫的一過(guò)性通過(guò)血循環(huán)到達(dá)體內(nèi)適宜部位后再進(jìn)行繁殖而致病。(傷寒早期)敗血癥:致病菌侵入血后在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性物質(zhì),引起全身性中毒癥狀。(高熱、皮膚和粘膜瘀斑、肝脾腫大)膿毒血癥:化膿性菌侵入血后在其中大量繁殖,并通過(guò)血流擴(kuò)散至宿主體內(nèi)的其他組織或器官,產(chǎn)生新的化膿性病灶。(三)帶菌狀態(tài):致病菌在顯性或隱性感染后并未消失,在體內(nèi)繼續(xù)留存一段時(shí)
43、間,與機(jī)體免疫力處于相對(duì)平衡狀態(tài)。第五節(jié) 醫(yī)院感染一、醫(yī)院感染( ):患者在住院期間發(fā)生的感染或醫(yī)院內(nèi)獲得而出院后發(fā)生的感染,或與前次住院有關(guān)的感染(不包括入院前已處于潛伏期的感染)。二、醫(yī)院感染的分類1、按微生物來(lái)源:內(nèi)源性醫(yī)院感染:由自身正常菌群轉(zhuǎn)變成機(jī)會(huì)性致病菌所致 特定條件:寄居部位改變;免疫功能下降;菌群失調(diào)外源性醫(yī)院感染(交叉感染):患者遭受醫(yī)院內(nèi)非自身存在的病原體侵襲而發(fā)生的感染。病人之間、醫(yī)患之間、污染醫(yī)護(hù)用品或診治設(shè)備、環(huán)境空氣等,也稱醫(yī)院內(nèi)感染。醫(yī)源性感染。2、按感染部位分類全身各部位均可發(fā)生三、醫(yī)院感染的微生物特征* 主要是機(jī)會(huì)性致病菌(常為內(nèi)源性感染)* 常為耐藥菌*
44、新的病原菌不斷出現(xiàn),種類變遷* 主要是細(xì)菌,其次為病毒和真菌四、醫(yī)院感染的危險(xiǎn)因素易感對(duì)象:年齡因素(老人、嬰幼兒);基礎(chǔ)疾?。垢腥灸芰ο陆担┰\療技術(shù)及侵入性檢查與治療因素:器官移植;血液透析和腹膜透析;介入檢查和治療損傷免疫系統(tǒng)的因素:放射治療;化學(xué)治療;激素治療其他因素:抗生素使用不當(dāng);外科手術(shù)及各種引流;住院時(shí)間過(guò)長(zhǎng)五、醫(yī)院感染的預(yù)防和控制* 消毒滅菌* 隔離預(yù)防* 合理使用抗生素第九章 球菌球菌:葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌球菌:奈瑟菌第一節(jié) 葡萄球菌屬一金黃色葡萄球菌(一)生物性狀1、顏色和染色:無(wú)芽胞,無(wú)鞭毛2、培養(yǎng)特性:需氧或兼性厭氧。培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求不高。屬內(nèi)不同菌種可產(chǎn)生金黃色、白
45、色、檸檬色等脂溶性色素并使菌落著色。致病性葡萄球菌菌落呈金黃色,于血瓊脂平板上生長(zhǎng)后在菌落周圍還可見完全透明溶血環(huán)(B溶血)。3、生化反應(yīng):多數(shù)能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。致病性菌株能分解甘露醇,產(chǎn)酸。觸酶(過(guò)氧化氫酶)陽(yáng)性,可與鏈球菌相區(qū)分。4、抗原:葡萄球菌A蛋白():存在于細(xì)胞壁上的表面抗原,可與的段結(jié)合,可進(jìn)行協(xié)同凝集,并具有抗吞噬等生物學(xué)活性。莢膜多糖:有利于黏附和抗吞噬。多糖抗原:具有群特異性,存在于細(xì)胞壁。5、分類:按相關(guān)性分:金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。按有無(wú)凝固酶(血漿凝固酶)分:凝固酶陽(yáng)性菌、凝固酶陰性菌。6、抵抗力:葡萄球菌對(duì)外界抵抗力強(qiáng)。對(duì)堿
46、性染料(龍膽紫)較敏感。對(duì)青霉素、金霉素、紅霉素、慶大霉素高度敏感,對(duì)鏈霉素中度敏感,對(duì)磺胺、氯霉素敏感性較差。易產(chǎn)生耐藥性,尤其對(duì)青霉素。(二)致病性葡萄球菌中毒性最強(qiáng)的是金黃色葡萄球菌。1、致病物質(zhì)(填空)酶血漿凝固酶:鑒定致病性葡萄球菌的重要指標(biāo),包括游離凝血酶和結(jié)合凝血酶。 其致病機(jī)理:阻礙吞噬細(xì)胞的吞噬和細(xì)胞內(nèi)消化作用。 保護(hù)病菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞。 引起周圍纖維蛋白沉積和凝固使感染易于局限化和形成血栓。耐熱核酸酶:由致病性葡萄球菌產(chǎn)生,耐熱,能較強(qiáng)的降解和。耐熱核酸酶是測(cè)定葡萄球菌有無(wú)致病性的重要指標(biāo)之一。纖維蛋白溶酶(葡激酶):激活纖維蛋白酶原使之成為纖維蛋白酶,導(dǎo)致血漿纖
47、維蛋白的溶解,有利于病菌的擴(kuò)散。透明質(zhì)酸(擴(kuò)散因子):降解結(jié)締組織的透明質(zhì)酸。脂酶:分解脂肪。觸酶:分解過(guò)氧化氫。毒素葡萄球菌溶素:破壞膜的完整性導(dǎo)致細(xì)胞溶解,對(duì)人類有致病作用的主要為a溶素。殺白細(xì)胞素():分快(F)慢(S)兩種組分,兩者必須協(xié)同才能有作用。攻擊中性粒白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,增強(qiáng)侵襲力。腸毒素:一組熱穩(wěn)定的可溶性蛋白質(zhì),可抵抗胃液中的蛋白酶的水解作用。刺激嘔吐中樞導(dǎo)致以嘔吐為主要癥狀的急性胃腸炎,即食物中毒。葡萄球菌腸毒素屬于超抗原,即不經(jīng)過(guò)抗原遞呈細(xì)胞的處理能非特異性刺激T細(xì)胞增值并釋放過(guò)量細(xì)胞因子致病。表皮剝脫毒素(表皮溶解毒素):有兩個(gè)血清型,A型耐熱,B型不耐熱。引起表皮脫
48、落性皮炎。毒素休克綜合癥毒素-1:引起多器官。多系統(tǒng)的功能紊亂,超抗原作用。細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)蛋白:莢膜、肽聚糖、磷酸壁、蛋白A2、所致疾病侵襲性疾?。阂阅撃[形式為主的化膿性炎癥。皮膚化膿性炎癥:濃汁金黃而粘稠,病灶界限清楚,多為局限性。毒素性疾病:由外毒素引起的中毒性疾病。食物中毒;燙傷樣皮膚綜合癥;毒性休克綜合癥()。(三)免疫性 :人類對(duì)葡萄球菌有一定的天然免疫力。(四)微生物檢查法致病性葡萄球菌的鑒定依據(jù):能產(chǎn)生金黃色色素;有溶血性;凝固酶實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性;耐熱核酸酶試驗(yàn)陽(yáng)性;能分解甘露醇產(chǎn)酸。二、凝固酶陰性葡萄球菌生物學(xué)性狀為菌,最常見的是表葡萄球菌和腐生葡萄球菌。致病性泌尿系統(tǒng)感染:細(xì)菌性內(nèi)膜炎
49、:敗血癥:術(shù)后及植入醫(yī)用器械引起的感染:第二節(jié) 鏈球菌屬鏈球菌屬對(duì)人類致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌。1、分類按溶血現(xiàn)象溶血現(xiàn)象性質(zhì)甲型溶血性鏈球菌(草綠色鏈球菌)菌落周圍有12寬的草綠色溶血環(huán)多為機(jī)會(huì)致病菌乙型溶血性鏈球菌(溶血性鏈球菌)菌落周圍有24寬的界限分明、完全透明的無(wú)色溶血環(huán)致病力強(qiáng)丙型溶血性鏈球菌(不溶血性鏈球菌)不產(chǎn)生溶血素,菌落周圍無(wú)溶血環(huán)一般不致病2、對(duì)人致病的鏈球菌90%左右屬A群,且對(duì)人致病的A群鏈球菌多呈現(xiàn)乙型溶血。3、需氧、兼性厭氧鏈球菌對(duì)人有致病性。一、A群鏈球菌A群鏈球菌主要有化膿性鏈球菌或-溶血性鏈球菌,是人類常見的感染細(xì)菌,也是鏈球菌中對(duì)人類致病作用最強(qiáng)
50、的細(xì)菌。生物學(xué)性狀1、培養(yǎng)特性:多數(shù)菌株兼性厭氧。營(yíng)養(yǎng)要求較高,多數(shù)菌株周圍易形成較寬的透明溶血環(huán)。2、生化反應(yīng):分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。鏈球菌一般不分解菊糖,不被膽汁溶解,可用來(lái)鑒別甲型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌。鏈球菌不產(chǎn)生觸酶。3、抗原:多糖抗原(C抗原);表面抗原(蛋白質(zhì)抗原);核蛋白抗原(P抗原)4、抵抗力:一般鏈球菌均可在60被殺死,對(duì)常用消毒劑敏感。致病性1、致病物質(zhì)細(xì)胞壁成分:黏附素:包括脂磷壁酸和F蛋白M蛋白:A群鏈球菌主要的致病因子。含M蛋白的鏈球菌具有抗吞噬和抵抗吞噬細(xì)胞內(nèi)殺菌作用的能力。肽聚糖:A群鏈球菌的肽聚糖具有致熱、溶解血小板、提高血管通透性、誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎等作用
51、。外毒素:致熱外毒素(紅疹毒素、猩紅熱毒素):由攜帶溶原性噬菌體的A群鏈球菌產(chǎn)生,具有超抗原作用。鏈球菌溶素:有溶解紅細(xì)胞、破壞白細(xì)胞和血小板的作用侵襲性酶類:透明質(zhì)酸酶:分解細(xì)胞間質(zhì),促進(jìn)細(xì)菌擴(kuò);鏈激酶(溶纖維蛋白酶):溶解血塊、阻止血漿凝固,促細(xì)菌擴(kuò)散;鏈道酶(酶):溶解膿汁中,降低其粘稠度,促細(xì)菌擴(kuò)散,主要有A,C,G群鏈球菌產(chǎn)生。2、所致疾?。夯撔愿腥荆喝缇植科つw及皮下組織感染(丹毒、淋巴管炎、蜂窩組織炎、癰、膿皰瘡等)和其它系統(tǒng)感染(化膿性扁桃體炎、咽炎、鼻竇炎、中耳炎及產(chǎn)褥熱等)。中毒性感染:如猩紅熱、鏈球菌毒性休克綜合征。變態(tài)反應(yīng)性疾?。喝顼L(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎等。免疫性:鏈球
52、菌型別多,各型間無(wú)交叉免疫力,故??煞磸?fù)感染。二、肺炎鏈球菌(肺炎球菌)肺炎鏈球菌常寄居于正常人的鼻腔中,多數(shù)不致病或致病力弱,僅有少數(shù)致病力。是細(xì)菌性大葉肺炎、腦膜炎、支氣管炎的主要病原菌。生物學(xué)性狀屬球菌,營(yíng)養(yǎng)要求較高,兼性厭氧。在血平板上的菌落細(xì)小、形成草綠色a溶血環(huán)。分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣??煽康蔫b別法是膽汁溶菌實(shí)驗(yàn)。對(duì)理化因素抵抗力較弱,對(duì)一般消毒劑敏感。致病性1、致病物質(zhì)莢膜、脂磷壁酸、肺炎鏈球菌溶素O、神經(jīng)氟酸酶2、所致疾病人類大葉性肺炎、支氣管炎免疫性:感染紅藕可建立較牢固的特異性免疫(四)微生物檢查法血瓊脂平板上的肺炎鏈球菌菌落周圍有草綠色a溶血環(huán)。肺炎鏈球菌主要應(yīng)與甲型溶血性鏈球菌鑒別,方法:膽汁容菌試驗(yàn)、菊糖發(fā)酵試驗(yàn)、莢膜腫脹試驗(yàn)。三、其他醫(yī)學(xué)相關(guān)鏈球菌B群鏈球菌()無(wú)乳鏈球菌 正常寄居陰道與直腸,帶菌率30% 新生兒感染(經(jīng)產(chǎn)道或呼吸道)敗血癥及腦膜炎死亡率高。D群鏈球菌腸球菌 條件致病菌,為醫(yī)院感染的重要致病菌,常見尿路感染。甲型溶血性鏈球菌 是口腔和上呼吸道部位的正常菌群 條件致病菌,可引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎 變異鏈球菌與齲齒發(fā)病有關(guān)。第四節(jié) 奈瑟菌屬奈瑟菌屬是菌,專性需氧,能產(chǎn)生氧化酶和觸酶,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。人類是奈瑟菌屬的天然宿主,對(duì)人類致病的只有腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。一、腦膜炎奈瑟
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