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文檔簡介
1、假定你正在研究原核生物轉(zhuǎn)座子Tn10,并已設(shè)計(jì)出一個(gè)很好的方法來確定Tn10在 轉(zhuǎn)座期間是否是通過復(fù)制還是不干涉DNA復(fù)制直接移動(dòng)。你的想法是根據(jù)這兩種機(jī)制的主要不同點(diǎn): 如果不復(fù)制那么轉(zhuǎn)座子的兩條親鏈將同時(shí)移動(dòng);如果復(fù)制則有一條親鏈移動(dòng)(如圖81) 你打算把來自兩個(gè)不同Tn職的鏈經(jīng)退火后都標(biāo)記上。為了把這些雜種Tn10雙螺旋足夠地分配到細(xì)胞中。你用了含有Tn10的噬菌體DNA,它既能在體外操作又能包在病毒殼內(nèi)成為有侵染力的噬菌體。你決定使用一個(gè)因?yàn)槠渌蛔兌セ钚缘氖删w基因組,因此它就不會(huì)復(fù)制整合,而且最終可被除去,這樣噬菌體基因組可被忽略。你的噬菌體DNA在同樣位點(diǎn)插入了稍微不同的Tn
2、10。兩種Tn10都含有四環(huán)素抗性基因和乳糖代謝基因(lacZ),但其中一種由于突變使lacZ基因失。這種差異為追蹤兩種Tn10提供了一個(gè)很方便的方法,因?yàn)閘acZ+ 細(xì)菌克隆(與適當(dāng)?shù)牡孜锕灿龝r(shí))會(huì)變藍(lán),而lacZ-克隆則還是白色。你把兩種噬菌體DNA的混合物變性后退火,得到兩份相等的雜交雙鏈與純合雙鏈的混合物(圖82) 然后你將混合物包裝到噬菌體外殼中,侵染lacZ-細(xì)菌,并把被侵染細(xì)菌涂布在含四環(huán)素和可產(chǎn)生有色底物的平板上。一旦噬菌體DNA進(jìn)入了細(xì)菌,轉(zhuǎn)座子將進(jìn)入細(xì)菌基因組(頻率很低),給細(xì)菌帶來四環(huán)素抗性。獲得一個(gè)Tn10的稀有野生細(xì)菌, 可以在選擇條件下生存并形成克隆。統(tǒng)計(jì)大量這樣的
3、克隆會(huì)發(fā)現(xiàn)有25為白色,25% 為藍(lán)色,50為藍(lán)色部分與白色部分的混合物; (1)解釋每種細(xì)菌克隆的來源并確定結(jié)果是否能說明Tn10復(fù)制或不復(fù)制的轉(zhuǎn)座機(jī)制 (2)你使用了一種無法修復(fù)DNA錯(cuò)配的細(xì)菌苗株作為受體,來做這些實(shí)驗(yàn)。如果你用可以修復(fù)錯(cuò)配的細(xì)菌苗株作為受體那么結(jié)果會(huì)有什么不同? (3)噬菌體DNA通過位點(diǎn)專一重組整合到細(xì)菌基因組上要比轉(zhuǎn)座更常見,如果你用能復(fù)制但不能整合的噬菌體突變體結(jié)果有什么不同? -類型:分析題-答案: 答: (1)所有菌落肯定是由Tn10轉(zhuǎn)座進(jìn)入細(xì)菌基因組產(chǎn)生的,因?yàn)榇婊钜蕾囉赥n10所攜帶四環(huán)素抗性基因的存在。主要觀察到的是出現(xiàn)了藍(lán)色和白色的混合菌落,因?yàn)榛旌暇?/p>
4、落的機(jī)率很高而轉(zhuǎn)座機(jī)率很低,所以混合菌落在單轉(zhuǎn)座中是很常見的??蓮?fù)制機(jī)制每次只能轉(zhuǎn)移親代雙螺旋中的一條鏈,產(chǎn)生藍(lán)色或白色菌落,這全看哪條鏈被轉(zhuǎn)移,而非復(fù)制機(jī)制可轉(zhuǎn)移雜合雙鏈的兩條鏈,并復(fù)制分離成姐妹細(xì)菌,產(chǎn)生混合菌落(一旦細(xì)菌在細(xì)菌培養(yǎng)基中被分離,最初被感染細(xì)胞的子代被限制在鄰近地方共同生長形成菌落。如果第一次分裂產(chǎn)生不同姐妹細(xì)菌,那它們的子代會(huì)長在一起產(chǎn)生一個(gè)包含兩種不同細(xì)菌的單一菌落)。純的藍(lán)色或白色菌落是由同源雙鏈參與轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的。藍(lán)色,白色和混合菌落的比例和從異 源雙鏈(使混合菌落數(shù)增加)與同源雙鏈(使純菌落數(shù)增加)混合物的比例所預(yù)計(jì)到的一樣。 (2)每個(gè)雜合雙鏈對應(yīng)lacZ基因突變的位
5、置都含有一個(gè)錯(cuò)配DNA區(qū)域。如果這些雜合雙鏈被導(dǎo)入可修復(fù)這種錯(cuò)誤的細(xì)菌,那么混合菌落數(shù)將下降。關(guān)鍵是,一次修復(fù)可將一個(gè)雜合雙鏈轉(zhuǎn)變成一個(gè)純合雙鏈。如果錯(cuò)配修復(fù)對兩條鏈的修復(fù)機(jī)會(huì)是等同的,那白色與藍(lán)色菌落的出現(xiàn)頻率同樣上升。 (3)如果你用了整合態(tài)的噬菌體基因組,那么存活的菌落來自位點(diǎn)專一重組,這是比轉(zhuǎn)座更有效的一種重組。位點(diǎn)專一重組可整合噬菌體基因組的雙鏈。這樣,藍(lán)色,白色和混合菌落的比例和非復(fù)制轉(zhuǎn)座一樣。事實(shí)上,在實(shí)際確定轉(zhuǎn)座機(jī)制的實(shí)驗(yàn)中,整合態(tài)的噬菌體被作為正對照和轉(zhuǎn)座結(jié)果相比較,兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致。 -題目圖片:picture-p8.1.jpg -題目圖片:picture-p8.2.jp
6、g-下列關(guān)于VSG基因轉(zhuǎn)錄活性的敘述是正確的有:( ) -類型:選擇題 -選擇:(a) 只有在表達(dá)位點(diǎn)的VSG基因被轉(zhuǎn)錄 (b) ELC(expression linked copy)總是位于端粒附近 (c)將內(nèi)部的VSG基因拷貝復(fù)制到表達(dá)位點(diǎn)可以改變表達(dá)位點(diǎn)的VSG基因 (d)不需經(jīng)過基因復(fù)制,端粒附近的VSG基因就可以被激活 (e)少數(shù)情況下,通過不同的VSG基因拷貝在表達(dá)位點(diǎn)組裝可以產(chǎn)生一個(gè)新的VSG 基因 (f)以上都正確 -答案: F;-位于ELC的VSG基因有一個(gè)不尋常的結(jié)構(gòu),包括:( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)不含限制性內(nèi)切酶切割位點(diǎn)的5無義區(qū) (b)由一個(gè)簡單序列重復(fù)多
7、次組成的3無義區(qū) (c)以上都正確 (d)以上都不正確 -答案: C;-哪些有關(guān)免疫球蛋白基因重排的敘述是正確的?( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)所有物種中V基因的數(shù)目是一樣的 (b)J是恒定區(qū)的一部分 (c)各部分連接時(shí),將產(chǎn)生缺失或重排 (d)當(dāng)一個(gè)等位基因中發(fā)生有意義的重排時(shí),另一個(gè)等位基因也發(fā)生重排 -答案: C;分析比較細(xì)菌轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)。 -類型:簡答題-答案: 答: 1974年,隨著發(fā)現(xiàn)與抗生素抗性有關(guān)的基因可以在質(zhì)粒與細(xì)菌的染色體之間轉(zhuǎn)移,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)座子。轉(zhuǎn)座子比IS元件大很多(一般為220kb),它們至少含有一個(gè)基因,給宿主帶來可遺傳的標(biāo)記,一般是對一種或多種抗
8、生素的抗性。這是一種非常有用的性質(zhì),因?yàn)槊糠N質(zhì)??梢杂靡环N轉(zhuǎn)座子“標(biāo)記”,這樣通過對藥物的抗性表型可以簡單地檢測質(zhì)粒的存在和轉(zhuǎn)移;同樣,可以輕易地觀察到轉(zhuǎn)座。轉(zhuǎn)座子Tn5(圖A8.2)長5.7kb,是一種結(jié)構(gòu)最簡單的轉(zhuǎn)座子;它由三個(gè)成分組裝而成:一個(gè)長中心區(qū)(27kb),含有卡那霉素的抗性基因,兩端為一對IS元件,每個(gè)長1.5kb,方向相反。其他的轉(zhuǎn)座子兩端為不同的IS元件,有時(shí)兩個(gè)IS同向。這些轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座類似IS元件,轉(zhuǎn)座過程中宿主的一個(gè)序列或DNA靶位點(diǎn)被復(fù)制。發(fā)生轉(zhuǎn)座首先是因?yàn)槿我庖粋€(gè)IS序列或兩個(gè)IS序列同時(shí)起作用,編碼一個(gè)轉(zhuǎn)座酶(在某些元件中,如Tn5,一個(gè)IS只有部分功能,不能編
9、碼一個(gè)有活性的轉(zhuǎn)座酶);其次,轉(zhuǎn)座子兩端通常有一對與IS特異相應(yīng)的反向重復(fù)序列:無論IS元件是正向還是反向的,這些末端重復(fù)序列都存在。 還有一種可能性:任一對IS元件可以相互作用使它們之間的任意序列轉(zhuǎn)座,這樣任一個(gè)基因都可以在兩端連上兩個(gè)同樣的IS元件成為轉(zhuǎn)座子;這個(gè)性質(zhì)已被用構(gòu)建重組DNA分子。 Tn5因?yàn)槠浣M件的組成被稱為集成轉(zhuǎn)座子。其他轉(zhuǎn)座子,如復(fù)雜的轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)是不同的;它們兩端不是一對IS而是一對反向重復(fù),編碼轉(zhuǎn)座所需蛋白的基因位于轉(zhuǎn)座子的中心區(qū)。 -答案圖片:picture-a8.2.jpg-以下關(guān)于抗體類型轉(zhuǎn)變的敘述哪些是正確的?( ) -類型:選擇題 -選擇:(a) 每種重鏈具
10、有不同的功能 (b)類型轉(zhuǎn)變的次序按染色體上重鏈排列順序進(jìn)行 (c)一旦一種類型轉(zhuǎn)換發(fā)生,其他的轉(zhuǎn)換將不再進(jìn)行 (d)也可通過可變剪接改變重鏈 -答案:a,b,d鋅指蛋白與鋅的結(jié)合( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)是共價(jià)的 (b)必須有DNA的存在 (c)通過保守的胱氨酸和組氨酸殘基間協(xié)調(diào)進(jìn)行 (d)位于蛋白質(zhì)的螺旋區(qū)域 -答案: c;-鋅指蛋白與DNA的結(jié)合( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)位于DNA大溝 (b)通過“鋅指”的C端進(jìn)行 (c)利用蛋白的螺旋區(qū)域 (d)每個(gè)“指”通過形成兩個(gè)序列特異的DNA接觸位點(diǎn) (e)通過“指”中保守的氨基酸同DNA結(jié)合 -答案:a,b,c,d-甾
11、醇類受體轉(zhuǎn)錄因子( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)結(jié)合的激素都是相同的 (b)與DNA的結(jié)合不具序列特異性 (c)與鋅結(jié)合的保守序列不同于鋅指蛋白 (d)通過第二“指”C端的氨基酸形成二聚體 (e)參與轉(zhuǎn)錄激活,與DNA和激素結(jié)合分別由不同的結(jié)構(gòu)域完成 -答案:c,e;-糖皮質(zhì)激素類的甾醇受體( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)是同源二聚體 (b)所結(jié)合的DNA回文序列都不相同 (c)結(jié)合的回文序列相同,但組成回文序列兩段DNA間的序列不同 (d)RXR受體通過形成異源二聚體后與同向重復(fù)序列結(jié)合 (e)這類受體存在于細(xì)胞核中 -答案: a,c,e;-同源異型域蛋白( ) -類型:選擇題
12、-選擇:(a)形成具有三個(gè)螺旋的結(jié)構(gòu) (b)主要通過螺旋3和N端的臂與DNA接觸 (c)與原核生物螺旋轉(zhuǎn)角螺旋蛋白(如阻遏物)的結(jié)構(gòu)很相似 (d)通常存在于細(xì)胞核中 (e)在果蠅早期發(fā)育調(diào)控中起重要作用 -答案:a,b,c,e;-HLH蛋白( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)在序列組成上與原核生物螺旋轉(zhuǎn)角螺旋蛋白具有相關(guān)性 (b)通過環(huán)區(qū)與DNA結(jié)合 (c)形成兩個(gè)螺旋與DNA的大溝結(jié)合 (d)由形成兩性螺旋,其中疏水殘基位于螺旋的一側(cè) (e)以上都不是 -答案: d;-bHLH蛋白( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)在環(huán)中含有保守的堿性氨基酸 (b)不能形成同源二聚體 (c)非誘導(dǎo)表達(dá)
13、(d)通過它們堿性區(qū)與HLH相互作用 (e)只有與HLH形成異源二聚體后才與DNA結(jié)合 (f)以上都不是 -答案: F; -以下關(guān)于亮氨酸拉鏈蛋白的敘述哪一項(xiàng)是正確的?( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)它們通過保守的亮氨酸殘基與DNA結(jié)合 (b)它們與HLH蛋白相似之處是:它們都具有相鄰的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和二聚化結(jié)構(gòu)域 (c)Jun蛋白可以形成同源二聚體而Fos蛋白不可以 (d)由FosJun復(fù)合物與Jun/Jun復(fù)合物結(jié)合的DNA序列不同 (e)FosJun與DNA的結(jié)合比Jun/Jun牢固 -答案: b,c,e;-選出所有正確的選項(xiàng):( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)基因必須經(jīng)過完
14、全的甲基化才能表達(dá) (b)具有活性的DNA是非甲基化的 (c)隨著發(fā)育階段的改變,DNA的甲基化也要發(fā)生變化 (d)在DNA復(fù)制過程中,通過識(shí)別半甲基化的酶,甲基化得以保存 -答案:b,c,d;-下列哪些轉(zhuǎn)錄因子含有TBP?( ) -類型:選擇題 -選擇: (a) B (b) A (c)SLl (d) TFD (e) TF B (f)UBFl-答案: c,d,e;下列哪些轉(zhuǎn)錄因子是裝配因子?( ) -類型:選擇題 -選擇: (a)SPl (b) TF B (c) TFH (d)以上都不是-答案: d;-以下關(guān)于TBP的陳述哪些是正確的?( ) -類型:選擇題 -選擇: (a)TBP誘導(dǎo)DNA發(fā)
15、生彎曲 (b)TBP結(jié)合于DNA雙螺旋的大溝 (c)TBP通過與不同的蛋白結(jié)合來識(shí)別不同的啟動(dòng)子 (d)TBP與聚合酶I、聚合酶和聚合酶的共同亞基作用 -答案: a,c,d; -TATA框存在于( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)聚合酶識(shí)別的所有啟動(dòng)子中 (b)聚合酶識(shí)別的大部分啟動(dòng)子中 (c)聚合醇識(shí)別的極少數(shù)啟動(dòng)子中 (d)聚合酶識(shí)別的所有啟動(dòng)子中 (e)聚合酶識(shí)別的大部分啟動(dòng)子中 (f)聚合酶識(shí)別的極少數(shù)啟動(dòng)子中 -答案: b,f -RNA聚合酶的C端結(jié)構(gòu)域(CTD)的磷酸化與( )相關(guān) -類型:選擇題 -選擇:(a)與起始前復(fù)合體的結(jié)合 (b)TFH的激酶活性 (c) TFD中特異T
16、AF蛋白的存在 (d)從起始聚合酶到延伸聚合酶的轉(zhuǎn)換 (e)起始因子TFA,TFB及TFD的釋放 -答案: b,d,e;-下列哪個(gè)(些)情況能解釋為什么一些基因在它們的轉(zhuǎn)錄因子存在時(shí)并不總是處于活性狀態(tài)?( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的鄰近序列 (b)有其他蛋白的結(jié)合 (c)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)狀態(tài) (d)缺少共激活蛋白 (e)以上都是 -答案: e-真核細(xì)胞中的RNA聚合酶僅在細(xì)胞核中有活性。 -類型:判斷題-答案: 錯(cuò)誤。 -在RNA的合成過程中,RNA鏈沿3到5方向延長。 -類型:判斷題-答案: 錯(cuò)誤。-候選三磷酸核苷通過對生長中RNA鏈的磷酸的親和攻擊加
17、到鏈上。 -類型:判斷題-答案: 正確。 -核不均一RNA是mRNA和rRNA的前體而不是tRNA的前體. -類型:判斷題-答案: 錯(cuò)誤。-密碼子AUG專門起mRNA分子編碼區(qū)的終止作用。 -類型:判斷題-答案: 錯(cuò)誤。 fMet的tRNA的反密碼子是TAC。 -類型:判斷題-答案: 錯(cuò)誤。-細(xì)菌細(xì)胞用一種 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄所有的RNA,而真核細(xì)胞則有三種不同的RNA聚合酶。 -類型:判斷題-答案: 正確。-轉(zhuǎn)錄因子具有獨(dú)立的DNA結(jié)合和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域。 -類型:判斷題-答案: 正確。-每個(gè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)被單個(gè)轉(zhuǎn)錄因子識(shí)別。 -類型:判斷題-答案: 錯(cuò)誤。-糾正下列一段話中的錯(cuò)誤: 在E.c
18、oli中,通過RNA聚合酶同操縱基因的結(jié)合來起始轉(zhuǎn)錄。與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)堿基互 補(bǔ)的dNTP同亞基結(jié)合,然后是第二個(gè)dNTP通過與第一個(gè)dNTP形成25磷酸 二酯鍵而結(jié)合上。當(dāng)生成的RNA鏈約有12個(gè)核苷酸長度時(shí),亞基脫離DNA聚合酶,RNA鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。當(dāng)DNA聚合酶在RNA鏈上遇到終止密碼子時(shí),轉(zhuǎn)錄作用停止。 -類型:判斷題-答案: 此段敘述中的錯(cuò)誤部分用下劃線標(biāo)出,并在后面進(jìn)行更正: 在E.coli中,通過RNA聚合酶同操縱基因的結(jié)合來起始轉(zhuǎn)錄。與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)堿基互補(bǔ)的dNTP同亞基結(jié)合,然后是第二個(gè)dNTP通過與第一個(gè)dNTP形成25磷酸二酯鍵而結(jié)合上。當(dāng)生成的RNA鏈約有12個(gè)核苷酸
19、長度時(shí)亞基脫離DNA聚合酶,RNA鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。當(dāng)DNA聚合酶在RNA鏈上遇到終止密碼時(shí),轉(zhuǎn)錄作用停止。操縱基因啟動(dòng)子;dNTPNTP;亞基亞基;dNTPNTP2-53-5; ;DNARNA;全酶核心酶;DNARNA;RNADNA;終止密碼終止信號(hào) -真核生物的mRNA加工過程中,5端加上(),在3端加上(),后者由()催化。如果被轉(zhuǎn)錄基因是不連續(xù)的,那么,()一定要被切除,并通過()過程將()連接在一起。這個(gè)過程涉及許多RNA分子,如Ul和U2等,它們被統(tǒng)稱為()。它們被統(tǒng)稱為()。它們分別與一組蛋白質(zhì)結(jié)合形成(),并進(jìn)一步地組成40S或60S的結(jié)構(gòu),叫()。 -類型:填空題-答
20、案: 帽子結(jié)構(gòu);多腺苷化尾;po1y(A)聚合酶; 內(nèi)含子; 剪接;外顯子;snRNA;snRNP;剪接體 -膠原蛋白通過在不同的脯氨酸殘基上添加()基團(tuán)而被化學(xué)修飾。這個(gè)反應(yīng)是由兩種酶催化的,它們是()和()。其他的一些蛋白質(zhì)被()磷酸化。蛋白質(zhì)上添加寡聚糖的過程叫()而添加脂肪酸鏈則叫()。O寡聚糖是一種同()或()殘基上氧連接的寡聚糖,而N寡聚搪是通過與()上的氮原子連接而成。N寡聚糖又是從同一種叫做()脂的前體寡聚糖衍生而來。 -類型:填空題-答案: 羥基; 脯氨酰3羥基化酶;脯氨酰4羥基化酶; 蛋白激酶; 糖基化作用;酰基化作用;絲氨酸; 蘇氨酸; 天冬酰胺; 長醇 -阿黑皮素原是(
21、)被切割以后可以產(chǎn)生很多活性蛋白質(zhì)的一個(gè)例予。如()之類的RNA病毒也能合成類似的結(jié)構(gòu)物。蛋白水解過程也涉及細(xì)胞外毒素的活性,如蜜蜂的()和動(dòng)物激素的活性,如()和()。 -類型:填空題-答案: 多聚蛋白;脊髓灰質(zhì)炎病毒;布魯菌素;胰島素; 胰高血糖素-剪接小體是( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)由多種snRNP組成的結(jié)構(gòu) (b)大小為40S一60S (c)一種在拼接中起作用的結(jié)構(gòu) (d)以上都不正確 (e)RNA加工的一種形式 -答案: b,c在O連接寡聚糖中,直接同多肽相連的糖基是( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)甘露糖 (b)N乙酰葡糖胺 (c)C半乳糖或N乙酰半乳糖胺 (d)半
22、乳糖或N乙酰葡萄糖胺 (e)葡萄糖 -答案: c;-正常情況下,同乙酰化蛋白質(zhì)氨基末端的甘氨酸相連的脂肪酸是( ) -類型:選擇題 -選擇:(a) 軟脂酸 (b) 油酸 (c)十四酸鹽(肉豆蔻酸鹽) (d)乙酰基 (e)以上都對 -答案: c;-在阿黑皮素原中被識(shí)別和切割的氨基酸殘基是( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)賴氨酸和精氨酸 (b)谷氨酰胺和甘氨酸 (c)賴氨酸和天冬酰胺 (d) a和b,其中a是丙氨酸,天冬氧酸或甘氨酸,b是丙氨酸或脯氨酸 (e)天冬酰胺和賴氨酸 -答案: c; -哪些有關(guān)剪接位點(diǎn)的敘述是正確的?( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)剪接位點(diǎn)含有長的保守序列 (b
23、)5與3剪接位點(diǎn)是互補(bǔ)的 (c)幾乎所有的剪接位點(diǎn)都遵從GTAG規(guī)律 (d)剪接位點(diǎn)被保留在成熟的mRNA中 (e)內(nèi)含子3與5剪接位點(diǎn)間的距離可以很大 (f)一個(gè)內(nèi)含子的5剪接位點(diǎn)只能與同一個(gè)內(nèi)含子的3剪接位點(diǎn)作用,雜合內(nèi)含子不能被剪接 -答案: c,e ;-分支位點(diǎn)核苷酸( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)總是A (b)的位置在內(nèi)含子內(nèi)是隨機(jī)的 (c)位于一個(gè)非嚴(yán)格保守的序列內(nèi) (d)通過與3剪接位點(diǎn)作用起始剪接的第一步 (e)在剪接的結(jié)于步完成后與內(nèi)含子中另外三個(gè)核苷酸共價(jià)連接 -答案: a,c,e; -轉(zhuǎn)酯反應(yīng):( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)不需要ATP (b)拆開一個(gè)化學(xué)鍵
24、后又形成另一個(gè)化學(xué)鍵 (c)涉及對糖磷骨架0H基團(tuán)的親核攻擊 (d)以上都正確 -答案: d;-選出所有有關(guān)snRNA的正確敘述:( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)snRNA只位于細(xì)胞核中 (b)大多數(shù)snRNA是高豐度的 (c) snRNA在進(jìn)化的過程中是高度保守的 (d)某些snRNA可以與內(nèi)含子中的保守序列進(jìn)行堿基配對 (e)以上都正確 -答案: e;-參與前體mRNA剪接的snRNP( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)與一組Sm蛋白結(jié)合 (b)含有獨(dú)特的蛋白(即不存在任何其他snRNP的蛋白) (c)其RNA和蛋白組分都是其作用不可缺少的 (d)主要通過蛋白組分與前體mRNA結(jié)合
25、 (e)以上都正確 -答案: a,b,c;-剪接小體的組裝( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)按有序的途徑一步步完成 (b)涉及snRNP與水溶性蛋白(即不是任何snRNP組分的蛋白) (c)不需要ATP (d)伴隨著多次snRNP的重組合 (e)以上都正確 -答案: a,b,d;-SR蛋白( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)家族中的成員都具有一個(gè)或多個(gè)精氨酸和絲氨酸豐富區(qū) (b)分別與特異的RNA序列結(jié)合 (c)形成一個(gè)蛋白質(zhì)連接橋U2AF和U1snRNP (d)都需要U1snRNP (e)可幫助識(shí)別外顯子 (f)以上都正確 -答案: a,c,d,e;型剪接與前體mRNA剪接的相似之處是
26、( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)兩種內(nèi)含子具有相似的剪接位點(diǎn): (b)它們都通過向樣的機(jī)制進(jìn)行剪接,其中涉及套索中間體 (c)都由肋A催化進(jìn)行 (d)都需要Ul snRNP (e)都可以在沒有蛋白的情況下進(jìn)行 (f)兩種內(nèi)含子都形成精細(xì)的二級(jí)結(jié)構(gòu) -答案: a,b,c;-可變剪接( ) -類型:選擇題 -選擇:(a) 與“組成型”剪接的機(jī)制完全不同 (b) 可以從單個(gè)基因產(chǎn)生多種同功蛋白,即添加或缺失少數(shù)氨基酸的變異蛋白 (c)涉及不同的5和3剪接位點(diǎn) (d)被用于在不同組織和不同的發(fā)育階段產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì) (e)可以跨越外顯子,也涉及可變外顯子或保留內(nèi)含子 -答案: b,c,d,e;-
27、多數(shù)情況下,剪接發(fā)生在同一個(gè)RNA分子內(nèi)部。但反式剪接( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)已被證實(shí)存在于天然和合成的內(nèi)含子中 (b)涉及前體mRNA與獨(dú)立的SLRNA間的剪接 (c)與順式剪接的機(jī)制完全不同 (d)有時(shí)是錐蟲與線蟲的剪接方式 (e)將同一個(gè)5外顯子(SLRNA)剪接到所有mRNA上 (f)只需要U1與U5snRNP -答案: a,b,d,e ;-tRNA中的內(nèi)含子( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)通過兩步轉(zhuǎn)酯反應(yīng)被切除 (b)具有與反密碼子互補(bǔ)的序列 (c)都形成相似的二級(jí)結(jié)構(gòu) (d)由蛋白酶(核酸內(nèi)切酶和連接酶)切除 (e)在5f和3P剪接位點(diǎn)的序列是保守的 -答案:
28、b,c,d -在前體mRNA上加多聚腺苷酸尾巴( ) -類型:選擇題 -選擇:(a) 涉及兩步轉(zhuǎn)酯機(jī)制 (b)需要保守的AAUAAA序列 (c)在AAUAAA序列被轉(zhuǎn)錄后馬上開始 (d)通過一個(gè)多組分復(fù)合物的逐步組裝進(jìn)行 (e)由依賴于模板的RNA聚合酶催化 -答案: b,d ;-真核細(xì)胞mRNA前體的長度由( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)形成的莖環(huán)結(jié)構(gòu)決定其 (b)其3末端的聚腺苷酸化位點(diǎn)所決定,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在此位點(diǎn)被切割并加上poly(A) (c)在終止位點(diǎn)與。RNA聚合酶結(jié)合的終止蛋白決定 (d)將所有初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工成最終長度的前體mRNA的核酸外切酶決定 (e)加帽、聚
29、腺苷酸化及內(nèi)含子的剪接所決定 -答案: b ;-下列關(guān)于mRNA降解的正確敘述是( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)原核mRNA的降解由核酸內(nèi)切酶從核糖體翻譯的后面5端開始 (b)原核mRNA的降解通常由核酸外切酶從35進(jìn)行 (c)真核mRNA的降解依賴于末端序列中多個(gè)特異性失活元件 (d)真核mRNA的降解依賴于po1y(A)核糖核酸酶的作用 (e)所有的mRNA在5末端的降解通常涉及核糖核酸內(nèi)切酶活性 -答案: a,b,c,d,e;-可變剪接能增加轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,這些轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物問的區(qū)別在于( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)mRNA的5非轉(zhuǎn)錄區(qū) (b)mRNA的編碼區(qū) (c)mRNA的3非轉(zhuǎn)錄
30、區(qū) (d)上述全是 (e)上述全不是 -答案: d; -在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,RNA編輯( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)可以在轉(zhuǎn)錄后水平改變一個(gè)基因的編碼能力 (b)能在小腸細(xì)胞中的apoB mRNA的中部插入一個(gè)終止密碼子,在肝細(xì)胞中卻不能 (c)通常使每個(gè)mRNA都發(fā)生很大的變化 (d)通過脫氨基可以改變特定的核苷酸 -答案: a,b,d;-在錐蟲的線粒體中,RNA編輯( ) -類型:選擇題 -選擇:(a)被廣泛用于改變許多mRNA的編碼能力 (b)只在每個(gè)MRNA上改變單個(gè)核苷酸 (c)只加上G和缺失G (d)由向?qū)NA指導(dǎo)進(jìn)行,其中向?qū)tA與編輯前mRNA上被編輯區(qū)域相鄰的堿基互補(bǔ)
31、 (e)所用的向?qū)NA上有一小段區(qū)域與被編輯的mRNA互補(bǔ)。 (f)進(jìn)行的方向與轉(zhuǎn)錄方向相同 -答案: a,d,e產(chǎn)生單個(gè)堿基變化的突變叫( )突變,如果堿基的改變產(chǎn)生一個(gè)并不改變氨基酸殘基編碼的( ),并不會(huì)造成什么影響,這就是( )突變。如果改變了氨基酸殘基的密碼,這就是( )突變。這種突變對蛋白質(zhì)功能影響程度要根據(jù)被改變的氨基酸殘基在蛋白質(zhì)( ) 或( )結(jié)構(gòu)中的重要程度,或是與酶的( )的密切性來決定,活性變化范圍可從( )到接近正常。 -類型:填空題-答案: 點(diǎn);密碼子;同義;錯(cuò)義;二級(jí)的;三級(jí)的;活性位點(diǎn);零-一種由于蛋白質(zhì)序列中丟失了( )殘基引起的突變將會(huì)阻止( )橋的形成,
32、這種蛋白質(zhì)更容易( )。如果在( )溫度是穩(wěn)定的而在( )溫度是不穩(wěn)定的,將它稱為( )突變,是( )突變的一個(gè)例子。 -類型:填空題-答案: 半胱氨酸; 二硫; 變性; 較低的; 較高的; 溫度敏感;條件致死-無義突變是將一種氨基酸的( )轉(zhuǎn)變成( )密碼子,結(jié)果使蛋白質(zhì)鏈( )。一個(gè)堿基的插入或( )叫( )突變。由于三聯(lián)( )的移動(dòng),突變位置( )的整個(gè)氨基酸序列都會(huì)被改變。上述兩種類型的突變(插入和缺失)所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)同( )的不同,通常是完全( ) -類型:填空題-答案: 密碼子;終止;變短;缺失;移碼;可讀框;下游;野生型; 失活-下面所列的是由突變而產(chǎn)生的一些異常表型(A),同時(shí)
33、也列出了表型由突變而造成的缺陷的可能原因(B)。請盡可能地將A項(xiàng)所列的異常表型同B項(xiàng)所列的可能原因配對。 A 異常表型: B 缺陷可能出現(xiàn)在: (a) 細(xì)菌的營養(yǎng)缺陷型 (t) 合成途徑 (b) 細(xì)菌溫度敏感突變體 (u) 降解途徑 (c) 細(xì)菌的誘導(dǎo)酶變成組成酶 (v) DNA的修復(fù) (d) 果蠅的紅眼變成白眼 (w) 轉(zhuǎn)錄控制 (e) 果蠅形成兩個(gè)胸節(jié) (x) 細(xì)胞分裂控制 (f) 人的鐮狀細(xì)胞貧血癥 (y) 胚胎發(fā)育控制 (g) 人的原葉啪癥 (z) 蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性 (h) 人著色性干皮病 (i) 苯丙酮尿癥 (j) 人腫瘤的發(fā)生 -類型:填空題-答案: (a)與(t) (b)與(z)
34、(c)與(w) (d)與(t) (e)與(y) (f)與(z) (g)與(t) (h)與(v) (i)與(u) (j)與(x)-下面各句是對不同誘變劑作用的敘述,寫出相應(yīng)情況的誘變劑的名稱: (1) 通過同雙螺旋的結(jié)合,引起變構(gòu),并激活修復(fù)性內(nèi)切核酸酶的誘變劑是:( ) (2)引起總?cè)旧w的損傷如斷裂和轉(zhuǎn)位的誘變劑是:( ) (3)取代正常的堿基而摻入到DNA中,并通過互變異構(gòu)引起復(fù)制錯(cuò)誤的誘變劑是:( )(4)只能夠除去胞哦暖和甲基密嘧啶胞的氨基基團(tuán)的誘變劑是:( ) (5)主要是引起同一條鏈上的相鄰嘧啶間的交聯(lián)的誘變劑是:( )(6)主要是在DNA雙螺旋的形變和鏈的錯(cuò)排過程中引起插入或缺失
35、的誘變劑是( )。 (7)可以除去DNA中任何一個(gè)帶有氨基基團(tuán)的堿基上氨基基團(tuán)的誘變劑是:( )。 -類型:填空題-答案: (1)丫啶類染料 (2)、或輻射 (3)5溴尿嘧啶;2氨基嘌呤 (4)羥胺 (5)紫外線照射 (6)丫啶類染料 (7)亞硝酸 -原核生物的核糖體RNA和tRNA相對較穩(wěn)定并且半衰期長,而mRNA卻不穩(wěn)定,很快被降解、請解釋這種穩(wěn)定性的差異。 -類型:簡答題-答案: 答: 如果轉(zhuǎn)錄物的壽命很長,就不可能通過控制mRNA的合成速率來調(diào)節(jié)基因的活性。另一方面,如果tRNA和rRNA的壽命長的話,就更合算。 -列舉兩種受調(diào)控蛋白控制的、與氨基酸的生物合成有關(guān)的操縱子。 -類型:簡
36、答題-答案: 答: 色氨酸, 精氨酸。 -什么是安慰誘導(dǎo)物? -類型:簡答題-答案: 答: 安慰誘導(dǎo)物是一種與天然誘導(dǎo)物結(jié)構(gòu)相似的化合物,它雖然能誘導(dǎo)操縱子表達(dá),但是它不能被操縱子基因產(chǎn)生的酶分解。在lac操縱子中異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是乳糖的類似物能代替異乳糖作為誘導(dǎo)物,但不能作為-半乳糖苷酶的底物進(jìn)入代謝途徑。 -葡萄糖是如何影響涉及糖代謝的操縱子(葡萄糖敏感型操縱子)的表達(dá)? -類型:簡答題-答案: 答: 在缺乏葡萄糖時(shí),cAMP的水平升高,CAP蛋白同每一個(gè)葡萄糖敏感操縱子中啟動(dòng)子內(nèi)的CAP位點(diǎn)結(jié)合,轉(zhuǎn)錄作用協(xié)同起始。如果有葡萄糖,cAMP的水平下降,CAP蛋白不再結(jié)合,轉(zhuǎn)錄的
37、速率協(xié)同下降。 -在大多數(shù)細(xì)菌操縱子中,結(jié)構(gòu)基因通常緊*在一起并由單個(gè)操縱序列啟動(dòng)子區(qū)調(diào)控,而在一些例子中結(jié)構(gòu)基因分散在染色體上。請問這些基因是如何以簡單的方式達(dá)到協(xié)同調(diào)節(jié)的。 -類型:簡答題-答案: 答: 每一個(gè)結(jié)構(gòu)基因都有它自己的啟動(dòng)子和通用的操縱基因序列。闡述原核生物的轉(zhuǎn)錄終止。 (1)轉(zhuǎn)錄終止的兩種主要的機(jī)制是什么? (2)描述翻譯怎樣能調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄終止。 (3)為什么在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄終止中很少涉及到Rho因子? (4)怎樣能阻止轉(zhuǎn)錄的終止? -類型:問答題-答案: 答: 原核生物中的轉(zhuǎn)錄終止作用概要如下: (1)原核生物中兩種不同的轉(zhuǎn)錄終止機(jī)制:在某一位點(diǎn)不需要其他因子協(xié)助僅依賴于內(nèi)在終止子的
38、終止機(jī)制;依賴于肋因子的終止機(jī)制。 (2)翻譯可通過弱化作用調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄終止,例如發(fā)生在氨基酸生物合成基因的表達(dá)中。前導(dǎo)肽的翻譯可以調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因下游的轉(zhuǎn)錄。這種調(diào)節(jié)的重要性充分體現(xiàn)在氨基酸的生物合成中(例如色氨酸)。原核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄和翻譯是同時(shí)發(fā)生的,正在翻譯的核糖體就像在追趕正在轉(zhuǎn)錄的RNA聚合酶。具有所需氨酰tRNA時(shí),核糖體可將前導(dǎo)序列翻譯成前導(dǎo)肽,而在前導(dǎo)開放讀碼框的終止密碼子處終止翻譯。新生的mRNA自由形成3-4莖環(huán)(完全配對)終止結(jié)構(gòu),所以阻礙了DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶的前進(jìn),結(jié)構(gòu)基因的下游轉(zhuǎn)錄終止,即發(fā)生弱化現(xiàn)象。若某種氨基酸短缺,則會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的氨酰tRNA短缺,核糖體終止在前導(dǎo)可讀
39、 框中所短缺的氨基酸密碼子上。 2-3莖環(huán)形成抗終止子,這一莖環(huán)不是聚合酶的終止信號(hào),它可以防止3-4莖環(huán)的形成,使結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行下去。 (3)在原核生物中、轉(zhuǎn)錄與翻譯是同時(shí)進(jìn)行的,意味著核糖體追趕著DNA指導(dǎo)的 RNA聚合酶。Rho因子是一個(gè)依賴于RNA的ATP水解酶,能夠在轉(zhuǎn)錄過程中將在轉(zhuǎn)錄泡中的RNA-DNA雜合體分開。因此它順著轉(zhuǎn)錄的方向(53)追趕DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶。若核糖體正好妨礙了它的前進(jìn),則依賴于肋因子的終止反應(yīng)不會(huì)發(fā)生。 (4)最為常見的機(jī)制是抗終止(參見噬菌體遺傳學(xué))??菇K止于是一種能識(shí)別終止序列上游抗終止序列(例如噬菌體的nut位點(diǎn))的蛋白質(zhì),它幫助抗終止子所利
40、用的底物(如噬菌體基因表達(dá)中的Nus蛋白)與依賴DNA的RNA聚合酶的相互作用,通讀下游的終止子序列。 -復(fù)制DNA的聚合酶(DNA依賴的DNA聚合酶)也有校正功能,解釋為什么RNA聚合酶沒有這種功能。 -類型:問答題-答案: 答 在DNA水平保持遺傳信息的忠實(shí)性是至關(guān)重要的,因此DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶 具有校正功能是必不可少的。轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與RNA復(fù)制及RNA分子通常半衰期較短,所以轉(zhuǎn)錄中的錯(cuò)誤可以通過具有天然降解活性的RNA酶進(jìn)行修復(fù)。無功能的產(chǎn)物可以被正確的副本所替換。 -討論原核生物基因表達(dá)的聚合作用反應(yīng)定向的重要性。假如核糖體從3端到5端讀它的模板mRNA的話,那么將會(huì)發(fā)生什么情況? -類型:問答題-答案: 答: 原核基因表達(dá)在空間和時(shí)間上是復(fù)雜和高度精細(xì)的過程。為了保持反應(yīng)的自由碰撞,轉(zhuǎn)錄和翻坪的定向是相當(dāng)重要的。同時(shí)發(fā)生在兩條鏈的5 3方向的環(huán)狀DNA的復(fù)制開始減慢,最后停止在特殊的終止序列上。翻譯過程中,核糖體總是追趕著RNA聚合酶。由于mRNA是單鏈分子而且容易被降解,因此翻譯不可能發(fā)生在3 5的方向。 -概括細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄過程。 -類型:問答題-答案:
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