臨床微生物標本采集手冊

1、臨床微生物標本采集手冊*醫(yī)院檢驗科細菌室2008年3月微生物檢查的標本收集原則1.及時采集微生物標本作病原學(xué)檢查。2.采樣時嚴格執(zhí)行無菌操作，將污染情形降至最低。3.在感染的急性期、使用抗生素前或傷口局部治療前收集樣本。4.收集真正感染的病灶處的樣本，且避免鄰近區(qū)域常居菌群的污染。5.采用專用無菌容器收集標本。容器須滅菌處理，防止?jié)B漏，但不得使用消毒劑。標本中不可添加防腐劑。6.選擇正確的解剖部位，并以適當(dāng)?shù)募夹g(shù)、方法與容器收集足量的樣本，盡量不要以棉花拭子收集樣本。7.采樣后立即送檢，最好在2h內(nèi)。為保持微生物活性，棉拭子等標本宜放入恰當(dāng)?shù)倪\送培養(yǎng)基送檢。如不能及時送檢，應(yīng)將標本置于適當(dāng)?shù)膬?/p>

2、存環(huán)境待送，但存放一般不能超過24h。8.混有正常菌群的標本，不可置肉湯培養(yǎng)。9.每份標本都應(yīng)貼上標簽并標明必要信息，在檢驗申請單上填寫足夠的有關(guān)臨床資料。（要標明病區(qū)、病人姓名、住院號、標本來源、采集部位、采集時間等）細菌室對微生物標本拒收的標準與處理方法拒收標準處理方式申請單注明的標本種類與送檢標本不符 與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求審核并重送符合要求的標本。申請單上填寫項目不全或與標本的標簽不符或容器上未貼標簽與原送檢部門聯(lián)系，要求補充完整申請單或重貼標簽或重送標本。檢驗單上未注明樣本來源和培養(yǎng)項目或僅注明身體部位者（如胸、腿） 查詢申請醫(yī)師，補足標本信息。僅有申請單而無標本或無菌容

3、器內(nèi)無標本與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本標本外漏及明顯受污染（如開塞）與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，建議重送標本。標本收集不符合采集要求 退回申請單，及時通知臨床，告知正確收集方法，要求重送標本樣本混入消毒液 或防腐劑退回申請單，及時通知臨床，建議重送標本。送檢延誤，超過要求送檢時限與送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本。標本量過少或已明顯干燥與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本。申請項目不適合如血液培養(yǎng)同時要求涂片革蘭染色，肛門或直腸標本要求做革蘭染色檢查淋球菌。 聯(lián)系申請醫(yī)師，建議刪去請求革蘭染色項目 送檢容器不當(dāng)或破損滲漏與原送檢部門聯(lián)系，退回申請單，要求重送標本。穿

4、刺液標本嚴重凝固，無菌部位標本（如腦脊液、膿、穿刺液、尿液等）為非無菌管采集。退回申請單，并注明標本不當(dāng)，要求重送標本。一支拭子同時做細菌、支原體、衣原體及真菌培養(yǎng) 詢問醫(yī)師并補送標本，如不能補送，則按醫(yī)師要求優(yōu)先次序處理 同一天同一病人重復(fù)送多次同一檢測目的的相同樣本（血液標本除外）一般只檢查一次即可，可與臨床醫(yī)生進行協(xié)商。各類標本儲存的環(huán)境儲存環(huán)境標本來源4冰箱 痰、尿液、糞便、活檢組織、氣管沖洗物、導(dǎo)尿管、心包積液、膿和傷口分泌物等室溫（25） 腦脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、喉、血液培養(yǎng)、血管導(dǎo)管尖、體液 、厭氧菌培養(yǎng)標本細菌室項目檢驗周期表序號檢驗項目標本送達時限標本接收至進行檢驗時

5、間標本接收至出報告時間標本檢驗的周期（標本接收至報告送達時間）1肥達氏反應(yīng)2小時1小時24小時2天2抗O、類風(fēng)濕因子（RF）定性2小時2小時10點以前送檢當(dāng)天下午10點以后送檢第二天下午3普通細菌培養(yǎng)+藥敏（包括尿、痰、腦脊液、分泌物、糞便、咽拭子等）1小時1小時3天4尿普通培養(yǎng)+L型或尿L型培養(yǎng)2小時1小時陽性結(jié)果3天以上，陰性結(jié)果7天5血培養(yǎng)立即1小時陽性結(jié)果3天以上，陰性結(jié)果7天6霍亂弧菌培養(yǎng)立即30分鐘12小時內(nèi)初步報告7淋球菌培養(yǎng)30分鐘30分鐘3天8真菌培養(yǎng)1小時2小時3天后9解脲、人型支原體培養(yǎng)及藥敏1小時2小時2天后10肺炎支原體培養(yǎng)及藥敏1小時2小時4-6天11淋球菌涂片革蘭

6、氏染色法1小時2小時5小時當(dāng)天下午12涂片找抗酸桿菌1小時2小時5小時當(dāng)天下午13新型隱球菌墨汁染色1小時1小時5小時當(dāng)天下午注：1.淋球菌涂片革蘭氏染色、涂片找抗酸桿菌、新型隱球菌墨汁染色只做病房標本并且周六下午、周日不做，門診標本請送到門診化驗室檢驗。2.細菌室正常上班時間為周一至周五全天、周六上午，其他時間（包括中午、夜班、周六下午、周日）常規(guī)培養(yǎng)請與病房值班人員聯(lián)系?？筄、類風(fēng)濕因子（RF）定性、支原體（包括解脲、人型、肺炎支原體）培養(yǎng)、衣原體檢查周六下午、周日休息停做，肥大氏反應(yīng)周六、周日不做。3.空氣培養(yǎng)周六、周日不做，需要培養(yǎng)的請周一至周五送檢。血培養(yǎng)采集操作規(guī)程1 概述當(dāng)微生物

7、侵入血液迅速繁殖超出免疫系統(tǒng)清除這些微生物的能力時形成菌血癥或真菌菌血癥。血液和骨髓的細菌學(xué)培養(yǎng)對菌血癥的診斷具有重要價值。臨床菌血癥按病程可分為一過性菌血癥、間歇性菌血癥、持續(xù)性菌血癥。菌血癥患者多數(shù)為間歇性菌血癥，病原菌周期性出現(xiàn)在血液中，隨之為無細菌時期。不管臨床癥狀經(jīng)歷的嚴重程度，患者血液中病原菌濃度相當(dāng)?shù)?，?jù)此要求臨床多次采集血液標本進行培養(yǎng)，但24h內(nèi)一般不超過3次。血培養(yǎng)常見菌:革蘭陰性菌主要包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、腸桿菌,傷寒沙門菌、綠膿假單胞菌、不動桿菌屬等;革蘭陽性菌主要包括金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、念珠菌屬等。菌血癥是臨床醫(yī)學(xué)急癥,應(yīng)盡快采集血液進行培養(yǎng)。

8、2 物品準備與檢驗申請2.1. 領(lǐng)取專用血培養(yǎng)瓶。請拿檢驗申請單到病房二樓細菌室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。普通血培養(yǎng)領(lǐng)取普通雙相血培養(yǎng)瓶（綠色帽），全自動血培養(yǎng)領(lǐng)取:成人血培養(yǎng)領(lǐng)成人瓶（灰色帽），兒童血培養(yǎng)領(lǐng)兒童瓶（粉紅色帽）。2.2. 填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。3 采集指征一般患者出現(xiàn)以下一種體征時可作為采血的重要指征:發(fā)熱(38) 或低溫(36) ,寒戰(zhàn),白細胞增多(計數(shù)大于10. 0×109/ L

9、,特別有“核左移”時) ,皮膚黏膜出血、昏迷、多器官衰竭,血壓降低,C 反應(yīng)蛋白升高及呼吸加快,血液病患者出現(xiàn)粒細胞減少,血小板減少等,或同時具備上述幾種體征時而臨床可疑菌血癥應(yīng)采集血液培養(yǎng)。新生兒可疑菌血癥,應(yīng)該同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。對入院危重感染患者應(yīng)在未進行抗菌藥物治療之前,及時做血培養(yǎng)。4 采集方法4.1 操作流程: 打開血培養(yǎng)瓶塑料蓋用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞并擦干表面殘余酒精消毒皮膚后用無菌注射器抽取血液從橡皮塞處注入血培養(yǎng)瓶內(nèi)用75%酒精重新消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞并蓋好塑料蓋立即送檢。（全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)的專用培養(yǎng)瓶注入血液后不需再消毒瓶塞，也不用再蓋塑料蓋，直接送檢）4.2 嚴

10、格執(zhí)行規(guī)范的皮膚消毒法，推薦用三步法:(1)用75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上(2)用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s,從穿刺點向外畫圈消毒,至消毒區(qū)域直徑達3cm以上，涂擦穿刺皮膚2遍，待干燥。（3）75%酒精脫碘：用75%酒精由內(nèi)向外方向涂抹去碘酒液 ,待酒精揮發(fā)干燥后采血。4.3 采血量成人采血量是810 ml ,兒童13 ml 。4.4 操作注意事項：（1）從靜脈采血，不建議從動脈采血，在穿刺前或穿刺期間,為防止靜脈滑動,可戴乳膠手套固定靜脈,但不可接觸穿刺點。（2）用注射器無菌穿刺取血后,勿換針頭(如果行第二次穿刺,應(yīng)換針頭) 直接注入消毒后的血培養(yǎng)瓶。（3）血標

11、本接種到培養(yǎng)瓶后,輕輕顛倒混勻以防血液凝固。立即送檢,切勿冷藏?。?）多次采血應(yīng)在不同部位的血管穿刺以排除皮膚菌叢污染的可能。除非無法作靜脈穿刺取血，否則不應(yīng)從留置導(dǎo)管內(nèi)取血。（5）如血培養(yǎng)是通過靜脈植入管采集的，不用棄去起始部分的血液，應(yīng)同時自外周靜脈采集血液進行血培養(yǎng)，以協(xié)助判讀血培養(yǎng)陽性結(jié)果。（6）抽血前應(yīng)將標簽貼于血培養(yǎng)瓶頸上，標簽內(nèi)容包括病人基本信息、采血時間、采血部位。注意不要把標簽貼在培養(yǎng)瓶條形碼上，否則儀器無法識別。4.5 血培養(yǎng)次數(shù)和采血時間采血培養(yǎng)應(yīng)該盡量在使用抗菌藥之前進行,在患者發(fā)熱期間越早越好，以發(fā)熱高峰前1h內(nèi)或病人寒戰(zhàn)和發(fā)熱開始時采集為宜。在30-60分鐘內(nèi)或同時

12、于不同部位采集23 份血培養(yǎng)(一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng)) ；除非懷疑有感染性心內(nèi)膜炎或其他靜脈內(nèi)感染如導(dǎo)管相關(guān)性感染時，才可分開時段采集。24h內(nèi)采血一般不超過3次。在采取血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)，不需要再重復(fù)采取血培養(yǎng)，因為進行治療后的2-5天血液中的感染細菌不會馬上消失。特殊的全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議: (1) 可疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、急性腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎、細菌性肺炎、腎盂腎炎發(fā)熱患者,應(yīng)在不同部位（如兩臂）采集23 份血標本（應(yīng)在抗生素治療前完成）。(2)不明原因發(fā)熱,如隱性膿腫,傷寒熱和波浪熱,第1天內(nèi)相隔1h在不同部位連續(xù)采集23 份血標本

13、,當(dāng)培養(yǎng)2448h后若為陰性，應(yīng)再采集2-3份血培養(yǎng)。(3)可疑菌血癥或真菌菌血癥,但血培養(yǎng)持續(xù)陰性,應(yīng)改變血培養(yǎng)方法,以獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物。(4)可疑細菌性心內(nèi)膜炎：急性病例，在抗生素治療或改變前12h內(nèi)從不同部位采集3份血標本；亞急性病例，第1天24h內(nèi)相隔1h連續(xù)采集3次血標本，若2448h全部陰性，再采集23次血標本；若已經(jīng)抗生素治療患者，連續(xù)3天，每天取2次血標本。嬰幼兒血培養(yǎng)采集要求：(1)采血量不能超過全血量的1%。（2）一般只抽一瓶需氧瓶進行培養(yǎng)，無需常規(guī)做厭氧瓶。5 標本運送和驗收 采血后應(yīng)該立即送檢,如不能立即送檢,需室溫保存,切勿冷藏。5.2 血培養(yǎng)瓶驗收: (1)

14、 檢查培養(yǎng)瓶是否有滲漏、破裂或明顯污染。(2)檢查瓶子上的標簽與申請單是否相符。(3)檢查血液標本是否適量，血液是否凝固。 不合格血培養(yǎng)標本的處理: (1)拒收培養(yǎng)瓶:血培養(yǎng)瓶標識與化驗申請單不符,培養(yǎng)瓶破裂或明顯污染，血液凝固的培養(yǎng)瓶。處理方法:立即與臨床醫(yī)師聯(lián)系,報告拒收的具體理由。(2)補做培養(yǎng)瓶:血標本采集后放置12h以上(手工法除外),用不適當(dāng)類型的培養(yǎng)瓶收集標本,用過期的培養(yǎng)瓶收集標本,采血量不足等。處理方法:立即與臨床醫(yī)師聯(lián)系,報告標本不合格的具體理由,建議補做血培養(yǎng)。附 細菌室雜項采樣須知抗鏈球菌溶血素O（ASO）、類風(fēng)濕因子（RF）定性檢測、肥達氏反應(yīng)試驗：均抽血3ml，置于

15、普通試管（紅色帽）中送檢。ASO與RF定性可與其他實驗室共用標本?？顾崛旧?、墨汁染色及薄膜試驗可與常規(guī)培養(yǎng)共用一份標本（拭子標本需單獨取一份）尿培養(yǎng)采集操作規(guī)程1概述尿路感染是指尿道內(nèi)有大量微生物繁殖而引起的尿路炎癥。尿路感染并非是一種單一的疾病，而是一種臨床綜合征。尿液的細菌學(xué)檢查對于尿路感染的診斷具有重要價值。正常人體內(nèi)的尿液是無菌的，而外尿道有正常菌群寄居。尿液經(jīng)尿道排出時受到尿道中細菌的污染而混有細菌，但細菌數(shù)不超過103cfu/ml?；加忻谀蛳蹈腥緯r，尿中的菌數(shù)高于104105cfu/ml,因而可以此界限作為診斷泌尿系感染的依據(jù)。2物品準備與檢驗申請2.1領(lǐng)取無菌試管。請拿檢驗申請單

16、到病房二樓細菌室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。注意：未留標本之前不要打開試管帽！2.2填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。3 采集指征有下列體征之一者，應(yīng)進行尿培養(yǎng)：（1）有典型的尿路感染癥狀；（2）肉眼膿尿或血尿；（3）尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細胞或亞硝酸鹽陽性；（4）不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；（5）留置導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱；（6）膀胱排空功能受損；（7）泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。4 采集方法標本采集應(yīng)力爭在未使用抗生素之前或停用抗

17、菌藥5d后留取尿液，注意避免消毒劑污染標本。采集方法有：（1）清潔中段尿法：是最常用的方法。最好留取早晨清潔中段尿標本，囑咐患者睡前少飲水，清晨起床后用肥皂水清洗會陰部，女性應(yīng)用手分開大陰唇，男性應(yīng)翻上包皮，仔細清洗，再用清水沖洗尿道口周圍；開始排尿，將前段尿排去，中段尿約510 ml直接排入專用的無菌試管中，不少于1ml，立即送檢。嬰兒消毒其陰部后，將無菌小瓶直接對準尿道口以橡皮膏貼于皮膚上，待排尿后立即送檢。該方法簡單、易行，但易受到會陰部細菌污染，注意正確采集。 （2）恥骨上膀胱穿刺法：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細菌感染的“ 金標準”方法，尤其做厭

18、氧菌檢查時必須采用膀胱穿刺法。但本法有一定的痛苦，患者難以接受。穿刺時膀胱應(yīng)充盈，皮膚嚴格消毒后用裝有19或20號針頭的注射器在恥骨聯(lián)合距臍1/3處穿刺。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標本困難的嬰兒尿標本的采集。（3）直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液，一般插入導(dǎo)管后先讓尿流15ml再留取培養(yǎng)標本。本法極易將下尿道細菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。禁止把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后收集尿液。（4）小兒收集包：對于無自控能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應(yīng)

19、結(jié)合臨床進行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M行復(fù)檢。（5）留置導(dǎo)尿管收集尿液：應(yīng)先消毒導(dǎo)尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導(dǎo)尿管吸取5-10ml尿液，置于無菌試管中送檢。操作時應(yīng)防止混入消毒劑，注意不能從尿液收集袋中采集尿液，導(dǎo)尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng)。本法中滯留導(dǎo)管會使膀胱帶有細菌，盡可能不采用。5 標本運送和驗收5.1 標本采集后后應(yīng)該立即送檢,如不能立即送檢,室溫保存時間不得超過2h，4保存不超過24h。規(guī)定每日1次。5.2申請單驗收：要求尿培養(yǎng)申請單除患者的基本信息以外還應(yīng)包括標本收集時間、收集方式、是否已使用抗生素等，驗收時應(yīng)檢查申請單是否填寫完整。 標本驗收

20、：（1）檢查標本標識是否與申請單相符；（2）檢查標本容器有無溢漏、滲出，是否加蓋；（3）檢查送檢時間是否超過規(guī)定的標本保存時間。 不合格標本處理:（1）對申請單信息不全者應(yīng)設(shè)法與臨床醫(yī)師取得聯(lián)系；（2）對標識不符、送檢容器不合格、送檢時間超過規(guī)定時間的標本應(yīng)注明原因，退回，要求重新留取標本，并做記錄。（3）標本離心鏡檢，凡有較多鱗狀上皮，膿細胞較少而細菌較多的或有大量尿結(jié)晶析出的均為不合格標本，應(yīng)拒收。痰及下呼吸道標本采集操作規(guī)程1概述臨床通常將正常人喉以上部位稱之為上呼吸道，上呼吸道定植有大量的正常菌群，而氣管以下包括氣管、支氣管和肺泡稱下呼吸道，通常無菌。下呼吸道分泌物經(jīng)過上呼吸道排出時常

21、受該處的正常菌群的污染。下呼吸道感染包括急性氣管-支氣管炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作、支氣管擴張繼發(fā)感染及肺實質(zhì)感染（肺炎、肺膿腫）等。病原體有細菌、病毒、衣原體、支原體、真菌、立克次體和原蟲等。上呼吸道感染臨床診斷一般不難。細菌學(xué)檢驗?zāi)苊鞔_感染病原及藥敏結(jié)果，有助于疾病治療、流行病學(xué)調(diào)查和醫(yī)院感染的監(jiān)測。2物品準備與申請2.1領(lǐng)取清潔痰盒，推薦到采購辦領(lǐng)取專門痰盒。請拿檢驗申請單到病房二樓細菌室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。2.2填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床

22、診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。3 采集指征痰液標本是臨床微生物學(xué)檢驗最常見的的標本，但不是下呼吸道感染的最佳標本。有下列體征之一，應(yīng)進行痰培養(yǎng)：（1）咳嗽 咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常見的癥狀。（2）咯血包括泡沫血痰、鮮血和痰中帶血等。（3）呼吸困難呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛。（4）發(fā)熱伴白細胞增高尤其是中性粒細胞或CRP明顯增高。（5）胸部影像學(xué)檢查提示有感染可能。4 采集方法4.1 自然咳痰法以晨痰為佳，采集標本前應(yīng)用清水、冷開水漱口或用牙刷（不用牙膏）清潔口腔和牙齒，有假牙者應(yīng)取下假牙。盡可能在用抗菌藥物之前采集標本。用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入痰盒中，標本量應(yīng)1ml。咳痰困

23、難者可用霧化吸入加溫至45°C的10% NaCl水溶液，使痰液易于排出。對難于自然咳痰患者可用無菌吸痰管抽取氣管深部分泌物。4.2 支氣管鏡采集法、防污染毛刷采集法、環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引法、經(jīng)胸壁針穿刺吸引法和支氣管肺泡灌洗法，均由臨床醫(yī)生按相應(yīng)操作規(guī)程采集，但必須注意采集標本時盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。其中氣管穿刺法僅用于昏迷患者。4.3 小兒取痰法用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳痰時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。5 標本運送和驗收5.1 標本應(yīng)盡快送檢，不能及時送檢的標本，室溫保存2h，4冰箱保存24h

24、。規(guī)定每日1次。5.2 下呼吸道細菌學(xué)檢驗標本驗收與拒收見下：（1）呼吸道有大量的正常菌群存在，咽拭子、咳痰、吸出的分泌物厭氧菌培養(yǎng)無意義。（2）申請單填寫應(yīng)完整無誤。標本標識必須唯一，并與申請單相符，未標采集時間、部位或檢驗要求等拒收。（3）痰標本呈水樣或唾液樣，有明顯食物殘渣、灰塵紙屑者拒收。（4）涂片白細胞和鱗狀上皮細胞計數(shù)：白細胞10低倍鏡或鱗狀上皮細胞25低倍鏡，表示該標本已污染正常菌群，建議重送標本。（5）送檢時間超過2h拒收。（6）同時同部位或同一天兩份相同檢測的標本，應(yīng)與申請醫(yī)生協(xié)商處理。糞便標本采集操作規(guī)程1概述急性感染性腹瀉可以由細菌、病毒及原蟲引起，實驗室常規(guī)檢查是細菌培

25、養(yǎng)。沙門氏菌、志賀氏菌、鄰單胞菌和氣單胞菌應(yīng)作為實驗室常規(guī)培養(yǎng)的主要腹瀉病原菌。住院3天以上發(fā)生腹瀉的患者進行常規(guī)培養(yǎng)意義不大，秋冬季，兒童(2歲以內(nèi))腹瀉多以病毒性腸炎為主，應(yīng)在腹瀉病毒篩選陰性之后，再考慮做細菌培養(yǎng)。2物品準備與申請2.1領(lǐng)取清潔便盒。請拿檢驗申請單到病房二樓細菌室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。2.2填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。3 采集指征當(dāng)腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時建議采集糞便標本，進行細菌培養(yǎng)

26、：（1）糞便涂片鏡檢白細胞5個/HP；（2）重癥腹瀉；（3）體溫大于；（4）血便；（5）便中有膿液；（6）未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉患者；（7）來自疫區(qū)的患者。4 采集方法標本采集盡可能在發(fā)病早期和應(yīng)用抗菌藥物治療之前。在不同的時間采集23份標本可以提高致病菌的分離率。方法有:4.1 自然排便法直接留置糞便標本于清潔、干燥廣口容器中送檢。本法為常規(guī)方法。注意若有膿血、粘液、組織碎片，則取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便23g，液體糞便則取絮狀物，一般取13ml。4.2 直腸拭子法 用無菌拭子插入肛門2-4cm，輕輕旋轉(zhuǎn)拭子，可在拭子上明顯見到糞便，插入運送培養(yǎng)基內(nèi)，立即送檢。本法只適用于排便

27、困難患者或嬰幼兒，不推薦使用拭子做常規(guī)性病原菌培養(yǎng)。5 標本運送和驗收5.1 標本應(yīng)盡快送檢，不能及時送檢的標本，室溫保存2h。如采便后2h內(nèi)未培養(yǎng),標本應(yīng)放入運送培養(yǎng)基如Cary -Blair運送培養(yǎng)基中4冰箱保存，一般可保存24h。5.2 糞便標本驗收與拒收程序：采用一次性無菌杯（盒）,杯（盒）蓋嚴密，無明顯灰塵紙屑，留取時間符合要求者為合格標本。否者為不合格標本應(yīng)拒收。當(dāng)懷疑沙門菌、志賀菌、彎曲菌以外的細菌引起的腹瀉時，臨床醫(yī)生必須通知實驗室，因為分離弧菌、耶爾森菌、氣單胞菌、大腸埃希菌O157：H7需要特殊的實驗程序和培養(yǎng)基。糞便標本一般不做厭氧培養(yǎng)。 腦脊液標本采集操作規(guī)程1概述正常

28、人體腦脊液是無菌的。當(dāng)人體患有腦脊髓膜炎癥時，在腦脊液中可以出現(xiàn)病原菌。常見的病原菌有細菌、真菌、結(jié)核分枝桿菌等。做腦脊液的細菌培養(yǎng)有助于診斷腦膜炎病因。2物品準備與申請2.1領(lǐng)取無菌試管。請拿檢驗申請單到病房二樓細菌室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。2.2填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。3 采集指征有腦膜炎癥狀，臨床懷疑有腦膜炎感染，應(yīng)進行細菌培養(yǎng)。4 采集方法病人應(yīng)先禁食，由醫(yī)師以無菌手續(xù)在病人第3和第4腰椎間隙或稍低處穿

29、刺取得，小兒則于第4和第5腰椎間隙穿刺，必須裝入戴帽(蓋)的無菌容器，立即送檢。5 標本運送和驗收5.1 標本采集后應(yīng)置于無菌試管內(nèi)盡快送檢，絕不可冷藏！每種檢驗需要最小量：細菌培養(yǎng)lml，真菌2ml，抗酸桿菌2ml。：標本未收集于無菌管或送檢延誤或冷藏保存，則拒收標本，通知臨床要求重新采集標本。無菌體液標本采集操作規(guī)程1概述無菌體液是指除血液、骨髓和腦脊液外的羊膜腔液、后穹窿穿刺液、透析液、心包液、腹膜穿刺液和滑膜液，正常的穿刺液是無菌的，在感染的情況下，只要檢出細菌，通常都可視為病原菌。2物品準備與申請2.1領(lǐng)取無菌試管或血培養(yǎng)瓶。請拿檢驗申請單到病房二樓細菌室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上

30、午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。2.2填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。2 采集指征局部組織或器官懷疑有細菌感染，應(yīng)進行細菌培養(yǎng)。4 采集方法由臨床醫(yī)生按相應(yīng)規(guī)程無菌采取適量標本送檢。當(dāng)留取標本時，為防止無菌體液凝固，應(yīng)在無菌容器內(nèi)先加入滅菌肝素0.5mg（可抗凝5ml標本），再注入各種穿刺液，輕輕混合。5 標本運送和驗收5.1 標本采集后應(yīng)置于無菌試管內(nèi)盡快送檢。5.2標本驗收與拒收:未置于無菌容器內(nèi)或未及時送檢者應(yīng)拒收。眼、耳、鼻、喉標本采集操作規(guī)程1

31、概述正常人的中耳及鼻竇內(nèi)是無菌的。健康人的咽峽部有口腔的正常菌群。做細菌培養(yǎng)有助于明確感染病原菌。鼻咽部標本有助于診斷百日咳、白喉和衣原體感染，以及識別出腦膜炎奈瑟菌或金黃色葡萄球菌的攜帶者，但不能用于中耳炎、鼻竇炎的診斷。2物品準備與申請2.1領(lǐng)取無菌試管。請拿檢驗申請單到病房二樓細菌室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。2.2填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。3 采集指征局部有炎癥癥狀或懷疑有細菌感染，應(yīng)進行細菌培養(yǎng)。4 采集方

32、法 眼結(jié)膜標本 預(yù)先沾濕拭子，在結(jié)膜上滾動采集標本。標本在15min內(nèi)送達實驗室。4.2 眼角膜標本 在麻醉下，用刮勺在潰瘍或創(chuàng)傷邊緣刮取碎屑，立即送檢。眼部感染所獲得的標本量很少，建議醫(yī)師取樣后直接接種在培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。4.3 口咽部標本 先用一個拭子揩去潰瘍或創(chuàng)面表淺分泌物，第二個拭子采集潰瘍邊緣或底部，常規(guī)培養(yǎng)2h送檢。4.4 患有外耳炎者，需要深部拭子，因為淺表拭子可能遺漏鏈球菌引起的蜂窩織炎。4.5 鼻標本 用一根無菌棉拭子伸進一側(cè)鼻孔約，與鼻黏膜接觸，輕輕旋轉(zhuǎn)拭子，蘸取黏膜上分泌物，緩慢取出，直接送檢。4.6 注意事項:（1）眼、耳、鼻、喉標本采集后應(yīng)立即送檢，防止干燥，禁止冷藏

33、。（2）應(yīng)注明標本來源如眼標本注明是眼瞼、結(jié)膜還是角膜等，并注明左眼還是右眼。結(jié)膜標本最好取雙眼、雙份，每眼取一份用于培養(yǎng)，一份做革蘭染色。（3）不建議用鼻咽拭子標本做常規(guī)細菌培養(yǎng)。（4）眼、耳、鼻、喉拭子標本一般不能做厭氧培養(yǎng)。5 標本運送和驗收5.1 標本采集后應(yīng)置于無菌試管內(nèi)盡快送檢，不超過 2h送至實驗室。：標本送檢時間過長或未置于無菌容器內(nèi)，標本有污染者應(yīng)拒收。膿液標本采集操作規(guī)程1概述組織或器官的化膿性感染，其病原菌的來源可分為兩類：內(nèi)源性（感染源是炎癥局部周圍器官中的正常菌群）和外源性（感染源是存在于外界的微生物）.2物品準備與申請2.1領(lǐng)取無菌試管。請拿檢驗申請單到病房二樓細菌

34、室登記領(lǐng)取。細菌室周一到周六上午正常上班。其他時間如中午、夜班、節(jié)假日請到生化室聯(lián)系。2.2填寫檢驗申請單。用鋼筆填寫，字跡清楚，填寫完整。填寫內(nèi)容包括：患者姓名、性別、年齡、科別、病區(qū)、床號、住院號、臨床診斷、送檢目的、申請醫(yī)生及送檢時間。3 采集指征局部組織或器官有化膿性感染表現(xiàn)，應(yīng)進行細菌培養(yǎng)。4 采集方法 開放膿腫 用無菌鹽水或70酒精擦去表面滲出物，用拭子深入潰瘍基底部或邊緣部，采集兩個拭子，分別做培養(yǎng)和革蘭染色，也可對滲出物做需氧培養(yǎng)。開放病灶不能做厭氧培養(yǎng)。4.2 閉鎖膿腫 不能用拭子，要消毒膿腫表面皮膚后用無菌注射器抽取，刺入無菌橡皮塞中送檢。4.3 燒傷傷口 清創(chuàng)，出現(xiàn)滲出物后用拭子用力采集，僅做需氧培養(yǎng)。也可送組織標本。4.4 膿皰或水皰 酒精消毒，干燥，用針頭（小兒用23號針頭）挑破膿皰，用拭子采集膿皰液和基底部標本。4.5 注意事項：對大多數(shù)開放傷口，采集前應(yīng)先清創(chuàng)，去除表面菌群。除非有滲出物，干燥、結(jié)痂傷口一般不做培養(yǎng)。閉合膿腫應(yīng)取穿刺物和膿腫壁標本。開放膿腫處理同開放傷口。不要僅僅送檢膿液，應(yīng)在病灶活動區(qū)域或基底部采集標本，最好是組織標本。5 標本運送和驗收5.1 標本采集后應(yīng)盡快送檢，如果在1h內(nèi)不能培養(yǎng)，應(yīng)將標本冷藏。:標本拭子未裝入無菌容器內(nèi)或注射器滲漏污染者，送檢時間過長者應(yīng)拒收。標本涂片革蘭染