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1、 廣州血液中心血型研究室 羅廣平 輸血前檢查的目的 選擇用于患者的血液或血液制品,使輸入的成分能在受者體內(nèi)有效存活,無(wú)不良反應(yīng)。要求要求輸入的紅細(xì)胞在受者體內(nèi)必須不凝集和不溶血,輸入的血漿不導(dǎo)致患者自身紅細(xì)胞顯著破壞。 輸血前的血型血清學(xué)試驗(yàn)包括:lABO血型正反定型lRh(D)定型l抗體篩檢和鑒定l交叉配合試驗(yàn) 試驗(yàn)項(xiàng)目 單項(xiàng)配合率 累積配合率 不做任何試驗(yàn) 644% 644% ABO定型 350% 994% Rh定型 04% 998% 抗體篩選 014% 9994% 交叉配血 001% 9995% 自身輸血 100% 100%l患者的病史和標(biāo)本等的檢查核對(duì)及處理l ABO和Rh(D)定型l

2、 抗體篩選和鑒定l 交叉配血試驗(yàn)l 已配合血液的標(biāo)簽與發(fā)出1病史資料和信息 l 輸血前檢查強(qiáng)調(diào)輸血科(血庫(kù))工作人員應(yīng)仔細(xì)閱讀輸血申請(qǐng)單 。l檢查前應(yīng)盡可能了解,核對(duì)病人的有關(guān)資料,包括病人的姓名,年齡,床號(hào)、住院號(hào)及唯一性標(biāo)識(shí)碼,性別,種族,臨床診斷,輸血史,藥物史,妊娠史。l凡資料填寫不全的輸血申請(qǐng)單要退回臨床科室補(bǔ)充,不得遷就,也不能通過(guò)電話修改。 1病史資料和信息 l如果病人以前有過(guò)試驗(yàn),則要注意核查病人以前檢查的血清學(xué)試驗(yàn)記錄及以往輸血反應(yīng)的記錄等。把以前的ABO、Rh血型和抗體檢測(cè)的解釋同現(xiàn)在的解釋及任何異常情況的解答進(jìn)行比較。l如既往曾經(jīng)檢出某種血型抗體,即使目前該抗體檢測(cè)陰性,

3、也應(yīng)選擇無(wú)相關(guān)抗原的血液輸注。 2標(biāo)本的要求u 標(biāo)本必須有正確的標(biāo)簽。如果標(biāo)本標(biāo)簽上的內(nèi)容與血液申請(qǐng)單上的內(nèi)容不一致或?qū)Σ∪松矸荽_認(rèn)有疑問(wèn)的話,必須重抽一份新的血液標(biāo)本,任何人不得對(duì)錯(cuò)誤的標(biāo)簽進(jìn)行修改。 u所用血標(biāo)本能代表患者當(dāng)前的免疫學(xué)狀態(tài)。輸血前檢查的各項(xiàng)試驗(yàn)必須使用3天內(nèi)采集的血標(biāo)本,反復(fù)輸血的患者更應(yīng)注意抽取新的標(biāo)本作配血試驗(yàn),避免因回憶反應(yīng)而產(chǎn)生的抗體漏檢。2標(biāo)本的要求l要防止血樣的稀釋和溶血的產(chǎn)生,溶血的標(biāo)本一般不能使用,原因是溶血標(biāo)本的游離血紅蛋白可以掩蓋抗原抗體反應(yīng)引起的溶血現(xiàn)象,對(duì)試驗(yàn)結(jié)果判斷造成干擾。l輸血后所有的標(biāo)本均應(yīng)妥善保存于28冰箱中,至少一周。 (1)沒(méi)有輸血申請(qǐng)

4、單或輸血申請(qǐng)單資料填寫不全,不能采集血標(biāo)本。 (2)采集血標(biāo)本者必須核對(duì)輸血申請(qǐng)單上提供的病人姓名、性別、床號(hào)、住院號(hào)及唯一性標(biāo)識(shí)碼與實(shí)際病人是否一致。如果二者不一致,則不能抽血。 (3)血標(biāo)本采集者在離開(kāi)病人床邊之前必須在試管上貼上標(biāo)明病人姓名、住院號(hào)、床號(hào)、唯一性標(biāo)識(shí)碼及抽標(biāo)本曰期的標(biāo)簽;抽血者應(yīng)在標(biāo)簽上簽名,以示負(fù)責(zé) 。(4)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員必須確認(rèn)盛血試管上的標(biāo)簽內(nèi)容與輸血申請(qǐng)單上的資料一致。如果對(duì)病人身份確認(rèn)有疑問(wèn),必須重新抽取標(biāo)本,不允許經(jīng)電話詢問(wèn)后就涂改錯(cuò)誤的標(biāo)簽或錯(cuò)誤的申請(qǐng)單。 (5)實(shí)驗(yàn)室拒收沒(méi)有標(biāo)簽的標(biāo)本。 (6) 加強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)意識(shí)培訓(xùn)教育。l各血型系中,以A、B抗原性最強(qiáng),Rh

5、(D)抗原次之,當(dāng)受者接受了所缺少的A、B抗原后,幾乎每個(gè)人都 會(huì)產(chǎn)生特異性同種抗體。l大約有2/3的Rh(D)陰性的人,接受Rh(D)陽(yáng)性血液后可產(chǎn)生抗D抗體。l經(jīng) 一次 妊娠Rh(+)的胎兒后,大約7%的Rh(-)婦女在6個(gè)月內(nèi)血清學(xué)可測(cè)到抗D。l這些抗體是造成溶血性輸血反應(yīng)的主要原因。因此,每個(gè)病人和供血者除作A、B抗原定型外,最好還作Rh(D)抗原定型,然后選擇合適的(同型或相容)獻(xiàn)血者血液。l如對(duì)血型定型結(jié)果有疑問(wèn),必須在輸血前妥善解決,否則在輸血時(shí)很難選到相合的血液。 1、技術(shù)和管理錯(cuò)誤這是ABO定型試驗(yàn)中產(chǎn)生異常結(jié)果的主要原因,包括:(1)標(biāo)本或試劑搞錯(cuò),造成假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。

6、(2)器材不潔產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。(3)試劑污染或失效產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。(4)離心過(guò)度或不足,產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。(5)陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)生溶血現(xiàn)象未能識(shí)別,導(dǎo)致假陰性結(jié)果。(6)漏加試劑,產(chǎn)生假陰性結(jié)果。(7)結(jié)果記錄或判斷錯(cuò)誤,產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。(8)細(xì)胞與血清比例不適當(dāng),產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。 2、血清異常 華通氏膠或血清蛋白異常引起串錢狀形成,影響反定型結(jié)果。3、紅細(xì)胞致敏 在含高蛋白介質(zhì)的試劑中可發(fā)生凝集,產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。4、異?;蛐?ABO亞型的弱抗原難以檢出,產(chǎn)生假陰性結(jié)果。5、近期輸血 曾異型輸血,使病人血液標(biāo)本成為不同型別的紅細(xì)胞混合物,定型時(shí)顯示“混合外觀凝集”現(xiàn)象

7、。 6、嵌合體血型 體內(nèi)有兩群紅細(xì)胞,定型時(shí)顯示“混合外觀凝集”現(xiàn)象。7、疾病因素導(dǎo)致抗原減弱 某些白血病病人ABO血型抗原可受到抑制,檢出困難。8、紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象 紅細(xì)胞因遺傳或獲得性的表面異常,發(fā)生多凝集現(xiàn)象。9、獲得性類B 由于革蘭氏陰性桿菌的作用,紅細(xì)胞可獲得“類B”的活性。10、近期內(nèi)進(jìn)行大量的血漿置換治療,影響抗體效價(jià),造成反定型困難。11、異常的血漿蛋白 病人血漿中異常的白蛋白、球蛋白比例和高濃度的纖維蛋白原等能導(dǎo)致緡錢狀形成,造成假凝集現(xiàn)象。12、不規(guī)則抗體的存在 受檢者血漿中,含有ABO血型抗體以外的不規(guī)則抗體,與試劑A、B細(xì)胞上的相應(yīng)抗原起反應(yīng)。13、低丙種球蛋白血癥 低

8、丙種球蛋白血癥病例,可能會(huì)因免疫球蛋白水平全面下降使血清定型時(shí)不見(jiàn)凝集或僅見(jiàn)弱凝集反應(yīng)。14、藥物等因素 藥物、右旋糖酐及靜脈注射某些造影劑可引起紅細(xì)胞聚集而類似凝集。 15、年齡因素 在未產(chǎn)生自己抗體的嬰兒、由母親被動(dòng)獲得抗體的嬰兒,或抗體水平下降的老人,試驗(yàn)時(shí)可出現(xiàn)異常結(jié)果。 lRh定型主要鑒定D抗原,定型時(shí)應(yīng)按抗D血清試劑的使用說(shuō)明進(jìn)行,并注意設(shè)立對(duì)照試驗(yàn)系統(tǒng)。lDu型的鑒定及意義 l只有病人有抗D以外的抗體時(shí)才有必要確定獻(xiàn)血者Rh(D)以外的抗原,選擇抗體對(duì)應(yīng)的陰性抗原血液和病人配血,可避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。 Rh血型系統(tǒng)的抗體及其臨床意義1 Rh抗體的免疫球蛋白性質(zhì):大部分Rh抗

9、體屬IgG,主要為IgG1和IgG3亞類,部分屬IgG2和IgG4。免疫反應(yīng)初期,抗體以IgM+IgG混合出現(xiàn),以IgM為主。以后IgM消失,以IgG抗體為主。 Rh血型系統(tǒng)的抗體及其臨床意義2 Rh抗體的產(chǎn)生:主要途徑有兩個(gè)l通過(guò)Rh血型異型輸血免疫產(chǎn)生。l通過(guò)母嬰Rh血型不合的妊娠免疫而產(chǎn)生。 3常見(jiàn)的Rh抗體和抗體混合物:除抗D外,常見(jiàn)的Rh抗體還有:抗E,抗C,抗c,抗e,抗Ce,抗cE,抗ce,抗CE等。 4Rh抗體的臨床意義: 受血者血漿中如含有Rh抗體,在輸入含相應(yīng)抗原的血液后,將引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)。IgG類的Rh抗體由于能通過(guò)胎盤,從而破壞胎兒有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞,引起新生

10、兒溶血病。因此,Rh抗體具有十分重要的臨床意義。3導(dǎo)致導(dǎo)致Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因:血型鑒定可能出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因:(1)受檢細(xì)胞已被免疫球蛋白致敏,或標(biāo)本血清中含有引起紅細(xì)胞凝集的因子。(2)受檢細(xì)胞與抗血清孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng),含高蛋白的定型試劑會(huì)引起串錢狀形成。(3)標(biāo)本抗凝不當(dāng),受檢過(guò)程中出現(xiàn)凝血或不的纖維蛋白凝塊,誤判為陽(yáng)性。(4)定型血清中含有事先未被檢測(cè)的其它特異性抗體,造成假陽(yáng)性定型結(jié)果。(5)多凝集細(xì)胞造成定型的假陽(yáng)性。 (6)檢定用器材或抗血清被污染,造成假陽(yáng)性。 4導(dǎo)致導(dǎo)致Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陰性的原因:血型鑒定可能出現(xiàn)假陰性的原因:(1)受檢細(xì)胞懸液濃度太高,與抗血清比

11、例失調(diào)。(2)漏加或錯(cuò)加定型血清。(3)定型血清的使用方法錯(cuò)誤,沒(méi)有按說(shuō)明書進(jìn)行。(4)離心后重懸細(xì)胞扣時(shí),搖動(dòng)用力時(shí)度,搖散微弱的凝集??寡寤蛎溉芤罕4娌划?dāng),導(dǎo)致失效 。l目的是發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體,獻(xiàn)血者血清最好也作不規(guī)則抗體篩選,如發(fā)現(xiàn)有不規(guī)則抗體就將它排除,不可用于輸血,特別是大量輸血時(shí),為了避免輸入血液相互間的反應(yīng),對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行抗體篩選具有重要價(jià)值。 l抗體篩選試驗(yàn)意義:歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家的血庫(kù)已將抗體篩選試驗(yàn)列為輸血前檢驗(yàn)的常規(guī)項(xiàng)目,在交叉配血試驗(yàn)前完成或同時(shí)進(jìn)行。當(dāng)抗體篩選試驗(yàn)為陰性,且以往的記錄未檢出有臨床意義的抗體時(shí),可用鹽水法快速配血,確認(rèn)ABO血型相容即可輸血。如抗體

12、篩選試驗(yàn)陽(yáng)性,應(yīng)進(jìn)一步作抗體鑒定,根據(jù)所鑒定出的抗體特異性事先選擇缺乏對(duì)應(yīng)抗原的獻(xiàn)血者血液配血,以縮短尋找合適血源及配血時(shí)間。l所謂不規(guī)則抗體是指抗A,抗B以外的血型抗體。l取決于被檢個(gè)體(獻(xiàn)血者或病人)的血型和用于檢查的技術(shù),大約有0.3%2%的群體血清中含有同種抗體。l對(duì)外來(lái)紅細(xì)胞抗原的免疫可能由妊娠、輸血或故意注射免疫物質(zhì)而引起。l 抗體篩選試驗(yàn)的原則是用受檢的血清與特殊的試劑紅細(xì)胞篩選紅細(xì)胞在不同的介質(zhì)中起反應(yīng),以發(fā)現(xiàn)在37中有反應(yīng)活性的抗體。l常使的試驗(yàn)方法有鹽水介質(zhì)試驗(yàn)法、低離子強(qiáng)度介質(zhì)法(LISS)、酶技術(shù)、抗球蛋白試驗(yàn)、Polybrene及其改良法、微柱凝膠技術(shù)等等,可按抗體的

13、血清學(xué)行為和試驗(yàn)的具體條件選擇,但必須做抗球蛋白試驗(yàn)確證。 (一)、篩選細(xì)胞的組成(一)、篩選細(xì)胞的組成 通常是以通常是以23個(gè)單人份的個(gè)單人份的O型紅細(xì)胞組成一套篩選型紅細(xì)胞組成一套篩選細(xì)胞試劑,包括以下常見(jiàn)的抗原:細(xì)胞試劑,包括以下常見(jiàn)的抗原:D,C,E,c,e,M,N,S,s,P,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb(二)、抗體鑒定(二)、抗體鑒定 抗體篩選試驗(yàn)陽(yáng)性,應(yīng)作抗體鑒定試驗(yàn),以確定抗體篩選試驗(yàn)陽(yáng)性,應(yīng)作抗體鑒定試驗(yàn),以確定其特異其特異性。性。 l交叉配血試驗(yàn)也稱配合性試驗(yàn),實(shí)際上是檢查不配合性,使病人,獻(xiàn)血者血液之間沒(méi)有可測(cè)到的不相配合的抗原,抗體成份。l交叉

14、配血應(yīng)在37孵育,除作鹽水介質(zhì)法配血外,還應(yīng)選用酶法、抗球蛋白試驗(yàn)法、Polybrene 或其改良法等能有效檢出不完全抗體的配血方法。(1)大多數(shù)情況下能證實(shí)獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞與病人的ABO血型是配合的。(2)能檢查出存在于病人血清中的針對(duì)獻(xiàn)血者紅細(xì)胞的大多數(shù)抗體。 (3)有無(wú)工作上的差錯(cuò)事故(如認(rèn)錯(cuò)病人,拿錯(cuò)血袋等)。 (1)保證輸入的紅細(xì)胞有正常存活率。(2)防止病人的免疫作用。(3)從病人的血清中檢出所有紅細(xì)胞抗體。(4)防止由于針對(duì)獻(xiàn)血者抗原而發(fā)生的記憶性抗體應(yīng)答引起的遲延性溶血性反應(yīng)。病人以前就有此種抗體但未能查出這種免疫作用。(5)檢查出獻(xiàn)血者或病人中所有的ABO血型錯(cuò)誤。(6)檢查出

15、獻(xiàn)血者或病人中所有的Rh血型錯(cuò)誤。 (7)檢出對(duì)紅細(xì)胞以外的抗體(如血小板、白細(xì)胞、血清蛋白抗體等)。 用血申請(qǐng)單一定要注明輸血的理由,以便血庫(kù)技術(shù)人員能選擇最合適的血液進(jìn)行配合性試驗(yàn),患者輸注的血液必須認(rèn)真地加以選擇,以適應(yīng)每個(gè)不同患者的要求(原則是ABO、Rh(D)同型或相容性輸血)。按照庫(kù)存血“先入先出”的管理原則,一般來(lái)說(shuō),首先用較陳的血,但有以下情況屬于例外: 1患者接受大量的血液(超過(guò)其自身的總血量)需要供給最新鮮的血液。2患者本身血容量小,但又需接受大量的血液,如新生兒換血或任何不到5歲的患者輸血,都應(yīng)當(dāng)給予盡量新鮮的血液。3超過(guò)5歲的患者為了糾正貧血要求輸血,可以給予濃縮紅細(xì)胞

16、。接受定期輸血的患者,如鐮狀細(xì)胞性貧血、地中海貧血等患者,需選擇不超過(guò)7天的相對(duì)新鮮的血液,這樣做會(huì)使輸血間隔期延長(zhǎng)一些。4患者當(dāng)前檢出或既往曾檢出某種血型特異性抗體,則需選擇該抗體對(duì)應(yīng)抗原陰性的血液配血,例如:患者檢出抗E,則需選擇ABO血型與患者同型或相容且Rh血型E抗原陰性之血液配血。 又例如:患者既往曾檢出有抗Jka抗體,盡管隨著時(shí)間的延長(zhǎng)該抗體水平下降,當(dāng)前已不能檢出該抗體,但為患者選擇血液時(shí)仍需選擇ABO血型與患者同型或相容且Kidd血型Jka抗原陰性之血液配血,只有這樣才能避免因回憶反應(yīng)產(chǎn)生的抗Jka導(dǎo)致遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)。 (1)病人血清對(duì)供者紅細(xì)胞 檢測(cè)對(duì)供者紅細(xì)胞起反應(yīng)的

17、抗體,一般稱為“主側(cè)”配血。(2)病人紅細(xì)胞對(duì)供者血清 檢測(cè)對(duì)受者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體,一般稱為“次側(cè)”配血。 (3)病人血清對(duì)病人紅細(xì)胞 稱為“自身對(duì)照”試驗(yàn)。目的是顯示或排除自身抗體,直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性及紅細(xì)胞串錢狀假陽(yáng)性的存在。 l酶技術(shù)配血方法 l低離子強(qiáng)度凝聚胺(Polybrene)交叉配血法 l血型抗體快速反應(yīng)介質(zhì)交叉配血法(Polybrene一步法) l抗球蛋白配血法l微柱凝膠試驗(yàn)配血法 1、緡錢狀(串錢狀)的形成 常見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤,巨球蛋白血,以及其它表現(xiàn)為血沉加速的一些病例中。 2、交叉配血試驗(yàn)結(jié)果不相容,顯示有未檢明的同種抗體存在。3、在室溫反應(yīng)中,顯示有自身抗體存在。4

18、、在抗球蛋白試驗(yàn)中顯示有自身抗體。5、存在抗體篩選試驗(yàn)陰性和交叉配血結(jié)果陽(yáng)性現(xiàn)象,提示可能有未檢明的抗體存在。6、交叉配血試驗(yàn)中,離心力不當(dāng),選成了假陰性或假陽(yáng)性。7、水浴箱溫度不正確,造成錯(cuò)誤結(jié)果。8、紅細(xì)胞不正確洗滌和懸浮,使抗球蛋白試驗(yàn)出現(xiàn)假陰性。 9、血清中如含有溶血性抗體,則相應(yīng)紅細(xì)胞被溶解而不是凝集,交叉配血結(jié)果應(yīng)視為陽(yáng)性反應(yīng)。 l 配血試驗(yàn)顯示供、受者血液配合,則應(yīng)該有一種標(biāo)志表明該血可以輸給該患者。最好是使用配血標(biāo)簽,標(biāo)簽可以用某種方式附在血袋上。 l在配血單上,需寫清楚病人的姓名,床號(hào),ABO及Rh血型,醫(yī)院名稱,血袋編號(hào),交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的解釋,發(fā)出血液內(nèi)容的名稱,日期和時(shí)間,以及工作人員的姓名。l反復(fù)核對(duì)輸血申請(qǐng)單,配血報(bào)告單和血液的標(biāo)簽,正確無(wú)誤后,將血液或血液制品及時(shí)發(fā)出。 本血液與

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