藥物分析第二章

1、Identification test of drugs鑒別：判定真?zhèn)舞b別：判定真?zhèn)螜z查：安全性、有效性、均一性檢查：安全性、有效性、均一性含量測(cè)定：有效成分的定量含量測(cè)定：有效成分的定量Basic regularity of drug inspectionIdentification test of drug藥物的鑒別試驗(yàn)藥物的鑒別試驗(yàn)?zāi)康模焊鶕?jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)特征，采用物理、化學(xué)、或生物學(xué)方法，判斷(鑒別)藥物真?zhèn)?。適用性：僅用于證實(shí)貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物是否為其所標(biāo)示的藥物，并非對(duì)未知物化學(xué)結(jié)構(gòu)的確證鑒定。要求：方法專屬，每個(gè)品種一般23項(xiàng)不同類型的鑒別試驗(yàn)。第一節(jié)、鑒別試驗(yàn)的內(nèi)涵第一節(jié)

2、、鑒別試驗(yàn)的內(nèi)涵Principles of Identification Test 一、性狀一、性狀 和和 物理常數(shù)物理常數(shù) 二、鑒別項(xiàng)下規(guī)定的試驗(yàn)二、鑒別項(xiàng)下規(guī)定的試驗(yàn)一般鑒別：區(qū)分藥物的一般鑒別：區(qū)分藥物的類別類別專屬鑒別：區(qū)分專屬鑒別：區(qū)分個(gè)別個(gè)別的藥物單體的藥物單體 ( (同類或相同母核同類或相同母核) )第二節(jié)、鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目第二節(jié)、鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目Items in Identification Test原原料料藥藥鑒鑒別別制制劑劑鑒鑒別別一、性狀一、性狀 和和 物理常數(shù)物理常數(shù) 外 觀溶解度物理常數(shù)Characters/DescriptionPhysical Constants外觀：

3、外觀：指藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等。指藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等。如如ChPChP對(duì)維生素對(duì)維生素B1B1的描述為的描述為“本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空氣中迅即吸收約粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空氣中迅即吸收約4%4%的的水分水分”。對(duì)于鏈霉素片的描述為對(duì)于鏈霉素片的描述為“本品為糖衣片或薄膜衣片，除本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后，顯白色至微帶黃綠色去包衣后，顯白色至微帶黃綠色”。溶解度：溶解度：不同溶劑中的溶解特性；不同溶劑中的溶解特性；一定程度上反映了藥品的純度。一定程度上反映了藥品的純度。物理常數(shù)：物理

4、常數(shù)：內(nèi)在物理特征；內(nèi)在物理特征；既可鑒別，也可反映純凈的程度。既可鑒別，也可反映純凈的程度。性狀性狀 和和 物理常數(shù)物理常數(shù)熔熔 點(diǎn)點(diǎn)固體熔化成液體的溫度固體熔化成液體的溫度 熔融同時(shí)分解的溫度熔融同時(shí)分解的溫度 自初熔至全熔的一段溫度自初熔至全熔的一段溫度 物理常數(shù)（物理常數(shù)（Physical Constants）玻璃毛細(xì)管測(cè)定法：玻璃毛細(xì)管測(cè)定法： “初熔初熔”：開始局部液化，出現(xiàn)明顯液滴時(shí)的溫度。：開始局部液化，出現(xiàn)明顯液滴時(shí)的溫度。 “全熔全熔”：全部液化時(shí)的溫度。：全部液化時(shí)的溫度。熔點(diǎn)熔點(diǎn) 及其及其 測(cè)定法測(cè)定法性狀性狀 和和 物理常數(shù)物理常數(shù)第一法第一法：測(cè)定易粉碎的固體藥品：

5、測(cè)定易粉碎的固體藥品( (一端熔封一端熔封 ) ) 毛細(xì)管放入：傳溫液加熱至較規(guī)定熔點(diǎn)低限約低毛細(xì)管放入：傳溫液加熱至較規(guī)定熔點(diǎn)低限約低10時(shí)時(shí) 升溫速率：升溫速率：1.01.5/min；熔融分解；熔融分解 2.53.0/min； 重復(fù)測(cè)定重復(fù)測(cè)定3次，取平均。次，取平均。第二法第二法：測(cè)定不易粉碎的固體藥品：測(cè)定不易粉碎的固體藥品( (如脂肪、脂肪酸、石蠟、如脂肪、脂肪酸、石蠟、羊毛脂等羊毛脂等) ) (兩端開口，吸入熔融樣品，兩端開口，吸入熔融樣品，冷凍凝固測(cè)定冷凍凝固測(cè)定) 升溫速率升溫速率： 0.5/min ， 供試品在毛細(xì)管中開始上升時(shí)的溫度。供試品在毛細(xì)管中開始上升時(shí)的溫度。第三法

6、第三法：測(cè)定凡士林或其他類似物質(zhì)：測(cè)定凡士林或其他類似物質(zhì) 熔點(diǎn)熔點(diǎn) 及其及其 測(cè)定法測(cè)定法性狀性狀 和和 物理常數(shù)物理常數(shù)比旋度比旋度：在一定波長(zhǎng)與溫度下，偏振光透過長(zhǎng)：在一定波長(zhǎng)與溫度下，偏振光透過長(zhǎng)1dm1dm且每且每1ml1ml中中含有旋光性物質(zhì)含有旋光性物質(zhì)1g1g的溶液時(shí)測(cè)得的旋光度。用的溶液時(shí)測(cè)得的旋光度。用 表示。表示。吸收系數(shù)吸收系數(shù)：在給定的波長(zhǎng)、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)：在給定的波長(zhǎng)、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度稱為吸收系數(shù)。在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度稱為吸收系數(shù)。摩爾摩爾( ( ) )與百分吸收系數(shù)與百分吸收系數(shù)( )( )

7、。中國(guó)藥典用：中國(guó)藥典用：%1cm1E應(yīng)用應(yīng)用：鑒別藥物：鑒別藥物 檢查純度檢查純度 含量測(cè)定含量測(cè)定( (制劑制劑) )%1cm1E性狀性狀 和和 物理常數(shù)物理常數(shù)e.g. VitC e.g. VitC 熔點(diǎn)熔點(diǎn)190190192192， +20.5+20.5 21.521.5 , ,葡萄糖注射液的含量測(cè)定葡萄糖注射液的含量測(cè)定依據(jù)依據(jù)同類同類藥物的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)進(jìn)行的真?zhèn)嗡幬锏慕Y(jié)構(gòu)、性質(zhì)進(jìn)行的真?zhèn)舞b別鑒別。無(wú)機(jī)藥物：其無(wú)機(jī)藥物：其 陰、陽(yáng)離子的特殊反應(yīng)陰、陽(yáng)離子的特殊反應(yīng); ;有機(jī)藥物：共有母核、官能團(tuán)特征反應(yīng)。有機(jī)藥物：共有母核、官能團(tuán)特征反應(yīng)。特點(diǎn)：確定特點(diǎn)：確定( (區(qū)分區(qū)分) )類別，

8、不能夠確定個(gè)別品種。類別，不能夠確定個(gè)別品種。常見一般鑒別試驗(yàn)常見一般鑒別試驗(yàn)：丙二酰脲類、托烷生物堿類、丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機(jī)氟化物類、有機(jī)酸鹽、芳香第一胺類、有機(jī)氟化物類、有機(jī)酸鹽、無(wú)機(jī)金屬鹽類、無(wú)機(jī)酸鹽、無(wú)機(jī)金屬鹽類、無(wú)機(jī)酸鹽、etcetcGeneral identification test二、一般鑒別試驗(yàn)二、一般鑒別試驗(yàn)有機(jī)氟化物鑒別方法：鑒別方法：取供試品約7mg，照氧瓶燃燒法進(jìn)行有機(jī)破壞，用水20ml與0.01mol/L氫氧化鈉溶液6.5ml為吸收液，俟燃燒完全后，充分振搖，取吸收液2ml，加茜素氟藍(lán)試液0.5ml，再加12%醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml，用

9、水稀釋至4ml，加硝酸亞鈰試液0.5ml，即顯藍(lán)紫色，同時(shí)做空白對(duì)照試驗(yàn)。 F-+OHOOOHCH2+Ce3+pH4.3NCH2COOHCH2COOHFOOOOCH2CeNCH2COOHCH2COOH 茜素氟藍(lán)藍(lán)紫色配合物藍(lán)紫色配合物水楊酸鹽 鑒別方法一：取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。 反應(yīng)原理：本品在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液生成配位化合物，在中性時(shí)呈紅色，弱酸性時(shí)呈紫色。 鑒別方法二：取供試品溶液，加稀鹽酸，即析出水楊酸沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液中溶解。+FeCl3OOHOH+FeOOOOHH2O+3HCl依據(jù)：依據(jù)：特定藥物特定藥物分子中的分子中的特殊性質(zhì)、特

10、征基團(tuán)特殊性質(zhì)、特征基團(tuán)或或官能團(tuán)官能團(tuán)的的專屬反應(yīng)專屬反應(yīng) 或或 測(cè)定測(cè)定 進(jìn)行的進(jìn)行的 真?zhèn)舞b別真?zhèn)舞b別。 Specific identification test三、專屬鑒別試驗(yàn)三、專屬鑒別試驗(yàn)C17C17位上有位上有-醇酮基，醇酮基，與四氮唑反應(yīng)與四氮唑反應(yīng)e.g. 醋酸潑尼松醋酸潑尼松Prednisolone Acetate取本品約1mg ，加乙醇2ml 使溶解，加10氫氧化鈉溶液2 滴與氯化三苯四氮唑試液1ml ，即顯紅色生物學(xué)法生物學(xué)法 HPLC、GC鑒別法鑒別法 薄層色譜鑒別法薄層色譜鑒別法 紙色譜鑒別法紙色譜鑒別法 呈色反應(yīng)鑒別法呈色反應(yīng)鑒別法 紫外光譜鑒別法紫外光譜鑒別法

11、紅外光譜鑒別法紅外光譜鑒別法 沉淀生成反應(yīng)鑒別法沉淀生成反應(yīng)鑒別法 色譜鑒別法色譜鑒別法 氣體生成反應(yīng)鑒別法氣體生成反應(yīng)鑒別法 測(cè)定生成物的熔點(diǎn)測(cè)定生成物的熔點(diǎn)熒光反應(yīng)鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法 第三節(jié)、鑒別試驗(yàn)方法第三節(jié)、鑒別試驗(yàn)方法Identification Test MethodsF專屬性強(qiáng)，耐用性好，靈敏度高，操作簡(jiǎn)便、快速。F常用方法：化學(xué)法，光譜法，色譜法和生物學(xué)法。F中藥材鑒別方法：還有顯微鑒別法和特征圖譜或指紋圖譜鑒別法。F制劑的鑒別：盡可能與原料藥相同；必須：排除輔料干擾；多組分或微量成分，須用更靈敏、專屬的方法。F特殊性質(zhì)：采用特定方法。如手性、晶型等。藥物的鑒別方法要求藥物的

12、鑒別方法要求指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測(cè)的有色產(chǎn)物。觀測(cè)的有色產(chǎn)物。（1 1）三氯化鐵呈色反應(yīng)：）三氯化鐵呈色反應(yīng)： 用于酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基用于酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基（2 2）異羥肟酸鐵反應(yīng)：）異羥肟酸鐵反應(yīng)： 多用于芳酸及其酯類、酰胺類多用于芳酸及其酯類、酰胺類（3 3）茚三酮呈色反應(yīng)：）茚三酮呈色反應(yīng)： 用于用于AA AA 和和 結(jié)構(gòu)中含有氨基糖單元的藥物結(jié)構(gòu)中含有氨基糖單元的藥物（4 4）重氮化）重氮化- -偶合顯色反應(yīng)：偶合顯色反應(yīng)： 用于芳伯氨基或潛在芳伯氨基用于芳伯氨基或

13、潛在芳伯氨基（5 5）氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)）氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)多巴胺等酚性藥物與三氯化鐵試液呈色多巴胺等酚性藥物與三氯化鐵試液呈色加堿溶液后的變色反應(yīng)加堿溶液后的變色反應(yīng)1.1.呈色反應(yīng)鑒別法呈色反應(yīng)鑒別法 2.2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法沉淀生成反應(yīng)鑒別法 （1 1）與重金屬離子的沉淀反應(yīng)）與重金屬離子的沉淀反應(yīng)維生素維生素B1與碘化汞鉀生成與碘化汞鉀生成淡黃色淡黃色沉淀沉淀 BH2HgI4。（2 2）與生物堿沉淀劑的反應(yīng)）與生物堿沉淀劑的反應(yīng)丙二酰脲類藥物與硝酸銀反應(yīng)丙二酰脲類藥物與硝酸銀反應(yīng) NHNOONaOR1R2+AgNO3+Na2CO3NHNOOAgOR1R2+Na

14、HCO3NaNO3NHNOOAgOR1R2NNAgOOAgOR1R2+AgNO3+Na2CO3+NaCHO3NaNO3The reagent can be prepared by adding 10 grams of vanillin and 5 milliliters of acetaldehyde to 500 milliliters of ethanol 常用的熒光發(fā)射形式：常用的熒光發(fā)射形式：（1 1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光；）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光；（2 2）藥物溶液加硫酸后，在可見光下發(fā)射熒光；）藥物溶液加硫酸后，在可見光下發(fā)射熒光；（3 3）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下

15、發(fā)射出熒光；）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光；3.3.熒光反應(yīng)鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法（4 4）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。（1 1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣。產(chǎn)生氨（胺）氣。（2 2）化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，）化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體。加熱，發(fā)生硫化氫氣體。（3 3）含碘有機(jī)藥物，經(jīng)直火加熱，可生成紫色）

16、含碘有機(jī)藥物，經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。4.4.氣體生成反應(yīng)鑒別法氣體生成反應(yīng)鑒別法氟胞嘧啶紫外光譜鑒別 本品本品8 8/ml的鹽酸溶液的鹽酸溶液(9100(91000.1mol/L) )，最大吸收波長(zhǎng)最大吸收波長(zhǎng)286nm286nm，吸光度約為，吸光度約為0.570.57，最小吸收波長(zhǎng)最小吸收波長(zhǎng)244nm244nm。 aba:Aa:A晶型晶型; ;b:Bb:B晶型晶型( (有效晶型有效晶型) )e.g. 棕櫚氯霉素棕櫚氯霉素的石蠟糊片的石蠟糊片IR譜譜氯羥去甲安定紅外光譜鑒別氯羥去甲安定紅外光譜鑒別氯羥去甲安定的測(cè)定：氯羥去甲安定的測(cè)定：“取本品，經(jīng)干燥后用溴化鉀壓片法測(cè)定取本品，經(jīng)干燥后用溴化鉀壓片法測(cè)定其紅外光吸收?qǐng)D譜中其紅外光吸收?qǐng)D譜中3440cm-1，3220 cm-1，1695 cm-1，1614