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文檔簡(jiǎn)介
1、三、判斷題1.所謂半保留復(fù)制就是以 DNA親本鏈作為合成新子鏈 DNA的模板,這樣產(chǎn)生的新的雙鏈 DNA分子由一條舊鏈和一條新鏈組成。2.DNA的復(fù)制需要 DNA聚合酶和RNA聚合酶。3在高鹽和低溫條件下由 DNA單鏈雜交形成的雙螺旋表現(xiàn)出幾乎完全的互補(bǔ)性,這一過(guò)程可看作是一個(gè)復(fù)性(退火)反應(yīng)。4. 在核酸雙螺旋(如DNA)中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序列使雙鏈形成對(duì)稱(chēng)的發(fā)夾,呈十字結(jié)構(gòu)。5B型雙螺旋是 DNA的普遍構(gòu)型,而 Z型則被確定為僅存在于某些低等真核細(xì)胞中。6病毒的遺傳因子可包括 l到300個(gè)基因。與生命有機(jī)體不同,病毒的遺傳因子可能是 DNA或 RNA
2、(但不可能同時(shí)兼有!),因此 DNA不是完全通用的遺傳物質(zhì)。7. Cot12與基因組大小相關(guān)。8C0C1/2與基因組復(fù)雜性相關(guān)。9非組蛋白染色體蛋白負(fù)責(zé)30nm纖絲高度有序的壓縮。10.大腸桿菌中,復(fù)制叉以每秒5O0個(gè)堿基對(duì)的速度向前移動(dòng),復(fù)制叉前的 DNA以大約 3000rmin的速度旋轉(zhuǎn)。11.“模板”或“反義” DNA鏈可定義為:模板鏈?zhǔn)潜籖NA聚合酶識(shí)別并合成一個(gè)互補(bǔ)的mRNA,這一 mRNA是蛋白質(zhì)合成的模板。12.在DNA復(fù)制中,假定都從53同樣方向讀序時(shí),新合成 DNA鏈中的核苷酸序列同模板鏈一樣。13.DNA的53合成意味著當(dāng)在裸露3-OH的基團(tuán)中添加dNTP時(shí),除去無(wú)機(jī)焦磷酸
3、DNA鏈就會(huì)伸長(zhǎng)。14.在先導(dǎo)鏈上 DNA沿53方向合成,在后隨鏈上則沿35方向合成。15.如果 DNA沿35合成,那它則需以5三磷酸或3脫氧核苷三磷酸為末端的鏈作為前體。16.大腸桿菌 DNA聚合酶缺失35校正外切核酸酶活性時(shí)會(huì)降低 DNA合成的速率但不影響它的可靠性。17.復(fù)制叉上的單鏈結(jié)合蛋白通過(guò)覆蓋堿基使DNA的兩條單鏈分開(kāi),這樣就避免了堿基配對(duì)。18.只要子鏈和親本鏈中的一條或兩條被甲基化,大腸桿菌中的錯(cuò)配校正系統(tǒng)就可以把它們區(qū)別開(kāi)來(lái),但如果兩條鏈都沒(méi)有甲基化則不行。19.大腸桿菌、酵母和真核生物病毒DNA的新一輪復(fù)制是在一個(gè)特定的位點(diǎn)起始的,這個(gè)位點(diǎn)由幾個(gè)短的序列構(gòu)成,可用于結(jié)合起
4、始蛋白復(fù)合體。20.拓?fù)洚悩?gòu)酶之所以不需要ATP來(lái)斷裂和重接 DNA鏈,是因?yàn)榱姿岫ユI的能量被暫時(shí)貯存在酶活性位點(diǎn)的磷酸酪氨酸連接處。21.酵母中的拓?fù)洚悩?gòu)酶突變體能夠進(jìn)行 DNA復(fù)制,但是在有絲分裂過(guò)程中它們的染色體不能分開(kāi)。22.靠依賴于DNA的DNA聚合酶所進(jìn)行的 DNA復(fù)制要求有作為一個(gè)引發(fā)物的游離3OH的存在。游離的3OH可以通過(guò)以下三種途徑獲得:合成一個(gè)RNA引物、DNA自我引發(fā)的或者一個(gè)末端蛋白通過(guò)磷酸二酯鍵共價(jià)結(jié)合到一個(gè)核苷酸。23.當(dāng) DNA兩條鏈的復(fù)制同時(shí)發(fā)生時(shí),它是由一個(gè)酶復(fù)合物: DNA聚合酶負(fù)責(zé)的真核生物的復(fù)制利用3個(gè)獨(dú)立作用的 DNA聚合酶,Pol的一個(gè)拷貝(為了
5、起始)和Po1的兩個(gè)拷貝(DNA多聚體化,當(dāng)MFl將RNA引發(fā)體移去之后填入)。24.從ori開(kāi)始的噬菌體復(fù)制的起始是被兩個(gè)噬菌體蛋白 O和 P所控制的,在大腸桿菌E.coli中 O和 P是 DnaA和 DnaC蛋白的類(lèi)似物?;谶@種比較,O蛋白代表一個(gè)解旋酶而 P蛋白調(diào)節(jié)解旋酶和引發(fā)酶結(jié)合。25拓?fù)洚悩?gòu)酶 和可以使 DNA產(chǎn)生正向超螺旋。26拓?fù)洚悩?gòu)酶 解旋需要ATP酶。27. RNA聚合酶 合成 DNA復(fù)制的RNA引物。28線粒體 DNA的復(fù)制需要使用 DNA引物。29. 噬菌體整合到大腸桿菌基因組上是由一個(gè)位點(diǎn)專(zhuān)一的拓?fù)洚悩?gòu)酶(入整合酶)催化的,它可以識(shí)別在兩條染色體上短的特異 DNA序
6、列。30在真核生物染色體 DNA復(fù)制期間,會(huì)形成鏈狀 DNA。31所有已知的基因轉(zhuǎn)變都需要一定量的 DNA合成。32根據(jù)不同物種同一蛋白質(zhì)中氨基酸的不同來(lái)估計(jì)突變率往往較實(shí)際的突變率低,因?yàn)橐恍┩蛔凅w由于危及蛋白質(zhì)功能,在選擇壓力下從種群中消失。33因?yàn)榻M蛋白 H4在所有物種中都是樣的,可以預(yù)期該蛋白基因在不同物種中也是一樣的。34DNA修復(fù)機(jī)制有很多種,但所有這些機(jī)制都依賴于二倍體染色體上兩套遺傳信息的存在。35.自發(fā)的脫膘呤作用和由尿嘧啶DNA糖基化酶切去一個(gè)已脫堿基的胞嘧啶都會(huì)產(chǎn)生可被無(wú)膘呤嘧啶內(nèi)切核酸酶作為底物識(shí)別的同樣的中間產(chǎn)物。36.DNA修復(fù)的第一步是由專(zhuān)用于修復(fù)過(guò)程的酶催化的,
7、下面的步驟由 DNA代謝過(guò)程中的常用酶催化。37.大腸桿菌中 SOS反應(yīng)的最主要作用是通過(guò)在原始 DNA損傷區(qū)附近導(dǎo)人補(bǔ)償突變來(lái)提高細(xì)胞存活率。38.DNA中四個(gè)常用堿基自發(fā)脫氨基的產(chǎn)物,都能被識(shí)別出來(lái)。39.在細(xì)菌細(xì)胞中,短片段修復(fù)是由損傷誘導(dǎo)的。相反,長(zhǎng)片段修復(fù)是組成型的,且往往涉及長(zhǎng)約150O一9000bp損傷 DNA片段的替換。40.真核生物中 DNA的修復(fù)沒(méi)有原核生物重要,這是因?yàn)轶w細(xì)胞的二倍體特征。41.一般性重組需要交換的雙方都有一長(zhǎng)段同源 DNA序列,而位點(diǎn)專(zhuān)一重組僅需要短而專(zhuān)一的核苷酸序列。某些情況下,只需要交換雙方中的一方具有該序列即可。42.一般性重組包括 DNA片段的物
8、理交換,該過(guò)程涉及 DNA骨架上磷酸二酯鍵的斷裂 和重新形成。43.RecA蛋白同時(shí)具有位點(diǎn)專(zhuān)一的單鏈切割的活性和將單鏈從雙螺旋 DNA分子上脫離 的解旋酶的功能,但需要依賴于ATP活性。44.大腸桿菌的單鏈結(jié)合蛋白通過(guò)與糖磷酸骨架結(jié)合并使堿基暴露,從而解開(kāi)單鏈上的短發(fā)夾結(jié)構(gòu)。45.RecA蛋白同時(shí)與單鏈、雙鏈 DNA結(jié)合,因此它能催化它們之間的聯(lián)會(huì)。46.交叉鏈互換包括交叉鏈和未交叉鏈,至少其中一條鏈的磷酸骨架斷裂才可能使這個(gè)過(guò)程逆轉(zhuǎn)。47.基因轉(zhuǎn)變是真菌類(lèi)偶然改變性別的方式;正常情況下,一次接合產(chǎn)生等量的雄性與雌性孢子,但偶然也會(huì)出現(xiàn)13或31的比例。48.當(dāng)兩個(gè) DNA的突變片段相互間不
9、能反式互補(bǔ),則可以推測(cè)這兩個(gè)突變影響了同一種功能。這樣的兩個(gè)突變和每個(gè)不能反式互補(bǔ)的突變分為同一個(gè)互補(bǔ)群,并被認(rèn)為是一個(gè)獨(dú)立遺傳單位的一部分。這個(gè)遺傳單位可能是一個(gè)順?lè)醋樱蛘呷绻蛔兎€(wěn)定地干擾了轉(zhuǎn)錄過(guò)程,這可能是一個(gè)多順?lè)醋愚D(zhuǎn)錄單位。49.編碼區(qū)以外的突變不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞或生物體表型改變。50.若一個(gè)二倍體酵母細(xì)胞中發(fā)生了一個(gè)錯(cuò)義突變,而這一突變將另外一個(gè)不同的氨基酸引入了一個(gè)分解代謝酶的催化位點(diǎn),從而使得這個(gè)酶可以利用別的底物。這就是所謂的功能獲得性突變。51因?yàn)?T4噬菌體至少編碼30種參與基因組復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的酶,它和寄主 DNA和RNA聚合酶都是獨(dú)立的,但它必須依賴寄主蛋白質(zhì)的復(fù)制機(jī)制。52
10、.小的DNA病毒,如 SV40和噬X174完全依賴寄主復(fù)制機(jī)制來(lái)復(fù)制它們的 DNA。53. 負(fù)鏈病毒不包含編碼蛋白的基因。54追蹤有外殼病毒的一個(gè)生活周期就等于游歷整個(gè)細(xì)胞。55當(dāng)一個(gè)噬菌體侵染一個(gè)合適的大腸桿菌寄主細(xì)胞時(shí),通常是裂解性侵染,釋放出幾百個(gè)子代噬菌體;更少見(jiàn)的是,它會(huì)整合到寄主染色體中,產(chǎn)生帶有原噬菌體染色體的溶原菌。56通過(guò)從寄主細(xì)胞表面出芽生殖的病毒常因?yàn)槌鲅吭斐杉?xì)胞表面改變而致癌。57一種把新病毒按 DNA或RNA分類(lèi)的簡(jiǎn)易方法是看它的生長(zhǎng)是否受放線菌素 D的抑制。放線菌素 D只阻遏依賴DNA的RNA合成,而對(duì)依賴RNA的復(fù)制酶無(wú)影響,如果病毒生長(zhǎng)受它抑制,那肯定是 DNA
11、病毒。58大病毒比小病毒更有可能存在重疊基因,因?yàn)樗鼈冇懈嗟幕颉?9因?yàn)轭?lèi)病毒不編碼任何蛋白但又能夠復(fù)制并在植物中造成嚴(yán)重的疾病,所以非常特殊。60.負(fù)責(zé)噬菌體 DNA合成的酶是在裂解循環(huán)的晚期形成的。61.溶源化是一個(gè)雙鏈 DNA病毒的生活周期中的一種狀態(tài),是當(dāng)病毒的基因組整合進(jìn)一個(gè)宿主細(xì)胞的基因組時(shí)形成的狀態(tài)。62.c蛋白的穩(wěn)定性是影響溶源和裂解循環(huán)之間開(kāi)關(guān)的一個(gè)關(guān)鍵。63.為了把噬菌體附著位點(diǎn)(attp)和在細(xì)菌染色體上的附著位點(diǎn)(attB)結(jié)合重組起來(lái),噬菌體 DNA在感染大腸桿菌后靠末端cos位點(diǎn)退火成環(huán)。64下面哪些結(jié)構(gòu)物能夠誘導(dǎo)乳糖操縱子?哪些是半乳糖苷酶的底物? (a)l,
12、4半乳糖苷 (b)l,4半乳糖苷 (c)1,6半乳糖苷 (d)l,6半乳糖苷 (e)上面既沒(méi)有誘導(dǎo)物,也沒(méi)有底物65下面哪些說(shuō)法是正確的? (a)Lac A的突變體是半乳糖苷透性酶的缺陷 (b)在非誘導(dǎo)的情況下,每個(gè)細(xì)胞大約有4分子的半乳糖苷酶 (c)乳糖是一種安慰誘導(dǎo)物 (d)RNA聚合酶同操縱基因結(jié)合 (e)多順?lè)醋?mRNA是協(xié)同調(diào)節(jié)的原因 (f) Lac阻遏物是一種由4個(gè)相同的亞基組成的四聚體 (g)腺苷酸環(huán)化酶將 cAMP降解成 AMP (h) CAP和 CRP蛋白是相同的 (i)-35和-10序列對(duì)于RNA聚合酶識(shí)別啟動(dòng)子都是很重要的 (j)色氨酸的合成受基因表達(dá)、阻遏、弱化作用和
13、反饋抑制的控制 (k)Trp的引導(dǎo) mRNA能夠同時(shí)形成三個(gè)“莖環(huán)”結(jié)構(gòu) (l)在轉(zhuǎn)錄終止子柄部的 A-T堿基對(duì)可以增強(qiáng)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性 (m)真核生物和原核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯都是偶聯(lián)的 (n)在色氨酸濃度的控制下,核糖體停泊在 Trp引導(dǎo)區(qū)串色氨酸密碼子上,但并不與之脫離 (o)Ara C蛋白既可作為激活蛋白,又可作為阻遏蛋白起作用 (p)Ara C的表達(dá)不受調(diào)控66轉(zhuǎn)錄的起始位點(diǎn)(stp)決定在模板鏈上嘧啶核苷酸的位置,在此形成第一個(gè)雜合的 RNA和 DNA堿基對(duì)。67反轉(zhuǎn)錄病毒侵染常常同時(shí)導(dǎo)致子代病毒的非致死釋放和被侵染細(xì)胞內(nèi)致癌的永久性基因改變。68轉(zhuǎn)座酶可以識(shí)別整合區(qū)周?chē)銐蚨嗟男蛄?,這樣
14、,轉(zhuǎn)座子不整合到基因的中間,因?yàn)槠茐幕驅(qū)?xì)胞是致死的。69轉(zhuǎn)座要求供體和受體位點(diǎn)之間有同源性。70TnA家族的轉(zhuǎn)座子通常轉(zhuǎn)移三種基因:轉(zhuǎn)座酶、解離酶和氨芐抗性基因。71Tn10高水平表達(dá)轉(zhuǎn)座酶。72水晰的基因組比人的基因組大。73高等真核生物的大部分 DNA是不編碼蛋白質(zhì)的。74. 假基因通常與它們相似的基因位于相同的染色體上。75在有絲分裂中,端粒對(duì)于染色體的正確分離是必要的。76大多數(shù)看家基因編碼低豐度的 mRNA。77所有真核生物的基因都是通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)錄起始的控制進(jìn)行調(diào)控的。78所有高等真核生物的啟動(dòng)子中都有TATA盒結(jié)構(gòu)。79只有活性染色質(zhì)轉(zhuǎn)錄的基因?qū)?DNase 敏感。80. 內(nèi)含子通
15、常可以在相關(guān)基因的同一位置發(fā)現(xiàn)。8140以上的Drosophila cirilis基因組是由簡(jiǎn)單的7bp序列重復(fù)數(shù)百萬(wàn)次組成。82衛(wèi)星 DNA在強(qiáng)選擇壓力下存在。83真核細(xì)胞中的RNA聚合酶僅在細(xì)胞核中有活性。84. 在RNA的合成過(guò)程中,RNA鏈沿35方向延長(zhǎng)。85. 候選三磷酸核苷通過(guò)對(duì)生長(zhǎng)中RNA鏈的磷酸的親和攻擊加到鏈上。86核不均一RNA是mRNA和rRNA的前體而不是tRNA的前體。87密碼子AUG專(zhuān)門(mén)起 mRNA分子編碼區(qū)的終止作用。88tRNAfMet的反密碼于是 TAC。89. RNA聚合酶能以兩個(gè)方向同啟動(dòng)子結(jié)合,并啟動(dòng)相鄰基因的轉(zhuǎn)錄。但是,模板鏈的選擇由另外的蛋白因子確定
16、。90細(xì)菌細(xì)胞用一種RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄所有的RNA,而真核細(xì)胞則有三種不同的RNA聚合酶。91. 轉(zhuǎn)錄因子具有獨(dú)立的 DNA結(jié)合和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域。92.每個(gè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)被單個(gè)轉(zhuǎn)錄因子識(shí)別。93.糾正下列一段話中的錯(cuò)誤: 在E. Coli中,通過(guò)RNA聚合酶同操縱基因的結(jié)合來(lái)起始轉(zhuǎn)錄。與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)堿基互 補(bǔ)的dNTP同亞基結(jié)合,然后是第二個(gè)dNTP通過(guò)與第一個(gè) dNTP形成25磷酸 二酯鍵而結(jié)合上。當(dāng)生成的RNA鏈約有12個(gè)核苷酸長(zhǎng)度時(shí), 亞基脫離 DNA聚合酶,RN鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。當(dāng) DNA聚合酶在RNA鏈上遇到終止密碼子時(shí),轉(zhuǎn)錄作用停止。94. 在tRNA分子中普遍存在的修飾核苷酸
17、是在摻入tRNA轉(zhuǎn)錄物結(jié)合前由標(biāo)準(zhǔn)核苷酸共價(jià)修飾而來(lái)。95如果tRNATyr加的反密碼子發(fā)生單個(gè)堿基變化后成為絲氨酸的反密碼子,被加入到無(wú)細(xì)胞系統(tǒng),所得的蛋白質(zhì)在原來(lái)應(yīng)為絲氨酸的位置都變成了酪氨酸。96. 在肽鏈延伸的過(guò)程中,加入下一個(gè)氨基酸比加人氨酰 tRNA 更能激活每個(gè)氨酰tRNA間的連接。97搖擺堿基位于密碼子的第三位和反密碼子的第一位。98核糖體小亞基最基本的功能是連接mRNA與tRNA,大亞基則催化肽鍵的形成。99. 蛋白質(zhì)合成時(shí),每加人一個(gè)氨基酸要水解4個(gè)高能磷酸鍵(4個(gè)密碼子),所消耗的總能量比起 DNA轉(zhuǎn)錄(每加入一個(gè)核苷酸用兩個(gè)高能磷酸鍵,6個(gè)密碼子)要少。100因?yàn)?AU
18、G是蛋白質(zhì)合成的起始密碼子,所以甲硫氨酸只存在于蛋白質(zhì)的 N末端。101通過(guò)延緩負(fù)載tRNA與核糖體結(jié)合以及它進(jìn)一步應(yīng)用于蛋白質(zhì)合成的時(shí)間,可使與不適當(dāng)堿基配對(duì)的tRNA離開(kāi)核糖體,提高蛋白質(zhì)合成的可靠性。102. 延伸因子eEF1幫助氨酰tRNA進(jìn)入 A位點(diǎn)依賴于ATP內(nèi)一個(gè)高能鍵的斷裂。103三種RNA必須相互作用以起始及維持蛋白質(zhì)的合成。104G-U堿基負(fù)責(zé)fMet-tRNA對(duì)GUG的識(shí)別。105.限制與修飾現(xiàn)象是宿主的一種保護(hù)體系,它是通過(guò)對(duì)外源 DNA的修飾和對(duì)自身 DNA的限制實(shí)現(xiàn)的。106.限制性內(nèi)切核酸酶在 DNA中的識(shí)別切割位點(diǎn)的二級(jí)三級(jí)結(jié)構(gòu)也影響酶切效率。一般來(lái)說(shuō),完全切割
19、質(zhì)?;虿《?DNA,要比切割線狀 DNA需要更多的酶,最高的需要20倍。107.如果限制性內(nèi)切核酸酶的識(shí)別位點(diǎn)位于 DNA分子的末端,那么接近末端的程度也 影響切割,如Hpa和Mbo要求識(shí)別序列之前至少有一個(gè)堿基對(duì)存在才能切割。108.能夠產(chǎn)生防御病毒侵染的限制性內(nèi)切核酸酶的細(xì)菌,其本身的基因組中沒(méi)有被該核酸酶識(shí)別的序列。109限制性圖譜與限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)圖譜的最顯著的區(qū)別在于前者是一個(gè)物理圖譜而后者是一個(gè)連鎖圖。110用限制性內(nèi)切核酸酶Hpa分別切割載體 DNA和供體 DNA后,可用Ecoli DNA 連接酶進(jìn)行連接。111已知某一內(nèi)切核酸酶在一環(huán)狀 DNA上有3個(gè)切點(diǎn),因此
20、,用此酶切割該環(huán)狀 DNA,可得到3個(gè)片段。112.迄今所發(fā)現(xiàn)的限制性內(nèi)切核酸酶既能作用于雙鏈 DNA,又能作用于單鏈 DNA。113基因工程中使用的類(lèi)限制性內(nèi)切核酸酶不僅有內(nèi)切核酸酶的活性,而且有甲基化酶的活性。114.DNA多態(tài)性就是限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性。115.用限制性內(nèi)切核酸酶 Pst切割質(zhì)粒 pBR322后,再用外切核酸酶.coli進(jìn)行系列缺失,可得到一系列大小不同的缺失突變體。116.甘油會(huì)使許多限制性內(nèi)切核酸酶的特異性發(fā)生改變,是導(dǎo)致一些酶的星活性的主要原因之一,防止的辦法是酶切反應(yīng)體系中,將甘油的濃度控制在5以下。117.具有EcoR 末端的外源片段只能以一個(gè)方向插入到EcoR
21、 末端的載體中。118.從Esherichia coliK中分離的限制性內(nèi)切核酸酶命名為 EcoK。119.同一種限制性內(nèi)切核酸酶切割靶 DNA,得到的片段的兩個(gè)末端都是相同的。120.在限制與修飾系統(tǒng)中,修飾主要是甲基化作用,一旦位點(diǎn)被甲基化了,其他的限制性酶就不能切割了121.稀有酶是指那些識(shí)別序列很長(zhǎng)又不常用的限制性內(nèi)切核酸酶。122.T4 DNA連接酶和E.coli連接酶都能催化平末端和粘性末端的連接。123.T4 DNA連接酶和E.coli連接酶都能催化雙鏈 DNA和單鏈 DNA的連接。124.反轉(zhuǎn)錄酶能夠以單鏈RNA或單鏈 DNA為模板,在引物的引發(fā)下合成一條互補(bǔ)的DNA鏈。以 R
22、NA為模板合成的 DNA是互補(bǔ) DNA(complementalyDNA, cDNA)。若是以 DNA模板合成 DNA,dNTP的摻人速度很低(約5個(gè)核苷酸秒),比 T7 DNA 聚合酶的合成速度差不多低100倍。125.以RNA為模板,用反轉(zhuǎn)錄酶可同時(shí)產(chǎn)生單鏈和雙鏈的cDNA,雙鏈 DNA是由自身引物引導(dǎo)合成。但這種自身引物引導(dǎo)的合成效率遠(yuǎn)低于外加寡核苷酸引物引導(dǎo)的合成。126.Ba131核酸酶(Ba131 nuclease)是 Ca2+依賴性的,在反應(yīng)混合物中加入 EDTA便可抑制它的活性。127.外切核酸酶不能在雙鏈 DNA的 gap和 nick處切割 DNA。128.當(dāng)一個(gè) DNA結(jié)合
23、蛋白同它識(shí)別的核苷酸序列結(jié)合以后,就保護(hù)了它們的磷酸二酯鍵免遭切割,其結(jié)果,電泳膠上就有明顯可見(jiàn)的空缺帶(與對(duì)照相比),這就是 DNA 足跡法。129.T4 DNA連接酶和E.coli連接酶作用時(shí)都需要ATP和NAD+作為輔助因子。130.多核苷酸激酶之所以能夠用于 DNA片段的標(biāo)記,是因?yàn)樗軌驅(qū)蝹€(gè)的32P標(biāo)記的單核苷酸加到每一 DNA鏈的5端。131.在反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中,使用 AMV比使用 M-MLV可得到較多的產(chǎn)物。132.真核生物可能有兩種DNA連接酶,連接酶和連接酶 都能在 DNA合成和連接中起作用。133.DNA聚合酶有三種酶活性,其中35外切核酸酶的活性在較多的dNTP存在 下,常
24、被53合成酶的活性所掩蓋。134用同一種酶切割載體和外源 DNA得到粘性末端后,為防止它們自身環(huán)化,要用 CIP將它們脫磷酸。135.外切核酸酶的作用產(chǎn)物可以作為末端轉(zhuǎn)移酶的作用底物。136.用外切酶作系列缺失突變時(shí),可以從突出的3端開(kāi)始。137.nick和gap的含義是不同的,前者指 DNA的單鏈中有較小的缺失,后者僅是斷開(kāi) 了一個(gè)磷酸二酯鍵。138.迄今發(fā)現(xiàn)的質(zhì)粒 DNA都是環(huán)狀的。139.線性質(zhì)粒同環(huán)狀質(zhì)粒一樣都不帶有宿主必需的基因。140.有 a、b、c三個(gè)質(zhì)粒,因?yàn)?a和 b能夠共存于一個(gè)細(xì)胞,a和 c也可共存于同一個(gè)細(xì)胞,所以 b和 c一定能夠共存于同一個(gè)細(xì)胞。141.插入元件(I
25、S)也是一種轉(zhuǎn)座元件,它除了有轉(zhuǎn)座酶基因外,還有附加基因。142.如果兩個(gè)不同的質(zhì)粒可以穩(wěn)定地共存于同一個(gè)細(xì)胞中,這兩種質(zhì)粒則屬于同一個(gè)不親和群。143.一個(gè)帶有反向重復(fù)序列的雙鏈 DNA經(jīng)變性后,復(fù)性時(shí)其單鏈可形成發(fā)夾環(huán)。144.能夠在不同的宿主細(xì)胞中復(fù)制的質(zhì)粒叫穿梭質(zhì)粒。145.任何一種質(zhì)粒都可以用氯霉素?cái)U(kuò)增的方法,增加它的拷貝數(shù)。146.只有完整的復(fù)制子才能進(jìn)行獨(dú)立復(fù)制,一個(gè)失去了復(fù)制起點(diǎn)的復(fù)制子不能進(jìn)行獨(dú)立復(fù)制。147CsCl-EB密度梯度離心法純化SC DNA原理是根據(jù) EB可以較多地插入到 SC DNA 中,因而沉降速度較快。148質(zhì)粒 Co1El同 pSC101共整合后,得到重組
26、質(zhì)粒 pSC134,具有兩個(gè)復(fù)制起點(diǎn),這兩個(gè)起點(diǎn)在任何細(xì)胞中都是可以使用的。149pBR322可以用于粘性末端連接、平末端連接和同聚物接尾法連接,無(wú)論用哪種方法連接,都可以用同一種酶回收外源片段。150所謂穿梭質(zhì)粒載體是能夠在兩種以上的不同宿主細(xì)胞中復(fù)制的質(zhì)粒,所用的復(fù)制起點(diǎn)不同。151.一般情況下,質(zhì)粒既可以整合到染色體上,也可以獨(dú)立存在。152. Co1El是唯一用作基因工程的自然質(zhì)粒載體,它具有四環(huán)素抗性標(biāo)記,因而很容易選擇。153.某一染色體 DNA經(jīng)內(nèi)切酶Sal切割后,產(chǎn)生了若干個(gè)具有粘性末端的 DNA片段,將這些片段分別在 T4 DNA連接酶的作用下自身連接成環(huán),然后導(dǎo)人受體細(xì)胞,
27、都可以進(jìn)行獨(dú)立地復(fù)制。154如果細(xì)菌的某種表型特征在UV處理下喪失后不再恢復(fù),這種表型有可能是質(zhì)粒賦予的。155基因克隆中,低拷貝數(shù)的質(zhì)粒載體是沒(méi)有用的。156.代型載體(replacement vector)是指同一種限制性內(nèi)切核酸酶在DNA中具有兩 個(gè)切點(diǎn)。外源 DNA通過(guò)取代這兩個(gè)切點(diǎn)間的片段被克隆。157現(xiàn)在最常用的 pUC載體是 pUC18,它的分子量小,具有多克隆位點(diǎn)和易于選擇的分子標(biāo)記,并且是松弛型復(fù)制。另外,這種載體可在輔助質(zhì)粒的幫助下合成單鏈 DNA。158.噬菌粒(phagemid)pUC118pUC119載體是集質(zhì)粒和絲狀噬菌體有利特征于一身 的載體,既能合成單鏈 DNA
28、,又能合成雙鏈 DNA。159.噬菌體 DNA和 M13單鏈?zhǔn)删w DNA在成熟前的 DNA復(fù)制都是用滾環(huán)模型。160.M13噬菌體每個(gè)世代裂解宿主后,可釋放100個(gè)子代噬菌體。161.以粘粒為載體的重組體雖然在平板上生長(zhǎng)的速度不同,但是轉(zhuǎn)化子中插入片段的擴(kuò)增量是相同的。162.氯霉素?cái)U(kuò)增 DNA時(shí),加氯霉素的時(shí)間是重要的,因?yàn)榧拥锰?,菌?shù)不夠,加入時(shí)間過(guò)遲,菌齡過(guò)老,容易自溶。163所謂引物就是同 DNA互補(bǔ)的一小段RNA分子。164脈沖凝膠電泳采用一個(gè)很強(qiáng)的電場(chǎng)來(lái)分離非常長(zhǎng)的DNA分子,其原理在于迫使 DNA分子根據(jù)長(zhǎng)度的不同而具有不同的速度,并按大小順序通過(guò)凝膠。165Agarose-
29、EB電泳法分離純化 CCC DNA原理是根據(jù) EB可以較多地插入到 CCC DNA 中,因而遷移速度較快。166.如果 PCR的每一次循環(huán)都把上一次循環(huán)中合成的 DNA都加了一倍,那么,10個(gè)循環(huán)就擴(kuò)增了1000倍,20個(gè)循環(huán)就擴(kuò)增了100萬(wàn)倍,30個(gè)循環(huán)就擴(kuò)增了10億倍。167PCR既能用于擴(kuò)增任何天然存在的核苷酸序列,又能重新設(shè)計(jì)任何天然核苷酸序列的兩個(gè)末端。因此,任意兩個(gè)天然存在的 DNA序列都能快速有效的擴(kuò)增,并拼接在一起。168最有效的制備純RNA的方法是讓其在細(xì)胞中超表達(dá),然后提純。169大量制備已被克隆基因編碼蛋白產(chǎn)物的常用方法是體外轉(zhuǎn)錄和翻譯。170.通過(guò)報(bào)告基因與來(lái)自于目的基
30、因上游和下游各種 DNA片段的結(jié)合,研究基因的調(diào)控序列。171.溫度敏感突變型是非常有用的,在這些突變型中,可以通過(guò)對(duì)溫度的改變控制這些突變體中異常表型的出現(xiàn)。172用人工合成的含有所需堿基變化的寡聚核苷酸,可以將特殊突變引入克隆的基因。173蛋白質(zhì)的氨基酸序列中各種重要信號(hào)都可以通過(guò)短氨基酸序列同報(bào)告蛋白的融合進(jìn)行研究。174簡(jiǎn)并引物是根據(jù)已知 DNA序列設(shè)計(jì)的引物群。175在 DNA貯存液中加一滴三氯甲烷,可防止真菌的污染。176密碼的偏愛(ài)性是指不同種屬的生物對(duì)簡(jiǎn)并密碼具有不同的使用頻率。177插入到質(zhì)粒 DNA中的 EB可以用正丁醇抽提除去。178堿法和煮沸法分離質(zhì)粒 DNA的原理是不相
31、同的。179酚法和堿法分離質(zhì)粒 DNA都要用溶菌酶破壁,但堿法用的溶菌酶的濃度要高。180外源基因(或 DNA片段)插入到某一基因內(nèi)的位點(diǎn)后,這個(gè)基因不再有任何功能。181用不同的產(chǎn)生粘性末端的限制性內(nèi)切核酸酶分別切割載體和外源 DNA,得到的粘性末端是不親和的粘性末端。182.基因組 DNA文庫(kù)是含有某一生物中全部 DNA序列隨機(jī)克隆的克隆群,而cDNA文庫(kù)是含有某一生物中所有表達(dá)基因隨機(jī)克隆的克隆群。183.cDNA克隆較之基因組克隆最重要的優(yōu)越性就是它們含有一個(gè)基因的完整序列。184通過(guò)差示雜交后制備的 cDNA文庫(kù)使克隆那些只在特定分化細(xì)胞中表達(dá)基因的機(jī)率大為提高。185在染色體步移中
32、,可通過(guò) DNA測(cè)序知道已到達(dá)所感興趣的基因。186一旦有了一套已知順序的基因組克隆,通過(guò)從文庫(kù)中獲得覆蓋目的突變基因所在基因組區(qū)的所有克隆,就可以進(jìn)行染色體步移。187根據(jù)遺傳連鎖作圖把基因定位在基因組中是定位克隆的第一步,它為分離特定的人的基因提供了一個(gè)直接而快速的方法。188.人工感受態(tài)和自然感受態(tài)細(xì)胞都能吸收線性和環(huán)狀單鏈 DNA。189.人工導(dǎo)入基因和正常染色體基因間的同源重組,可以發(fā)生基因置換。190.為了保證重組 DNA分子在受體細(xì)胞中能夠穩(wěn)定地獨(dú)立存在下來(lái),通常用recrm表型的細(xì)胞株作為受體菌。191.線性 DNA片段被導(dǎo)人哺乳動(dòng)物細(xì)胞后,在細(xì)胞內(nèi)酶的作用下,很快相互連接成重
33、復(fù)的DNA大片段)并能在隨機(jī)位點(diǎn)整合到染色體中。192.不匹配的粘性末端是不能通過(guò)粘性末端連接的。193.用限制性內(nèi)切核酸酶切割載體、供體 DNA后,要加入 EDTASDS中止液使限制性內(nèi)切核酸酶失活,這樣有利于重組連接。194.限制性內(nèi)切核酸酶Bgl識(shí)別的序列為 A GATCT,BamH識(shí)別的序列為GGATCC,用它們分別切割載體 DNA和供體 DNA,不必使酶失活,就可以直接通過(guò)粘性末端連接法進(jìn)行連接。195.具有E.coR 末端的外源片段只能以一個(gè)方向插入到E.coR 末端的載體中。196.不匹配的粘性末端可以通過(guò)部分填補(bǔ)后進(jìn)行連接。197.低豐度的mRNA不僅拷貝數(shù)少,而且種類(lèi)也少。1
34、98.同聚物接尾法構(gòu)建重組體,不僅連接效率高,而且也很容易回收插入的片段199.以噬菌體為載體的篩選方法比較簡(jiǎn)便,凡能形成噬菌斑的就一定是重組體。200.核酸雜交探針就是帶有放射性標(biāo)記的 DNA分子。201.Northern雜交中,為了防止RNA形成部分環(huán)狀發(fā)夾結(jié)構(gòu),影響遷移率,所以要 用變性緩沖液進(jìn)行電泳。202探針的離體標(biāo)記實(shí)際上是酶法標(biāo)記。203切口移位法(nick translation)只能標(biāo)記線性雙鏈 DNA不能標(biāo)記環(huán)狀雙鏈 DNA。204通過(guò)原位菌落雜交得到的陽(yáng)性克隆即是重組體,但不能判斷插入的外源基因是否進(jìn)行了表達(dá)。205尼龍膜(nylon membrane)是核酸雜交的一種固
35、體支持物,具有同 DNA結(jié)合能力強(qiáng)、韌性強(qiáng),可反復(fù)洗脫使用,并且雜交信號(hào)本底低等優(yōu)點(diǎn),就是成本高。206如果 DNA序列的某種變異在群體中是稀有的,稱(chēng)為突變;若是普遍的,則稱(chēng)為多態(tài)險(xiǎn)。207用寡聚 DNA進(jìn)行高度嚴(yán)緊的雜交可用于胎兒遺傳病的診斷,可檢測(cè)到因單個(gè)核苷酸變化而造成的基因突變。208.由于基因家族中成員之間是密切相關(guān)的,因此可以用其中一個(gè)成員作為探針進(jìn)行高度嚴(yán)緊的雜交來(lái)檢測(cè)其他成員。209通過(guò)用化學(xué)標(biāo)記法取代放射性標(biāo)記法,并采用一種抗體來(lái)特異性地識(shí)別這種化學(xué)修飾,使得原位雜交的分辨率大大提高。210在雜交之前先用凝膠電泳將粗提取物中的RNA或 DNA分子進(jìn)行分離,假定雜交后只有一種或
36、少數(shù)幾種大小的片段被探針雜交上了,就能肯定這種雜交是特異性的。211根據(jù)某一感興趣蛋白質(zhì)的序列、抗原性以及配基結(jié)合性質(zhì)制備探針,可從 DNA文庫(kù)中篩選到相應(yīng)的基因。212.如果用其他的方法對(duì)某種蛋白質(zhì)已進(jìn)行過(guò)鑒定,那么要確定某一克隆是否含有該蛋白編碼基因就相當(dāng)容易了。213用DNA探針進(jìn)行雜交反應(yīng)非常敏感并具有選擇性,可用來(lái)測(cè)定某一特定 DNA序列在細(xì)胞基因組中的拷貝數(shù)。214雙重藥物選擇法富集哺乳動(dòng)物細(xì)胞中稀有重組體的原理是:一種藥物用于選擇以任意方式整合外源 DNA的細(xì)胞,第二種藥物殺死帶有隨機(jī)整合 DNA的細(xì)胞。215就像對(duì)培養(yǎng)中的鼠胚性干細(xì)胞進(jìn)行遺傳操作獲得突變鼠一樣,用 DNA轉(zhuǎn)染培
37、養(yǎng)中的單個(gè)植物細(xì)胞,能夠創(chuàng)造轉(zhuǎn)基因植物。216NC(硝酸纖維素膜)和尼龍膜都可作為電轉(zhuǎn)移 DNA支持物。217單克隆抗體是淋巴細(xì)胞和瘤細(xì)胞雜交后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞經(jīng)無(wú)性繁殖而產(chǎn)生的特異性抗體。218用免疫化學(xué)法篩選重組體不需要外源基因的表達(dá)。219用 DNA探針同RNA 分子雜交在測(cè)定一已知基因在某一細(xì)胞中是否表達(dá)時(shí)是很有 用的,但不能用于檢測(cè)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)、終止位點(diǎn)或內(nèi)含子的位置。220. 核酸雜交的原理是根據(jù) DNA分子間互補(bǔ)。221. 突出的3末端或凹缺的3末端都可以用Klenow大片段酶進(jìn)行末端標(biāo)記。222用多核苷酸激酶進(jìn)行5末端標(biāo)記前, DNA必須進(jìn)行脫磷酸,否則無(wú)法標(biāo)記。223.
38、X-gal顯色反應(yīng)的基本原理是使載體上與受體互補(bǔ)的肽失活。224Norhern印跡和 Southern印跡的基本原理是一樣的,都是用于檢測(cè)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)。225. 在液相液相和液相固相雜交中,它們的雜交效率都是一樣的。四、簡(jiǎn)答題1.為什么只有 DNA適合作為遺傳物質(zhì)?2.在體內(nèi),rRNA和 tRNA都具有代謝的穩(wěn)定性,而 mRNA的壽命卻很短,原因何在?3.堿基對(duì)間在生化和信息方面有什么區(qū)別?4.在何種情況下有可能預(yù)測(cè)某一給定的核苷酸鏈中“G”的百分含量?5.真核基因組的哪些參數(shù)影響 Cot12值?6.請(qǐng)問(wèn)哪些條件可促使 DNA復(fù)性(退火)?7.為什么 DNA雙螺旋中維持特定的溝很重要?8.大
39、腸桿菌染色體的分子量大約是2.5×109Da1),核苷酸的平均分子量是330Da,兩個(gè)鄰近核苷酸對(duì)之間的距離是0.34mn;雙螺旋每一轉(zhuǎn)的高度(即螺距)是3.4nm,請(qǐng)問(wèn): (l)該分子有多長(zhǎng)? (2)該 DNA有多少轉(zhuǎn)?9.曾經(jīng)有一段時(shí)間認(rèn)為,DNA無(wú)論來(lái)源如何,都是4個(gè)核甘酸的規(guī)則重復(fù)排列(如, ATCGATCGATCGATCG),所以 DNA缺乏作為遺傳物質(zhì)的特異性。第一個(gè)直接推翻該四核苷酸定理的證據(jù)是什么?10.為什么在 DNA中通常只發(fā)現(xiàn) AT和 CG堿基配對(duì)?11.列出最先證實(shí)是 DNA(或RNA)而不是蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì)的一些證據(jù)。12.什么是連鎖群?舉一個(gè)屬于連鎖基因座
40、的例子。13.什么是順?lè)醋?用“互補(bǔ)”和“等位基因”說(shuō)明“基因”這個(gè)概念。14.對(duì)于所有具有催化能力的內(nèi)含子,金屬離子很重要。請(qǐng)舉例說(shuō)明金屬離子是如何作用的。15.列出真核生物mRNA與原核生物mRNA的區(qū)別。16.列出各種tRNA所有相同的反應(yīng)及個(gè)別 tRNA的特有反應(yīng)。17.為什么真核生物核糖體RNA基因具有很多拷貝?18.為什么說(shuō)信使RNA的命名源自對(duì)真核基因表達(dá)的研究,比說(shuō)源自對(duì)原核基因表達(dá)的研究更為恰當(dāng)?19.說(shuō)明為什么mRNA僅占細(xì)胞RNA總量的一小部分(3一5)。20.為何rRNA和tRNA分子比 mRNA穩(wěn)定?21.起始tRNA具有哪兩種與其他 tRNA不同的特性?22.區(qū)別r
41、RNA和mRNA在翻譯中的作用。23.氨基酸分子如何與正確的tRNA分子連接?24.簡(jiǎn)要說(shuō)明證明信使的存在及其本質(zhì)為RNA的證據(jù)。25.列舉4種天然存在的具有催化活性的RNA。26.型內(nèi)含子發(fā)生改變后,可以產(chǎn)生其他酶的活性嗎?如果可以,是哪些活性?這意味著型內(nèi)含子的催化中心有什么特點(diǎn)?27某些自剪接的內(nèi)含子具有可讀框,它們編碼何種蛋白?這與內(nèi)含子的移動(dòng)有什么關(guān)系?28.描述 Meselson-Stahl試驗(yàn),說(shuō)明這一實(shí)驗(yàn)加深我們對(duì)遺傳理解的重要性。29.請(qǐng)列舉可以在線性染色體的末端建立線性復(fù)制的三種方式。30.為什么一些細(xì)菌完成分裂的時(shí)間比細(xì)菌基因組的復(fù)制所需的時(shí)間要少?為什么在選擇營(yíng)養(yǎng)條件下
42、,E. coli中可以存在多叉的染色體或多達(dá)4個(gè)以上的開(kāi)環(huán)染色體拷貝, 而正常情況下染色體是單拷貝的?31.在 DNA聚合酶催化新鏈合成以前發(fā)生了什么反應(yīng)?32.DNA復(fù)制起始過(guò)程如何受DNA甲基化狀態(tài)影響?33.請(qǐng)指出在 oriC或X型起點(diǎn)起始的 DNA復(fù)制之間存在的重要差異。34.大腸桿菌被 T2噬菌體感染,當(dāng)它的 DNA復(fù)制開(kāi)始后提取噬菌體的 DNA,發(fā)現(xiàn)一些RNA與 DNA緊緊結(jié)合在一起,為什么?35.DNA連接酶對(duì)于 DNA的復(fù)制是很重要的,但RNA的合成一般卻不需要連接酶。解釋這個(gè)現(xiàn)象的原因。36.曾經(jīng)認(rèn)為 DNA的復(fù)制是全保留復(fù)制,每個(gè)雙螺旋分子都作為新的子代雙螺旋分子的模板。如
43、果真是這樣,在Meselson和 Stahl的實(shí)驗(yàn)中他們將得到什么結(jié)果?37.描述 Matthew和Franklin所做的證明 DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)。38.解釋在DNA復(fù)制過(guò)程中,后隨鏈?zhǔn)窃鯓雍铣傻摹?9描述滾環(huán)復(fù)制過(guò)程及其特征。40.假如發(fā)生了堿基對(duì)的錯(cuò)配會(huì)產(chǎn)生什么表型,它們?cè)鯓颖恍迯?fù)?41.為什么 DNA的甲基化狀態(tài)可以為復(fù)制的調(diào)節(jié)和 DNA的修復(fù)所利用?42.錯(cuò)配修復(fù)的方向可以怎樣被調(diào)節(jié)(突變型到野生型或野生型到突變型)?43.RecA蛋白是怎樣調(diào)節(jié) SOS反應(yīng)的?44.以圖4.1A為例,畫(huà)出圖4.1B所示分子同源區(qū)域交叉重組的產(chǎn)物,圖中用一條單線表示 DNA雙螺旋,同源重組的靶位點(diǎn)用
44、箭頭標(biāo)出。圖4.1各種重組的底物45.圖4.2所示為兩條同源的親代雙螺旋和兩套可能的重組產(chǎn)物。請(qǐng)畫(huà)圖表示兩親代雙螺旋間可以產(chǎn)生指定重組產(chǎn)物的 Holliday連接,在每條鏈的左端標(biāo)明 Holliday連接的3或5端,這樣親代和重組雙螺旋間的關(guān)系就比較清楚。請(qǐng)指明為了產(chǎn)生每套重組產(chǎn)物哪些鏈應(yīng)被切去。最后,畫(huà)出經(jīng)過(guò)一輪 DNA復(fù)制后的重組產(chǎn)物。圖4.2親代與重組的雙螺旋46.為什么基因內(nèi)互補(bǔ)只發(fā)生在:(1)某一基因座的等位基因間;(2)這些基因座的特殊等位基因?qū)﹂g?47.有很多突變對(duì)于野生型基因是隱性的,也就是說(shuō),在一個(gè)含有突變型和野生型基因二倍體細(xì)胞中,野生型的特性能夠得到表達(dá)。請(qǐng)根據(jù)對(duì)突變過(guò)程
45、的認(rèn)識(shí)解釋這一事實(shí)。對(duì)于說(shuō)明為什么有些突變是顯性的,有何見(jiàn)解?48.為了選擇下面兩種突變型,應(yīng)對(duì)只含有葡萄糖、硫酸銨以及無(wú)機(jī)離子的基本培養(yǎng)基作何調(diào)整? (1) leu,亮氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型; (3)gal,不能以半乳糖作為唯一碳源的突變型。49.寫(xiě)出利用突變研究以下問(wèn)題的步驟: (l)氨基酸 X的代謝途徑; (2)Ecoli中細(xì)胞分裂的控制。50.在工業(yè)微生物菌種的選育中,人們喜歡用誘變的方法篩選解除了酶合成阻遏的突變株,而不要解除了酶活性反饋抑制的突變株。請(qǐng)解釋原因。51.為什么一個(gè)基因座的正向突變發(fā)生的頻率要比回復(fù)突變高?52.一個(gè)基因間阻遏物突變?cè)鯓幼瓒袅艘粋€(gè)錯(cuò)義突變?53.為什么吖啶類(lèi)染料
46、誘導(dǎo)的突變較堿基類(lèi)似物誘導(dǎo)的突變對(duì)生物體更有害?54.羥胺對(duì)游離噬菌體和轉(zhuǎn)化 DNA都是高度特異的致變劑。它只與 DNA中的C反應(yīng),使之轉(zhuǎn)變成偶爾可與 A錯(cuò)配的形式。 (1)羥胺誘導(dǎo)的堿基替代是什么? (2)推測(cè)羥胺是否可回復(fù)自身誘導(dǎo)的突變? (3)羥胺可以回復(fù)5溴尿嘧啶誘導(dǎo)的突變嗎? (4)5溴尿嘧啶可以回復(fù)羥胺誘導(dǎo)的突變嗎?55.在下列哪些基因中你可以分離到溫度敏感突變和琥珀突變? (l) lacO;(2) lacZ; (3) lacP;(4) lacI56.區(qū)別反向突變、回復(fù)突變和第二位點(diǎn)回復(fù)突變。57.指出突變頻率和突變率的區(qū)別。58.簡(jiǎn)述大腸桿菌中的增變基因。59.簡(jiǎn)述怎樣利用化學(xué)誘
47、變劑在細(xì)菌中的誘變來(lái)檢測(cè)它們致癌作用。60.簡(jiǎn)述 Muller5技術(shù),并說(shuō)明如何利用它測(cè)得 X射線對(duì)果蠅突變頻率的影響。61.列舉幾種具以下特征突變:(1)不能合成特殊多肽;(2)組成型合成多肽。62.突變能影響高等真核生物結(jié)構(gòu)基因表達(dá)的幾個(gè)水平?并指出每種突變最明顯的分子表型。63.當(dāng)E.coli菌株 K同時(shí)被兩個(gè)特異的 T4噬菌體 r突變體所感染時(shí),感染細(xì)胞裂解并釋放出正常數(shù)量的噬菌體后代。這些后代是重組的結(jié)果還是互補(bǔ)作用的結(jié)果?應(yīng)怎 樣辨別?64.在E.coli中, A和 B基因座相隔了大約5的基因組,另一對(duì)標(biāo)記 C和 D間隔1的基因組。哪對(duì)能被(1)共轉(zhuǎn)化;(2)共轉(zhuǎn)導(dǎo)?65.當(dāng)一個(gè)烈
48、性噬菌體的所有基因全部表達(dá)時(shí),如果不對(duì)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行時(shí)序性調(diào)控,將出現(xiàn) 什么問(wèn)題?66.為什么噬菌體感染產(chǎn)生的溶源菌通常對(duì)其他的噬菌體的感染有免疫?67.請(qǐng)預(yù)測(cè)具有下列突變的噬菌體感染細(xì)菌的表型。并說(shuō)明原因: (1)產(chǎn)生一個(gè)抗蛋白酶的 c蛋白的突變。 (2)具有阻止蛋白結(jié)合的OR2的突變。 (3)使N基因失去作用的突變。 (4)編碼 c I蛋白的基因突變。68鑒定化合物的致癌性的一個(gè)通用實(shí)驗(yàn)是愛(ài)姆斯試驗(yàn),通過(guò)營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌的回復(fù)突變 確定其致癌性。用人噬菌體和E.coli設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)使之能用于致癌物的檢測(cè)。69為什么像流感病毒這樣的RNA 病毒的生命周期,有力地支持了以下這一論點(diǎn):與其說(shuō)病毒是生命有機(jī)
49、體,不如說(shuō)它是“寄生的遺傳因子”。70.大腸桿菌噬菌體 T2的染色體是一個(gè)線性 DNA分子,它的兩端都有冗余并且可作循 環(huán)變換。解釋冗余的含義并說(shuō)明這些分子是怎樣產(chǎn)生的。71.烈性噬菌體和溫和噬菌體的區(qū)別是什么?72.從噬菌體 MS2中提取出來(lái)的裸露染色體可以感染大腸桿菌的原生質(zhì)球(去除胞壁的細(xì)菌),這會(huì)產(chǎn)生和具感染能力的噬菌體一樣的噬菌體顆粒。如果染色體先用RNA酶處理,就會(huì)失去感染能力;另外,如果標(biāo)記感染的RNA,在子代中不出現(xiàn)標(biāo)記。解釋這些現(xiàn)象。73.從噬菌體中提取的 DNA用兩種只攻擊單鏈 DNA的外切核酸酶處理。外切核酸酶 A只從突出的5端消化 DNA,而外切核酸酶 B只攻擊自由的3
50、端。這種處理對(duì)噬菌體 DNA的生物活性有什么影響?74比較真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄起始的第一步有什么個(gè)同。75轉(zhuǎn)錄涉及模板鏈和編碼鏈的分離,解釋在轉(zhuǎn)錄中單鏈 DNA是怎樣被保護(hù)的。76概括說(shuō)明因子對(duì)啟動(dòng)子調(diào)節(jié)的輔助功能。77什么是增效與減效突變?78細(xì)菌促旋酶突變通常是致死的,但是促旋酶拓?fù)洚悩?gòu)酶突變卻可以成活,其原何在?79解釋因子是怎樣選擇專(zhuān)一性啟動(dòng)子共有序列而啟動(dòng)不同基因表達(dá)的(考慮對(duì)環(huán)境壓力的應(yīng)答)。80 rpoN基因編碼因子:54,它具有不同于已知原核生物的因子的特征。請(qǐng)與E. coli的因子:70(RpoD)作比較討論這些特征。81在原核生物中,核心酶與 DNA的松散結(jié)合和緊密結(jié)合之
51、間存在種平衡,為什么這比核心多聚酶自身形成游離與結(jié)合平衡更有利?82正調(diào)控和負(fù)調(diào)控的主要不同是什么?83區(qū)別(1)啟動(dòng)子增效突變與啟動(dòng)子減效突變;(2)上游序列和下游序列。84解釋為什么操縱子和啟動(dòng)子是反式隱性、順式顯性的,而編碼阻礙蛋白的基因既是反式顯性又是順式顯性。85為什么只有 DNA雙螺旋中的一條鏈能被正常的轉(zhuǎn)錄?86哪三個(gè)序列對(duì)原核生物mRNA的精確轉(zhuǎn)錄是必不可少的?87說(shuō)明因 RNA聚合酶啟動(dòng)子不同的相互作用如何導(dǎo)致不同基因的轉(zhuǎn)錄。88原核生物的核糖體 RNA和 tRNA的相對(duì)較穩(wěn)定并且半衰期長(zhǎng),而 mRNA卻不穩(wěn)定,很快被降解,請(qǐng)解釋這種穩(wěn)定性的差異。89列舉兩種受調(diào)控蛋白控制的
52、、與氨基酸的生物合成有關(guān)的操縱子。90什么是安慰誘導(dǎo)物?91葡萄糖是如何影響涉及糖代謝的操縱子(葡萄糖敏感型操縱子)的表達(dá)?92在大多數(shù)細(xì)菌操縱子中,結(jié)構(gòu)基因通常緊靠在一起并由單個(gè)操縱序列啟動(dòng)子區(qū)調(diào)控,而在一些例子中結(jié)構(gòu)基因分散在染色體上。請(qǐng)問(wèn)這些基因是如何以簡(jiǎn)單的方式達(dá)到協(xié)同調(diào)節(jié)的。93. 反轉(zhuǎn)錄病毒與反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子有什么不同?94. gag和pol基因的蛋白產(chǎn)物是怎樣生成的? mRNA編碼的 Env蛋白是怎樣生成的?95. 蛋白酶為什么對(duì)反轉(zhuǎn)錄病毒生活史很重要?96. 列出轉(zhuǎn)化病毒正鏈RNA摻入到宿主雙鏈 DNA的詳細(xì)過(guò)程。97. 噬菌體整合到宿主基因組后,46個(gè)宿主 DNA的核苷酸被復(fù)制,
53、這是為什么?這與轉(zhuǎn)座子插入新位點(diǎn)有何相似之處?另外,兩個(gè)核苷酸從5U3的5和3被切除,這意味著遺傳信息從反轉(zhuǎn)錄病毒中被丟失嗎?98反轉(zhuǎn)錄病毒怎樣獲得像onc基因這樣的細(xì)胞基因?獲得此類(lèi)基因會(huì)對(duì)反轉(zhuǎn)錄病毒基 因產(chǎn)生影響嗎?一個(gè)反轉(zhuǎn)錄病毒怎樣才會(huì)丟失如 pol和 env這樣的重要的基因而復(fù)制?99描述酵母 Ty元件的結(jié)構(gòu)。它與反轉(zhuǎn)錄病毒有何相似之處?為什么它不形成感染粒子? 100你如何證明 Ty元件在轉(zhuǎn)座時(shí)經(jīng)歷了一個(gè)RNA中間體?101FB元件與copia因子有何不同?102列出病毒和非病毒超家族反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子之間的4種差異。103為什么說(shuō) Alu元件可能作為 DNA復(fù)制的起點(diǎn)?有什么理由不支持這
54、種假說(shuō)呢?104描述兩種轉(zhuǎn)座子引起基因組重排的方式。105 IS元件整合到靶位點(diǎn)時(shí)會(huì)發(fā)生什么?106一個(gè)復(fù)合轉(zhuǎn)座子和一個(gè) IS元件之間的關(guān)系是什么?107列出一個(gè)轉(zhuǎn)座子插入到一個(gè)新位點(diǎn)所要求的步驟。108當(dāng)(l)DNA在兩個(gè)定向重復(fù)之間(2)DNA在兩個(gè)反向重復(fù)之間發(fā)生重組的效應(yīng)各是什么?109在什么過(guò)程中會(huì)形成一個(gè)共整合體?它的結(jié)構(gòu)是什么?110Tn10元件只有在自己的轉(zhuǎn)座酶基因具有活性時(shí)發(fā)生轉(zhuǎn)座(與利用基因組中 Tn10元件表達(dá)的轉(zhuǎn)座酶的情況正好相反),這種偏愛(ài)的原因是什么?111什么是雜種不育?是什么引起的?112即使不攜帶癌基因,反轉(zhuǎn)錄病毒依然會(huì)導(dǎo)致癌變轉(zhuǎn)化。列舉這種現(xiàn)象發(fā)生的三種方式
55、。113簡(jiǎn)述大腸桿菌的插入序列,并指出它們對(duì)自發(fā)突變的重要性。114比較基因組的大小和基因組復(fù)雜性的不同:個(gè)基因組有兩個(gè)序列,一個(gè)是 A,另個(gè)是 B,各將2000bP長(zhǎng)。其中個(gè)是由400bp的序列重復(fù)5次而成,另一個(gè)則由50bp的序列重復(fù)40次而成,問(wèn): (1)這個(gè)基因組的大小怎樣? (2)這個(gè)基因組的復(fù)雜性如何?115. 一個(gè)基因如何產(chǎn)生兩種不同類(lèi)型的mRNA分子?116. 在一個(gè)克隆基因的分析中發(fā)現(xiàn):個(gè)含有轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)上游3.8kb DNA的克隆,其 mRNA直接轉(zhuǎn)錄活性比僅含有3.1kb上游 DNA的克隆的轉(zhuǎn)錄活性大50倍。這表明了什么?117被加工的假基因與其他假基因有哪些不同?它是如何產(chǎn)生的?118非轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)與轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)分別位于 rRNA重復(fù)的什么位置?轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)與內(nèi)含子 有何區(qū)別?119請(qǐng)描述 C值矛盾,并舉一個(gè)例說(shuō)明。120在酵母基因中,其生活必需基因占多大比例?為什么有些基因可能是不必要的?121酵母mRNA的大小一般與基因的大小相致。而哺乳動(dòng)物 mRNA比對(duì)應(yīng)的基因明顯小。為什么?122在一個(gè)
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