生物化學(xué)檢驗(yàn)電解質(zhì)第二講

1、鉀、鈉、氯測(cè)定及方法學(xué)評(píng)價(jià)鉀、鈉、氯測(cè)定及方法學(xué)評(píng)價(jià)l（一）樣品的采集和處理（一）樣品的采集和處理血清、肝素鋰抗凝血漿、汗、糞便、尿及胃血清、肝素鋰抗凝血漿、汗、糞便、尿及胃腸液均可作為測(cè)定鈉鉀樣品。腸液均可作為測(cè)定鈉鉀樣品。血清或血漿可在血清或血漿可在24或冰凍保存?；虮鶅霰４?。鉀測(cè)定結(jié)果明顯受溶血的干擾，鉀測(cè)定結(jié)果明顯受溶血的干擾，因?yàn)榧t細(xì)胞因?yàn)榧t細(xì)胞中鉀比血漿鉀高二十幾倍，故樣品嚴(yán)格防止溶血。中鉀比血漿鉀高二十幾倍，故樣品嚴(yán)格防止溶血。血漿鉀比血清低血漿鉀比血清低0.10.7mmol/L，這種差別是由，這種差別是由于凝血過(guò)程中血小板破裂釋放鉀之故。于凝血過(guò)程中血小板破裂釋放鉀之故。鈉的測(cè)

2、定受溶血影響很小。鈉的測(cè)定受溶血影響很小。全血未及時(shí)分離或冷藏均可使血鉀上升。全血未及時(shí)分離或冷藏均可使血鉀上升。l（二）方法學(xué)（二）方法學(xué)鉀、鈉的測(cè)定方法有：火焰光度法、離子選鉀、鈉的測(cè)定方法有：火焰光度法、離子選擇電極法、冠醚法和酶法。擇電極法、冠醚法和酶法。氯的測(cè)定方法有：離子選擇電極法、硫氰酸氯的測(cè)定方法有：離子選擇電極法、硫氰酸汞比色法、硝酸汞滴定法和電量分析法汞比色法、硝酸汞滴定法和電量分析法（庫(kù)侖滴（庫(kù)侖滴定法）定法）1.火焰光度法：火焰光度法：Na+、K+測(cè)定可采用火焰光度法。測(cè)定可采用火焰光度法。原理：火焰光度法是一種發(fā)射光譜分析法，原理：火焰光度法是一種發(fā)射光譜分析法，利用

3、火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時(shí)發(fā)射的光譜利用火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時(shí)發(fā)射的光譜強(qiáng)度進(jìn)行含量分析。強(qiáng)度進(jìn)行含量分析。l該法可檢測(cè)血清、尿液、腦脊液及胸腹水該法可檢測(cè)血清、尿液、腦脊液及胸腹水的的Na+和和K+，該方法屬于經(jīng)典的標(biāo)準(zhǔn)參考該方法屬于經(jīng)典的標(biāo)準(zhǔn)參考法法，l3.離子選擇電極法離子選擇電極法（ISE法）：法）：原理：離子選擇電極是一種電化學(xué)傳原理：離子選擇電極是一種電化學(xué)傳感器，其結(jié)構(gòu)中有一個(gè)對(duì)特定離子具有選感器，其結(jié)構(gòu)中有一個(gè)對(duì)特定離子具有選擇性響應(yīng)的敏感膜，將離子活度轉(zhuǎn)換成電擇性響應(yīng)的敏感膜，將離子活度轉(zhuǎn)換成電位信號(hào)，在一定范圍內(nèi)，其電位與溶液中位信號(hào)，在一定范圍內(nèi)，其電位與溶液中特

4、定離子活度的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系，通過(guò)與特定離子活度的對(duì)數(shù)呈線性關(guān)系，通過(guò)與已知離子濃度的溶液比較可求得未知溶液已知離子濃度的溶液比較可求得未知溶液的離子活度，的離子活度，l優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn);ISE法具有標(biāo)本用量少，快速準(zhǔn)確，法具有標(biāo)本用量少，快速準(zhǔn)確，操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。是目前所有方法中最為操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。是目前所有方法中最為簡(jiǎn)便準(zhǔn)確的方法。簡(jiǎn)便準(zhǔn)確的方法。缺點(diǎn)：電極具有一定壽命，使用一段缺點(diǎn)：電極具有一定壽命，使用一段時(shí)問(wèn)后，電極會(huì)老化。時(shí)問(wèn)后，電極會(huì)老化。l是是臨床臨床檢驗(yàn)中必不可少的醫(yī)療檢驗(yàn)中必不可少的醫(yī)療器械器械之一，之一，儀器儀器主要用來(lái)從樣本中檢測(cè)鉀離子，鈉離主要用來(lái)從樣本中檢測(cè)鉀離子，鈉離子，氯

5、離子，離子鈣和鋰離子。子，氯離子，離子鈣和鋰離子。儀器儀器的檢的檢測(cè)樣本可以是全血，血清，血漿，尿液，測(cè)樣本可以是全血，血清，血漿，尿液， 透析液，和水化液。透析液，和水化液。電解質(zhì)分析儀的工作原理 l 溶液中被測(cè)離子接觸電極時(shí)溶液中被測(cè)離子接觸電極時(shí),在離子選擇電在離子選擇電極基質(zhì)的極基質(zhì)的含水層含水層內(nèi)發(fā)生離子遷移內(nèi)發(fā)生離子遷移.遷移的離遷移的離子的子的電荷電荷改變存在著改變存在著電勢(shì)電勢(shì),因而使膜面間的因而使膜面間的電位發(fā)生變化電位發(fā)生變化,在測(cè)量電極與參比電極間產(chǎn)在測(cè)量電極與參比電極間產(chǎn)生一個(gè)生一個(gè)電位差電位差. l鈉電極特點(diǎn)：鈉電極是一種玻璃鈉電極特點(diǎn)：鈉電極是一種玻璃毛細(xì)管毛細(xì)管電

6、極用來(lái)測(cè)定液體樣本中的電極用來(lái)測(cè)定液體樣本中的鈉離子鈉離子濃度，濃度，主要結(jié)構(gòu)：主要結(jié)構(gòu)：l電極套：透明塑料。電極套：透明塑料。l測(cè)量毛細(xì)管：鈉敏感玻璃。測(cè)量毛細(xì)管：鈉敏感玻璃。l電極室電極室 ：密封的，內(nèi)充滿鈉電極液。：密封的，內(nèi)充滿鈉電極液。l電極芯：電極芯：Ag、Agcll鉀電極特點(diǎn)：鉀電極是一種膜電板，也是鉀電極特點(diǎn)：鉀電極是一種膜電板，也是用來(lái)測(cè)量樣本中的用來(lái)測(cè)量樣本中的鉀離子鉀離子濃度。濃度。l主要結(jié)構(gòu)：主要結(jié)構(gòu)：l電極套：透明塑料。電極套：透明塑料。l測(cè)量毛細(xì)管：鉀離子敏感膜。測(cè)量毛細(xì)管：鉀離子敏感膜。l電極室：密封的，內(nèi)充滿電極室：密封的，內(nèi)充滿K+液。液。l電極芯：電極芯：A

7、g/Agcll氯電極特點(diǎn)：氯電極也是一種膜電極，用氯電極特點(diǎn)：氯電極也是一種膜電極，用來(lái)測(cè)量樣本中的來(lái)測(cè)量樣本中的Cl離子濃度。離子濃度。l主要結(jié)構(gòu)：主要結(jié)構(gòu)：l電極套：透明塑料。電極套：透明塑料。l測(cè)量毛細(xì)管：測(cè)量毛細(xì)管：Cl離子敏感膜。離子敏感膜。l電極室：密封的且充有電極室：密封的且充有Cl-液。液。l電極芯：電極芯：Ag/Agcll參比電極特點(diǎn)：參比電極是連接樣本和信號(hào)地的一個(gè)裝參比電極特點(diǎn)：參比電極是連接樣本和信號(hào)地的一個(gè)裝置。置。l主要結(jié)構(gòu)：主要結(jié)構(gòu)： 參比電極由兩部分組成：參比電極由兩部分組成： 參比電極套和參比電極套和參比電極芯。參比電極套中的參比液在以參比電極芯與樣參比電極芯

8、。參比電極套中的參比液在以參比電極芯與樣本之間形成一個(gè)鹽橋，每次測(cè)量開(kāi)始時(shí)，參比液被注入?yún)⒈局g形成一個(gè)鹽橋，每次測(cè)量開(kāi)始時(shí)，參比液被注入?yún)⒈入姌O套中，同時(shí)有一小部分參比液由玻璃毛細(xì)管中滲入比電極套中，同時(shí)有一小部分參比液由玻璃毛細(xì)管中滲入測(cè)量室測(cè)量室 ，從而在樣本和參比電極芯之間形成鹽橋，參比，從而在樣本和參比電極芯之間形成鹽橋，參比電極芯在電信號(hào)地和參比液之間形成回路。電極芯在電信號(hào)地和參比液之間形成回路。l測(cè)量過(guò)程：離子選擇式電極，電極內(nèi)含有已知離子濃測(cè)量過(guò)程：離子選擇式電極，電極內(nèi)含有已知離子濃度的電極液，通過(guò)離子選擇電極膜與樣本中相應(yīng)離子相互度的電極液，通過(guò)離子選擇電極膜與樣本中相應(yīng)

9、離子相互滲透，從而在膜的兩邊產(chǎn)生膜電位，樣本中離子濃度不用，滲透，從而在膜的兩邊產(chǎn)生膜電位，樣本中離子濃度不用，產(chǎn)生的電位信號(hào)的大小也不同，通過(guò)測(cè)量電位信號(hào)大小就產(chǎn)生的電位信號(hào)的大小也不同，通過(guò)測(cè)量電位信號(hào)大小就可以測(cè)知樣本中離子的濃度?？梢詼y(cè)知樣本中離子的濃度。l電極內(nèi)液與樣本之間的離子濃度電極內(nèi)液與樣本之間的離子濃度差使差使電極電極膜產(chǎn)生電化學(xué)電位，這個(gè)電位可由電極取膜產(chǎn)生電化學(xué)電位，這個(gè)電位可由電極取出，輸往出，輸往放大器放大器的輸入端，放大器的另一的輸入端，放大器的另一個(gè)輸入端與參比電極連接并接地，電極電個(gè)輸入端與參比電極連接并接地，電極電壓可進(jìn)一步放大。形成電壓差，決定著被壓可進(jìn)一步

10、放大。形成電壓差，決定著被測(cè)樣本的離子濃度。測(cè)樣本的離子濃度。 l電極溶液中被測(cè)離子接觸電極時(shí)，在離子電極溶液中被測(cè)離子接觸電極時(shí)，在離子選擇電極膜基質(zhì)的含水層內(nèi)發(fā)生離子遷移。選擇電極膜基質(zhì)的含水層內(nèi)發(fā)生離子遷移。遷移離子的電荷改變存在著電勢(shì)，因而使遷移離子的電荷改變存在著電勢(shì)，因而使膜面間的電位發(fā)生變化；在測(cè)量電極與參膜面間的電位發(fā)生變化；在測(cè)量電極與參比電極間產(chǎn)生一個(gè)電位差。理想的離子選比電極間產(chǎn)生一個(gè)電位差。理想的離子選擇性電極對(duì)溶液中所要測(cè)定的離子產(chǎn)生的擇性電極對(duì)溶液中所要測(cè)定的離子產(chǎn)生的電位差，應(yīng)符合電位差，應(yīng)符合能斯特能斯特（Nernst）方）方程程 E=E0+ log10a(x)

11、 lE：測(cè)得的電位lE0：標(biāo)準(zhǔn)電極電位（常數(shù)）lR：氣體常數(shù)lT：絕對(duì)溫度lZ：離子價(jià)lF：法拉第常數(shù)la(x)：離子的活度l可見(jiàn)測(cè)得的電極電位和可見(jiàn)測(cè)得的電極電位和“X”離子的活度離子的活度的的對(duì)數(shù)對(duì)數(shù)成比例，當(dāng)活度系數(shù)保持恒定時(shí)，成比例，當(dāng)活度系數(shù)保持恒定時(shí)，電極電位與離子濃度（電極電位與離子濃度（C）的對(duì)數(shù)也成比例，）的對(duì)數(shù)也成比例，以此來(lái)求出溶液中離子的活度或濃度。以此來(lái)求出溶液中離子的活度或濃度。 l目前生產(chǎn)鈉鉀氯離子電極分析儀的廠家很目前生產(chǎn)鈉鉀氯離子電極分析儀的廠家很多，但所用的電極基本相同，鈉多采用多，但所用的電極基本相同，鈉多采用硅硅酸酸鋰鋁鋰鋁玻璃電極玻璃電極膜制成，壽命較

12、長(zhǎng)，鉀電膜制成，壽命較長(zhǎng)，鉀電極多采用結(jié)頁(yè)氨霉素膜制成極多采用結(jié)頁(yè)氨霉素膜制成。 l離子選擇性電極分析儀內(nèi)的主要組成部分離子選擇性電極分析儀內(nèi)的主要組成部分Na+、K+、Cl-電極都有規(guī)定的壽命，需要電極都有規(guī)定的壽命，需要定期更換。一般情況下，經(jīng)多次保養(yǎng)電極，定期更換。一般情況下，經(jīng)多次保養(yǎng)電極，且保證管道暢通，多次定標(biāo)仍不能通過(guò)的且保證管道暢通，多次定標(biāo)仍不能通過(guò)的電極，就需更換此電極。電極，就需更換此電極。 電解質(zhì)分析儀的使用l1 開(kāi)機(jī)自動(dòng)定標(biāo)（也可以選擇退出不開(kāi)機(jī)自動(dòng)定標(biāo)（也可以選擇退出不定標(biāo)，方便維修維護(hù)）定標(biāo)，方便維修維護(hù)）l2 一點(diǎn)定標(biāo)、兩點(diǎn)定標(biāo)可選一點(diǎn)定標(biāo)、兩點(diǎn)定標(biāo)可選l3 智

13、能液體檢測(cè)程序，確保進(jìn)樣及測(cè)智能液體檢測(cè)程序，確保進(jìn)樣及測(cè)量準(zhǔn)確量準(zhǔn)確l4 故障自動(dòng)診斷，自動(dòng)提示故障自動(dòng)診斷，自動(dòng)提示l5 測(cè)量過(guò)程自動(dòng)提示，您方便的向?qū)y(cè)量過(guò)程自動(dòng)提示，您方便的向?qū)6 可可24小時(shí)待機(jī)，在待機(jī)狀態(tài)能自動(dòng)保養(yǎng)，有小時(shí)待機(jī)，在待機(jī)狀態(tài)能自動(dòng)保養(yǎng)，有自動(dòng)沖洗功能自動(dòng)沖洗功能l7 具有電極活化計(jì)時(shí)功能，精確把握活化具有電極活化計(jì)時(shí)功能，精確把握活化時(shí)間時(shí)間l8 自動(dòng)打印、手動(dòng)打印可選，節(jié)約自動(dòng)打印、手動(dòng)打印可選，節(jié)約打印紙打印紙l9 報(bào)告單：病人綜合信息報(bào)告報(bào)告單：病人綜合信息報(bào)告,正常值判斷正常值判斷結(jié)果結(jié)果l10 中、英文兩種操作語(yǔ)言可選，并可打印中、英文兩種操作語(yǔ)言可選，

14、并可打印中、英文中、英文 報(bào)告單報(bào)告單l11 有質(zhì)控功能，自動(dòng)儲(chǔ)存質(zhì)控校正有質(zhì)控功能，自動(dòng)儲(chǔ)存質(zhì)控校正因數(shù)因數(shù)，自動(dòng)生成質(zhì)控報(bào)告，計(jì)算出自動(dòng)生成質(zhì)控報(bào)告，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)準(zhǔn)差、變異變異系數(shù)系數(shù)等參數(shù)等參數(shù)l12 吸樣針具有自動(dòng)抬起，自動(dòng)歸位吸樣針具有自動(dòng)抬起，自動(dòng)歸位自動(dòng)清洗功能，避免吸樣針堵塞自動(dòng)清洗功能，避免吸樣針堵塞l13 簡(jiǎn)短的液路，獨(dú)有兩點(diǎn)三泵自動(dòng)簡(jiǎn)短的液路，獨(dú)有兩點(diǎn)三泵自動(dòng)定標(biāo)及沖洗管道系統(tǒng)，杜絕交叉污染和定標(biāo)及沖洗管道系統(tǒng)，杜絕交叉污染和管管路路堵塞堵塞ll1 檢測(cè)樣品：全血、血清、血漿、尿液、檢測(cè)樣品：全血、血清、血漿、尿液、體液等體液等l2 測(cè)量方法測(cè)量方法：離子選擇性電極（：

15、離子選擇性電極（ISE）直接法直接法l3 檢測(cè)項(xiàng)目：檢測(cè)項(xiàng)目：K+、Na+、Cl-、Ca2+、PH、CO2、Li+，l操作方法操作方法l 儀器開(kāi)機(jī)進(jìn)入系統(tǒng)自檢，檢測(cè)各主要部件的儀器開(kāi)機(jī)進(jìn)入系統(tǒng)自檢，檢測(cè)各主要部件的功能是否正常，如：儀器功能是否正常，如：儀器主板主板、打印機(jī)、液路檢、打印機(jī)、液路檢測(cè)（由液檢器完成）、分配閥及閥檢器等，可智測(cè)（由液檢器完成）、分配閥及閥檢器等，可智能識(shí)別判斷故障，自動(dòng)提示。能識(shí)別判斷故障，自動(dòng)提示。l 進(jìn)入活化電極程序，具有電極活化計(jì)時(shí)功能，進(jìn)入活化電極程序，具有電極活化計(jì)時(shí)功能，精確把握活化時(shí)間，以提高電極的使用壽命，確精確把握活化時(shí)間，以提高電極的使用壽命，

16、確保電極穩(wěn)定性。時(shí)間為保電極穩(wěn)定性。時(shí)間為30分鐘倒計(jì)時(shí)，可按分鐘倒計(jì)時(shí)，可按NO 鍵直接退出活化電極程序。鍵直接退出活化電極程序。l 進(jìn)入主菜單，首先進(jìn)行系統(tǒng)定標(biāo)，可自動(dòng)進(jìn)進(jìn)入主菜單，首先進(jìn)行系統(tǒng)定標(biāo)，可自動(dòng)進(jìn)行選擇基點(diǎn)與行選擇基點(diǎn)與斜率斜率定標(biāo)（也可以選擇退出不定標(biāo)，定標(biāo)（也可以選擇退出不定標(biāo)，方便維修維護(hù)，但不可以直接測(cè)血清標(biāo)本）方便維修維護(hù)，但不可以直接測(cè)血清標(biāo)本）l 選擇質(zhì)控分析，經(jīng)選擇質(zhì)控分析，經(jīng)5次以上的質(zhì)控測(cè)試后，可次以上的質(zhì)控測(cè)試后，可自動(dòng)生成、打印質(zhì)控報(bào)告，計(jì)算出所做質(zhì)控次數(shù)自動(dòng)生成、打印質(zhì)控報(bào)告，計(jì)算出所做質(zhì)控次數(shù)的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)。的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)。l 智能液體檢測(cè)程序，確保進(jìn)樣及測(cè)量準(zhǔn)確，智能液體檢測(cè)程序，確保進(jìn)樣及測(cè)量準(zhǔn)確， 測(cè)量過(guò)程自動(dòng)提示，您方便的向?qū)?，測(cè)量過(guò)程自動(dòng)提示，您方便的向?qū)В?可可24小時(shí)待小時(shí)待機(jī)，在待機(jī)狀態(tài)能自動(dòng)保養(yǎng)，有自動(dòng)正反沖洗功機(jī)，在待機(jī)狀態(tài)能自動(dòng)保養(yǎng)，有自動(dòng)正反沖洗功能，能， 簡(jiǎn)短的液路，獨(dú)有正反沖洗自動(dòng)定標(biāo)及沖洗簡(jiǎn)短的液路，獨(dú)有正反沖洗自動(dòng)定標(biāo)及沖洗管道系統(tǒng)，杜絕交叉污染和管路堵塞管道系統(tǒng)，杜絕交叉污染和管路堵塞。l l30孔位自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，設(shè)有質(zhì)控孔位自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，設(shè)有質(zhì)控M孔位孔位及廢液孔位及廢液孔位W位。一次可檢測(cè)位。一次可檢測(cè)30個(gè)標(biāo)本。個(gè)標(biāo)本。 l 7自動(dòng)打印、手動(dòng)打