2016年新立式壓力蒸汽滅菌器效果驗證報告

1、重慶西南制藥二廠有限責(zé)任公司頁數(shù)共11頁文件編碼：SVR-09009-00-2016文件名稱YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器效果驗證報告制定人制定日期審核人審核日期QA審閱人審閱日期批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期受控狀態(tài)分發(fā)號生效日期分發(fā)部門質(zhì)量部QA質(zhì)量部QC技術(shù)部綜合部供銷部口設(shè)備工程部口動力車間口EHS部 財務(wù)部口生產(chǎn)部口一車間口二車間 三車間口制劑車間文件歷史日期交更原因變更前文件版本號驗證小組人員名單組長姓名職務(wù)/職稱職責(zé)李輝質(zhì)量部副部長負責(zé)驗證方案和報告的審核工作；負責(zé)組織實施滅菌效果確認組員姓名職務(wù)/職稱職責(zé)張麗QC負責(zé)驗證方案和報告的起草；負責(zé)實施滅菌效果確認；負責(zé)進行檢測；統(tǒng)計檢測數(shù)

2、據(jù)陳靜QC主管負責(zé)驗證方案和報告的起草；負責(zé)實施滅菌效果確認；負責(zé)進行檢測；統(tǒng)計檢測數(shù)據(jù)謝青QA協(xié)調(diào)驗證工作批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期目錄項目名稱頁碼日的5,驗證類別,，5驗證時間，,，5驗證依據(jù)5,J/Il,接受標(biāo)準(zhǔn)5,驗證的實施步驟，,，5偏差及異常處理，,，10再驗證,，10驗證報告、結(jié)果分析和結(jié)論,10驗證結(jié)論批準(zhǔn)、會簽及日期,10驗證證書,11批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期序號1234567891011摘要公司對YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器121c高壓滅菌30分鐘的滅菌效果進行了驗證，確認YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠。驗證結(jié)果如下：當(dāng)加入

3、未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后顯渾濁，而在115c滅菌20分鐘后的枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后清亮，無渾濁，說明枯草桿菌黑色變種芽胞菌全部被滅活。121c壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡滅菌后顏色達到、深于標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色），說明本試驗合格。當(dāng)未滅菌的嗜熱脂肪芽抱桿菌生物指劑經(jīng)培養(yǎng)后由紫色變?yōu)辄S色，而在121c壓力蒸汽滅菌20分鐘后的仍為紫色時，說明嗜熱脂肪芽抱桿菌全部被滅活?？莶菅勘U菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)在121c滅菌30分鐘后，經(jīng)培養(yǎng)無菌生長，細菌挑戰(zhàn)性試驗合格。批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期1 目的：提供足夠的數(shù)據(jù)和文件依據(jù)，確認YXQ-LS-70A型

4、立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠。2 驗證類別：驗證3 驗證時間：2016年04月4 驗證依據(jù)：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）藥品生產(chǎn)驗證指南（2003年修訂）驗證管理規(guī)定SMP-10002-035驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)驗證項目驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)驗證方法熱分布測試（121c壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡變色反應(yīng)）火菌后指示卡顏色應(yīng)達到或深于標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色）目測法生物指示劑滅活實驗火菌后指本菌應(yīng)全部被火活培養(yǎng)法細菌挑戰(zhàn)性試驗火菌后指示菌泡全部死亡微生物限度檢查6驗證的實施步驟6.1試驗條件6.1.1檢測用儀表確認名稱型號編R校驗日期校驗結(jié)論功效時間壓力表結(jié)論：檢查人/日期

5、復(fù)核人/日期6.1.2檢測用菌種、指示劑（卡）等的確認名稱規(guī)格來源枯草芽抱桿菌中國約品生物制品檢定所大腸埃布國中國藥品生物制品檢定所沙門菌中國藥品生物制品檢定所銅綠假單抱菌中國約品生物制品檢定所金黃色葡萄球菌中國藥品生物制品檢定所嗜熱脂肪芽胞桿菌生物指示劑北與四環(huán)衛(wèi)生藥械廠后限公司枯草桿菌黑色變種芽胞菌片中國藥品生物制品檢定所121c壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示H二北與四環(huán)衛(wèi)生藥械廠后限公司結(jié)論：符合規(guī)定檢驗人/日期：復(fù)核人/日期：批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期6.1.3菌培養(yǎng)物制備：分別取枯草芽抱桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌1白金耳于裝有9ml胰酪大豆月東液培養(yǎng)基的試管中，于3035c培養(yǎng)

6、1824小時后,出現(xiàn)渾濁，說明各種菌均有生長，即得枯草芽抱桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)物，備用。6.2 取樣方法：6.2.1 取樣點：YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)上、中、下三部位各取樣點（見物品放置圖）物品放置圖6.2.2 取樣頻次：每個試驗進行三次。6.3 熱分布測試（121c壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡變色反應(yīng)試驗）：6.3.1 驗證方法：將每組9張“121C壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡”按物品放置圖位置放于YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121c滅菌15和30分鐘各一次后，取出與化學(xué)指示卡自帶標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色

7、）比較。6.3.1.1 空載熱分布將每組9張“121C壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡”做好數(shù)字標(biāo)記，置于敞口試管中，按物品放置圖位置放于YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)。注意滅菌器中只放置試管，不放置試劑，開啟滅菌器，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121c滅菌15和30分鐘各一次后，取出與化學(xué)指示卡自帶標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色）比較。6.3.1.2 滿載熱分布在滅菌器內(nèi)裝滿用牛皮紙包裹的潔凈的與平時相同數(shù)量的培養(yǎng)皿和三角瓶，自下而上擺放。將每組9張“121C壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡”做好數(shù)字標(biāo)記，置于敞口試管中，按物品放置圖位置放于YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)。開啟滅菌器，按立式壓力

8、蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121c滅菌15和30分鐘各一次后，取出與化學(xué)指示卡自帶標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色）比較。6.3.2結(jié)果判定：批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期121C壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡滅菌后顏色如達到或深于標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色），則本試驗合格。6.3.3驗證結(jié)果：6.3.3.1空載熱分布驗證結(jié)果:檢測結(jié)果火菌時間及溫度123456789121c15分鐘深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于121c30分鐘%L、次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于結(jié)論

9、：符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期6.3.3.2滿載熱分布驗證結(jié)果（培養(yǎng)皿數(shù)量90個，三角瓶數(shù)量20個）：檢測結(jié)果火菌時間及溫度123456789121c15分鐘%L、次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于121c30分鐘湊L次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第二次深于深于深于深于深于深于深于深于深于第三次深于深于深于深于深于深于深于深于深于結(jié)論：符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期6.4 生物指示劑滅活試驗：6.4.1 枯草桿菌黑色變種芽胞菌片（115C滅菌20分鐘）6.4.1.1 驗證方法：在滅菌器內(nèi)裝滿用

10、牛皮紙包裹的潔凈的與平時相同數(shù)量的培養(yǎng)皿和三角瓶，自下而上擺放。取9張枯草桿菌黑色變種芽胞菌片按物品放置圖位置放于立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi),批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期按YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于115c滅菌20分鐘后，取出于3035c培養(yǎng)2448小時。同時取兩片未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片作對照，分別于24小時和48小時觀察，記錄結(jié)果。6.4.1.2 結(jié)果判定：當(dāng)加入未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的胰酪大豆臍液體培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后顯渾濁，而滅菌后的枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后清亮，無渾濁，說明枯草桿菌黑色變種芽胞菌全部被滅活。6.4.1.3驗證結(jié)果（培養(yǎng)皿數(shù)量90個，三

11、角瓶數(shù)量20個）：取樣點標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)后現(xiàn)象結(jié)論鏢L次第二次第三次1培養(yǎng)基清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁符合規(guī)定2清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁3清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁4清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁5清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁6清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁7清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁8清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁9清亮、無渾濁清亮、無渾濁清亮、無渾濁陽性對照1號培養(yǎng)基渾濁渾濁渾濁渾濁2號渾濁渾濁渾濁檢驗人/日期復(fù)核人/日期6.4.2嗜熱脂肪芽抱桿菌生物指示劑（121C滅菌15分鐘）6.4.2.1驗證方法：在滅菌器內(nèi)裝滿

12、用牛皮紙包裹的潔凈的與平時相同數(shù)量的培養(yǎng)皿和三角瓶，自下而上擺放。取9瓶嗜熱脂肪芽抱桿菌生物指示劑按物品放置圖位置放于立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121c滅菌15分鐘后，取出于54c培養(yǎng)48小時。同時取2支未滅菌的嗜熱脂肪芽抱桿菌生物指示劑作對照。6.4.2.2 結(jié)果判定：當(dāng)未滅菌的嗜熱脂肪芽抱桿菌生物指劑經(jīng)培養(yǎng)后由紫色變?yōu)辄S色、而滅菌后的仍為紫色時，說明嗜熱脂肪芽抱桿菌全部被滅活。6.4.2.3 驗證結(jié)果（培養(yǎng)皿數(shù)量90個，三角瓶數(shù)量20個）：批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期檢測結(jié)果火菌時間及溫度123456789陽性對照12121C15分鐘%L、次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫

13、色紫色原;色黃色第二次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色原;色黃色第三次紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色紫色原;色黃色結(jié)論符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期6.5細菌挑戰(zhàn)性試驗:6.5.1驗證方法：將枯草芽抱桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)物各9支培養(yǎng)物按物品放置圖位置放于YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器內(nèi)，按立式壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)操作程序，于121c滅菌30分鐘后，取出，即得枯草芽抱桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌的滅菌培養(yǎng)物。取各滅菌培養(yǎng)物1ml,置直徑90mm的滅菌平皿中，將預(yù)先準(zhǔn)備好的胰酪大豆月東瓊脂培養(yǎng)基熔化，冷至約45c時，

14、傾注上述平皿各2115-20mL,混勻待凝。將各凝固平板倒置于3035c培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別于24小時和48小時觀察，記錄結(jié)果，每管平行測定2份。同時用兩個滅菌平皿各加注0.9%的無菌氯化鈉溶液1ml作為陰性對照；并用大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌作陽性對照。6.4.2.4 結(jié)果判定：枯草芽胞桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物滅菌后，經(jīng)培養(yǎng)應(yīng)無菌生長，則細菌挑戰(zhàn)性試驗合格。6.5.3驗證結(jié)果:檢測結(jié)果菌培養(yǎng)物123456789陽性對照12枯草芽抱桿菌%L、次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第

15、三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性大腸埃希國湊L次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性沙門菌%L、次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性銅綠假單抱菌湊L次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性金黃色葡萄球菌%L、次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性

16、陽性陽性第二次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性第三次陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陰性陽性陽性結(jié)論符合規(guī)定檢查人/日期復(fù)核人/日期7異常及偏差處理無8 再驗證8.1 再驗證周期：每年8.2 內(nèi)容：根據(jù)再驗證方案制定9 驗證報告、結(jié)果分析和結(jié)論：9.1 當(dāng)加入未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后顯渾濁，而在115c滅菌20分鐘后的枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后清亮，無渾濁，說明枯草桿菌黑色變種芽胞菌全部被滅活。9.2 121c壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡滅菌后顏色達到、深于標(biāo)準(zhǔn)顏色（黑色），說明本試驗合格。9.3 當(dāng)未滅菌的嗜熱脂肪芽抱桿菌生物指劑經(jīng)培養(yǎng)后由紫色變?yōu)辄S

17、色，而在121c壓力蒸汽滅菌20分鐘后的仍為紫色時，說明嗜熱脂肪芽抱桿菌全部被滅活。9.4 枯草芽抱桿菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單抱菌、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)在121c滅菌30分鐘后，經(jīng)培養(yǎng)無菌生長，細菌挑戰(zhàn)性試驗合格。驗證小組組員：日期：驗證小組組長：日期：10 驗證結(jié)論批準(zhǔn)、會簽及日期批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期驗證證書編號：SVR-09009-00-2016驗證項目YXQ-LS-70A型立式高壓滅菌器效果驗證驗證要求及目的確認YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠驗證文件編號SVR-09009-00-2016驗證文件名稱YXQ-LS-70A型立式高壓滅菌器效果驗證報告驗證小組按照YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器效果驗證方案（SVP-09002-01-2012）對立式壓力蒸汽滅菌器121c高壓滅菌30分鐘的滅菌效果進行了驗證，確認YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌器的可靠性，確保微生物學(xué)檢驗及環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)的真實可靠。驗證結(jié)果如下：當(dāng)加入未滅菌枯草桿菌黑色變種芽胞菌片的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后顯渾濁，而在11