優(yōu)化HPLC及使用注意事項

1、1HPLC維護(hù)維護(hù)21.1.在線脫氣機在線脫氣機2. 2. 四元二元四元二元/ /單元泵單元泵3. 3. 自動進(jìn)樣器自動進(jìn)樣器4. 4. 二極管陣列檢測器二極管陣列檢測器5. 5. 可變波長紫外檢測可變波長紫外檢測器器3在線脫氣機在線脫氣機-在線脫氣機在線脫氣機4工作原理工作原理在線脫氣機在線脫氣機5何時需要使用在線脫氣機何時需要使用在線脫氣機在線脫氣機在線脫氣機6在線脫氣機在線脫氣機脫氣機的操作脫氣機的操作：操作泵之前，用至少兩個體積（標(biāo)準(zhǔn)脫操作泵之前，用至少兩個體積（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機氣機30ml，對微脫氣機對微脫氣機10ml）沖沖洗洗 真空脫氣機，特別是真空脫氣機，特別是當(dāng)當(dāng) 泵關(guān)閉了一段時間后

2、（例如，過夜），以及在通道中泵關(guān)閉了一段時間后（例如，過夜），以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑使用揮發(fā)性混合溶劑 時時。 標(biāo)準(zhǔn)脫氣機（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機（G1322A). 標(biāo)準(zhǔn)脫氣機每個通道體積為12ml 建議排液操作：5ml/min 排液6min以上。 微脫氣機（微脫氣機（G1379A). 微脫每個通道體積為1ml 建議排液操作：2ml/min 排液5min。 切勿用5ml/min 流速去排液。7溶劑溶劑 用棕色玻璃瓶裝水溶液，可以避免藻類的生長。用棕色玻璃瓶裝水溶液，可以避免藻類的生長。 過濾溶劑以免其中微粒永久性阻塞毛細(xì)管。過濾溶劑以免其中微粒永久性阻塞毛細(xì)管。避免使用下述可腐蝕鋼鐵的避免使用下述

3、可腐蝕鋼鐵的 溶劑：溶劑： 堿金屬鹵化物及其酸溶液(如：碘化鋰、氯化鉀等)。 高濃度無機酸，如硝酸、硫酸. 可能含有過氧化物的色譜純醚(如THF、二氧六環(huán)、二丙基乙醚)。這些在 使用前必須用干燥氧化鋁過濾除去過氧化物。 含強絡(luò)合劑的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。 四氯化碳與2-異丙醇或四氫呋喃的混合液。8防止堵塞溶劑過濾器及真空腔防止堵塞溶劑過濾器及真空腔 污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影響泵的運行。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液 (pH4 至 7) 中尤其如此。下 列建議將會延長溶劑過濾器的使用壽命并維持泵的運行。 使用滅過菌的溶劑瓶來減緩藻類生長。使用新鮮配

4、制的流動相，特別是水溶劑或鹽緩沖液（建議不超過兩天）。如果應(yīng)用許可，在溶劑中加人0.00010.001M的疊氮化鈉。避免溶劑瓶暴露在直射陽光下。用氬氣置換流動相上層的空氣。長期不用時用水清洗水溶液通道并置換為甲醇日常維護(hù)日常維護(hù),故障診斷故障診斷9日常維護(hù)日常維護(hù),故障診斷故障診斷檢查溶劑過濾器檢查溶劑過濾器擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，并使液面高于出口擰開脫氣機出口或比例閥入口管線，并使液面高于出口30cm；此時溶劑會因；此時溶劑會因為重力流出，脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出為重力流出，脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出。查看過濾器是否變色查看過濾器是否變色

5、臨時取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常臨時取下過濾器，檢查柱前壓力是否正常清潔溶劑過濾器清潔溶劑過濾器將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下。先用水沖洗殘留之溶劑，然后將過濾器放在裝有濃硝酸 （35）的燒杯里浸一小時。用二次蒸餾水徹底沖洗過濾器。建議不使用超聲波清洗機清洗。將過濾器重新裝好。建議定期清洗溶劑過濾器及溶劑瓶，每三個月至少清洗一次。注意：不要使用沒有安裝溶劑過濾器的系統(tǒng)可能會嚴(yán)重堵塞系統(tǒng)注意：不要使用沒有安裝溶劑過濾器的系統(tǒng)可能會嚴(yán)重堵塞系統(tǒng)10日常維護(hù)日常維護(hù)Question?1.如何簡單判斷脫氣機脫氣是否正常？如何簡單判斷脫氣機脫氣是否正常？ 打開打開Purge閥，設(shè)定泵的流速閥，設(shè)

6、定泵的流速2ml/min，提起當(dāng)提起當(dāng)前所使用溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭，使之脫離液面前所使用溶劑瓶內(nèi)的溶劑過濾頭，使之脫離液面一小段時間，此時溶劑傳送管內(nèi)會產(chǎn)生一小段氣一小段時間，此時溶劑傳送管內(nèi)會產(chǎn)生一小段氣泡，放下過濾頭，讓此段氣泡通過脫氣機，如果泡，放下過濾頭，讓此段氣泡通過脫氣機，如果脫氣機正常，氣泡應(yīng)消失或縮小。脫氣機正常，氣泡應(yīng)消失或縮小。2.如何簡單判斷脫氣機腔體或溶劑過濾頭是否堵如何簡單判斷脫氣機腔體或溶劑過濾頭是否堵塞？塞？ 關(guān)閉泵，擰開脫氣機出口或比例閥入口管線關(guān)閉泵，擰開脫氣機出口或比例閥入口管線,此此時溶劑會因為重力流出，脫氣機或溶劑過濾頭堵時溶劑會因為重力流出，脫氣機或溶

7、劑過濾頭堵塞時，溶劑會流出不暢或不流出。塞時，溶劑會流出不暢或不流出。11Agilent 1100 四元泵四元泵 (G1311A)12Agilent 1100 四元泵工作原理四元泵工作原理13Agilent 1100 泵頭泵頭(Pump Head)結(jié)構(gòu)圖結(jié)構(gòu)圖Agilent 1100 泵泵 14嚴(yán)重污染的溶劑出口過濾芯嚴(yán)重污染的溶劑出口過濾芯Agilent Agilent 四元二元四元二元/ /單元泵日常維護(hù)單元泵日常維護(hù)15多通道梯度閥（多通道梯度閥（MCGV）操作要點操作要點 當(dāng)鹽溶液和有機溶劑混合時，鹽溶液可能與有機溶劑完全混溶，而不會出現(xiàn) 沉淀。但是在梯度閥的混合點，重力作用有可能使鹽

8、顆粒 沉淀下來。通常，閥的A通道用于水相/鹽溶液，而泵的B通道用于有機溶 劑。如果使用的是這樣的配置，鹽將落回到鹽溶液中，并被溶解。當(dāng)泵使用 的不同配置（例如，D-鹽溶液，A-有機溶劑）時，鹽可能會落到有機溶劑 中，從而出現(xiàn)問題。 Agilent 1100四元泵中使用鹽溶液和有機溶劑時，建議將鹽溶液接到下面的 口上，有機溶劑接到上面的梯度閥口上。有機溶劑通道最好直接在鹽溶液通 道的上面。建議定期用水沖洗所有MCGV通道，以去除在閥口上可能出現(xiàn)的鹽 沉淀。Agilent Agilent 四元二元四元二元/ /單元泵日常維護(hù)單元泵日常維護(hù) 16更好地使用四元泵更好地使用四元泵將裝有溶劑瓶的溶劑箱放

9、在泵上面(或較高處)。當(dāng)在四元泵上使用鹽溶液或有機溶劑時，建議將鹽溶液接 在底部的梯度閥口上，將有機溶劑接在上面的梯度閥口上。有機通道最好 在鹽溶液通道的上面。建議用水定期沖洗所有MCGV通道除去可能在 閥口析出得鹽結(jié)晶。操作泵之前，用至少兩個體積（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機30ml，對微脫氣機10ml）沖洗 真空脫氣機，特別是當(dāng) 泵關(guān)閉了一段時間后（例如，過夜），以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑 時。防止溶劑過濾器堵塞及長菌。當(dāng)濾器表面有黑色或黃色污染層說明濾器發(fā)生了堵塞，請立即清洗或更換之。定期檢查排液閥的濾芯。檢查方法：擰開排液閥，以水作流動相，流速5ml/min，若壓力大于10bar,則須立即更換。Ag

10、ilent Agilent 四元二元四元二元/ /單元泵日常維護(hù)單元泵日常維護(hù) 17Agilent 1100 系列泵的使用須知系列泵的使用須知 更好地使用泵更好地使用泵 當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件時，由于該附件中也有密封墊，這樣就會增加活塞桿運動時的阻力。所以開泵前一定要用10異丙醇，并將其流速調(diào)至約20滴/分鐘使這溶液流過沖洗裝置。 10異丙醇有助于降低水的表面張力，并有抑菌作用。最好不要用其它溶劑代替。 當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件而不開啟當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件而不開啟10異丙醇，會使密封墊及活異丙醇，會使密封墊及活塞桿的壽命減短。塞桿的壽命減短。18Agilent 1100 自動進(jìn)樣器使用須知自動進(jìn)樣器

11、使用須知19Agilent 1100 自動進(jìn)樣器使用須知自動進(jìn)樣器使用須知使用自動洗針功能使用自動洗針功能自動洗針功能可以把程序設(shè)置為“帶有洗針的進(jìn)樣”,或?qū)⒆詣酉瘁樄δ馨?含在進(jìn)樣器程序中。當(dāng)使用自動洗針功能時，進(jìn)樣針在取樣后會轉(zhuǎn)移到洗針 步驟。造成攜留效應(yīng)的主要原因是殘留在進(jìn)樣針外的少量樣品。通過進(jìn)樣后 的洗針功能可以立即洗去針外表面上殘留的樣品。當(dāng)進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)回到主流路 時，定量管和針內(nèi)所有的樣品都被沖洗到色譜柱中。這種結(jié)合洗針和沖洗管 路的設(shè)計可以把攜留效應(yīng)減低到最小的程度。去掉洗滌瓶蓋去掉洗滌瓶蓋為了獲得最佳的分析結(jié)果，裝有溶劑的洗滌瓶是不加蓋的，而且洗滌瓶中的 溶劑對樣品組分有較好的溶

12、解作用。如果洗滌瓶有蓋將會有少量樣品留在密 封墊上，這樣會把殘留的樣品帶到下一個樣品中。帶有洗針的進(jìn)樣程序帶有洗針的進(jìn)樣程序進(jìn)樣程序中包括了NEEDLE WASH（洗針）命令，當(dāng)這一命令設(shè)置在進(jìn)樣程序 中時，則在進(jìn)樣前會進(jìn)入指定的洗滌瓶中洗針。例 1 DRAW 5L（抽取5L樣品） 2 NEEDLE WASH vial 7（洗針到7號瓶） 3 INJECT（進(jìn)樣）20Agilent 1100 自動進(jìn)樣器使用須知自動進(jìn)樣器使用須知21Agilent 1100 自動進(jìn)樣器使用須知自動進(jìn)樣器使用須知提高進(jìn)樣量的精度提高進(jìn)樣量的精度進(jìn)樣體積小于進(jìn)樣體積小于2L當(dāng)進(jìn)樣閥切換到BYPASS（旁路）位置時，

13、在定量管內(nèi)的流動相壓力降低。當(dāng) 進(jìn)樣針抽取樣品時，流動相進(jìn)一步降低壓力。如果流動相沒有充分脫氣，在 進(jìn)樣時定量管內(nèi)就會產(chǎn)生小氣泡。在進(jìn)樣體積小于2L時這些小氣泡就會 影響到進(jìn)樣體積的精密度。為了使進(jìn)樣體積小于2L時有最佳的進(jìn)樣精密 度，建議使用Agilent1100系列真空脫氣機，確保流動相充分脫氣。也可以 在進(jìn)樣間隙自動洗針，從而進(jìn)一步提高進(jìn)樣體 積的精密度。22Agilent 1100 自動進(jìn)樣器使用須知自動進(jìn)樣器使用須知提高進(jìn)樣量精度提高進(jìn)樣量精度抽樣速度抽樣速度對粘稠的樣品，計量部件從樣品瓶抽取樣品的速度會影響取樣體積的精密 度。如取樣速度太快，在樣品塞中會帶有氣泡，從而影響進(jìn)樣體積。

14、抽樣速 度的默認(rèn)值是200L/min (范圍：10-1000L/min)，這一速度適合于大 多數(shù)樣品的取樣要求。但是對于粘稠的樣品要得到最佳的結(jié)果，設(shè)定的抽樣 速度要低于200L/min。進(jìn)樣器程序中的“DRAW”命令行也用于抽樣速度 的設(shè)定，這是為自動進(jìn)樣器設(shè)置的。推樣速度推樣速度默認(rèn)的推樣速度為200L/min (范圍：10-1000L/min)，當(dāng)進(jìn)行大體積 進(jìn)樣時，就要設(shè)定為較大的推樣速度，加快進(jìn)樣周期。這就是縮短計量器具 從進(jìn)樣周期開始（當(dāng)注射器活塞回到起始位置時）到推出溶劑所需的時間。進(jìn)樣器程序中的“EJECT”命令行也用于推樣速度的設(shè)定，這是為自動進(jìn)樣器設(shè)置的。較快的推樣速度可以

15、加快進(jìn)樣器程序所需的時間。對于粘稠的樣 品要避免使用過快的推樣速度。當(dāng)使用多次抽樣功能時，推樣速度控制著樣品進(jìn)入針座毛細(xì)管擴大體積部分 的速度，對粘稠的樣品要避免使用過快的推樣速度。23Question?1.樣品量太少（某些離心處理的樣品），無法過濾，為樣品量太少（某些離心處理的樣品），無法過濾，為了盡量避免堵塞，可以采取什么措施？了盡量避免堵塞，可以采取什么措施？ 在自動進(jìn)樣器設(shè)置中，適當(dāng)抬高進(jìn)樣針抽樣時的位在自動進(jìn)樣器設(shè)置中，適當(dāng)抬高進(jìn)樣針抽樣時的位置。置。Agilent 1100 自動進(jìn)樣器日常維護(hù)自動進(jìn)樣器日常維護(hù)24Agilent 1100 自動進(jìn)樣器日常維護(hù)自動進(jìn)樣器日常維護(hù)Que

16、stion?2.怎樣判斷自動進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子墊圈磨損？怎樣判斷自動進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子墊圈磨損？ 將第四號管（排液的細(xì)塑料管）提起，正常情況下應(yīng)將第四號管（排液的細(xì)塑料管）提起，正常情況下應(yīng)沒有液體滴出，如有則轉(zhuǎn)子墊圈已磨損。沒有液體滴出，如有則轉(zhuǎn)子墊圈已磨損。 色譜現(xiàn)象：壓力不穩(wěn)，保留時間、峰面積重復(fù)性差，色譜現(xiàn)象：壓力不穩(wěn)，保留時間、峰面積重復(fù)性差，殘留嚴(yán)重。殘留嚴(yán)重。25Agilent 1100 手動進(jìn)樣器（手動進(jìn)樣器（G1328A,G1328B)26Agilent 1100 手動進(jìn)樣器操作原理手動進(jìn)樣器操作原理27Agilent 1100 手動進(jìn)樣器操作原理手動進(jìn)樣器操作原理28Agilent 1

17、100 手動進(jìn)樣器使用須知手動進(jìn)樣器使用須知 為了防止虹吸應(yīng)注意使第五第六號放空管的出口與進(jìn)樣口保持在同一平面29Agilent 1100 手動進(jìn)樣器使用須知手動進(jìn)樣器使用須知1為了更好的重現(xiàn)性，應(yīng)進(jìn)行滿閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積最好是樣品環(huán)的56倍。2一定要使用合規(guī)格的進(jìn)樣器，規(guī)格為外徑0.028英寸，長2英寸的平頭針。一定不能使用尖針！它會嚴(yán)重刮壞轉(zhuǎn)子墊圈。一定不能使用尖針！它會嚴(yán)重刮壞轉(zhuǎn)子墊圈。30Agilent 1100 手動進(jìn)樣器日常維護(hù)手動進(jìn)樣器日常維護(hù)1進(jìn)完樣后一定要及時沖洗進(jìn)樣器，特別是用鹽或緩沖液作流動相。由于這些溶液會形成結(jié)晶從而磨損墊圈。2沖洗方法： A. 將進(jìn)樣器轉(zhuǎn)至Inject

18、位置，利用液相泵輸送高純水沖洗(這時是沖洗樣品環(huán)及溝槽）. B.用閥清洗接頭和注射器沖洗。31Agilent 1100 手動進(jìn)樣器日常維護(hù)手動進(jìn)樣器日常維護(hù)3經(jīng)常用濕潤的軟布清潔進(jìn)樣器，特別是進(jìn)樣口周圍。4請仔細(xì)閱讀進(jìn)樣器說明書，上面有詳細(xì)使用及其它信息。32Agilent 1100 手動進(jìn)樣器日常維護(hù)手動進(jìn)樣器日常維護(hù)Question.如何判斷手動進(jìn)樣器的密封圈漏？通常結(jié)合兩方面：1從進(jìn)樣器觀察，進(jìn)樣后將針拔出，若從進(jìn)樣口或排空管有液體冒出，顯示密封圈磨損。2從結(jié)果看：通常有壓力不穩(wěn)定，峰面積或保留時間不穩(wěn)定和殘留嚴(yán)重。33Agilent 1100 柱溫箱器使用注意事項及日常維護(hù)柱溫箱器使用

19、注意事項及日常維護(hù)34Agilent 1100 柱溫箱器使用注意事項及日常維護(hù)柱溫箱器使用注意事項及日常維護(hù)1連接的管路盡量短，防止熱擴散及峰增寬。2如果使用小體積分析柱以及流速小于0.2ml/min時建議使用左邊的柱溫箱(左邊體積較少, 3ul).3除非特殊應(yīng)用，建議將兩邊溫度設(shè)置一樣。并確保關(guān)好前蓋。35Agilent 1100 二極管陣列檢測器二極管陣列檢測器(G1315B)36Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器工作原檢測器工作原理理37Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器工作原檢測器工作原理理可變的光進(jìn)口狹縫系統(tǒng)可變的光進(jìn)口狹縫系統(tǒng)這一微型狹縫系統(tǒng)是利用硅

20、的機械性能和總體布局微型加工技術(shù)以及精確的 制作功能加工而成，它把所需的光學(xué)性能狹縫和光柵集中組合到一起， 成為一個簡單、緊湊的元件。狹縫寬度直接由儀器上的微處理器來控制，并 可用為設(shè)定分析方法的一個實驗參數(shù)。光柵光柵用一個凹面全息光柵來實現(xiàn)分光和光譜成像， 光柵把入射光束全部分散成組 成它的波長，然后把它反射到二極管陣列上。 二極管陣列二極管陣列二極管陣列由1024個光電二極管和一個位于陶瓷基座上的電路組成，在 190 - 950nm范圍內(nèi)取樣間隔1nm。38Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)檢測器性能優(yōu)化化39Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)檢

21、測器性能優(yōu)化化40Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)化檢測器性能優(yōu)化41Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)化檢測器性能優(yōu)化流通池光路長度對信號值的影響流通池光路長度對信號值的影響 流通池加長得到的信號值就高，盡管在流通池加長時噪音略有增加，而 信噪比有較大的增加。例如，見圖8，把流通池長度由6mm 增加到10mm， 噪音增加10%，而信號增加70%。 流通池加長會使池體積也有所增加在我們的例子中為5L 13L， 這時 峰寬也會增加， 如圖8所示，在此例的梯度洗脫中對分離度沒有影響。 經(jīng)驗表明，池體積應(yīng)為半峰高處峰體積的1/3。 要測定峰體積，把積分后

22、的 峰寬乘以流速再除以3。圖圖842Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)檢測器性能優(yōu)化化使用較寬的帶寬有降低噪聲的優(yōu)點，能在整個波長范圍內(nèi)降低噪聲和使用 4nm帶寬相比采用30nm帶寬，基線噪聲降低約2.5倍。 而信號值是4-nm 帶寬的75 %，在此例中信噪比增大2倍。 43Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)檢測器性能優(yōu)化化44Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)檢測器性能優(yōu)化化45Agilent 1100二極管陣列二極管陣列檢測器性能優(yōu)檢測器性能優(yōu)化化46Agilent 1100二極管陣列檢測器性能優(yōu)化二極管陣列檢測器性能優(yōu)化峰

23、寬（響應(yīng)時間）峰寬（響應(yīng)時間）響應(yīng)時間是說明在流通池中光吸收產(chǎn)生突變后出現(xiàn)檢測器信號的快慢， 檢測器采用數(shù)值濾波器使響應(yīng)時間與色譜圖中峰寬相適應(yīng)， 這一濾波器不影響峰 面積和峰的對稱性， 正確設(shè)定此濾波器會大大減小基線噪聲（見圖9），但 會使峰高略有下降。 另外這一濾波器能降低數(shù)據(jù)的速度，優(yōu)化色譜的積分和 顯示，能最大限度地減少存儲色譜和光譜的磁盤空間。47Agilent 1100二極管陣列檢測器性能優(yōu)化二極管陣列檢測器性能優(yōu)化表表6 列出檢測器對濾波器的選擇。列出檢測器對濾波器的選擇。 為獲得最佳效果，把峰寬設(shè)定為接為獲得最佳效果，把峰寬設(shè)定為接近于色近于色 譜圖中窄峰的寬度，譜圖中窄峰的寬

24、度， 此時響應(yīng)時間約為峰寬的此時響應(yīng)時間約為峰寬的1/3，這樣會使，這樣會使峰高降低峰高降低 5%，峰的加寬不到，峰的加寬不到5%。 在檢測器中峰寬設(shè)定減小會引起在檢測器中峰寬設(shè)定減小會引起峰高增加峰高增加9.5的流動相，以的流動相，以防腐蝕流通池石英窗，避免使用可能析晶的流動相，防止流通池堵塞防腐蝕流通池石英窗，避免使用可能析晶的流動相，防止流通池堵塞VWD 40bar；DAD 120bar ； MWD 120bar； FLD 20bar ；RID 5barRID、FLD永遠(yuǎn)是最后一個檢測器永遠(yuǎn)是最后一個檢測器10.10. 注意不同廠家接頭問題，防止?jié)B漏或毀壞色譜柱和接頭注意不同廠家接頭問題

25、，防止?jié)B漏或毀壞色譜柱和接頭 Agilent 1100 HPLC日常維護(hù)日常維護(hù)54HPLC常用的色譜柱接頭常用的色譜柱接頭0.090 in.0.130 in.0.090 in.0.170 in.SwagelokWatersParkerRheodyneValcoUptight0.090 in.0.080 in.Troubleshooting LC Fittings, Part II.J. W. Dolan and P. Upchurch.LC/GC Magazine 6:788 (1988)Agilent 1100 HPLC日常維護(hù)日常維護(hù)總結(jié)總結(jié)55Agilent 1100 HPLC日常維護(hù)

26、日常維護(hù)總總結(jié)結(jié)毛細(xì)管的區(qū)分 Blue 0.25 mmColor i.d.Red 0.12 mmGreen 0.17 mm56Agilent 1100 HPLC日常維護(hù)日常維護(hù)總結(jié)總結(jié)57Agilent 1100 HPLC故障診斷故障診斷保留時間不穩(wěn)定。保留時間不穩(wěn)定。 首先觀察保留時間是否有規(guī)律的變化，并同時觀察壓力是否穩(wěn)定首先觀察保留時間是否有規(guī)律的變化，并同時觀察壓力是否穩(wěn)定 若壓力穩(wěn)定而保留時間呈有規(guī)律變化，若壓力穩(wěn)定而保留時間呈有規(guī)律變化，多數(shù)是色譜柱未平衡好，多數(shù)是色譜柱未平衡好，特別是含有鹽的流動相，需較長的時間去平衡。特別是含有鹽的流動相，需較長的時間去平衡。 若壓力穩(wěn)定而保留時間無規(guī)律變化，若壓力穩(wěn)定而保留時間無規(guī)律變化