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1、3. 混合菌夜稀釋液的制備：取混合菌夜混合菌夜稀釋液的制備：取混合菌夜1ml，加入盛有加入盛有9ml無(wú)菌水的試管中，稀釋濃度無(wú)菌水的試管中，稀釋濃度為為10-1，從濃度為，從濃度為10-1試管中取試管中取0.5ml 稀釋液加入盛有稀釋液加入盛有4.5ml無(wú)菌水的試管中，無(wú)菌水的試管中，以此類推，分別制成稀釋度為以此類推，分別制成稀釋度為10-210-3的稀釋液。的稀釋液。4.涂布平板法：將上述每種培養(yǎng)基平板底面涂布平板法：將上述每種培養(yǎng)基平板底面標(biāo)記稀釋度，然后用無(wú)菌吸管從最后三種標(biāo)記稀釋度，然后用無(wú)菌吸管從最后三種稀釋度中即稀釋度中即10-1、10-3試管中吸取試管中吸取0.1ml對(duì)號(hào)放入平

2、板上，用玻棒涂布。對(duì)號(hào)放入平板上，用玻棒涂布。5.平板劃線法a.作分區(qū)標(biāo)記在皿底將整個(gè)平板分成A、B、C、D四個(gè)面積不等的區(qū)域。各區(qū)之間的交角應(yīng)為120度左右（平板轉(zhuǎn)動(dòng)一定角度約60度），一遍充分利用整個(gè)平板的面積，而且采用這種分區(qū)法可使D區(qū)和A區(qū)劃出的線條相平行，并可避免此兩區(qū)線條相接觸。b.劃線操作（1）用接種環(huán)挑取10-1少量混合菌夜；（2）劃A區(qū)，劃3-4條平行線（線條的多少依據(jù)挑取的菌量多少而定）。劃完A區(qū)后應(yīng)立即燒掉環(huán)上的殘菌，以免因菌過多而影響后面各區(qū)的分離效果。在接種時(shí)，左手持皿底并將其覆蓋在皿蓋上方（不要放入皿蓋內(nèi)），以防止雜菌污染。（3）劃其他區(qū)：將燒去殘菌后的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基邊緣冷卻一下，并使B區(qū)轉(zhuǎn)到上方，接種環(huán)通過A區(qū)（菌源區(qū)）將菌帶到B區(qū)，隨即劃數(shù)條致密的平行線。再?gòu)腂區(qū)作C區(qū)的劃線。最后經(jīng)C區(qū)作D區(qū)的劃線，D區(qū)的線條應(yīng)與A區(qū)平行，但話D區(qū)時(shí)切勿重新接觸A、B區(qū)，以免該兩區(qū)中濃度的

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