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文檔簡介

1、醫(yī)學微生物學實驗醫(yī)學微生物學實驗微生物學教研室 2011年12月實驗內(nèi)容一、細菌染色標本檢查法一、細菌染色標本檢查法 抗酸染色法（操作）抗酸染色法（操作）二、標本片觀察：二、標本片觀察：（鉤體（鉤體 、白色念珠菌，曲霉、炭疽桿菌）、白色念珠菌，曲霉、炭疽桿菌） 目的要求l掌握抗酸染色技術(shù)l掌握鉤體，白色念珠菌、曲霉、炭疽桿菌基本形態(tài)l分枝桿菌的細胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，主要是分枝菌酸脂質(zhì)，主要是分枝菌酸，它包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色抗酸染色。l改良抗酸染色法改良抗酸染

2、色法是在常溫條件下利用增強染色液增強染色液(堿性品紅+苯酚)予以染色，再以鹽酸酒精脫色處理,。使其脫色后再對比染色，此時抗酸菌仍然為最初色素的紅色紅色，而其他細菌及背景中的物質(zhì)為蘭色蘭色。一、抗酸染色原理一、抗酸染色原理 抗酸染色抗酸染色l材料： 標本：卡介苗 染液：石碳酸復(fù)紅(堿性品紅+苯酚)，3%鹽酸酒精，美藍 器具：同革蘭氏染色 實驗方法：實驗方法：1、細菌涂片標本的制備、細菌涂片標本的制備 涂片涂片 干燥干燥 固定固定3、油鏡觀察油鏡觀察1）初染：）初染：，滴加石炭酸復(fù)紅蓋滿玻片，染色至少5分鐘用水沖洗。2）脫色：）脫色： 3%鹽酸酒精脫色301；用水沖洗。3）復(fù)染復(fù)染：用堿性美蘭溶液

3、復(fù)染30，用水沖洗后用吸水紙吸干。2、染色染色 抗酸染色步驟抗酸染色步驟 1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。、涂片包括涂片、干燥、固定三步。 涂片涂片 干燥干燥 固定固定抗酸染色步驟抗酸染色步驟l2、染色包括初染、脫色、復(fù)染三步。、染色包括初染、脫色、復(fù)染三步。 石炭酸復(fù)紅石炭酸復(fù)紅5 5 3%鹽酸酒精鹽酸酒精30 1 美藍復(fù)染美藍復(fù)染30 沖洗沖洗 干燥干燥 油鏡觀察油鏡觀察沖洗沖洗沖洗沖洗初染初染脫色脫色復(fù)染復(fù)染三、抗酸染色結(jié)果三、抗酸染色結(jié)果抗酸菌呈紅色抗酸菌呈紅色，常堆積成團，排列無序，偶呈分枝狀生長。背景及非抗酸性細菌呈蘭色。注意事項：1、無菌操作、無菌操作2、菌種管搖勻后取菌、菌種管搖勻后取菌3、涂片均勻、涂片均勻4、油鏡下從視野中找紅色抗酸菌、油鏡下從視野中找紅色抗酸菌二、標本片觀察二、標本片觀察l白色念珠菌l鉤體l枯草桿菌l曲霉類炭疽（枯草桿菌）類炭疽（枯草桿菌）

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