(完整)高效液相色譜儀的結構

1、四、高效液相色譜儀的結構高效液相色譜儀由高壓輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)等五大部分組成(圖3-1-2)。分析前，選擇適當?shù)纳V柱和流動相，開泵，沖洗柱子，待柱子達到平衡而且基線平直后，用微量注射器把樣品注入進樣口，流動相把試樣帶入色譜柱進行分離，分離后的組分依次流入檢測器的流通池，最后和洗脫液一起排入流出物收集器。當有樣品組分流過流通池時，檢測器把組分濃度轉(zhuǎn)變成電信號，經(jīng)過放大，用記錄器記錄下來就得到色譜圖。色譜圖是定性、定量和評價柱效高低的依據(jù)。0Tlr圖3-1-2咼效液相色譜儀的結構示意圖1.高壓輸液系統(tǒng)高壓輸液系統(tǒng)由溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等組成。(1

2、) 溶劑貯存器。溶劑貯存器一般由玻璃、不銹鋼或氟塑料制成，容量為12L,用來貯存足夠數(shù)量、符合要求的流動相。(2) 高壓輸液泵。高壓輸液泵(圖3-1-3)是高效液相色譜儀中關鍵部件之一，其功能是將溶劑貯存器中的流動相以高壓形式連續(xù)不斷地送入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過程。由于液相色譜儀所用色譜柱徑較細，所填固定相粒度很小，因此，對流動相的阻力較大，為了使流動相能較快地流過色譜柱，就需要高壓泵注入流動相。對泵的要求：輸出壓力高、流量范圍大、流量恒定、無脈動，流量精度和重復性為0.5%左右。此外，還應耐腐蝕，密封性好。高壓輸液泵，按其性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵兩大類。恒流泵是能給出恒定流量的

3、泵，其流量與流動相粘度和柱滲透無關。恒壓泵是保持輸出壓力恒定，而流量隨外界阻力變化而變化，如果系統(tǒng)阻力不發(fā)生變化，恒壓泵就能提供恒定的流量?！傲鲃酉喑隹趂流動相逬口圖3-1-3恒流柱塞泵（3）梯度洗脫裝置。梯度洗脫就是在分離過程中使兩種或兩種以上不同極性的溶劑按一定程序連續(xù)改變它們之間的比例，從而使流動相的強度、極性、pH值或離子強度相應地變化，達到提高分離效果，縮短分析時間的目的。梯度洗脫裝置分為兩類：一類是外梯度裝置（又稱低壓梯度），流動相在常溫常壓下混合，用高壓泵壓至柱系統(tǒng)，僅需一臺泵即可。另一類是內(nèi)梯度裝置（又稱高壓梯度），將兩種溶劑分別用泵增壓后，按電器部件設置的程序，注入梯度混合室

4、混合，再輸至柱系統(tǒng)。梯度洗脫的實質(zhì)是通過不斷地變化流動相的強度，來調(diào)整混合樣品中各組分的k值，使所有譜帶都以最佳平均k值通過色譜柱。它在液相色譜中所起的作用相當于氣相色譜中的程序升溫，所不同的是，在梯度洗脫中溶質(zhì)k值的變化是通過溶質(zhì)的極性、pH值和離子強度來實現(xiàn)的，而不是借改變溫度（溫度程序）來達到。2進樣系統(tǒng)進樣系統(tǒng)包括進樣口、注射器和進樣閥等，它的作用是把分析試樣有效地送入色譜柱上進行分離。六通進樣閥是最理想的進樣器，其結構如圖3-1-4。X人口魚譜柱入口出口棒品壞色譜柱人口人口準備狀態(tài)迸樣狀態(tài)圖3-1-4六通進樣閥裝置3.分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)包括色譜柱、恒溫器和連接管等部件。色譜柱一般用內(nèi)部拋光的不銹鋼制成,如圖3-1-5。其內(nèi)徑為26mm,柱長為1050cm，柱形多為直形，內(nèi)部充滿微粒固定相，柱溫一般為室溫或接近室溫。圖3-1-5常見色譜柱外形4.檢測器最常用的檢測器為紫外吸收檢測器，它的典型結構如圖3-1-6。圖3-1-6紫外檢測器光路圖1-低壓汞燈2-透鏡3-遮光板4-測量池5-參比池6-紫外濾光片7-雙紫外光敏電阻檢測器是液相色譜儀的關鍵部件之一。對檢測器的要求是：靈敏度高，重復性好、線性范圍寬、死體積小以及對溫度和流量的變化不敏感等。在液相色譜中，有兩種類型的檢測器，一類是溶質(zhì)性檢測器，它僅對被分離組分的物理或物理化