分析方法驗證的基本思路張俊山學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1分析方法驗證分析方法驗證(ynzhng)的基本思路張俊山的基本思路張俊山第一頁，共34頁。測定方法測定方法HPLCGC滴定滴定分析方法類型分析方法類型含量含量有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)或溶殘或溶殘溶劑殘留溶劑殘留含量含量驗證項目驗證項目系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性YesYesYesNo專屬性專屬性YesYesYesYes (空白校正空白校正)精密度精密度YesYesYesYes線性及范圍線性及范圍YesYesYesYes準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度YesYesYesNo定量限及檢測限定量限及檢測限NoYesYesNo耐用性耐用性YesYesYesYes第1頁/共33頁第二頁，共34頁。33含量含量(hnling)（HP

2、LC）一一系統(tǒng)系統(tǒng)(xtng)適應(yīng)性適應(yīng)性2. 專屬性專屬性3. 精密度精密度線性及范圍線性及范圍準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度耐用性耐用性第2頁/共33頁第三頁，共34頁。4含量含量(hnling)（HPLC）1. 系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性溶液配制溶液配制l 空白溶液；系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液空白溶液；系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l滿足專論的系統(tǒng)適應(yīng)性要求；滿足專論的系統(tǒng)適應(yīng)性要求；l對稱因子應(yīng)在對稱因子應(yīng)在0.81.5之間（之間（EP 2.2.46）；）；lRSD （EP 2.2.46 & USP 621）需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l主峰與已知雜質(zhì)主峰與已知雜質(zhì)RT（RRT）；分離度；主峰峰面積）

3、；分離度；主峰峰面積及及RSD；可能包括拖尾因子或?qū)ΨQ因子或理論塔板；可能包括拖尾因子或?qū)ΨQ因子或理論塔板數(shù)數(shù) 。第3頁/共33頁第四頁，共34頁。55含量含量(hnling)（HPLC）2. 專屬性專屬性溶液配制溶液配制l 空白溶液；對照液；供試液空白溶液；對照液；供試液可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l空白溶液在供試液和對照液中主峰空白溶液在供試液和對照液中主峰RT處無干擾；處無干擾；l供試液中主峰供試液中主峰RT與對照液中主峰與對照液中主峰RT保持一致；保持一致；l供試液與對照液中主峰的供試液與對照液中主峰的峰純度因子峰純度因子995或者符合或者符合色譜系統(tǒng)默認(rèn)參數(shù)色譜系統(tǒng)默認(rèn)參數(shù)需報告內(nèi)容需報告內(nèi)

4、容l主峰主峰RT及主峰純度因子及主峰純度因子第4頁/共33頁第五頁，共34頁。3. 精密度精密度對方法對方法 n次重復(fù)，不是對某個溶液次重復(fù)，不是對某個溶液 n次重復(fù)次重復(fù)重復(fù)性重復(fù)性溶液配制溶液配制l對照液，對照液，2份；供試液，份；供試液，6份份可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=6）2.0% %重現(xiàn)性重現(xiàn)性溶液配制溶液配制l同重復(fù)性同重復(fù)性可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=6）2.0% %；lRSD（n=12）2.0% %；（作用不大）；（作用不大）l重復(fù)性與重現(xiàn)性均值的絕對差值重復(fù)性與重現(xiàn)性均值的絕對差值2.0% %；樣品檢測樣品檢測溶液配制溶液配制lATS和基地對不同于驗證使用的另一批

5、次樣品進(jìn)行和基地對不同于驗證使用的另一批次樣品進(jìn)行檢測。檢測?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lATS與基地與基地QC檢測的含量的絕對差值檢測的含量的絕對差值2.0% %。重現(xiàn)性中已經(jīng)進(jìn)行，此項不一定必需重現(xiàn)性中已經(jīng)進(jìn)行，此項不一定必需需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l主峰峰面積；主峰峰面積；6份及份及12份含量單值，份含量單值，MeanSD，RSD；95%CI（n=6）；含量均值的絕對差值。）；含量均值的絕對差值。6第5頁/共33頁第六頁，共34頁。溶液名稱溶液名稱進(jìn)樣針數(shù)進(jìn)樣針數(shù)目的目的空白溶液空白溶液 1或或2針針消除殘留，排除干擾，通常消除殘留，排除干擾，通常必需必需專屬性溶液專屬性溶液1或或2針針若非綜合驗

6、證，不必需若非綜合驗證，不必需系統(tǒng)適應(yīng)性溶液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液 1針針看系統(tǒng)適應(yīng)性項目和要求看系統(tǒng)適應(yīng)性項目和要求對照液對照液1 5針針/6針針這是真正的系統(tǒng)適應(yīng)性這是真正的系統(tǒng)適應(yīng)性對照液對照液22針針供試液供試液6份份各各1針針對照液對照液12針針重現(xiàn)重現(xiàn)(zhn xin)性下進(jìn)樣序列：性下進(jìn)樣序列：第6頁/共33頁第七頁，共34頁。88含量含量(hnling)（HPLC）4. 線性及范圍線性及范圍溶液配制溶液配制l 50%150%的線性溶液（至少的線性溶液（至少5個點）個點）可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lr 0.9990;lY軸截距軸截距/100%濃度時濃度時Y軸響應(yīng)值的絕對值軸響應(yīng)值的絕對值2.0

7、%需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l線性點的實際濃度及峰面積；線性圖；線性范圍；線性線性點的實際濃度及峰面積；線性圖；線性范圍；線性方程；相關(guān)系數(shù)；殘差平方和；方程；相關(guān)系數(shù)；殘差平方和；Y軸截距；軸截距；Y軸截距的軸截距的95%CI；Y軸截距軸截距/100%濃度時濃度時Y軸響應(yīng)值的絕對值。軸響應(yīng)值的絕對值。第7頁/共33頁第八頁，共34頁。99含量含量(hnling)（HPLC）5. 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度溶液配制溶液配制l 80%，100%，120%的準(zhǔn)確度溶液各三份，可用一個母的準(zhǔn)確度溶液各三份，可用一個母 液稀釋。液稀釋?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l單個回收率及平均回收率應(yīng)在單個回收率及平均回收率應(yīng)在98.0%1

8、02.0%；l回收率（回收率（n=9）的）的RSD2.0%。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l實際測得值；理論值；單個回收率；平均回收率及其實際測得值；理論值；單個回收率；平均回收率及其95%CI及及RSD。第8頁/共33頁第九頁，共34頁。6. 耐用性耐用性溶液穩(wěn)定性溶液穩(wěn)定性溶液配制溶液配制l系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液；供試液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液；供試液可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：如分離度符合要求；系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：如分離度符合要求；l對照液及供試液：對照液及供試液： 各時間點主峰含量（或峰面積）與各時間點主峰含量（或峰面積）與0h相比應(yīng)在相比應(yīng)在 98.0102.0%； 主峰峰純度因子主峰峰純

9、度因子990。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l系統(tǒng)適應(yīng)性要求；主峰含量（或峰面積）及峰純度因子系統(tǒng)適應(yīng)性要求；主峰含量（或峰面積）及峰純度因子；各時間點含量（或峰面積）與；各時間點含量（或峰面積）與0h的比值；符合要求測的比值；符合要求測試點的試點的RSD。色譜條件的影響色譜條件的影響溶液配制溶液配制l系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液色譜條件色譜條件l流動相比例；流速；流動相比例；流速；pH值；柱溫；色譜柱批號。值；柱溫；色譜柱批號?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l同系統(tǒng)適應(yīng)性項下的可接受標(biāo)準(zhǔn)。同系統(tǒng)適應(yīng)性項下的可接受標(biāo)準(zhǔn)。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l同系統(tǒng)適應(yīng)性項下各報告內(nèi)容同系統(tǒng)適應(yīng)性項下各報告內(nèi)容第9

10、頁/共33頁第十頁，共34頁。耐用性耐用性個人理解個人理解 耐用性的目的是通過有意識地對測定參數(shù)進(jìn)行調(diào)整，耐用性的目的是通過有意識地對測定參數(shù)進(jìn)行調(diào)整，來測試方法對檢測條件變化的容許能力，從而為日常來測試方法對檢測條件變化的容許能力，從而為日常檢測提供指導(dǎo)。檢測提供指導(dǎo)。 通常以系統(tǒng)適應(yīng)性指標(biāo)來評估通常以系統(tǒng)適應(yīng)性指標(biāo)來評估 目前的方法驗證中，關(guān)于耐用性的驗證操作方法太過目前的方法驗證中，關(guān)于耐用性的驗證操作方法太過復(fù)雜，且對實際檢測的指導(dǎo)意義不大。復(fù)雜，且對實際檢測的指導(dǎo)意義不大。 需思考和討論的問題：需思考和討論的問題： EP、USP中都有在保證系統(tǒng)適應(yīng)性滿足要求的前提中都有在保證系統(tǒng)適應(yīng)

11、性滿足要求的前提下，允許對系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)整的參數(shù)范圍。這里面允許的下，允許對系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)整的參數(shù)范圍。這里面允許的參數(shù)范圍要遠(yuǎn)寬于耐用性驗證的范圍。請問你怎么考參數(shù)范圍要遠(yuǎn)寬于耐用性驗證的范圍。請問你怎么考慮這兩個參數(shù)的范圍差別。慮這兩個參數(shù)的范圍差別。 第10頁/共33頁第十一頁，共34頁。1212有有關(guān)關(guān)(yugun)物物質(zhì)質(zhì)或溶或溶殘殘（HPLC）二二系統(tǒng)系統(tǒng)(xtng)適應(yīng)性適應(yīng)性2. 專屬性專屬性精密度精密度檢測限及定量限檢測限及定量限線性及范圍線性及范圍準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度耐用性耐用性第11頁/共33頁第十二頁，共34頁。1313含量含量(hnling)（HPLC）1. 系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性溶液

12、配制溶液配制l 空白溶液空白溶液l 系統(tǒng)適應(yīng)性溶液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液l 對照液對照液l 靈敏度溶液靈敏度溶液 可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l滿足專論的系統(tǒng)適應(yīng)性要求；滿足專論的系統(tǒng)適應(yīng)性要求；l對稱因子應(yīng)在對稱因子應(yīng)在0.81.5之間（之間（EP 2.2.46）lRSD （EP 2.2.46 & USP 621）lS/N 10需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l分離度或拖尾因子或?qū)ΨQ因子或理論塔板數(shù)；主峰及已分離度或拖尾因子或?qū)ΨQ因子或理論塔板數(shù)；主峰及已知雜質(zhì)知雜質(zhì)RT，RRT；主峰峰面積及；主峰峰面積及RSD；主峰信噪比。；主峰信噪比。第12頁/共33頁第十三頁，共34頁。14142. 專屬性專屬性空空白白

13、干干擾擾及及增增敏敏試試驗驗溶液配制溶液配制l 空白溶液；供試液；對照液；空白溶液；供試液；對照液；l 系統(tǒng)適應(yīng)性溶液，增敏溶液。系統(tǒng)適應(yīng)性溶液，增敏溶液?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l 空白溶液在各雜質(zhì)及主峰空白溶液在各雜質(zhì)及主峰RT處（和處（和/或或RRT）無干擾）無干擾l 供試液和對照液中已知單雜及主峰與相鄰峰的供試液和對照液中已知單雜及主峰與相鄰峰的R1.5l 供試液和對照液中主峰及已知雜質(zhì)的供試液和對照液中主峰及已知雜質(zhì)的RT保持一致保持一致l 供試液與對照液中主峰的峰純度因子供試液與對照液中主峰的峰純度因子990l 增敏溶液與系統(tǒng)適應(yīng)性溶液中的已知雜質(zhì)增敏溶液與系統(tǒng)適應(yīng)性溶液中的已知雜質(zhì)R

14、T保持一致保持一致l 增敏溶液與供試液相比，已知雜質(zhì)增敏溶液與供試液相比，已知雜質(zhì)RT處峰面積增強(qiáng)處峰面積增強(qiáng)需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l 分離度；主峰及已知雜質(zhì)峰分離度；主峰及已知雜質(zhì)峰RT（和（和/或或RRT）及其峰）及其峰 面積；主峰峰純度因子。面積；主峰峰純度因子。第13頁/共33頁第十四頁，共34頁。15152. 專屬性（續(xù)上）專屬性（續(xù)上）強(qiáng)強(qiáng)制制降降解解試試驗驗溶液配制溶液配制l 未破壞供試液；各破壞試驗空白溶液；未破壞供試液；各破壞試驗空白溶液；l 酸破壞試驗；堿破壞試驗；氧化破壞試驗；酸破壞試驗；堿破壞試驗；氧化破壞試驗；l 光照破壞試驗；高溫破壞試驗。光照破壞試驗；高溫破壞試驗。

15、注：注：1. 光照強(qiáng)度總量：光照強(qiáng)度總量：ICH Q1B要求要達(dá)到要求要達(dá)到1.2106Lux hours； 2. 破壞后主峰含量的計算：用未破壞供試液為對照液進(jìn)行外標(biāo)計破壞后主峰含量的計算：用未破壞供試液為對照液進(jìn)行外標(biāo)計 算破壞后主峰含量，降解率在算破壞后主峰含量，降解率在510%，降解率與總雜偏差，降解率與總雜偏差5%可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l 各破壞溶液中新增降解雜質(zhì)與主峰及已知雜質(zhì)各破壞溶液中新增降解雜質(zhì)與主峰及已知雜質(zhì)R1.5 （可調(diào)整，至少保留主峰與相鄰雜質(zhì)的可調(diào)整，至少保留主峰與相鄰雜質(zhì)的R的標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)）l 各破壞溶液中主峰的峰純度因子各破壞溶液中主峰的峰純度因子990。需報告內(nèi)容

16、需報告內(nèi)容l 分離度；主峰峰純度；主峰含量及降解率；對比破壞分離度；主峰峰純度；主峰含量及降解率；對比破壞 前后各雜質(zhì)變化情況（包括前后各雜質(zhì)變化情況（包括RRT，含量及總雜）；列，含量及總雜）；列 出主要降解雜質(zhì)。出主要降解雜質(zhì)。第14頁/共33頁第十五頁，共34頁。3. 精密度精密度分析重復(fù)性分析重復(fù)性溶液配制溶液配制l對照液，對照液，1份；份；l供試液或供試液或100%加標(biāo)液或雜質(zhì)限度濃度的主成分考察加標(biāo)液或雜質(zhì)限度濃度的主成分考察溶液，溶液，6份份可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=6）10.0% %重現(xiàn)性重現(xiàn)性溶液配制溶液配制l同分析重復(fù)性同分析重復(fù)性可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=

17、6）10.0% %lRSD（n=12）10.0% %；l重復(fù)性與重現(xiàn)性已知單雜含量均值（或主成分則以主重復(fù)性與重現(xiàn)性已知單雜含量均值（或主成分則以主峰計）的峰計）的絕對差值絕對差值0.05%（可調(diào)整）。（可調(diào)整）。樣品檢測樣品檢測溶液配制溶液配制lATS和基地對不同于驗證使用的另一批次樣品進(jìn)行檢和基地對不同于驗證使用的另一批次樣品進(jìn)行檢測。測?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lATS與基地與基地QC檢測的已知雜質(zhì)含量的絕對差值檢測的已知雜質(zhì)含量的絕對差值 0.05%，總雜的絕對差值，總雜的絕對差值 0.10%（可調(diào)整）（可調(diào)整）需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l主峰或已知單雜峰面積；主峰或已知單雜峰面積；6份及份及1

18、2份主峰或已知單雜份主峰或已知單雜含量單值，含量單值，MeanSD，RSD；95%CI（n=6）；含）；含量均值的絕對差值。量均值的絕對差值。第15頁/共33頁第十六頁，共34頁。溶液名稱溶液名稱進(jìn)樣針數(shù)進(jìn)樣針數(shù)空白溶液空白溶液 1或或2針針系統(tǒng)適應(yīng)性溶液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液 1針針靈敏度溶液靈敏度溶液1針針專屬性溶液（如必要）專屬性溶液（如必要）1或或2針針對照液對照液3、5、6針（根據(jù)針（根據(jù)RSD定）定）供試液供試液6份份各各1針針靈敏度溶液靈敏度溶液1針針系統(tǒng)適應(yīng)性溶液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液1針針應(yīng)考慮成本應(yīng)考慮成本重現(xiàn)重現(xiàn)(zhn xin)性下進(jìn)樣序列：性下進(jìn)樣序列：第16頁/共33頁第十七頁，共

19、34頁。18含量含量(hnling)（HPLC）4. 檢測限及定量限檢測限及定量限溶液配制溶液配制l 對照液對照液逐級稀釋至逐級稀釋至S/N 3和和S/N 10時的濃度溶液，時的濃度溶液， 連續(xù)進(jìn)樣三針。連續(xù)進(jìn)樣三針?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l檢測限：檢測限：S/N 3;l定量限：定量限：S/N 10； RSD（n=3）10.0%或或15.0%； 定量限定量限忽略限（或報告限）。忽略限（或報告限）。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l信噪比；主峰峰面積及信噪比；主峰峰面積及RSD（RSD僅是用于定量限）僅是用于定量限） ；定量限及檢測限的濃度及其相當(dāng)于供試液中主峰濃度的定量限及檢測限的濃度及其相當(dāng)于供試液中主峰

20、濃度的百分比。百分比。第17頁/共33頁第十八頁，共34頁。1919含量含量(hnling)（HPLC）5. 線性及范圍線性及范圍溶液配制溶液配制l 報告限報告限雜質(zhì)限度的雜質(zhì)限度的150%（至少（至少5個點）個點）注：若方法描述中對照液的濃度超過了雜質(zhì)限度，則線性最高點做到注：若方法描述中對照液的濃度超過了雜質(zhì)限度，則線性最高點做到 對照液濃度的對照液濃度的150%。可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lr 0.990;lY軸截距軸截距/最低雜質(zhì)限度時最低雜質(zhì)限度時Y軸響應(yīng)值的絕對值軸響應(yīng)值的絕對值5.0% （最大可放寬至（最大可放寬至10.0%）需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l線性點實際濃度及峰面積；線性圖；線性范

21、圍；線性方線性點實際濃度及峰面積；線性圖；線性范圍；線性方程；相關(guān)系數(shù)；殘差平方和；程；相關(guān)系數(shù)；殘差平方和；Y軸截距；軸截距；Y軸截距的軸截距的95%CI；Y軸截距軸截距/雜質(zhì)限度對應(yīng)的響應(yīng)值的絕對值。雜質(zhì)限度對應(yīng)的響應(yīng)值的絕對值。第18頁/共33頁第十九頁，共34頁。20含量含量(hnling)（HPLC）6. 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度溶液配制溶液配制l 報告限，報告限，雜質(zhì)限度，及線性最高點的準(zhǔn)確度溶液各雜質(zhì)限度，及線性最高點的準(zhǔn)確度溶液各3 份，可用一個母液稀釋。份，可用一個母液稀釋。l 供試液，供試液，1份（供試品加標(biāo)雜質(zhì)）和份（供試品加標(biāo)雜質(zhì)）和/或或l 對照液，對照液，1份（主成分方法）份（

22、主成分方法）注：若本底太高，最低點可從注：若本底太高，最低點可從50%做起，或用對照品代替供試品。做起，或用對照品代替供試品?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l單個回收率及平均回收率應(yīng)在單個回收率及平均回收率應(yīng)在90.0%110.0%；l回收率（回收率（n=9）的）的RSD10.0%。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l實際測得值；理論值；單個回收率；平均回收率及其實際測得值；理論值；單個回收率；平均回收率及其95%置信區(qū)間及置信區(qū)間及RSD。第19頁/共33頁第二十頁，共34頁。7. 耐用性耐用性溶液穩(wěn)定性溶液穩(wěn)定性溶液配制溶液配制l系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液；供試液系統(tǒng)適應(yīng)性溶液；對照液；供試液可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l系

23、統(tǒng)適應(yīng)性溶液：滿足要求；系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：滿足要求；l對照液：主峰峰面積與對照液：主峰峰面積與0h相比應(yīng)在相比應(yīng)在0.91.1之間；之間；l供試液：總雜含量與供試液：總雜含量與0h相比應(yīng)在相比應(yīng)在0.91.1之間；之間； 各原單雜含量的極差各原單雜含量的極差|An- A0| 0.05%； 不得出現(xiàn)大于不得出現(xiàn)大于0.05%的新雜質(zhì)。的新雜質(zhì)。 主峰面積變化可以增加，重點考慮雜質(zhì)峰主峰面積變化可以增加，重點考慮雜質(zhì)峰需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l系統(tǒng)適應(yīng)性要求；主峰峰面積或含量，系統(tǒng)適應(yīng)性要求；主峰峰面積或含量， RRT；各時；各時間點主峰峰面積與間點主峰峰面積與0h比值；單雜含量及極差；總雜比值；單雜含

24、量及極差；總雜質(zhì)含量與質(zhì)含量與0h的比值。的比值。色譜條件的影響色譜條件的影響溶液配制溶液配制l系統(tǒng)適應(yīng)性；對照液（系統(tǒng)適應(yīng)性；對照液（方法開發(fā)時應(yīng)考慮供試液方法開發(fā)時應(yīng)考慮供試液）色譜條件色譜條件l流動相比例；流速；流動相比例；流速；pH值；柱溫；色譜柱批號。值；柱溫；色譜柱批號。可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l同系統(tǒng)適應(yīng)性項下的可接受標(biāo)準(zhǔn)。同系統(tǒng)適應(yīng)性項下的可接受標(biāo)準(zhǔn)。注：在注：在RSD符合要求的情況下，可減少為符合要求的情況下，可減少為3針。針。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l同系統(tǒng)適應(yīng)性項下各報告內(nèi)容。同系統(tǒng)適應(yīng)性項下各報告內(nèi)容。第20頁/共33頁第二十一頁，共34頁。2222溶溶劑劑(rngj)殘殘留（

25、留（GC）三三系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性2. 專屬性專屬性精密度精密度檢測限及定量檢測限及定量(dngling)限限線性及范圍線性及范圍準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度耐用性耐用性第21頁/共33頁第二十二頁，共34頁。2323含量含量(hnling)（HPLC）1. 系統(tǒng)適應(yīng)性系統(tǒng)適應(yīng)性溶液配制溶液配制l 空白溶液；對照液空白溶液；對照液可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l對照液中待測溶劑峰與相鄰峰的分離度對照液中待測溶劑峰與相鄰峰的分離度1.5；lRSD (n=6) 5.0%或或10.0%；需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l分離度；待峰溶劑峰的峰面積及分離度；待峰溶劑峰的峰面積及RSD。2. 專屬性專屬性溶液配制溶液配制l 空白溶液；對照液

26、；供試液；空白溶液；對照液；供試液；100%加標(biāo)溶液；加標(biāo)溶液；l 專屬性溶液（峰鑒別溶劑專屬性溶液（峰鑒別溶劑 + 對照液）；對照液）；可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l空白溶液在待測溶劑峰的空白溶液在待測溶劑峰的RT處（或處（或RRT）無干擾；）無干擾；l供試液和供試液和100%加標(biāo)液與對照液中待測峰加標(biāo)液與對照液中待測峰RT保持一致；保持一致；l專屬性溶液及專屬性溶液及100%加標(biāo)液中待測峰與相鄰峰的加標(biāo)液中待測峰與相鄰峰的R1.5l100%加標(biāo)液和供試液相比，待測峰的峰面積增加。加標(biāo)液和供試液相比，待測峰的峰面積增加。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l分離度；各溶劑峰的分離度；各溶劑峰的RT（或（或RRT）及

27、峰面積。）及峰面積。第22頁/共33頁第二十三頁，共34頁。3. 精密度精密度重復(fù)性重復(fù)性溶液配制溶液配制l對照液，對照液，1份；份；l供試液或供試液或100%加標(biāo)液，加標(biāo)液，6份份可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=6）10.0% %重現(xiàn)性重現(xiàn)性溶液配制溶液配制l同分析重復(fù)性同分析重復(fù)性可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=6）10.0% %；lRSD（n=12）10.0% %；l重復(fù)性與重現(xiàn)性均值的絕對差值重復(fù)性與重現(xiàn)性均值的絕對差值1/10溶殘限度溶殘限度 （對于痕量分析的可以放寬到限度的（對于痕量分析的可以放寬到限度的1/2）；樣品檢測樣品檢測溶液配制溶液配制lATS和基地對不同于驗證使用的

28、另一批次和基地對不同于驗證使用的另一批次樣品樣品進(jìn)行檢測進(jìn)行檢測.可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lATS與基地與基地QC檢測的含量的絕對差值檢測的含量的絕對差值1/10溶殘限度溶殘限度 （對于痕量分析的可以放寬到限度的（對于痕量分析的可以放寬到限度的1/2）。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l待測溶劑峰面積；待測溶劑峰面積；6份及份及12份含量單值，份含量單值，MeanSD，RSD；95%CI（n=6）；含量均值的絕對差值。）；含量均值的絕對差值。第23頁/共33頁第二十四頁，共34頁。溶液名稱溶液名稱進(jìn)樣針數(shù)進(jìn)樣針數(shù)空白溶液空白溶液 1或或2針針專屬性溶液（如必要）專屬性溶液（如必要）1或或2針針對照液對照液6份

29、份各各1針針供試液供試液6份份（或（或100%供試品加標(biāo)液供試品加標(biāo)液6份）份）各各1針針重現(xiàn)重現(xiàn)(zhn xin)性下進(jìn)樣序列：性下進(jìn)樣序列：第24頁/共33頁第二十五頁，共34頁。2626含量含量(hnling)（HPLC）4. 檢測限及定量限檢測限及定量限溶液配制溶液配制l 對照液逐級稀釋至對照液逐級稀釋至S/N 3和和S/N 10時的濃度，各時的濃度，各 平行配制平行配制3份。份?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l檢測限：檢測限：S/N 3;l定量限：定量限： S/N 10；RSD（n=3）10.0%或或15.0%需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l信噪比；待測溶劑峰峰面積及信噪比；待測溶劑峰峰面積及RSD（R

30、SD僅用于定量限僅用于定量限）；定量限及檢測限的濃度及其相當(dāng)于供試液濃度的百）；定量限及檢測限的濃度及其相當(dāng)于供試液濃度的百分比（或分比（或ppm）。）。 第25頁/共33頁第二十六頁，共34頁。2727含量含量(hnling)（HPLC）5. 線性及范圍線性及范圍溶液配制溶液配制l LOQ150%的線性溶液（至少的線性溶液（至少5個點）個點）可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lr 0.990;lY軸截距軸截距/100%濃度時濃度時Y軸響應(yīng)值的絕對值軸響應(yīng)值的絕對值5.0% （最大可放寬至（最大可放寬至10.0%）。）。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l線性實際濃度及峰面積；線性圖；線性方程；線性范圍線性實際濃度及峰面

31、積；線性圖；線性方程；線性范圍；相關(guān)系數(shù)；殘差平方和；相關(guān)系數(shù)；殘差平方和；Y軸截距；軸截距；Y軸截距軸截距95%CI；Y軸截與軸截與/100%濃度對應(yīng)響應(yīng)值的絕對值。濃度對應(yīng)響應(yīng)值的絕對值。6. 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度溶液配制溶液配制l 50%，100%，150%的加標(biāo)液各三份，可用一個母的加標(biāo)液各三份，可用一個母 液稀釋；供試液，液稀釋；供試液，2份份注：若本底太高，低濃度點可用對照品代替供試品。注：若本底太高，低濃度點可用對照品代替供試品?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l單個回收率及平均回收率應(yīng)在單個回收率及平均回收率應(yīng)在90.0%110.0%；l回收率（回收率（n=9）的）的RSD10.0%。注：痕量分析

32、回收率最多可以放寬到注：痕量分析回收率最多可以放寬到70.0-130.%。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l實際測得值；理論值；單個回收率；平均回收率及其實際測得值；理論值；單個回收率；平均回收率及其95%CI及及RSD。第26頁/共33頁第二十七頁，共34頁。7. 耐用性耐用性溶液穩(wěn)定性溶液穩(wěn)定性溶液配制溶液配制l對照液，對照液，1份；份；可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l對照液中待測溶劑峰的峰面積與對照液中待測溶劑峰的峰面積與0h相比應(yīng)在相比應(yīng)在0.901.10之間。之間。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l各時間點主峰峰面積及與各時間點主峰峰面積及與0h的比值。的比值。氣相色譜法，溶液穩(wěn)定性測試可不考慮氣相色譜法，溶液穩(wěn)定性

33、測試可不考慮色譜條件的影響色譜條件的影響溶液配制溶液配制l對照液，對照液，1份；（份；（方法開發(fā)時應(yīng)考慮供試液方法開發(fā)時應(yīng)考慮供試液）色譜條件色譜條件l色譜柱初始溫度；色譜柱初始溫度；l頂空瓶加熱溫度；頂空瓶加熱溫度；l載氣流速；載氣流速；l色譜柱批號；色譜柱批號；l頂空瓶平衡時間。頂空瓶平衡時間。注：可根據(jù)實際情況考察對色譜耐用性影響較大的因素，如頂空注：可根據(jù)實際情況考察對色譜耐用性影響較大的因素，如頂空 的進(jìn)樣時間及加樣時間。的進(jìn)樣時間及加樣時間?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l同系統(tǒng)適應(yīng)性項下的可接受標(biāo)準(zhǔn)。同系統(tǒng)適應(yīng)性項下的可接受標(biāo)準(zhǔn)。注：在注：在RSD符合要求的情況下，可減少為符合要求的情況下

34、，可減少為3針。針。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l同系統(tǒng)適應(yīng)性項下各報告內(nèi)容。同系統(tǒng)適應(yīng)性項下各報告內(nèi)容。第27頁/共33頁第二十八頁，共34頁。2929含量含量(hnling)（酸（酸堿堿滴定）滴定）四四空白空白(kngbi)校正校正2. 滴定曲線的繪制滴定曲線的繪制3. 精密度精密度線性與范圍線性與范圍溶液穩(wěn)定性溶液穩(wěn)定性第28頁/共33頁第二十九頁，共34頁。1. 空白校正空白校正溶液配制溶液配制l 空白溶液，空白溶液，2份份可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)l空白消耗體積不能超過空白消耗體積不能超過0.10 mL，約相當(dāng)于樣品消耗滴，約相當(dāng)于樣品消耗滴定體積的定體積的1%（根據(jù)具體情況而定）。（根據(jù)具體情況

35、而定）。需報告內(nèi)容需報告內(nèi)容l空白溶液消耗的體積空白溶液消耗的體積空白溶液校正時檢驗操作程序的必要步驟，不是驗證項目。而且驗證也沒有空白溶液校正時檢驗操作程序的必要步驟，不是驗證項目。而且驗證也沒有意義，每次操作，空白都會不同。當(dāng)然，可以從總體上看出空白的影響意義，每次操作，空白都會不同。當(dāng)然，可以從總體上看出空白的影響。另外，空白如果太高，本身就證明方法不合適。另外，空白如果太高，本身就證明方法不合適第29頁/共33頁第三十頁，共34頁。313. 精密度精密度 重復(fù)性重復(fù)性溶液配制溶液配制l空白溶液，空白溶液，1份；供試液，份；供試液，6份份可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=6） 0.33%（酸堿滴定）（酸堿滴定）1. 重現(xiàn)性及重現(xiàn)性及樣品檢測樣品檢測溶液配制溶液配制l同分析重復(fù)性同分析重復(fù)性可接受標(biāo)準(zhǔn)可接受標(biāo)準(zhǔn)lRSD（n=6）0.33%lRSD（n=12）0.33%方法原理不一