醫(yī)院干化學應用專題講座

1、干化學應用實驗室專員房圣亞主要內容干化學原理V350分析儀的日常保養(yǎng)常見應用問題解析美國強生公司是世界上最大的、最具綜合性的醫(yī)療保健品制造商，為消費者、制藥業(yè)和醫(yī)療器材及診斷市場提供全面的專業(yè)化效勞。2021年銷售額到達675億美元，在全世界的醫(yī)療保健產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)中名列第一。全球雇員超過12萬。公司總部位于美國新澤西州，擁有多于250家子公司，為57個國家的市場提供產(chǎn)品和專業(yè)化效勞。產(chǎn)品覆蓋制藥、醫(yī)療器材和保健品。在外科縫線、OTC藥品、醫(yī)療器械及診斷領域居于國際領先地位。2021年在?財富?全球最受景仰的公司評選中，名列第三。全球僅有的五家AAA信用級工業(yè)公司之一。強生公司3強生OCD主要產(chǎn)

2、品 平安輸血 血型分析 血液篩查 實驗室診斷 臨床生化 臨床免疫 實驗室自動化* ValuMetrix實驗室管理咨詢效勞* Veridex腫瘤分子診斷* 注冊中MicroSlide 多涂層薄膜干片技術擴散層擴散層試劑層試劑層指示劑層指示劑層支持層支持層標本MicroSlide多涂層薄膜干片技術：將所需試劑預固相在多層薄膜和郵票大小的透明支持基墊之上。當血漿，血清，尿液或腦脊液與這些已含化學物質的干式薄膜接觸時發(fā)生反響并對反響信號進行測量。干片分類CM/RTPMIR干片鈉鉀氯地高辛苯巴比妥卡馬西平苯妥因C反響蛋白膽固醇 甘油三酯總蛋白 白蛋白高密度酯蛋白 脂肪酶尿蛋白 腦脊液蛋白谷丙轉氨酶 谷氨

3、酸轉移酶堿性磷酸酶 r谷氨酰轉酞酶乳酸脫氫酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶 尿素氮肌酐 尿酸 乳酸 鐵、總鐵結合力磷 鋰淀粉酶膽堿脂酶總膽紅素結合/非結合膽紅素血氨乙醇水楊酸茶堿醋氨酚鎂二氧化碳比色/速率法干片免疫速率法干片電極法干片 指示劑層 支持層擴散層試劑層比色/速率法干片通過測定干片顏色變化來確定化合物濃度 指示劑層 支持層 多孔結構，允許標本通過 均勻分布標本 過濾大分子蛋白質，脂肪等 去除干擾物質溶血，黃疸等 提供反射測定的背景擴散層試劑層擴散層比色/速率法干片結構試劑層 擴散層 試劑層指示劑層 支持層 包含檢測反響所需的酶，緩沖液，催化劑等 多層試劑，控制反響順序比色/速率法干片結構葡

4、萄糖干片指示劑層 擴散層 試劑層 指示劑層 支持層試劑層產(chǎn)物與指示劑層中的染料結合時，形成有色復合物，其與分析物濃度成正比。比色/速率法干片結構支持層 擴散層 試劑層 指示劑層 支持層 提供反響支持基墊 允許光路自由通過比色/速率法干片結構反射光的測定干擾物質反光背景成色層生成純潔的反射光光源濾光片接收器比色/速率法干片功能演示濕化學 ： 采用透射光度法 遵循朗勃比爾定律干化學 ： 采用反射光度法 遵循Williams Clapper定律吸光度濃度反射光濃度透射與反射接收器接收器透射 與 反射光線經(jīng)過干擾物質 光線不經(jīng)過干擾物質 受影響 不受影響尿酸其他的優(yōu)異抗干擾能力 MicroSlide多

5、層涂膜技術可以針對不同檢測工程使用加以不同成份的薄膜以到達最正確的檢測結果某些干片中有清道夫層如尿酸試劑去除維他命C 和鎂干片去除鈣的干擾 某些干片試劑層下有半透膜層如尿素氮：去除藥物干擾半透膜尿素氮 競爭性與非競爭性免疫速率反響模式 需要液體反響底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡馬西平免疫速率法干片電極法干片 離子選擇電極技術 直接法測定兩電極間電勢不同 鉀，鈉，氯18鹽橋S2S1S3S4aIar離子載體膜M+ ClAgCl Ag離子載體膜M+ ClAgClAgaIarVV干片常規(guī)濃度液體(參比液)待測液體(標本)離子選擇電極(ISE)鹽橋ar電極法干片19干片在接觸點被穿透測量電

6、壓讀數(shù)通過電壓讀數(shù)計算出分析物的濃度旗艦測試工程 K，Na，Cl 直接離子選擇電極20Aqueous Solution (Serum)水相(血清)Non-aqueous solution(Lipids, Proteins)非水相(血脂,蛋白質)以間接法檢測的容量以直接法檢測的容量間接法無法對血脂和蛋白質進行校正.21組成成分 原始體積水相9.3 ul非水相 0.7 ul總樣本體積 10.0 ul按照血清中, 非水相占有的體積約為7 %計算標本電解質排斥效應22組成成分 原始體積稀釋液 990.0 ul水相 9.3 ul非水相 0.7 ul總樣本體積 1000.0 ul稀釋后的正常人標本(100

7、倍稀釋)稀釋比率 = 最終體積 / 原始體積總的血清稀釋比率 = 1000 / 10 = 100 倍水相稀釋比率 = (990 + 9.3) / 9.3 = 107.45 倍電解質排斥效應23正常人標本Na=140K = 4.0稀釋 1:100檢測計算Na= 140K = 4.0結果Na = 130.3K = 3.72單位：mmol/LNa = 140 /107.45100 = 130.3 mmol/LK = 4/107.45100 = 3.72 mmol/L直接離子選擇電極法檢測間接離子選擇電極法結果電解質排斥效應蛋白質增高脫水巨球蛋白血癥多發(fā)性骨髓瘤高球蛋白血癥肉芽腫病某些膠原病血脂增高甲

8、狀腺機能減退腎病綜合癥糖原過多癥糖尿病急性胰腺炎直接法 vs. 間接法 ISE疾病狀態(tài)對標本的影響血漿蛋白影響血漿蛋白為局部水溶性，故高濃度的蛋白會造成與血脂類似地影響 4 8 12 160.800.901.00檢測結果總蛋白直接電極法間接電極法 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性黃疸20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入膽紅素 BILIRUBIN ( mg/dL)( 最終結果 /原始結果)= 結果離散度 %*CREAASTPHOS# LDH #ALKPCaPROTECO2#MgCHOLGLUALT*TRIG

9、*NA*CL*UREA*CK*AMYL*ALB*URCA*FEDxxxxx Dxxxxxxx 某濕生化系統(tǒng)文件來源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000BILIRUBIN ADDED

10、( mg/dL)結果離散度%PROT*ALB*ALKP*AMYL*AST*ECO2*CA*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*NA*CL*URCA*UREA*TRIG*CK200VITROS 350 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性黃疸文件來源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.2001801601401

11、2010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 脂肪 ( INTRALIPID Added mg/dL)結果離散度%*BILIURCAPHOSGLUPROTMgCHOLALBCaCREAALKPAST#ALT*UREA*CK*CL*K*GGT*NA*CO2# LDH 109% AT 750 MG/DLCxxxxx 某濕生化系統(tǒng) 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性脂血文件來源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- e

12、dit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D. 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性脂血18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000LIPEMIA ( INTRALIPID Added mg/dL)結果離散度%*ALB*ALKP*ALT*AMYL*AST*BICARB*BIL*CAL*CK*CL*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*Na*PHOS*PROT*URCA*UREAVITROS 350200文件來

13、源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.200 18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 血紅素 (as hemoglobin mg/dL)結果離散度%Hxxxxx xxx 某濕生化系統(tǒng)T.BILICPKMgALBPHO

14、SUATRIGALTTPALKPGGTAMYL*CL*GLU*CHOL*GLOB*CREAT*D.BILI*BUN*CO2*NA*CA 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性 溶血文件來源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700

15、 800 900 1000HEMOLYSATE ADDED (as hemoglobin mg/dL)結果離散度%*ALKP*AMYL*ECO2*CAL*CK*CL*CREAT*NA*URCA*UREABILIPHOSPROTALBTRIG GLU CHOLMg200VITROS 750強生干式生化系統(tǒng)的抗干擾性溶血文件來源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D.,

16、 Ph.D Starla J. Glick, M.D.主要內容干化學原理V350分析儀的日常保養(yǎng)常見應用問題解析每日保養(yǎng)需要做的保養(yǎng):清空:廢稀釋杯和廢吸頭箱空試劑盒箱廢干片箱檢查: 加樣架是否臟了有無損壞補充:稀釋杯,吸頭試劑參比液,稀釋液,免疫沖洗液質控: 做所有機上工程的質控每日保養(yǎng)清潔加樣架和通道每日保養(yǎng)更換各種輔助試劑:選擇相應的子程序儀器自動準備放入新的輔助試劑參比液,洗液都是記數(shù)為300滴稀釋液是2-10ML每周保養(yǎng)需要做的保養(yǎng):清潔:加樣架平臺,加樣架運動軌道吸頭停止位加樣位的樣品杯限位器觸摸屏和鍵盤檢查:加樣臂的運動路徑主控計算機的空氣濾網(wǎng)每周保養(yǎng)加樣架平臺加樣架運動軌道吸頭

17、停止位加樣位的樣品杯限位器每周保養(yǎng)加樣臂的運動路徑每周保養(yǎng)空氣濾網(wǎng)必要的保養(yǎng)應做的保養(yǎng):須更換的:保濕劑,枯燥劑 反射光度計的燈泡清潔: 廢干片通道 推片尺和干片通道需做的: 用黑白參考片做的光 路校正測試必要的保養(yǎng)必要的保養(yǎng)進入Diagnostic-setup/adjust-Reflectometer Iris調整燈電壓(至8V以下)必要的保養(yǎng)用黑白參考片做的光路校正測試Diagnostic-setup/adjust-Correction Factor輸入黑白參考片的反射系數(shù)按提示將參考片放入孵育盤更新生成的校正系數(shù)主要內容干化學原理V350分析儀的日常保養(yǎng)常見應用問題解析45肌酐為什么有時

18、候肌酐不出結果，報DP,稀釋后結果反而不高？常見應用問題解析-肌酐反響原理兩點速率法：滴加樣本后，干片進行孵育。反響初期樣本重的內源性肌酸被氧化，所產(chǎn)生的反射信號值在兩個時間點測定，測定的反射強度差值與樣本中的肌酐 (CREA) 濃度成正比。46常見應用問題解析-肌酐干擾物質血清和血漿 肌酸：肌酐 (CREA) 濃度為 133 mol/L 時，大于 707 mol/L的肌酸濃度將會顯示“DP代碼因為提高很多的肌酸濃度可能引起過度的背景密度。 對于沒有顯示錯誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 13.3 mol/L。 肌酐 (CREA) 濃度為 1237 mol/L時，大于 88 mol/L 的肌酸濃度將會顯示“DP代碼。 對于沒有顯示錯誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 2%。47肌酐 常見應用問題解析-肌酐處理方法稀釋樣本如果肌酐濃度超出系統(tǒng)可報告范圍，或者分析儀顯示“DP代碼指示高背景密度，通常是因為肌酸濃度升高所致，那么按如下步驟操作：手工樣本稀釋1. 使用 VITROS 7% 牛血清白蛋白溶液稀釋樣本；2. 重新分析；3. 結果乘以稀釋因子，獲得原始樣本中肌酐濃度的估計值。48CK/C