微生物檢驗(yàn)第三篇病毒

1、臨床病毒學(xué)檢驗(yàn)臨床病毒學(xué)檢驗(yàn)第一節(jié)第一節(jié) 病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)體積微小，結(jié)構(gòu)簡單，非細(xì)胞型微生物體積微小，結(jié)構(gòu)簡單，非細(xì)胞型微生物只含一種核酸只含一種核酸在活細(xì)胞內(nèi)寄生在活細(xì)胞內(nèi)寄生以復(fù)制方式進(jìn)行增殖以復(fù)制方式進(jìn)行增殖對抗生素不敏感，干擾素可抑制其增殖；對抗生素不敏感，干擾素可抑制其增殖；葡萄球菌(1000nm） 牛痘病毒300250nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體、大腸桿菌噬菌體 ( 65 95nm )B、腺病毒、腺病毒 (70nm )D、乙腦病毒、乙腦病毒 ( 40nm )E、蛋白分子、蛋白分子 (10nm )F、流感病毒、流感病毒 ( 100

2、nm )G、煙草花葉病毒、煙草花葉病毒C、脊髓灰質(zhì)炎病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒 (30nm ) 形態(tài)形態(tài)球形球形桿形桿形子彈狀子彈狀磚塊狀磚塊狀蝌蚪狀蝌蚪狀病毒體結(jié)構(gòu)模式圖病毒體結(jié)構(gòu)模式圖殼粒殼粒衣殼衣殼核心（核樣物）核心（核樣物）核衣殼核衣殼包膜包膜包膜病毒包膜病毒包膜子粒包膜子粒吸附穿入脫殼生物合成釋放組裝成熟 病毒沒有正常的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，缺乏一些與代謝有關(guān)的病毒沒有正常的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，缺乏一些與代謝有關(guān)的酶，單獨(dú)不能復(fù)制，必須在活細(xì)胞內(nèi)增殖酶，單獨(dú)不能復(fù)制，必須在活細(xì)胞內(nèi)增殖 第二節(jié)第二節(jié) 病毒的增殖病毒的增殖裸露病毒裸露病毒：胞飲作用：胞飲作用不同病毒，穿入方式不同不同病毒，穿入方式不同包膜病毒包膜

3、病毒：包膜與細(xì)胞膜融合包膜與細(xì)胞膜融合噬菌體噬菌體：注入式注入式病毒的配體位點(diǎn)與細(xì)胞表面的特異受體結(jié)合病毒的配體位點(diǎn)與細(xì)胞表面的特異受體結(jié)合三、脫殼三、脫殼不同病毒脫殼方式不同不同病毒脫殼方式不同多數(shù)病毒在宿主細(xì)胞溶酶體酶作用下脫殼多數(shù)病毒在宿主細(xì)胞溶酶體酶作用下脫殼四、生物合成四、生物合成宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行的，在病毒基因控制下在病毒基因控制下的病毒核酸和蛋白的病毒核酸和蛋白質(zhì)的合成過程質(zhì)的合成過程 先合成一些復(fù)制酶、先合成一些復(fù)制酶、抑制蛋白，抑制抑制蛋白，抑制宿主細(xì)胞的正常宿主細(xì)胞的正常代謝，使細(xì)胞代謝代謝，使細(xì)胞代謝向著有利于病毒向著有利于病毒合成的方向進(jìn)行合成的方向進(jìn)行再依

4、據(jù)病毒基因組再依據(jù)病毒基因組的指令，進(jìn)行病毒的指令，進(jìn)行病毒核酸的復(fù)制、核酸的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯轉(zhuǎn)錄和翻譯六、釋放六、釋放出芽釋放出芽釋放溶細(xì)胞釋放溶細(xì)胞釋放組裝：組裝：DNA病毒：一般在核內(nèi)組裝病毒：一般在核內(nèi)組裝RNA病毒：多數(shù)在胞漿內(nèi)組裝病毒：多數(shù)在胞漿內(nèi)組裝病毒的致病作用病毒的致病作用 水平傳播水平傳播（Horizontal transmission） 病毒主要通過皮膚、粘膜（呼吸道、消化道、泌尿生病毒主要通過皮膚、粘膜（呼吸道、消化道、泌尿生殖道）傳播，在特定條件下直接進(jìn)入血液（輸血、機(jī)殖道）傳播，在特定條件下直接進(jìn)入血液（輸血、機(jī)械損傷、昆蟲叮咬等）而感染機(jī)體。所引起的感染，械損傷、

5、昆蟲叮咬等）而感染機(jī)體。所引起的感染，叫水平感染叫水平感染(Horizontal infection) 垂直傳播垂直傳播（Vertical transmission ） 經(jīng)胎盤、產(chǎn)道，病毒直接由親代經(jīng)胎盤、產(chǎn)道，病毒直接由親代( (母親母親) )傳播給子代傳播給子代( (胎胎兒兒/ /新生兒新生兒) )的傳播方式。導(dǎo)致的感染，稱為垂直感染的傳播方式。導(dǎo)致的感染，稱為垂直感染( Vertical infection） 病毒感染的類型病毒感染的類型（一）隱性感染（一）隱性感染（inapparent or subclinical infection） 非顯性感染、亞臨床感染非顯性感染、亞臨床感染 病

6、毒侵入機(jī)體內(nèi)，不引起臨床癥狀的感染病毒侵入機(jī)體內(nèi)，不引起臨床癥狀的感染 形成原因：病毒毒力弱、機(jī)體防御較強(qiáng)，病毒不能大形成原因：病毒毒力弱、機(jī)體防御較強(qiáng)，病毒不能大量增殖，未造成細(xì)胞、組織嚴(yán)重?fù)p傷；或最終不能侵量增殖，未造成細(xì)胞、組織嚴(yán)重?fù)p傷；或最終不能侵入靶細(xì)胞。入靶細(xì)胞。 意義：獲得免疫力；意義：獲得免疫力；（二）顯性感染（二）顯性感染（apparent infection） 病毒感染后，患者出現(xiàn)明顯的臨床癥狀病毒感染后，患者出現(xiàn)明顯的臨床癥狀 可表現(xiàn)為可表現(xiàn)為局部局部和和全身感染全身感染；1 1、急性感染：潛伏期短，發(fā)病急，病程短，恢復(fù)后病毒被徹、急性感染：潛伏期短，發(fā)病急，病程短，恢復(fù)

7、后病毒被徹底清除，機(jī)體獲得免疫力。如流感，甲肝等。底清除，機(jī)體獲得免疫力。如流感，甲肝等。2、 持續(xù)性感染（持續(xù)性感染（persistent infection）：）： 病毒在體內(nèi)持續(xù)存在幾個(gè)月病毒在體內(nèi)持續(xù)存在幾個(gè)月,幾年幾年,幾十年，幾十年， 甚至終身甚至終身攜帶，經(jīng)常攜帶，經(jīng)常/反復(fù)有病毒排除體外，但缺乏持續(xù)性的臨床表反復(fù)有病毒排除體外，但缺乏持續(xù)性的臨床表現(xiàn)?，F(xiàn)。病毒能持續(xù)存在于體內(nèi)的原因病毒能持續(xù)存在于體內(nèi)的原因 病毒病毒Ag弱，不足以引起機(jī)體免疫反應(yīng)；弱，不足以引起機(jī)體免疫反應(yīng)； 病毒病毒Ag變異，機(jī)體免疫系統(tǒng)不能有效識別；變異，機(jī)體免疫系統(tǒng)不能有效識別； 病毒基因整合在宿主細(xì)胞染

8、色體上，病毒病毒基因整合在宿主細(xì)胞染色體上，病毒與與細(xì)胞共存；細(xì)胞共存； 病毒直接侵犯免疫細(xì)胞，造成免疫功能下降病毒直接侵犯免疫細(xì)胞，造成免疫功能下降; ; 1 1、慢性感染、慢性感染（chronic infection） 顯性、隱性感染后，病毒未完全清除，持續(xù)存顯性、隱性感染后，病毒未完全清除，持續(xù)存在血液或組織中，處于持續(xù)增殖狀態(tài)，并不斷在血液或組織中，處于持續(xù)增殖狀態(tài)，并不斷排出體外。臨床癥狀可有、可無。病程長（數(shù)排出體外。臨床癥狀可有、可無。病程長（數(shù)月、數(shù)年、數(shù)十年），病毒慢性進(jìn)行性損傷機(jī)月、數(shù)年、數(shù)十年），病毒慢性進(jìn)行性損傷機(jī)體，并能檢出病毒的存在。體，并能檢出病毒的存在。2 2、

9、潛伏感染、潛伏感染（latent infection） 顯、隱性感染后，病毒存在于一定組織或細(xì)胞顯、隱性感染后，病毒存在于一定組織或細(xì)胞內(nèi)，不產(chǎn)生感染性病毒體。在某些條件下，病內(nèi)，不產(chǎn)生感染性病毒體。在某些條件下，病毒基因被激活而急性發(fā)作，增殖出病毒顆粒，毒基因被激活而急性發(fā)作，增殖出病毒顆粒，出現(xiàn)顯性感染。出現(xiàn)顯性感染。3、慢發(fā)病毒感染（、慢發(fā)病毒感染（slow virus infection） 又稱遲發(fā)病毒感染（又稱遲發(fā)病毒感染（delay infection）; 病毒感染后，在機(jī)體內(nèi)經(jīng)過長期潛伏病毒感染后，在機(jī)體內(nèi)經(jīng)過長期潛伏( (數(shù)月、數(shù)年、數(shù)十?dāng)?shù)月、數(shù)年、數(shù)十年年) )后，出現(xiàn)慢性進(jìn)

10、行性疾病，最終導(dǎo)致死亡后，出現(xiàn)慢性進(jìn)行性疾病，最終導(dǎo)致死亡; ; 常見病毒引起：常見病毒引起： HIV AIDS; 麻疹病毒麻疹病毒亞急性硬化性全腦炎（亞急性硬化性全腦炎（SSPESSPE） 非常見病毒非常見病毒/ /待定致病因子引起：待定致病因子引起： 朊粒朊粒羊癢疫羊癢疫(scrapie)，庫魯病，庫魯病( Kulu )等等 病毒的致病機(jī)制病毒的致病機(jī)制（一）病毒對宿主細(xì)胞的直接作用（一）病毒對宿主細(xì)胞的直接作用1、殺細(xì)胞性感染、殺細(xì)胞性感染 多多見于裸露病毒見于裸露病毒 機(jī)制：機(jī)制：- - 阻斷細(xì)胞大分子合成；阻斷細(xì)胞大分子合成； - - 破壞細(xì)胞溶酶體；破壞細(xì)胞溶酶體； - - 病毒毒

11、性蛋白的作用；病毒毒性蛋白的作用；2、細(xì)胞膜的改變 細(xì)胞融合細(xì)胞融合- 形成多核巨細(xì)胞，細(xì)胞功能受損。形成多核巨細(xì)胞，細(xì)胞功能受損。- 細(xì)胞膜表面出現(xiàn)新抗原細(xì)胞膜表面出現(xiàn)新抗原- 病毒增殖，將自身蛋白表達(dá)在宿主細(xì)胞膜病毒增殖，將自身蛋白表達(dá)在宿主細(xì)胞膜上，改變宿主細(xì)胞膜成分上，改變宿主細(xì)胞膜成分3 3、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、細(xì)胞轉(zhuǎn)化 某些病毒的某些病毒的DNADNA和宿主細(xì)胞的染色體整合，和宿主細(xì)胞的染色體整合，可使細(xì)胞遺傳性狀發(fā)生改變，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生可使細(xì)胞遺傳性狀發(fā)生改變，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生4 4、形成包涵體、形成包涵體 病毒感染病毒感染C C后，在光鏡下可見，胞漿或核后，在光鏡下可見，胞漿或核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸

12、或嗜堿性的團(tuán)塊結(jié)構(gòu)，稱為包涵體。內(nèi)出現(xiàn)嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊結(jié)構(gòu)，稱為包涵體。 形成機(jī)制形成機(jī)制： V V顆粒的聚集；顆粒的聚集；V V增殖的場所；增殖的場所；C C對對V V的反應(yīng)產(chǎn)物；的反應(yīng)產(chǎn)物；C C表面的表面的V-Ag細(xì)胞暴露的自身抗原細(xì)胞暴露的自身抗原 CELL體液免疫體液免疫細(xì)胞免疫細(xì)胞免疫 損傷宿主損傷宿主C C 腎毛腎毛細(xì)血管基底膜細(xì)血管基底膜蛋白尿蛋白尿, ,血尿血尿V-Ag+Ab 關(guān)節(jié)滑膜關(guān)節(jié)滑膜關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)炎 肺部肺部支氣管炎、肺炎支氣管炎、肺炎 A.B.IC（二）（二） 病毒感染的免疫病理損傷病毒感染的免疫病理損傷1、體液免疫損傷、體液免疫損傷（II,III型超敏反應(yīng)）型超敏

13、反應(yīng)） 受染細(xì)胞表面有受染細(xì)胞表面有V-Ag、IC沉積沉積 自身免疫自身免疫2、細(xì)胞免疫損傷、細(xì)胞免疫損傷（IV型超敏反應(yīng)）型超敏反應(yīng)）3、直接損傷淋巴細(xì)胞或淋巴器官、直接損傷淋巴細(xì)胞或淋巴器官 如：如：HIV直接損傷直接損傷CD4+T細(xì)胞細(xì)胞（三）病毒的免疫逃逸（三）病毒的免疫逃逸 通過編碼特異性抑制蛋白或形成合胞體是病通過編碼特異性抑制蛋白或形成合胞體是病毒在細(xì)胞間傳播。毒在細(xì)胞間傳播。第二節(jié)第二節(jié) 宿主的抗病毒宿主的抗病毒免疫免疫一、非特異性免疫：一、非特異性免疫：IFN, NK細(xì)胞細(xì)胞（一）、干擾素（一）、干擾素(Interferon, IFN) 1、定義：病毒或干擾素誘生劑刺激機(jī)體的

14、多種細(xì)胞、定義：病毒或干擾素誘生劑刺激機(jī)體的多種細(xì)胞(巨巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、體細(xì)胞等噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、體細(xì)胞等)，產(chǎn)生的抑制病毒增殖的，產(chǎn)生的抑制病毒增殖的糖蛋白。糖蛋白。 2 2、 分類分類: : IFN類型類型 主要來源主要來源 特點(diǎn)特點(diǎn) I型型 IFN 人人WBC IFN 人成纖維人成纖維C 抑制病毒作用抑制病毒作用III II型型 IFN TC 抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)作用抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)作用III IFN 細(xì)胞基因細(xì)胞基因 抗病毒蛋白抗病毒蛋白 自身和鄰近細(xì)胞自身和鄰近細(xì)胞 降解病毒降解病毒mRNA 抑制病毒蛋白合成抑制病毒蛋白合成 抑制病毒組裝、釋放抑制病毒組裝、釋放 抑制病毒復(fù)制抑制病毒

15、復(fù)制 中斷病毒感染；限制病毒擴(kuò)散中斷病毒感染；限制病毒擴(kuò)散 3 3、作用機(jī)理作用機(jī)理 不是直接殺滅病毒不是直接殺滅病毒 4、生物學(xué)活性、生物學(xué)活性:（1）、）、 廣譜的廣譜的抗病毒作用抗病毒作用；抑制病毒感染、阻止；抑制病毒感染、阻止病毒在體內(nèi)擴(kuò)散、促進(jìn)痊愈病毒在體內(nèi)擴(kuò)散、促進(jìn)痊愈;（2）、）、調(diào)節(jié)免疫功能調(diào)節(jié)免疫功能；（3）、）、 抑制腫瘤細(xì)胞生長抑制腫瘤細(xì)胞生長；（二）（二）NK：非特異性殺傷病毒感染的靶細(xì)胞非特異性殺傷病毒感染的靶細(xì)胞特點(diǎn)：不受特點(diǎn)：不受MHC限制、不依賴限制、不依賴Ab；可通過多種途；可通過多種途徑活化；徑活化； 殺傷機(jī)制：殺傷機(jī)制：NK接觸靶接觸靶C釋放穿孔素、釋放穿

16、孔素、TNF破壞受染破壞受染C（一）、（一）、體液免疫體液免疫：中和病毒中和病毒（二）、（二）、細(xì)胞免疫：細(xì)胞免疫：主要靠主要靠TC 釋放穿孔素、顆粒酶，致敏釋放穿孔素、顆粒酶，致敏TH1釋放的釋放的多種淋巴因子發(fā)揮作用多種淋巴因子發(fā)揮作用二、特異性免疫二、特異性免疫 第三十三章第三十三章 病毒學(xué)檢驗(yàn)基本技術(shù)病毒學(xué)檢驗(yàn)基本技術(shù)一、標(biāo)本采集與送檢：原則：盡早采取 、部位適宜、冷藏速送：冰塊或干冰、 50%的甘油緩沖鹽水 、抗生素雙份血清標(biāo)本：急性期、恢復(fù)期雙份血清二、快速檢查方二、快速檢查方法法光鏡光鏡-包涵體包涵體電鏡電鏡免疫熒光免疫熒光ELISA分子生物學(xué)技術(shù)分子生物學(xué)技術(shù)雜交雜交South

17、ern blotPCRNorthern blot三、病毒的分離培三、病毒的分離培養(yǎng)養(yǎng)檢驗(yàn)標(biāo)本檢驗(yàn)標(biāo)本殺滅雜菌殺滅雜菌( (青鏈霉素青鏈霉素) )接種接種病毒分離的一般程序：病毒分離的一般程序：動物接種動物接種出現(xiàn)病狀出現(xiàn)病狀雞胚接種雞胚接種病變或死亡病變或死亡細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞病變細(xì)胞病變 鑒定病毒種型鑒定病毒種型 第三十四章 呼吸道病毒1. 掌握呼吸道病毒的種類和致病特點(diǎn)；流行性感掌握呼吸道病毒的種類和致病特點(diǎn)；流行性感冒病毒、冒病毒、SARS冠狀病毒、禽流感病毒、副黏病冠狀病毒、禽流感病毒、副黏病毒科病毒的生物特性和微生物檢驗(yàn)。毒科病毒的生物特性和微生物檢驗(yàn)。2. 熟悉流行性感冒病毒、熟

18、悉流行性感冒病毒、SARS冠狀病毒、禽流感冠狀病毒、禽流感病毒、副粘病毒科病毒的臨床意義。病毒、副粘病毒科病毒的臨床意義。3. 了解其他呼吸道病毒的生物特性、臨床意義和了解其他呼吸道病毒的生物特性、臨床意義和微生物檢驗(yàn)。微生物檢驗(yàn)。教學(xué)目的與要求教學(xué)目的與要求 呼吸道病毒是指一大類能侵犯呼吸道引呼吸道病毒是指一大類能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病變或僅以呼吸道為入侵門起呼吸道局部病變或僅以呼吸道為入侵門戶，主要引起呼吸道外組織器官病變的病戶，主要引起呼吸道外組織器官病變的病毒。據(jù)統(tǒng)計(jì)，毒。據(jù)統(tǒng)計(jì)，90%以上的急性呼吸道感染以上的急性呼吸道感染由該類病毒引起。由該類病毒引起。呼吸道病毒引起的主要疾病

19、呼吸道病毒引起的主要疾病呼吸道病毒流行性感冒病毒禽流感病毒副粘病毒科其它呼吸道病毒第一節(jié)正粘病毒科第一節(jié)正粘病毒科 一、一、流行性感冒病毒流行性感冒病毒（influenza virus）（一）分類（一）分類 據(jù)據(jù)RNP和和M M蛋白抗原性分：甲、乙、丙三型蛋白抗原性分：甲、乙、丙三型 甲型根據(jù)甲型根據(jù)HAHA和和NANA抗原性不同，又分若干亞型抗原性不同，又分若干亞型 （H1H16、N1N9） 乙型、丙型至今未發(fā)現(xiàn)亞型乙型、丙型至今未發(fā)現(xiàn)亞型（二）臨床意義 “流行性感冒流行性感冒”（ Influenza ）是英）是英國人國人John huzxam在在1743年創(chuàng)造的字，年創(chuàng)造的字，他依據(jù)意大利

20、語中用來描述這個(gè)疾病起源他依據(jù)意大利語中用來描述這個(gè)疾病起源的片語的片語“un infuenza di freddo”，即，即“寒冷的影響寒冷的影響 ”。它主要發(fā)生在深秋、。它主要發(fā)生在深秋、冬天和早春季節(jié)。每年都有數(shù)以百萬計(jì)的冬天和早春季節(jié)。每年都有數(shù)以百萬計(jì)的人群受到感染。人群受到感染。50年代以來共三次年代以來共三次 1957年，年，H2N2，貴州，貴州 1968年，年，H3N2，香港，香港 1977年，年，H1N1，遼寧，遼寧先集體，后散居先集體，后散居先城市，后農(nóng)村先城市，后農(nóng)村傳染源：顯、隱性患者、感染的動物傳染源：顯、隱性患者、感染的動物傳播途徑傳播途徑：呼吸道飛沫傳播：呼吸道飛

21、沫傳播 V呼吸道粘膜柱狀上皮呼吸道粘膜柱狀上皮C病變壞死病變壞死粘膜充血、水腫粘膜充血、水腫炎癥炎癥 鼻塞、咽喉腫痛、咳嗽、卡他等癥鼻塞、咽喉腫痛、咳嗽、卡他等癥狀狀 毒性代謝產(chǎn)物毒性代謝產(chǎn)物 （局部癥狀局部癥狀） 入血入血 發(fā)熱、頭痛、肌肉酸痛、乏力等（發(fā)熱、頭痛、肌肉酸痛、乏力等（全身癥狀全身癥狀）V不入血，只在呼吸道上皮局部增殖不入血，只在呼吸道上皮局部增殖（三）生物學(xué)特性1、形態(tài)結(jié)構(gòu)：形態(tài)結(jié)構(gòu)： 流感病毒呈球形或絲狀，球形直徑流感病毒呈球形或絲狀，球形直徑80-120nm，新分離株絲狀多于球形，新分離株絲狀多于球形,有包膜，單鏈分片段的有包膜，單鏈分片段的RNA病毒。病毒。 流感病毒結(jié)

22、構(gòu)流感病毒結(jié)構(gòu)表面：表面：血凝素血凝素(HA)柱狀，為三聚體，基本上以相同的間距覆柱狀，為三聚體，基本上以相同的間距覆蓋了病毒的全部表面蓋了病毒的全部表面HA1（吸附）（吸附）HA2（核衣殼釋放）血凝（核衣殼釋放）血凝抑制抗體抑制抗體(保護(hù)性抗體保護(hù)性抗體) 神經(jīng)氨酸酶（神經(jīng)氨酸酶（NA）四個(gè)亞單位組成的四聚體，并不平均分四個(gè)亞單位組成的四聚體，并不平均分布在病毒表面，而是聚合成群。與病毒釋放有關(guān)布在病毒表面，而是聚合成群。與病毒釋放有關(guān)。內(nèi)部：內(nèi)部：1、核衣殼、核衣殼病毒分片段的病毒分片段的RNA，結(jié)合有核蛋白（，結(jié)合有核蛋白（NP）以及與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有關(guān)的三種依賴以及與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有關(guān)的三種依

23、賴RNA的的RNA多聚酶蛋白。多聚酶蛋白。呈螺旋對稱。呈螺旋對稱。2、基質(zhì)蛋白（、基質(zhì)蛋白（M蛋白）蛋白）覆蓋在核衣殼外面，覆蓋在核衣殼外面，M蛋白抗原性穩(wěn)蛋白抗原性穩(wěn)定，也具有型特異性。定，也具有型特異性。M1(增加包膜厚度增加包膜厚度)M2(輔助輔助HA2釋放釋放核衣殼核衣殼)3、包膜、包膜來自宿主細(xì)胞的脂質(zhì)雙層膜。來自宿主細(xì)胞的脂質(zhì)雙層膜。 流感病毒的內(nèi)部結(jié)構(gòu)流感病毒的內(nèi)部結(jié)構(gòu)1、核衣殼、核衣殼病毒分片段的病毒分片段的RNA，結(jié)合有核，結(jié)合有核蛋白（蛋白（NP）以及與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄）以及與復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有關(guān)的三種依賴有關(guān)的三種依賴RNA的的RNA多多聚酶蛋白。呈螺旋對稱。聚酶蛋白。呈螺旋對稱。2

24、、基質(zhì)蛋白（、基質(zhì)蛋白（M蛋白）蛋白）覆蓋在核衣殼外面，覆蓋在核衣殼外面，M蛋白抗蛋白抗原性穩(wěn)定，也具有型特異性。原性穩(wěn)定，也具有型特異性。M1(增加包膜厚度增加包膜厚度)M2(輔助輔助HA2釋放核衣殼釋放核衣殼)3、包膜、包膜來自宿主細(xì)胞的脂質(zhì)雙層膜。來自宿主細(xì)胞的脂質(zhì)雙層膜。NAHA包膜包膜M2M1基質(zhì)蛋白基質(zhì)蛋白41 2 35 6 7 8核衣殼核衣殼RNA核蛋白核蛋白 RNA聚合酶聚合酶2 2、變異、變異 抗原漂移（抗原漂移（antigenic drift） 因因HA或或NA的點(diǎn)突變造成，變異幅度小，屬的點(diǎn)突變造成，變異幅度小，屬量變，引起局部中、小型流行。量變，引起局部中、小型流行。

25、抗原轉(zhuǎn)換（抗原轉(zhuǎn)換（antigenic shift） 因因HA或或NA的大幅度變異造成，屬質(zhì)變，導(dǎo)的大幅度變異造成，屬質(zhì)變，導(dǎo)致新亞型的出現(xiàn)，引起世界性的暴發(fā)流行。致新亞型的出現(xiàn)，引起世界性的暴發(fā)流行。 3 3、培養(yǎng)特性、培養(yǎng)特性 雞胚培養(yǎng)：不引起雞胚出現(xiàn)病變，取羊雞胚培養(yǎng)：不引起雞胚出現(xiàn)病變，取羊水或尿囊液做血凝試驗(yàn)水或尿囊液做血凝試驗(yàn) 細(xì)胞培養(yǎng)：紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)：紅細(xì)胞吸附試驗(yàn) 4 4、抵抗力、抵抗力 較弱，不耐熱，對干燥、乙醚、甲醛和較弱，不耐熱，對干燥、乙醚、甲醛和乳酸等敏感。乳酸等敏感。微生物檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn) 病毒分離培養(yǎng)(金標(biāo)準(zhǔn)) 取患者咽漱液或鼻咽拭，接種雞胚或培養(yǎng)細(xì)胞 抗原

26、檢測 直接從病人呼吸道分泌物、脫落細(xì)胞中檢測抗原 分型鑒定 核酸雜交、PCR、序列分析 血清學(xué)診斷 血凝抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫測定二、二、 禽流感病毒禽流感病毒（一）臨床意義（一）臨床意義截止2013年5月11日，全國內(nèi)地共報(bào)告人感染H7N9禽流感確診病例130例，其中死亡人數(shù)33人，康復(fù)人數(shù)45人。病例分布于北京（1例）、上海（33例，死亡14例）、江蘇（27例，死亡8例）、浙江（46例，死亡7例）、安徽（4例，死亡2例）、福建（5例）、江西（5例，死亡1例）、山東（2例）、河南（4例，死亡1例）、湖南（2例）10省市的39個(gè)地市。另有臺灣1例。尚未發(fā)現(xiàn)人傳人的證據(jù)。H7

27、N9（二）生物學(xué)特（二）生物學(xué)特性性類似流行性感冒病毒（三）微生物檢驗(yàn) 標(biāo)本采集與處理：常規(guī)采集全血、死亡動物腸內(nèi)容物、肛門拭子、氣管、肺、腸、脾、腎、腦、肝和心臟標(biāo)本。 分離培養(yǎng)：雞胚培養(yǎng)法 病毒抗原及抗體檢測：熒光免疫技術(shù)和酶免疫技術(shù) 核酸檢測：PCR和RT-PCR 第二節(jié)第二節(jié) 副黏病毒副黏病毒科科 特點(diǎn)：特點(diǎn)： 病毒體較大病毒體較大; ; 具另一種刺突具另一種刺突(F(F蛋白蛋白);); 單鏈單鏈RNA,RNA,不分節(jié)段。不分節(jié)段。 種類：種類： 麻疹病毒麻疹病毒 腮腺炎病毒腮腺炎病毒 副流感病毒副流感病毒 呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒 間質(zhì)性肺炎病毒間質(zhì)性肺炎病毒一、麻疹病毒一、麻疹

28、病毒 入侵（CD46為病毒受體）呼吸道上皮細(xì)胞內(nèi)增殖入血（第一次病毒血癥）侵入淋巴組織和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)增殖后再次入血（第二次病毒血癥）多種組織、器官受累，表現(xiàn)為細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞，核內(nèi)形成嗜酸性包涵體等（一）臨床意義（一）臨床意義麻疹的臨床表現(xiàn)麻疹的臨床表現(xiàn) 潛伏期約潛伏期約1012天天 體溫略高、咳嗽、流體溫略高、咳嗽、流涕、好打噴嚏及淚眼，涕、好打噴嚏及淚眼，癥狀持續(xù)癥狀持續(xù)35天天 體溫突然升高（達(dá)到體溫突然升高（達(dá)到4040.5C），口頰粘），口頰粘膜出現(xiàn)柯氏斑，隨后膜出現(xiàn)柯氏斑，隨后出現(xiàn)紅色班丘疹，從出現(xiàn)紅色班丘疹，從耳部開始，耳部開始，23天后天后遍及全身遍及全身 4天后消退，

29、脫屑天后消退，脫屑M 蛋白蛋白螺旋狀核衣殼螺旋狀核衣殼 （RNA和和N蛋白）蛋白）)HN/H/G 糖蛋白突起糖蛋白突起多聚酶多聚酶 脂質(zhì)雙層包膜脂質(zhì)雙層包膜 F糖蛋白突起糖蛋白突起（二）生物學(xué)特性（二）生物學(xué)特性（三）微生物學(xué)檢（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)驗(yàn) 血象：白細(xì)胞總數(shù)減低，淋巴細(xì)胞相對增血象：白細(xì)胞總數(shù)減低，淋巴細(xì)胞相對增加加 早期診斷：分泌物沉渣檢多核巨細(xì)胞和病早期診斷：分泌物沉渣檢多核巨細(xì)胞和病毒抗原毒抗原 血清學(xué)檢查：特異性抗體血清學(xué)檢查：特異性抗體 病毒分離病毒分離二、腮腺炎病毒二、腮腺炎病毒（一）臨床意義（一）臨床意義 腮腺炎病毒是流行性腮腺炎的腮腺炎病毒是流行性腮腺炎的 病原體，只病

30、原體，只有一個(gè)血清型，人是其唯一宿主有一個(gè)血清型，人是其唯一宿主 病毒通過飛沫或直接接觸傳播病毒通過飛沫或直接接觸傳播 咳嗽、噴嚏甚至說話都可傳播病毒咳嗽、噴嚏甚至說話都可傳播病毒 學(xué)齡兒童為易感人群學(xué)齡兒童為易感人群 出現(xiàn)癥狀前出現(xiàn)癥狀前23天及癥狀消失后天及癥狀消失后9天仍有傳天仍有傳染性染性（一）臨床意義（一）臨床意義 潛伏期潛伏期23周周 在上皮細(xì)胞和局部在上皮細(xì)胞和局部淋巴結(jié)內(nèi)增殖淋巴結(jié)內(nèi)增殖 入血，病毒隨血侵入血，病毒隨血侵入腮腺及其它器官入腮腺及其它器官 主要癥狀為主要癥狀為腮腺腫腮腺腫大、睪丸炎、卵巢大、睪丸炎、卵巢炎及病毒性腦炎炎及病毒性腦炎 可獲牢固的免疫力可獲牢固的免疫力

31、（三）微生物學(xué)檢驗(yàn) 分離培養(yǎng)： 標(biāo)本：患者唾液、尿液或腦脊液 方法：雞胚羊膜腔、雞胚細(xì)胞培養(yǎng) 血清學(xué)診斷：病毒IgM或4倍上升的IgG 方法：血凝抑制試驗(yàn)、ELISA和免疫熒 光技術(shù)三、副流感病毒三、副流感病毒（一）臨床意義 病毒通過人與人直接接觸或飛沫傳播，進(jìn)入人體于呼吸道上皮細(xì)胞中增殖，病毒血癥罕見?？梢饗胗變杭皟和瘒?yán)重呼吸道疾病。 （二）生物學(xué)性狀病毒呈球形，較大，直徑為125-250nm。刺突：刺突：HN蛋白：蛋白：具有HA和NA作用F蛋白：蛋白：具有使細(xì)胞融合及溶解紅細(xì)胞的作用根據(jù)抗原構(gòu)造不同，副流感病毒分為5型。（三）微生物學(xué)檢驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)室診斷可用細(xì)胞培養(yǎng)分離鑒定病毒，或用免疫熒光

32、檢查鼻咽脫落細(xì)胞中的病毒抗原。 四、呼吸道合胞病毒 引起嬰幼兒下呼吸道感染的最常見病毒 侵入呼吸道后在上皮細(xì)胞內(nèi)增殖，病毒不入血 病理免疫造成細(xì)胞損傷 支氣管壞死物與粘液、纖維蛋白粘連在一起，易導(dǎo)致氣道阻塞，可并發(fā)嚴(yán)重的細(xì)支氣管炎和肺炎包膜刺突包膜刺突G與受體結(jié)合、吸附與受體結(jié)合、吸附F強(qiáng)烈細(xì)胞融合作用（故名），形成合胞體及胞強(qiáng)烈細(xì)胞融合作用（故名），形成合胞體及胞漿嗜堿性包涵體漿嗜堿性包涵體SARS冠狀病毒冠狀病毒第三節(jié) 冠狀病毒科（一）臨床意義20022002年年1111月月1616日中國廣東佛山發(fā)現(xiàn)第一起后來稱為日中國廣東佛山發(fā)現(xiàn)第一起后來稱為SARSSARS的病例的病例20032003

33、年年2 2月月1818日中國疾病預(yù)防控制中心宣布，廣東嚴(yán)重呼吸道日中國疾病預(yù)防控制中心宣布，廣東嚴(yán)重呼吸道綜合征的病原基本可以確定為衣原體綜合征的病原基本可以確定為衣原體3 3月月1515日世界衛(wèi)生組織將此疾改稱嚴(yán)重急性呼吸綜合征（日世界衛(wèi)生組織將此疾改稱嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARSSARS）4 4月月1616日世界衛(wèi)生組織在日內(nèi)瓦宣布，病毒已經(jīng)找到，正式日世界衛(wèi)生組織在日內(nèi)瓦宣布，病毒已經(jīng)找到，正式命名為命名為SARSSARS病毒。病毒。我國內(nèi)地我國內(nèi)地2424個(gè)省區(qū)市先后發(fā)生非典型肺炎疫情，共波及個(gè)省區(qū)市先后發(fā)生非典型肺炎疫情，共波及266266個(gè)縣個(gè)縣和市和市( (區(qū)區(qū)) )。截止。截止

34、8 8月月1616日日1010時(shí)，我國內(nèi)地累計(jì)報(bào)告非典型肺炎臨時(shí)，我國內(nèi)地累計(jì)報(bào)告非典型肺炎臨床診斷病例床診斷病例53275327例，治愈出院例，治愈出院49594959例，死亡例，死亡349349例例20042004年年3 3月發(fā)生的月發(fā)生的SARSSARS疫情中，北京和安徽兩地共出現(xiàn)疫情中，北京和安徽兩地共出現(xiàn)9 9例例SARSSARS確診病例，在短短的幾天內(nèi)有確診病例，在短短的幾天內(nèi)有862862人被醫(yī)學(xué)隔離。人被醫(yī)學(xué)隔離。 非典型肺炎癥狀及體征非典型肺炎癥狀及體征 1.1.癥狀與體征癥狀與體征 發(fā)熱（發(fā)熱（3838）和咳嗽、呼吸加速，氣促，）和咳嗽、呼吸加速，氣促，或呼吸窘迫或呼吸窘迫 綜合征，肺部羅音或有肺實(shí)變體綜合征，肺部羅音或有肺實(shí)變體征之一以上。征之一以上。 2.2.實(shí)驗(yàn)室檢查實(shí)驗(yàn)室檢查早期血早期血WBCWBC計(jì)數(shù)不升高，或降低。計(jì)數(shù)不升高，或降低。 3.3.肺部影像學(xué)檢查肺部影