遺傳育種15-4第四章微生物的重組基因

1、第四章 微生物的遺傳重組（基因重組育種）第一節(jié) 轉(zhuǎn)化第二節(jié) 細(xì)菌的接合第三節(jié) 轉(zhuǎn)導(dǎo)第四節(jié) 真菌的有性生殖 第五節(jié) 真菌的準(zhǔn)性生殖第六節(jié) 原生質(zhì)體融合育種2定義：由于不同DNA鏈的斷裂和連接而產(chǎn)生DNA片段的交換和重新組合，形成新的DNA分子，進(jìn)而形成新遺傳個(gè)體的方式稱為基因重組( gene bination)。作用：基因重組可使生物體在未發(fā)生突變的情況下，也能產(chǎn)生新遺傳型的個(gè)體。3重組與雜交的關(guān)系重組是分子水平上的一個(gè)概念，可以理解成是遺傳物質(zhì)分子水平上的雜交而一般所說(shuō)的雜交（hybridization）則是細(xì)胞水平上的一個(gè)概念。雜交中必然包含著重組，而重組則不限于雜交這一形式。4體內(nèi)基因重組

2、的方式原核微生物 轉(zhuǎn)化 Transformation 轉(zhuǎn)導(dǎo) Transduction 接合 Conjugation真核微生物 有性生殖 Sexual reproduction 準(zhǔn)性生殖 Parasexual reproduction體外基因重組基因工程5基因重組是基因重組育種的理論基礎(chǔ)基因重組育種的優(yōu)點(diǎn)：由于選用了已知性狀的供體菌和受體菌作為親本，因此，不論在方向性還是自覺(jué)性方面，均比誘變育種前進(jìn)了一大步。往往還可以消除某一菌株在經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期誘變處理后所出現(xiàn)的產(chǎn)量上升緩慢的現(xiàn)象，因此，它是一種重要的育種手段。6菌株甲生長(zhǎng)快、產(chǎn)量低基因重組新菌株生長(zhǎng)快、產(chǎn)量高菌株乙生長(zhǎng)慢、產(chǎn)量高基因重組育種的缺點(diǎn)：

3、 由于方法較復(fù)雜，工作進(jìn)展較慢，還很難像誘變育種技術(shù)那樣得到普遍的推廣和使用，尤其在原核生物的領(lǐng)域中，應(yīng)用轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或接合等重組技術(shù)來(lái)培育可應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐上的高產(chǎn)菌株的例子還不多見(jiàn)。到了70年代后期，由于原生質(zhì)體融合技術(shù)獲得巨大的成功后，才使重組育種技術(shù)獲得了飛速的發(fā)展。重 組廣義：指由于獨(dú)立分配或交換在后代中出現(xiàn)新的基因組合的過(guò)程。狹義：僅指基因交換或重排而產(chǎn)生的重組。 重組的主要類型 同源重組 位點(diǎn)特異性重組 轉(zhuǎn)座重組*細(xì)菌遺傳物質(zhì)的傳遞方式轉(zhuǎn)化：受體菌直接攝取來(lái)自供體菌的游離DNA片段，并將其整合到自己的基因組中，從而獲得部分新的遺傳性狀的基因轉(zhuǎn)移過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化。接合：供體與受體細(xì)胞直接

4、接觸，借性纖毛傳遞DNA，在受體細(xì)胞中發(fā)生交換、整合，使之獲得供體菌的遺傳性狀的現(xiàn)象，稱為接合。轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體作媒介，將供體細(xì)胞的DNA片段攜帶到受體細(xì)胞中，通過(guò)交換與整合，使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)。第四節(jié) 真菌的有性生殖Sexual reproduction一、順序排列的四分體的遺傳學(xué)分析1、粗糙脈孢菌(Neurospora crassa)的生活史菌絲體無(wú)性繁殖 有性繁殖 順序四分體: 在減數(shù)分裂過(guò)程中形成的孢子不僅共處于一個(gè)子囊中，而且它們是依次直線排列在子囊中，因此稱為順序四分體。2、有性繁殖過(guò)程中著絲粒的分離情況 3、還原分裂和均等分裂還原分裂：來(lái)自同一親本的兩上基因趨

5、向同一極的分裂。均等分裂：來(lái)自同一親本的兩個(gè)基因分別趨向兩極的分裂。 4、基因的第一次分裂分離和第二次分裂分離第一次分裂分離：還原分裂，均等分裂 原因：基因與著絲粒之間未發(fā)生交換 第二次分裂分離：均等分裂，還原分裂 原因：基因與著絲粒之間發(fā)生了交換 第一次分裂分離第二次分裂分離5、著絲粒距離： 某一基因與著絲粒之間的距離著絲粒距離=重組染色單體數(shù)100染色單體總數(shù)=2 第二次分裂分離子囊數(shù)1004 子囊總數(shù)=第二次分裂分離子囊數(shù)1100子囊總數(shù)2二、非順序排列的四分體的遺傳學(xué)分析1、子囊類型 PD、NPD、T從可能性上： 不交換 單交換 雙交換 PD T PD/ T/ NPD結(jié)論： 若：PDN

6、PD，而且NPD/T 較小 則：兩基因連鎖?。?）重組頻率AB重組頻率 =(重組染色單體數(shù)/染色單體總數(shù))100% =(1/2T+NPD)/(PD+NPD+T)100%20第五節(jié)真菌的準(zhǔn)性生殖 Parasexual reproduction準(zhǔn)性生殖是指異核體細(xì)胞中兩個(gè)遺傳物質(zhì)不同的細(xì)胞核可以結(jié)合成雜合二倍體的細(xì)胞核。這種雜合二倍體的細(xì)胞核在有絲分裂過(guò)程中可以發(fā)生染色體交換和單倍體化，最后形成遺傳物質(zhì)重組的單倍體的過(guò)程。準(zhǔn)性生殖是使同種生物不同菌株的體細(xì)胞發(fā)生融合，不經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂而導(dǎo)致基因重組的生殖過(guò)程。21準(zhǔn)性生殖是絲狀真菌，特別是不產(chǎn)生有性孢子的絲狀真菌如半知菌類特有的遺傳現(xiàn)象。是介于有性與

7、無(wú)性之間的一種生殖方式。能進(jìn)行準(zhǔn)性生殖的微生物： Aspergillus nidulans; Asp. niger; Asp. sojae Penicillium chrysogenum; Fusarium oxysporum22準(zhǔn)性生殖的過(guò)程 異核體形成； （雜合）二倍體形成； 體細(xì)胞交換和單元化一、異核體的形成1、異核體異核體細(xì)胞：并存有兩個(gè)不同遺傳性狀的核的細(xì)胞異核體菌絲體：由異核體細(xì)胞構(gòu)成的菌絲體異核體的無(wú)性繁殖：產(chǎn)生親代類型的單倍體分生孢子 異核體的生物學(xué)意義：具有生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)；可以儲(chǔ)備隱性突變 2、異核體的形成(1) 選擇親本 A. 親緣關(guān)系近 B. 生活力、產(chǎn)生分生孢子的能力及數(shù)量相

8、似 C. 帶不同的遺傳標(biāo)記(2) 創(chuàng)造形成異核體的條件 A. 限制性培養(yǎng)基 B. 孢子混合數(shù)量：10610826（3）異核體的證實(shí)異核體的營(yíng)養(yǎng)互補(bǔ)作用：兩個(gè)基因型不同的細(xì)胞核處在同一個(gè)細(xì)胞中，在代謝過(guò)程中互為對(duì)方提供對(duì)方所缺陷的生長(zhǎng)因子的現(xiàn)象?；ヰB(yǎng)作用：雙方產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物通過(guò)培養(yǎng)基滲透擴(kuò)散，互為對(duì)方提供對(duì)方不能合成的營(yíng)養(yǎng)因子，使二者同時(shí)在基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。27二、（雜合）二倍體的形成1、形成：將106 107個(gè)異核體的分生孢子涂至MM上，長(zhǎng)出的少數(shù)菌落即為二倍體 2、檢出： 避免異核體分生孢子重新形成異核體的措施MM要十分純正采用具有分生孢子顏色突變型和營(yíng)養(yǎng)缺陷型作遺傳標(biāo)記例：Asp. nid

9、ulans 分生孢子顏色突變 w+y- :黃色 w-y+ : 白色 w+y+: 綠色異核體： A-B+w+y- A+B-w-y+產(chǎn)生A-B+w+y-(黃色)和A+B-w-y+(白色)分生孢子 A-B+w+y- A+B-w-y+二倍體：產(chǎn)生A+B+w+y+(綠色)分生孢子3、二倍體孢子與單倍體孢子的區(qū)別單倍體孢子二倍體孢子直徑(m)體積(m3)核數(shù)/孢子直徑(m)體積(m3)核數(shù)/孢子Asp. nidulans3.1516.31.04.033.51.0Asp. niger4.547.71.05.482.41.0Asp. sojae-1354.22-1282.21Asp. oryzae-3.5-1

10、.9P. chrysogenus3.726.91.04.961.91.0三、體細(xì)胞交換和單元化 二倍體在有絲分裂過(guò)程中發(fā)生基因重組，使隱性基因得以表達(dá)，由此產(chǎn)生各種類型的分離子。1、體細(xì)胞交換與體細(xì)胞重組體（1）體細(xì)胞交換(somatic crossing-over)：在有絲分裂過(guò)程中同源染色體發(fā)生的交換。由此導(dǎo)致部分基因的純合化。（2）體細(xì)胞重組體：通過(guò)體細(xì)胞交換而形成的分離子。離著絲粒愈近的基因純合化的機(jī)會(huì)愈小，愈遠(yuǎn)則愈大；著絲粒一端基因的純合化不影響著絲粒另一端基因的純合化。2、單元化過(guò)程與非整倍體及單倍體分離子（1）單元化過(guò)程：雜合二倍體在有絲分裂過(guò)程中通過(guò)一系列染色體不離開(kāi)行為而產(chǎn)生

11、非整倍體分離子及最終單倍體分離子的過(guò)程。二倍體(2n) 三體(2n+1)+單體(2n-1) (非整倍體分離子） 2n+ 1 2n (二倍重組體分離子) 2n - 1 2n-1-1 n (單倍重組體分離子)(2) 單元化與連鎖群 A. 體細(xì)胞交換和單元化是兩個(gè)獨(dú)立的事件，發(fā)生在同一細(xì)胞中的概率很??； B. 同一染色體上發(fā)生兩次交換的概率很?。灰虼耍喝粢粭l染色體兩臂上的基因同時(shí)出現(xiàn)純合化現(xiàn)象，可能是單元化的結(jié)果； 若某一基因隨著一條染色體兩臂上的基因的純合化而呈現(xiàn)純合，則為同一個(gè)連鎖群。3、體細(xì)胞交換與單元化的區(qū)別(1) 分離子及其來(lái)源二倍體分離子：來(lái)源于體細(xì)胞交換及單元化非整倍體分離子：來(lái)源于單

12、元化單倍體分離子：來(lái)源于單元化(2) 二倍體分離子與單倍體分離子判別Asp. nidulans二倍體分離子體積大(3) 二倍體分離子與非整倍體分離子判別非整倍體分離子在無(wú)性繁殖子代中繼續(xù)出現(xiàn)另一基因的分離(4) 發(fā)生概率有性生殖與準(zhǔn)性生殖的區(qū)別有性生殖 準(zhǔn)性生殖 導(dǎo)致有性孢子的產(chǎn)生，其形態(tài)、生理均與營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞不同，往往產(chǎn)生在特殊的囊器中 導(dǎo)致重組體細(xì)胞產(chǎn)生，其和一般營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞相同，不產(chǎn)生在特殊的囊器中 減數(shù)分裂導(dǎo)致基因重組，減數(shù)分裂中染色體交換和減半是有規(guī)律的協(xié)調(diào)過(guò)程，是必然的 有絲分裂導(dǎo)致基因重組，有絲分裂中，染色體交換和減少是不規(guī)則且不協(xié)調(diào)的過(guò)程，是偶然的 微生物中導(dǎo)致基因重組的各種形式

13、基因重組 涉及范圍供體和受體間的關(guān)系整個(gè)基因組部分染色體個(gè)別或少數(shù)基因細(xì)胞融合或連接性細(xì)胞真菌的有性生殖體細(xì)胞真菌的準(zhǔn)性生殖細(xì)胞暫時(shí)溝通細(xì)菌接合F因子轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞不接觸轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)化42第六節(jié) 原生質(zhì)體融合技術(shù)原生質(zhì)體Weibull等于1953年首次用溶菌酶處理巨大芽孢桿菌細(xì)胞獲得原生質(zhì)體，并首先提出原生質(zhì)體的概念 。細(xì)胞壁被酶水解剝離，剩下由原生質(zhì)膜包圍著原生質(zhì)的部分稱為原生質(zhì)體（protoplast）。 protoplast 與spheroplast原生質(zhì)體基本保持原細(xì)胞結(jié)構(gòu)、活性和功能，具有細(xì)胞的全能性，但由于不具有細(xì)胞壁，所以原生質(zhì)體不能分裂，對(duì)滲透壓特別敏感 。Macquillen于1955年

14、首次發(fā)現(xiàn)巨大芽孢桿菌原生質(zhì)體的再生方法，使之恢復(fù)成正常的細(xì)胞并繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖。 一、原生質(zhì)體融合育種原生質(zhì)體融合育種是將雙親株先經(jīng)酶法破壁制備原生質(zhì)體，然后用物理、化學(xué)或生物學(xué)方法，促進(jìn)兩親株原生質(zhì)體融合，經(jīng)染色體交換、重組而達(dá)到雜交目的，通過(guò)篩選獲得集兩親株優(yōu)良性狀于一體的穩(wěn)定融合子。經(jīng)過(guò)30余年的發(fā)展，原生質(zhì)體融合已經(jīng)從菌株內(nèi)、菌株間的融合發(fā)展到種內(nèi)、種間的融合，打破了種屬間的親緣障礙，實(shí)現(xiàn)了屬間、門間，甚至跨界的基因重組。 1、原生質(zhì)體融合育種的優(yōu)勢(shì)重組頻率高：放線菌、霉菌：10-110-3，酵母：10-410-5 ，細(xì)菌：10-510-6 重組的親本范圍擴(kuò)大：受接合型或致育型限制小，可以

15、實(shí)現(xiàn)種、屬、門間基因重組融合子集中兩親本優(yōu)良性狀的機(jī)會(huì)增大：遺傳物質(zhì)的傳遞更為完善，三親本、甚至多親本的原生質(zhì)體融合可以實(shí)現(xiàn)二、原生質(zhì)體融合育種的方法親本及其遺傳標(biāo)記選擇；原生質(zhì)體制備；原生質(zhì)體誘導(dǎo)融合；原生質(zhì)體的再生；融合重組體（融合子）的篩選1、親本及遺傳標(biāo)記的選擇兩親株要有遺傳差異較大的良好的生產(chǎn)性狀，以便通過(guò)融合使優(yōu)良性狀迭加 兩親株的親緣關(guān)系要近，基因重組的概率高 兩親株要帶有不同的遺傳標(biāo)記，有利于融合子的檢出，或采用對(duì)一個(gè)親株加熱滅活 親本標(biāo)記：營(yíng)養(yǎng)缺陷型或抗藥性等；自然標(biāo)記；細(xì)胞質(zhì)遺傳標(biāo)記：小菌落、Killer等；生產(chǎn)性狀本身。2、原生質(zhì)體的制備制備大量具有活性的原生質(zhì)體是微生物

16、原生質(zhì)體育種的前提?；钚栽|(zhì)體制備的過(guò)程包括原生質(zhì)體的分離、收集、純化、活性鑒定和保存等操作步驟。 （1）原生質(zhì)體分離 原生質(zhì)體分離是指去除細(xì)胞壁使原生質(zhì)體從細(xì)胞中釋放出來(lái)的過(guò)程。酶法破壁是最有效、最常用的原生質(zhì)體分離方法。 基本操作： 菌體培養(yǎng)洗滌懸浮于高滲溶液酶解原生質(zhì)體釋放原生質(zhì)體收集菌體培養(yǎng)：對(duì)數(shù)期細(xì)胞菌體前處理： 在培養(yǎng)基中或菌懸液中加入某些物質(zhì)對(duì)菌體進(jìn)行處理，以抑制或阻止某種細(xì)胞壁成分的合成，使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)疏松，有利于酶滲透到細(xì)胞壁中進(jìn)行酶解絲狀真菌：可使用b-巰基乙醇酵母菌： 1%巰基乙醇和1% EDTA放線菌：1-4%甘氨酸；細(xì)菌：通常加入亞致死量的青霉素，酶處理破壁破壁用酶：

17、 原核微生物：溶菌酶（lysozyme） 霉菌：蝸牛酶、纖維素酶 酵母菌： Zymolyase-20T、蝸牛酶、b-葡聚糖酶酶濃度： 菌種：細(xì)菌0.10.5mg/ml， 鏈霉菌1mg/ml溶菌酶。 生長(zhǎng)階段： 大腸桿菌對(duì)數(shù)期0.1mg/ml，饑餓狀態(tài)0.25mg/ml溶菌酶酶解條件：溫度、pH、時(shí)間等滲透壓穩(wěn)定劑（高滲保護(hù)、種類）； 考慮再生，脫壁不能太完全。滲透壓穩(wěn)定劑KCl、NaCl、MgSO4、CaCl2、蔗糖、甘露醇、山梨醇等細(xì)菌多使用蔗糖或NaCl，鏈霉菌經(jīng)常使用蔗糖，而酵母菌則可使用山梨醇或KCl使用的有效濃度為0.31.0mol/L微生物原生質(zhì)體形成模式 原生質(zhì)體形成率=（A-B

18、）/A100% 方法一：血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù) A：高滲溶液中細(xì)胞數(shù) B：水溶液中細(xì)胞數(shù) 方法二：平板菌落計(jì)數(shù) A：高滲溶液稀釋后在再生培養(yǎng)基上CFU B：水溶液稀釋后在再生培養(yǎng)基上CFU原生質(zhì)體的鑒別方法 低滲爆破法 熒光染色法 原生質(zhì)體活性的鑒別 熒光素雙醋酸鹽（FDA)染色法原生質(zhì)體收獲絲狀菌：紗布或擦鏡紙過(guò)濾，洗滌，懸浮于高滲液中；單細(xì)胞微生物：離心 ，洗滌，懸浮于高滲液中原生質(zhì)體的保藏制備好的原生質(zhì)體最好立即使用 加入5%的二甲亞砜(DMS)或甘油等保護(hù)劑，迅速降溫可保藏于液氮或-70-80冰箱 3、原生質(zhì)體的誘導(dǎo)融合 將等量的原生質(zhì)體混合于含有促融合劑PEG、Ca2+、Mg2+、滲透壓穩(wěn)定

19、劑的緩沖液中，保溫一定時(shí)間，原生質(zhì)體就會(huì)發(fā)生融合低劑量紫外線照射融合液可顯著增加融合頻率 適用于促進(jìn)原生質(zhì)體融合的PEG的相對(duì)分子質(zhì)量為10006000，常用濃度為3050% 電融合： A. 原生質(zhì)體在電場(chǎng)中極化成偶極子，沿電力線方向排列成串 B. 外加瞬間高頻直流強(qiáng)電壓，以50ms的時(shí)程脈沖沖擊原生質(zhì)體粘連點(diǎn)，擾亂原生質(zhì)體膜的分子排列，使之穿孔，相連的原生質(zhì)體發(fā)生融合酵母菌的融合操作將兩種原生質(zhì)體以1:1混合達(dá)到108細(xì)胞/ml，以2000r/min的轉(zhuǎn)速離心15分鐘收集原生質(zhì)體將其懸浮于含有0.6mol/L KCl、30%PEG6000、10mmol/L CaCl2的10mmol/L pH

20、 6.8磷酸緩沖液中，30保溫60分鐘，此時(shí)原生質(zhì)體凝集到一起3000r/min 離心15分鐘收集凝集塊，以0.6mol/L KCl洗滌，再在5放置60分鐘以達(dá)到完全融合 原生質(zhì)體融合的影響因素親株的親和力和原生質(zhì)體的活性 融合劑：不同種類微生物對(duì)PEG分子量的要求不盡相同 物理融合劑：電場(chǎng)和激光 溫度：絲狀真菌：30 細(xì)菌：4或20 放線菌：常溫（約20）融合處理時(shí)間：1min-1h，但大多數(shù)微生物110 min無(wú)機(jī)離子： 一定濃度的Ca2+、Mg2+能有效地促進(jìn)融合 4. 原生質(zhì)體的再生是指原生質(zhì)體重建細(xì)胞壁，恢復(fù)細(xì)胞完整形態(tài)并能生長(zhǎng)、分裂的過(guò)程。再生率10-310-1再生培養(yǎng)基：加入滲透

21、壓穩(wěn)定劑，不同微生物其再生培養(yǎng)基不同。再生需要一定的細(xì)胞壁做引物。影響再生的因素：再生培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件；原生質(zhì)體制備方法及條件5. 融合子的檢出與鑒定融合子的選擇利用遺傳標(biāo)記：營(yíng)養(yǎng)缺陷型，抗性標(biāo)記利用滅活的原生質(zhì)體 (例如 5023h)利用熒光染色采用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行檢出。對(duì)是否是真正融合子進(jìn)行鑒定：發(fā)生核融合后穩(wěn)定，而不進(jìn)行核融合形成的異核體不穩(wěn)定。 6. 目標(biāo)重組子的篩選 原生質(zhì)體融合技術(shù)的應(yīng)用（1）高產(chǎn)優(yōu)良菌株的選育例：親株：乳糖發(fā)酵短桿菌親株1：產(chǎn)谷氨酸，DCr(德夸菌素)，KMr ( 酮基丙二酸)，發(fā)酵速度快；親株2：產(chǎn)賴氨酸，AECr，發(fā)酵速度慢 (100h)融合子： DCr KM

22、r AECr，發(fā)酵速度快(30h)， 產(chǎn)賴氨酸提高3倍（2）合成新的產(chǎn)物三、其它原生質(zhì)體技術(shù)（1）原生質(zhì)體誘變育種：以脫去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體作為處理對(duì)象的誘變育種方法。優(yōu)點(diǎn) 1）提高微生物對(duì)誘變劑的敏感性； 2）提高正變株的變異幅度，使誘變效果提高 3）對(duì)于絲狀微生物，原生質(zhì)體可作為單個(gè)細(xì)胞 單位而便于控制，避免后代過(guò)多的分離現(xiàn)象缺點(diǎn) 1）誘變后原生質(zhì)體再生較慢，因此較常規(guī)誘變 育種耗時(shí)長(zhǎng)； 2）不適用于以青霉素淘汰野生型對(duì)營(yíng)養(yǎng)缺陷 型突變體進(jìn)行濃縮。其它原生質(zhì)體技術(shù)（2）自學(xué)原生質(zhì)體再生育種：通過(guò)菌體細(xì)胞脫壁后直接再生來(lái)改變菌株的遺傳特性，提高產(chǎn)量或改良某些性狀的育種方法。特點(diǎn)：正變率較高。原

23、生質(zhì)體轉(zhuǎn)化：以原生質(zhì)體作為受體菌轉(zhuǎn)化DNA分子的過(guò)程。優(yōu)點(diǎn)：1）感受態(tài)容易建立，維持時(shí)間長(zhǎng)； 2）對(duì)轉(zhuǎn)化DNA要求較低。原生質(zhì)體的固定化小結(jié)原生質(zhì)體育種是一種新興的技術(shù)消除了細(xì)胞壁的影響實(shí)現(xiàn)了遠(yuǎn)親微生物的基因重組實(shí)現(xiàn)了多親本微生物的基因重組小結(jié):遺傳角度討論微生物多樣性 “微生物基因重組方式的多樣性”基因重組：遺傳重組是指遺傳物質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞向 另一個(gè)細(xì)胞傳遞并導(dǎo)致DNA交換和重排的過(guò)程。重組的主要類型同源重組、位點(diǎn)特異性重組、轉(zhuǎn)座重組*微生物中遺傳物質(zhì)的傳遞方式： 真核微生物：有性生殖和準(zhǔn)性生殖 原核微生物：接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo) 遺傳重組的方向、重組的范圍、重組的頻率 細(xì)胞之間是否接觸 微生物中導(dǎo)致基因重組的各種形式 基因重組 涉及范圍供體和受體間的關(guān)系整個(gè)基因組部分染色體個(gè)別或少數(shù)基因細(xì)胞融合或連接性細(xì)胞真菌的有性生殖體細(xì)胞真菌的準(zhǔn)性生殖放線菌接合細(xì)胞暫時(shí)溝通細(xì)菌接合