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1、微生物學(xué)(wi shn w xu)期末考試(q m ko sh)知識點第六章 微生物的生長(shngzhng)繁殖及其控制1. 生長曲線:細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中,定時取樣測定細(xì)胞數(shù)量,以培養(yǎng)時間為橫座標(biāo),以菌數(shù)為縱座標(biāo)作圖,得到的一條反映細(xì)菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。生長曲線各階段出現(xiàn)原因特點應(yīng)用延遲期:將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后,在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加,或增加很少,生長速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。調(diào)整代謝:微生物接種到一個新的環(huán)境,暫時缺乏分解和催化有關(guān)底物的酶,或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成中間代謝產(chǎn)物,就需要一段適應(yīng)期。分裂遲緩、代謝活躍在生
2、產(chǎn)實踐中縮短遲緩期的常用手段:1.通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短2.利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為種子3.盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大4.適當(dāng)擴大接種量對數(shù)期: 又稱指數(shù)生長期,菌體繁殖速度最快。菌體逐漸適應(yīng)新環(huán)境,由于環(huán)境中養(yǎng)料充足,開始大量繁殖。生長曲線的生長速率常數(shù)最大, 代時最短,細(xì)胞平衡生長,酶系活躍,代謝旺盛作為發(fā)酵生產(chǎn)的種子,使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短,提高經(jīng)濟效益。穩(wěn)定期:穩(wěn)定生長期又稱恒定期或最高生長期,此時培養(yǎng)液中活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定。由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗,代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化,逐步不適宜于細(xì)菌生長,導(dǎo)致生長速率降低直至零(即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于
3、細(xì)菌死亡數(shù))。生長速率常數(shù)為零,菌體產(chǎn)量達到最高點,菌體產(chǎn)量與營養(yǎng)物消耗有一定的比例關(guān)系。細(xì)胞開始儲存糖原,芽孢桿菌開始形成芽孢,積累代謝產(chǎn)物,某些放線菌抗生素的大量形成也在此時期。如何延長穩(wěn)定期:補料:補充營養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)pH等,以獲得更多的菌體物質(zhì)或積累更多的代謝產(chǎn)物。衰亡期營養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累,細(xì)菌死亡速率超過新生速率,整個群體呈現(xiàn)出負(fù)增長。負(fù)生長,細(xì)菌衰老并出現(xiàn)菌體自溶。有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。2. 二次生長:當(dāng)培養(yǎng)基中同時含有快速碳源(氮源)或遲效碳源(氮源)這兩類碳源(或氮源)時,微生物在生長過程中會形成二次生長現(xiàn)象。3. 同步培養(yǎng):使群
4、體中的細(xì)胞處于比較一致的,生長發(fā)育均處于同一階段上,即大多數(shù)細(xì)胞能同時進行生長或分裂的培養(yǎng)方法。4. 分批(封閉)培養(yǎng):是指在一個密閉系統(tǒng)內(nèi)投入有限數(shù)量的營養(yǎng)物質(zhì)后,接入少量微生物菌種進行培養(yǎng),使微生物生長繁殖,在特定條件下完成一個生長周期的微生物培養(yǎng)方法。5. 連續(xù)培養(yǎng):在微生物的整個培養(yǎng)期間,通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。連續(xù)培養(yǎng)的兩種類型:恒濁連續(xù)培養(yǎng):不斷調(diào)節(jié)流速而使細(xì)菌培養(yǎng)液濁度保持恒定連續(xù)發(fā)酵與單批發(fā)酵相比的優(yōu)點:高效便于自動控制產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定缺點:菌種易退化易污染雜菌培養(yǎng)基利用率低恒化連續(xù)培養(yǎng):保持恒定的流速,以某一營養(yǎng)物為生長限制
5、因子6. 環(huán)境(hunjng)對微生物生長的影響:1. 營養(yǎng)物質(zhì): 碳源、氮源、無機鹽等2. 水的活性3. 溫度(wnd)4. pH5. 氧7. 酵母(jiom)的生殖方式(一)無性繁殖:芽殖 裂殖 無性孢子(二)有性繁殖:酵母菌是以形成子囊和 HYPERLINK /s?wd=%E5%AD%90%E5%9B%8A%E5%AD%A2%E5%AD%90&hl_tag=textlink&tn=SE_hldp01350_v6v6zkg6 t _blank 子囊孢子的方式進行有性繁殖的。8. 微生物生長控制中的常見名詞解釋消毒:殺死或滅活病原微生物(營養(yǎng)體細(xì)胞)滅菌:殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物防腐:防
6、止或抑制霉腐微生物在食品等物質(zhì)上的生長化療:殺死或抑制宿主體內(nèi)的病原微生物抑制:生長停止,但不死亡死亡:生長能力不可逆喪失9. 兩種重要的選擇性抗微生物劑抗代謝物:有些化合物在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物很相似,以至可以和特定的酶結(jié)合,從而阻礙了酶的功能,干擾了代謝的正常進行,這些物質(zhì)稱為抗代謝物。舉例:葉酸對抗物(磺胺)、嘌呤對抗物(6-巰基嘌呤)、苯丙氨酸對抗物(對氟苯丙氨酸)、尿嘧啶對抗物(5-氟尿嘧啶)胸腺嘧啶對抗物(5-溴胸腺嘧啶)等等 抗生素:是由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產(chǎn)物或衍生物,它們在很低濃度時就能選擇性抑制或影響它種生物的生命活動,如殺死微生物或抑制其生長。舉例:
7、利福平、氨芐青霉素、青霉素、頭孢菌素、四環(huán)素、紅霉素等10. 抗性菌株 特點:細(xì)胞質(zhì)膜透性改變,使抗生素不進入細(xì)胞或進入細(xì)胞后被細(xì)胞主動排出;藥物作用靶改變;合成了修飾抗生素的酶;抗性菌株發(fā)生遺傳變異,導(dǎo)致合成新的多聚體,以取代或部分取代原來的多聚體;避免出現(xiàn)細(xì)菌(xjn)的耐藥性的措施: (1)第一次使用的藥物(yow)劑量要足;(2)避免在一個時期或長期多次使用(shyng)同種抗生素;(3)不同的抗生素(或與其他藥物)混合使用;(4)對現(xiàn)有抗生素進行改造;(5)篩選新的更有效的抗生素;11. 殺滅或抑制微生物的物理因素:溫度、輻射作用、過濾、滲透壓、干燥、超聲波等。第七章 病毒1. 病毒
8、 定義:病毒是一種個體微小,結(jié)構(gòu)簡單,只含一種核酸(DNA或RNA),必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型生物。 特點:(1)不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu),具有一般化學(xué)大分子的特征。 (2)一種病毒的毒粒內(nèi)只含一種核酸,DNA或RNA。 (3)大部分病毒沒有酶或酶系極不完全,不含催化能量代謝的酶,不能進行獨立的代謝作用。 (4)嚴(yán)格的活細(xì)胞內(nèi)寄生,沒有自身的核糖體,沒有個體生長,也不進行二均分裂,必須依賴宿主細(xì)胞進行自身的核酸復(fù)制,形成子代。 (5)個體微小,在電子顯微鏡下才能看見。 (6)對大多數(shù)抗生素不敏感,對干擾素敏感。2. 噬菌斑:即 HYPERLINK /view/43444.htm t
9、_blank 噬菌體侵染細(xì)菌細(xì)胞,導(dǎo)致寄主細(xì)胞溶解死亡,因而在瓊脂培養(yǎng)基表面形成的肉眼可見的透明小圓斑,或稱負(fù)菌落。 包涵體:表達外源基因的宿主細(xì)胞。 噬斑:若是噬菌體標(biāo)本經(jīng)過適當(dāng)稀釋再接種細(xì)菌平板,經(jīng)過一定時間培養(yǎng),在細(xì)菌菌苔上可形成圓形局部透明區(qū)域,即噬斑。3. 病毒純化(1)病毒純化的標(biāo)準(zhǔn):1. 病毒是有感染性的生物體=純化的病毒制備物應(yīng)保持其感染性。 2. 病毒具有化學(xué)大分子的屬性=純化的病毒制備物的理化性質(zhì)應(yīng)具有均一性。(2)病毒純化的方法:1. 主要化學(xué)組成為蛋白質(zhì)=蛋白質(zhì)提純(tchn)方法(鹽析、等電點沉淀、有機溶劑沉淀、凝膠層析、離子交換等) 2. 具有一定(ydng)的大小
10、、形狀和密度=差速離心或超速離心4. 毒粒:病毒(bngd)的細(xì)胞外顆粒形式,也是病毒的感染性形式。 殼體(衣殼):包圍著病毒核酸的蛋白質(zhì)外殼,由蛋白質(zhì)亞基按對稱的形式、有規(guī)律地排列而成,是病毒毒粒的基本結(jié)構(gòu)。5. 核殼(核衣殼):病毒的蛋白質(zhì)殼體和病毒核酸(核心)構(gòu)成的復(fù)合物。6. 病毒的結(jié)構(gòu)蛋白 殼體蛋白:構(gòu)成蛋白質(zhì)外殼,保護病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破壞。 包膜蛋白:決定病毒感染的特異性,與易感細(xì)胞表面存在的受體具特異性親和力,促使病毒粒子的吸附和入侵;決定病毒的抗原性,能刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。 存在于毒粒中的酶:構(gòu)成毒粒酶,或參與病毒對宿主細(xì)胞的入侵(如T4噬菌體的溶菌酶等)
11、,或參與病毒復(fù)制過程中所需要病毒大分子的合成(如逆轉(zhuǎn)錄酶等)。7. 病毒的復(fù)制周期(循環(huán)): 吸附; 侵入; 脫殼; 病毒大分子的合成,包括病毒基因組的表達與復(fù)制; 裝配與釋放;8. 病毒的(非)增值性感染 增殖性感染:感染發(fā)生在病毒能在其內(nèi)完成復(fù)制循環(huán)的允許細(xì)胞內(nèi),并以有感染性病毒子代產(chǎn)生為特征 非增殖性感染:感染由于病毒、或是細(xì)胞的原因,致使病毒的復(fù)制在病毒進入敏感細(xì)胞后的某一階段受阻,結(jié)果導(dǎo)致病毒感染的不完全循環(huán)。在此過程中,由于病毒與細(xì)胞的相互作用,雖然亦可能導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生某些變化,甚至產(chǎn)生細(xì)胞病變,但在受染細(xì)胞內(nèi),不產(chǎn)生有感染性的病毒子代。病毒的非增殖性感染:(1)流產(chǎn)感染(分依賴于細(xì)
12、胞或病毒兩種) (2)限制性感染 (3)潛伏感染衛(wèi)星(wixng)病毒:一類基因組缺損、需要依賴輔助(fzh)病毒,基因才能復(fù)制和表達,才能完成增殖的亞病毒,不單獨存在,常伴隨著其他病毒一起出現(xiàn)。9. 溫和(wnh)噬菌體(溶源性噬菌體):感染宿主細(xì)胞后不能完成復(fù)制循環(huán),噬菌體基因組長期存在于宿主細(xì)胞內(nèi),沒有成熟噬菌體產(chǎn)生。(此現(xiàn)象稱為溶源性現(xiàn)象) 烈性噬菌體:感染宿主細(xì)胞后能在細(xì)胞內(nèi)正常復(fù)制并最終殺死細(xì)胞,形成裂解循環(huán)。10. 溶源性細(xì)菌:細(xì)胞中含有以原噬菌體狀態(tài)存在的溫和噬菌體基因組的細(xì)菌稱做溶源性細(xì)菌。11. 原噬菌體:整合于細(xì)菌染色體或以質(zhì)粒形成存在的溫和噬菌體基因組稱做原噬菌體。12
13、. 溶源轉(zhuǎn)變:原噬菌體引起的溶源性細(xì)菌除免疫性外的其他的表形改變,包括溶源菌細(xì)胞表面性質(zhì)的改變和致病性轉(zhuǎn)變被稱為溶源轉(zhuǎn)變。第八章 微生物遺傳1. 基因組:一個物種的單倍體的所有染色體及其所包含的遺傳信息的總稱。原核生物(細(xì)菌、古生菌)的基因組特點: (大腸桿菌) (1)染色體為雙鏈環(huán)狀的DNA分子(單倍體) (2)基因組上遺傳信息具有連續(xù)性 (3)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu) (4)結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝 (5)基因組的重復(fù)序列少而短真核微生物(啤酒酵母)的基因組特點:(1)典型的真核染色體結(jié)構(gòu)(2)沒有明顯的操縱子結(jié)構(gòu)(3)有間隔區(qū)(即非編碼區(qū))和內(nèi)含子序列(4)重復(fù)序列
14、多2. 質(zhì)粒:一種獨立于染色體外,能進行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳因子,主要存在于各種微生物細(xì)胞中。轉(zhuǎn)座因子:位于染色體或質(zhì)粒上的一段能改變自身位置的DNA序列,廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中。質(zhì)粒的類型(lixng):致育因子(ynz)抗性因子(ynz)Col質(zhì)粒毒性質(zhì)粒代謝質(zhì)粒隱秘質(zhì)粒3. 基因突變:基因組DNA分子發(fā)生的突然的、可遺傳的變異現(xiàn)象。4. 營養(yǎng)缺陷型:一種缺乏合成其生存所必須的營養(yǎng)物(包括氨基酸、維生素、堿基等)的突變型,只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營養(yǎng)或其前體物才能生長。表型判斷的標(biāo)準(zhǔn):在基本培養(yǎng)基上能否生長。特點:在選擇培養(yǎng)基(一般為基本培養(yǎng)基)上不生長。(營養(yǎng)缺陷型是微生物遺
15、傳學(xué)研究中重要的選擇標(biāo)記和育種的重要手段)5.自發(fā)突變:不經(jīng)誘變劑處理而自然發(fā)生的突變。自發(fā)突變的特點: 1)非對應(yīng)性2)稀有性3)規(guī)律性4)獨立性5)遺傳和回復(fù)性6)可誘變性6. 誘變劑與致癌物質(zhì)Ames試驗:利用細(xì)菌突變來檢測環(huán)境中的致癌物質(zhì)。該實驗利用鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株的回復(fù)突變的性能進行的。該菌株在不含組氨酸的培養(yǎng)基中不能生長,只有極少數(shù)的自發(fā)回復(fù)突變子生長,如果回復(fù)突變率因某種化學(xué)誘變劑(或待測物)的作用而增加,那么這種化學(xué)藥物可判定為具有致癌性。7. 細(xì)菌的三種水平基因轉(zhuǎn)移形式:接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、自然轉(zhuǎn)化 細(xì)菌的接合作用:通過細(xì)胞與細(xì)胞的直接接觸而產(chǎn)生的遺傳信息的轉(zhuǎn)移和
16、重組過程。 細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo):由噬菌體介導(dǎo)的細(xì)菌細(xì)胞間進行遺傳交換的一種方式(一個細(xì)胞的DNA通過病毒載體的感染轉(zhuǎn)移到另一個細(xì)胞中)。 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo):噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)給體染色體的任何部分到受體細(xì)胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)過程 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo):在 HYPERLINK /subview/225836/225836.htm t _blank 轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中,若所轉(zhuǎn)導(dǎo)的只限于供體菌染色體上特定的基因,則稱為局限性或 HYPERLINK /subview/544131/544131.htm t _blank 特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)。也可以說只能使供體的一個或少數(shù)幾個基因以 HYPERLINK /subview/43444/43444.htm t _
17、blank 噬菌體為媒介轉(zhuǎn)移到受體的 HYPERLINK /subview/705189/705189.htm t _blank 轉(zhuǎn)導(dǎo)作用稱為局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)。局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)與普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要(zhyo)區(qū)別:1)被轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因共價(n ji)地與噬菌體DNA連接,與噬菌體DNA一起進行復(fù)制、包裝以及被導(dǎo)入受體細(xì)胞中。而完全轉(zhuǎn)導(dǎo)包裝的可能全部是宿主菌的基因;2)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒攜帶特定的染色體片段并將固定(gdng)的個別基因?qū)胧荏w,故稱為局限性轉(zhuǎn)導(dǎo);3)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)生于溶原性后期,普遍性轉(zhuǎn)到則發(fā)生于裂解期。8.從特定環(huán)境中分離菌株:1) 摸清目的菌種的特性,生活在什么環(huán)境就去相似的環(huán)境中采樣2) 利用目
18、的菌種的特異性設(shè)計制作培養(yǎng)基3) 分離,挑取菌斑單獨培養(yǎng)4) 純化,連續(xù)培養(yǎng)5) 得到目的菌種9.誘變考慮的原則:(1)選擇簡便有效的誘變劑(2)挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株(3)處理單孢子(或單細(xì)胞)懸液(4)選用最適劑量(5)充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)(6)利用和創(chuàng)造形態(tài)、生理與產(chǎn)量間相關(guān)指標(biāo)(7)設(shè)計或采用高效篩選方案10.常用菌種的保存方法: 生活態(tài)菌種:培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)(斜面、平板)、寄主傳代培養(yǎng) 休眠態(tài)菌種:冷凍(液氮、低溫冰箱)、干燥(沙土管、冷凍真空干燥)11.防止菌種衰退的措施:1)減少傳代次數(shù)2)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件3)經(jīng)常進行純種分離,并對相應(yīng)的性狀指標(biāo)進行檢查4)采用有效的菌種保藏方
19、法第十一章 微生物生態(tài)1. 微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的作用:微生物是有機物的主要分解者微生物是物質(zhì)循環(huán)中的重要成員微生物是生態(tài)系統(tǒng)中的初級生產(chǎn)者微生物是物質(zhì)和能量的貯存者微生物是地球生物演化的先鋒種類2. 土壤(trng)微生物種類(zhngli)多、數(shù)量多、代謝潛力巨大,是主要的微生物源,是微生物的大本營。3. 飲用水的微生物指標(biāo)(zhbio):總菌數(shù)100個/mL大腸桿菌 放線菌 真菌 藻類 原生動物6. 極端環(huán)境下的微生物: 1)嗜熱微生物2)嗜冷微生物3)嗜酸微生物4)嗜堿微生物5)嗜鹽微生物6)嗜壓微生物7. 互生:二種可以單獨生活的生物,當(dāng)它們生活在一起時,通過各自的代謝活動而有利于對方,或偏利于一方的一種生活方式。例:纖維素分解細(xì)菌和固氮菌8. 條件致病菌:人體的正常微生物菌群一旦進入非正常聚居部位,或生態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起人類疾病的微生物。9. 共生:二種生物共居在一起,相互分工協(xié)作、相依為命,甚至形成在生理上表現(xiàn)出一定的分工,在組織和形態(tài)上產(chǎn)生了新的結(jié)構(gòu)的特殊的共生體。細(xì)菌與原生動物間的共生關(guān)系:細(xì)菌棲息于原生動物細(xì)胞內(nèi),獲得營養(yǎng)和保護環(huán)境,并且這些細(xì)菌在原生動物細(xì)胞外都不能生長;原生動物通過共生菌獲得生長所需要的維生素及其它生長因子生理上的共生:共生菌從基質(zhì)中吸收水分和無機養(yǎng)料;共生藻
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